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1. SEMILLAS Y GERMINACIÓN

La semilla es una de las estructuras de mayor relevancia en la historia evolutiva de las

plantas. El tegumento o testa que recubre al embrión, y en muchos casos, el endospermo
como un tejido de reserva para su sostenimiento metabólico, permiten que la semilla
persista en ambientes desfavorables conservando su capacidad germinativa.

Las diferentes líneas filogenéticas de las plantas han llevado a una enorme variedad
morfológica y germinativa de las semillas. La tabla 1 presenta solo algunas de las formas
de clasificación más usadas en fisiología vegetal:

Tabla 1. Diferentes tipos de clasificación de semilla

CARÁCTERÍSTICA PROPIEDAD DE LA SEMILLA TIPO

1. Tiempo de vida de una La semilla puede vivir muy poco EFÍMERA
semilla tiempo, unas pocas semanas o
incluso días.
La semilla está dotada para PERSISTENTE
mantenerse por un tiempo de varias
semanas, meses, o incluso años.
2. Posición del hipocótilo y Los cotiledones y el hipocótilo DE GERMINACIÓN
los primordios cotiledonares permanecen por debajo de la HIPÓGEA
durante la germinación superficie del suelo
El hipocótilo sobresale del suelo o DE GERMINACIÓN
permanece a ras y los cotiledones EPÍGEA
dan lugar a las primeras hojas
3. Capacidad de las semillas Baja NO DORMANTES
de permanecer latentes
durante períodos Alta DORMANTES
prolongados de tiempo
4. Respuestas a la luz La germinación de la semilla FOTOSENSIBLES
responde a señales de cantidad de
luz (fotones), o de tipos de luz
(longitudes de onda)
La semilla germina igual en NO
diferentes condiciones de luz FOTOSENSIBLES
5.Capacidad de regenerar la La semilla es incapaz de germinar, RUDIMENTO
especie porque se ha degenerado durante SEMINAL
el proceso evolutivo de la especie.
La semilla tiene potencial para NORMAL O
regenerar la especie ACTIVA

Al caracterizar la semilla de acuerdo a estos aspectos, es posible conocer los patrones

regenerativos de las especies. Y en conjunto con estudios de germinación y desarrollo
primario bajo condiciones controladas nos permite establecer cuál es la capacidad
adaptativa de regeneración bajo diferentes condiciones ambientales.
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MARCO TEÓRICO

Realice para su informe un marco teórico no mayor a una (1) página

OBJETIVO GENERAL

Establecer, por diferentes métodos, cuánto potencial regenerativo presentan las semillas
de diferentes especies, en condiciones estándar.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Plantear para su informe sus objetivos específicos con relación a la especie problema y que
se articulan con el objetivo general.

MATERIALES Y REACTIVOS

 Semillas de diferentes especies**  Termo-higrómetro (opcional)

 Cajas de Petri  Estereoscopios y microscopios
 Cloruro de trifenil tetrazolium  Cajas de plástico o icopor**
 Acido sulfúrico al 20%, 10% y 5%  Papel aluminio**
 Sudan III en gotas  Papel toalla**
 Lugol  Papel celofán (6 colores)**
 Reactivo de Biuret  Lija**
 Pipetas de 10 ml  Estuche de disección: cuchillas,
pinzas, porta y cubre-objetos**
 Hipoclorito (opcional)  Frasco aspersor**
 Balanza

**A cargo del estudiante

PROCEDIMIENTO
Programación para 1 sesión de laboratorio y 15 días de crecimiento

Métodos de asepsia:

En todos los ensayos de semillas deberán tomarse las medidas más asépticas posibles;
limpiar previamente los mesones, las cajas de Petri y bandejas para sembrar, con
hipoclorito de sodio. Este mismo compuesto, en disoluciones bajas (2% durante 5 minutos),
pueden emplearse para esterilizar las semillas. Permanentemente el estudiante deberá
usar toallas de papel limpias. Si se minimiza el error potencial por manejo de las muestras,
se obtendrán resultados más confiables.

