MÉTODOS DE ESTUDIO DE LO INVISIBLE AL OJO HUMANO

El estudio de la materia viva se puede realizar de dos formas:

MACROSCÓPICAMENTE
A simple vista

MICROSCÓPICAMENTE

Análisis estructural

Análisis ultraestructural

Mediante lupa o
microscopio óptico.

Mediante
microscopio electrónico.
LUPA BINOCULAR PARA VER LOS DETALLES
EL MICROSCOPIO PERMITE VER LO INVISIBLE AL OJO HUMANO
TIPOS DE MICROSCOPIOS
CAPACIDAD DE AUMENTOS
Corcho.
Grabado de Robert Hooke
MICROSCOPIO ÓPTICO (vista exterior)
MICROSCOPIO ÓPTICO (vista interna y de los rayos de luz)

Ocular
Pie o estativo

Revolver
Muestra

Platina Objetivo

Macrométrico
Condensador

Micrométrico
Ajuste de platina
Diafragma de campo

Fuente de luz
COMPONENTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
 DIFERENTES IMÁGENES CON EL MICROSCOPIO ÓPTICO

MICROSCOPIO DE CAMPO MICROSCOPIO DE POLARIZACIÓN

MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
BRILLANTE O DE CAMPO CLARO

MICROSCOPIO DE
INTERFERENCIA MICROSCOPIO DE
DIFERENCIAL FLUORESCENCIA O LUZ
MICROSCOPIO DE ULTRAVIOLETA
CONTRASTE DE FASE
PREPARACIÓN DE MUESTRAS SENCILLAS
PREPARACIÓN DE MUESTRAS. FORMA DE PONER EL CUBRE
PREPARACIÓN DE MUESTRAS SENCILLAS
 MÉTODO DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS

1 Extracción de la muestra y fijación 3 Obtención de cortes y colocación en el portaobjetos

2 Deshidratación e inclusión en parafina

La muestra se
sumerge en una Los cortes
serie de etanol se realizan
de gradación mediante
creciente. un
microtomo

5 Deshidratación y montaje
4 Desparafinado, hidratación y tinción

Se coloca el
Para poder cubreobjeto
visualizar la s y se
muestra al monta con
microscopio es resinas
necesario naturales.
teñirla.
PREPARACIÓN DE MUESTRAS POR CRIOFACTURA
MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
CAPACIDAD DE AUMENTOS
 Fundamento del microscopio óptico y del microscopio electrónico

imagen
Cañón de
electrones
o
c

electrones
b

objeto objeto

visor c
o
luz

imagen

Microscopio electrónico Microscopio óptico

c) condensador; b) objetivo; o) ocular. interruptor

 TIPOS DE MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS

Microscopio electrónico de transmisión (MET) Microscopio electrónico de barrido (MEB)

 MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN

Cátodo
Ánodo

Lente condensadora

Brazo de soporte de la
muestra
Lente objetivo

Linfocito a MET
Lupa de aumento de la
pantalla visual

Lente de
proyección

Pantalla visual
 PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA EL MET

1 Extracción de la muestra y fijación

2 Deshidratación e inclusión en resinas 3 Obtención de cortes mediante un ultramicrotomo

Los cortes son

muy finos, de 50
La muestra se o 100 nm de
incluye en una grosor.
resina epoxi para Estos cortes se
poder realizar adhieren a una
cortes finos. rejilla circular.

4 Contrastado de los cortes 5 Observación de la muestra

Los cortes se
exponen a Las rejillas
sales de se colocan
metales en un
pesados soporte que
como el se introduce
uranio o el en el ME.
plomo.
Fotografías de microscopio electrónico de transmisión (MET)
Mitocondria (MET)
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO (MEB)

Haz de electrones

Lente condensador
Ameba a MEB
Generador
de barrido
Deflector del haz

Lente objetivo

Brazo de
soporte de la
muestra
Pantalla
fluorescente
Detector
Fotografías de microscopio electrónico de barrido (MEB)
Polen (MEB)
Ácaro (MEB)
RESUMEN COMPARATIVO DE LOS TIPOS DE MICROSCOPIOS

Característica MO MET MEB

Portátil sí no no

Aumento X 2 500 X 500 000 X 20 000

Tamaño mínimo
120 nm 1 nm 10 nm
observable

Fotografía B/N y color B/N B/N

Observación
sí no no
in vivo