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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS


ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL

INFORME DE DETERMINACIÓN DE LA ALCALINIDAD EN AGUA


ASIGNATURA:
QUÍMICA ANALÍTICA
DOCENTE:
LUIS JAVIER QUIPUSCOA CASTRO
ALUMNO:
MALAVER RODRIGUEZ, GUILLERMO
CICLO:
IV
FECHA:
28/11/2018

CAJAMARCA-PERÚ
UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA
Facultad: CIENCIAS AGRARIAS
Escuela académico profesional: INGENIERÍA AMBIENTAL

determinación dela actividad enzimática


1. Resumen
2. Introducción
Las enzimas pueden ser descritas como catalizadores complejos de origen biológico que tiene
un alto grado de especificad y eficiencia, esto permite que la eficiencia esta permites que las
reacciones químicas dentro la célula ocurran rápidamente atreves de vías bien definidas.

Para poder demostrar la actividad enzimática se debe tener presente fundamentalmente que
la acción catalítica de las enzimas es decir de carácter específico es decir cada reacción química
debe ser catalizada por una determinada encima.

Existen diversos tipos de enzimas, cuya funcionalidad es muy variada. Las enzimas contribuyen
al desdoblamiento de las moléculas de los principios nutritivos (proteínas grasas
carbohidratos) en otras más pequeñas duran la digestión de los alimentos. Asimismo, facilitan
su paso a la sangre a través de la pared intestinal: catalizan la formación de moléculas grandes
y complejas con el fin de producir los constituyentes celulares, y favorecen el almacenamiento
y gasto de energía las enzimas también actúan en las funciones de la reproducción, procesos
dela respiración, y en todo el demás mecanismo orgánico.

En el desarrollo de la practica nos centramos en una de ella; la alfa amilasa saliva, todo esto
para demostrar la actividad enzimática que posee (o no) para degradar el almidón en
productos más simples como la maltosa, alfa dextrina limitante y glucosa: basándonos en las
presencias de precipitados y distintos colores obtenidos utilizados los reactivos adecuados
para ello. Para medir si hay o no hay actividad enzimática, se puede realizar de dos maneras.

A) controlar el sustrato no transformado (sustrato residual).

B) controlado los productos liberados después de un tiempo determinado de incubación en


condiciones específicas de producir la degradación del almidón maltasa para formar glucosa.

La finalidad de este trabajo experimental en laboratorio es determinar la actividad de la alfa


amilasa saliva-, enzima que como la presencia tiene la capacidad de producir la degradación
del almidón, maltasa para formar la glucosa.

3. Objetivos
3.1 Objetivos generales
 Analizar algunos factores que inciden sobre la actividad enzimática de la saliva.
 Determinación de presencia de carbohidratos reductores (productos de la reacción)
 Demostrar la formación de productos de la actividad enzimática de la amilasa saliva.

3.2 Objetivos específicos


 Reconocer NaCl como factor de la amilasa salical.
 Determinar la presencia de azucares a través de la utilización del reactivo de benedict.
 Reconocer el sustrato residual utilizado solución yodada.

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4. Método
Los enzimas son biomoléculas especializadas en la catálisis de las reacciones químicas que
tienen lugar en la célula. Son muy eficaces como catalizadores ya que son capaces de
aumentar la velocidad de las reacciones químicas mucho más que cualquier catalizador
artificial conocido, y además son altamente específicos ya que cada uno de ellos induce la
transformación de un sólo tipo de sustancia y no de otras que se puedan encontrar en el
medio de reacción.

4.1 Actividad enzimática


La actividad de una enzima se mide bajo condiciones definidas (temperatura, pH y
concentración de tampón, sustrato y coenzima). La tasa o velocidad (v) de una reacción
enzimática bajo estas condiciones se define como la velocidad de conversión del sustrato en
producto por unidad de tiempo. Una unidad de enzima es una medida de la cantidad de
enzima. La unidad internacional (UI) utilizada habitualmente para una enzima es la cantidad de
enzima que cataliza la conversión de un micromol de sustrato en producto por minuto (1 UI =
1μmol/min). El katal es una unidad internacional para la cantidad de enzima que cataliza la
conversión de 1 mol de sustrato en 1 molde producto por segundo (1 kat = 1 mol/s). Dado que
el katal generalmente es una cifra muy pequeña, normalmente se utiliza como unidad
estándar de actividad la unidad internacional, una cifra mucho mayor. (John W.Baynes, Marek
H. Dominiczak, 2015)