Almacenamiento de semillas:

Si las semillas deben conservarse durante un tiempo antes de la práctica, intentar

mantenerlas lo más secas posible, el lugar fresco protegido de la luz (preferiblemente a
bajas temperaturas, para evitar la proliferación microbiana); deberán usarse sobres de
papel limpio, seco y grueso.
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Seguimiento cronológico

Siempre llevar un registro diario de fechas, tratamientos, tiempos, y datos, mediciones u

observaciones hechas en el Cuaderno de Laboratorio. Todos los integrantes del grupo
deben tener pulcra y adecuadamente registrados sus datos de la práctica en el cuaderno
de laboratorio, y las fotos organizadas según fecha así: ejemplo de nombre de archivo:
“200615” para la foto tomada el 15 de junio de 2020.

BAJO CUBIERTA:

1.1 Efecto de la luz sobre la germinación

Sembrar tres réplicas de 20 a 50 semillas (dependiendo del tamaño de la semilla) en

recipientes de icopor, con tierra de buena calidad como sustrato, bajo alguno de estos tres
tratamientos de papel celofán:
- Transparente
- Rojo (rojo corto)
- Azul
- Amarillo
- Morado (rojo lejano)
- Verde

Regar periódicamente. Hacer seguimiento de imbibición, germinación y vigor como se

describe en los siguientes numerales.

MEDICIONES:

1.2 Curva de Imbibición

Medir entre 5 a 10 semillas, sembrar 20 a 40 en cajas de Petri, previamente acondicionadas

con papel toalla humedecido con 4 a 6 ml de agua destilada (dependiendo del tamaño de
la semilla). Medir las semillas cada hora, hasta que la biomasa llegue a ser constante.
Realizar la gráfica correspondiente.

1.3 Curva de Germinación

Usar un grupo de 20 a 40 semillas en caja Petri con papel humedecido (también pueden
usarse en continuidad las semillas del numeral anterior) para registrar el número de semillas
germinadas, haciendo observaciones cada 1-2 días, hasta el momento en que ya no se
registren más germinaciones. Realizar la gráfica correspondiente al porcentaje de
germinación.

Calcular la velocidad de Germinación (VG):

=
−

Gf: Máximo de semillas germinadas

Tf: Tiempo (días) en que se alcanzó el máximo de germinación
Ti: Tiempo (días en que inició la germinación)
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Calcular el tiempo medio de germinación (TMG):

∑
=
TiR: Tiempo (días) de inicio de germinación en cada réplica
R: Número de réplicas

1.4 Vigor

El día de germinación de cada semilla será considerado como día cero para la curva de
vigor, o, en su defecto, caso en que la germinación sea poco sincrónica, usar como día cero
el TMG. Medir periódicamente (cada 2-3 días) los germinados durante un seguimiento de
10 - 15 días. Comparar el vigor obtenido con el obtenido en otros tratamientos, como los de
luz (1.1) y temperatura (1.7).

PRUEBAS DE TINCIÓN

Poner en imbibición un lote de 20 semillas, escogidas al azar, 2 a 6 horas antes de la

práctica. En laboratorio se deberán hacer cortes longitudinales de las semillas, que dejen
al embrión expuesto. Separar las mitades de cada semilla en cajas Petri diferentes. La
primera mitad de semillas se usará en test de Tinta China y la segunda mitad se usará para
la caracterización. NO DEMORE EN APLICAR LOS COLORANTES UNA VEZ CORTADAS LAS
SEMILLAS.

1.5 Prueba de viabilidad

Verter en la caja de Petri 10 –20 ml de Tinta China 1%, teniendo en cuenta que los
EMBRIONES ESTÉN EN CONTACTO PERMANENTE CON EL REACTIVO. Envolver la caja de
Petri con papel aluminio y guardar en un sitio oscuro durante 24 horas, al cabo de las cuales
se observará los embriones y contará el número de mitades con tinción total, con tinción
parcial, y sin tinción. Obtener el porcentaje de viabilidad correspondiente.

1.6 Caracterización de la semilla

Hacer la caracterización morfo-anatómica (forma de la semilla y del embrión, anatomía y

diferenciación de los tejidos celulares). Se recomienda hacer cortes finos longitudinales:

1) Una coloración clara, dependiendo de la especie identifica al endospermo. El color

depende del almacenamiento de lípidos.

2) Una coloración menos clara puede indicar presencia de almidón.

1.7 Efecto de la temperatura sobre la germinación

Sembrar un lote de 20 a 50 semillas en las condiciones estándar en caja de Petri, y colocarlo

en nevera a temperaturas alrededor de 5ºC. Realizar observaciones y seguimiento de
germinación, cada dos o tres días. Comparar con el control del numeral 1.3.