4.2 El complejo enzima-sustrato


Emil Fischer, en 1894, propuso que una enzima presenta una plantilla rígida, o cerradura, y que
el sustrato es la llave que le corresponde. Sólo los sustratos específicos se pueden ajustar a
determinada enzima. Los primeros estudios de cinética enzimática confirmaron que una
enzima (E) se une a un sustrato para formar un complejo enzima-sustrato (ES). Los complejos
ES se forman cuando los ligandos se unen de manera no covalente a sus lugares adecuados en
el sitio activo. El sustrato reacciona en forma transitoria con la Ingeniería Ambiental
Bioquímica Experimental 5 proteína catalizadora (y con otros sustratos, en una reacción
multisustratos) para formar el producto de la reacción.

𝐸 + 𝑆 → 𝐸𝑆 → 𝐸 + 𝑃

Esta reacción se efectúa en dos pasos distintos: la formación del complejo enzima-sustrato y la
reacción química actual, acompañada por la disociación del producto. Cada paso transcurre
con una velocidad característica. La velocidad total de una reacción enzimática depende de las
concentraciones tanto del sustrato como del catalizador (la enzima).Cuando la cantidad de
enzima es mucho menor que la cantidad de sustrato, la reacción depende de la cantidad de
enzima. (H.Robert Horton, Laurence A. Moran, K. Gray Scrimgeour, Marc D. Perry, J. David
Rawn, 2008)

4.1.1 Mecanismo de acción enzimática


4.1.2 Modelo de llave-cerradura
Este modelo plantea una analogía entre la interacción de las enzimas con u sustrato y el
funcionamiento de una llave que se complementa específicamente con una única chapa o
cerradura. Si bien es cierto que este modelo da cuenta de la relación entre una enzima y su
sustrato, sugiere una interacción “rígida” entre ellos, condición que algunos científicos
actualmente cuestionan.

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4.1.3 Modelo encaje inducido


Estudios posteriores sugirieron que el sitio activo es mucho más flexible que una cerradura. La
interacción física entre las moléculas de enzima y sustrato produce un cambio en la geometría
del centro activo, mediante la distorsión de las superficies moleculares. Este modelo llamado
encaje inducido impondría cierta tensión a las moléculas reaccionantes, facilitando aún más la
reacción

4.1.2 factores que afectan a la actividad enzimática.


Diferentes factores ambientales pueden afectar a la actividad enzimática. Destacaremos dos:
el pH y la temperatura.

4.1.2.1 efecto del ph


La mayoría de los enzimas presentan un pH óptimo para el cual su actividad es máxima; por
encima o por debajo de ese pH la actividad disminuye bruscamente. Este efecto se debe a que,
al ser los enzimas de naturaleza proteica, al igual que otras proteínas, se desnaturalizan y
pierden su actividad si el pH varía más allá de unos límites estrechos (Figura 14.8). De ahí la
conocida importancia biológica de los sistemas tampón.

En la mayor parte de los casos el pH óptimo está próximo a la neutralidad, en consonancia con
el pH intracelular, pero existen enzimas con pH óptimo muy diverso según sea el pH del medio
en el que habitualmente actúan (los enzimas proteolíticos del jugo gástrico tienen pHs óptimos
próximos a 2 ya que este es el pH de dicho jugo). Por último, existen algunos enzimas a los que
el pH no afecta en absoluto

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4.1.2.2 enzimas modulados covalentemente

Los enzimas modulados covalentemente también presentan dos formas, una activa y otra
inactiva, que son interconvertibles por modificación covalente de sus estructuras catalizada
por otros enzimas, denominados enzimas moduladores.

4.2 enzimática

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5 materiales y reactivos
5.1 materiales
 gradilla.
 6 tubos de ensayo.
 Pipetas.
 baño.
 baño maría 37C
 casina eléctrica.

5.2 Reactivos
 Solución de almidón pH 6.6 al 1%
 Cloruro de sodio solución 0.1M.
 Enzima al 2%.
 Ácido clorhídrico 0.5M.
 Solución yodada.

6 Procedimiento
6.1 ETAPA A:
SITEMA
COMPONENTES
I II
Solucion almidon 1% pH 6,6
5ml 5ml
solucion de cloruro de
cloruro de sodio 0,1M 1ml 1ml

agua destilada 4ml 3ml

1)colocar los tubos al BAÑO MARIA DE AGUA A 37 °C. por 5 minutos

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2)AGREGAR 1ml De ENZIMA al tubo II sin retirar del BM.

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3)seguir con el baño maría de agua a 37°C. durante 30 minutos.

6.2 ETAPA B:
SITEMA
COMPONENTES
I II
de los tubos I y II de la etapa
A 01 ml 01 ml

acido clorhidrico 0,05 N 1ml 1ml

solucion yodada 0,5ml 0,5ml

6.3 ETAPA C:
SITEMA
COMPONENTES
I II
de los tubos I y II de la etapa
A 1 ml 1 ml

benedict 1ml 1ml

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7 Resultados
TUBOS
INDICADOR
TUBO 1 TUBO 2

8 Discusión
 Para la valoración de la actividad enzimática en el sistema de detección y medición por
el sustrato residual, luego de la etapa A, la solución de HCl 0.05 M detiene la reacción,
debido a que la amilasa se encuentra en medio ácido y se desnaturaliza; esta enzima
por tener naturaleza proteica, pierde su estructura tridimensional y por consecuencia,
también, su centro activo y así su función como enzima.

9 Conclusión
 Por el método del sustrato residual, se notó diferencia entre los tubos, uno de ellos
viró a color amarillento en ausencia de almidón y se demostró la actividad amilásica
presente.
 Por el método de los productos formados, se demostró la actividad amilásica en base a
la formación del precipitado color rojo indio, es decir, se determinó la presencia de los
azucares reductores: maltosa y algo de glucosa, después de un tiempo determinado de
incubación y bajo condiciones específicas de pH y temperatura.

10 Referencias
 Calderón. A. (OCT/15/2017) determinación de la actividad enzimática.
Recuperada de. https://es.scribd.com/document/361619507/Practica-N%C2%BA2-
Determinacion-de-La-Actividad-Enzimatica#download. Del 07/05/2019.alas.3.28 am

 Castillo.S.(oct/16/2017) “Determinación de la actividad enzimática”. Recuperado de.


file:///C:/Users/Guillermo/Downloads/361619507-Practica-N%C2%BA2-
Determinacion-de-La-Actividad-Enzimatica.pdf. Del 07/05/2019 a la 3.45 am.

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Discusión
1 ¿Cómo demuestra usted la presencia del sustrato en los tubos
de ensayo?
Se puede observar la presencia del sustrato (almidón) al colocarle solución yodada a una
muestra, en el caso del experimento fue al colocarle solución yodada al tubo I B. Si la muestra
no contiene almidón, al colocarle la solución yodada cambia a un color anaranjado opaco ya
que se produjo una reacción enzimática.

2 ¿Cómo demostra usted si se ha producido o no reacción


enzimática en el experimento realizado?
La reacción enzimática se demostró en la etapa 2, al colocarle solución yodada a la solución de
almidón, en el tubo I B hubo un cambio a color azul oscuro, lo que indica la presencia de
almidón (no se produjo reacción enzimática); mientras que en el tubo II B hubo un cambio de
color anaranjado opaco, lo que indica que hubo una reacción enzimática. También se
demostró la en la etapa 3, usando el reactivo de Benedict en el tubo I C, generando un color a
verde oliva, lo que indico que se había producido una reacción enzimática del almidón
hasta carbohidratos reductores.

4 ¿Qué diferencia y/o semejanza entre los experimentos 4 y 5


para determinar la actividad enzimática? 
Se utilizaron dos reactivos: solución yodada y reactiva de Benedict. La diferencia para
determinar la reacción enzimática en una solución de almidón es que al usar la solución
yodada cambia de a color azul oscuro; muestras que al usar el reactivo de Benedict cambia a
color verde oliva.

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GUILLERMO MALAVER RODRIGUEZ
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