V CLASE

GENÉTICA BACTERIANA

BASES FISICAS DE LA HERENCIA

Dos son los fenómenos biológicos básicos en relación con los mecanismos de la herencia:
a) Estabilidad de los caracteres hereditarios y
b) La ocurrencia rara de variaciones hereditarias.
Análisis genéticos y citológicos de las células animales y vegetales han establecido que la
base física para ambos fenómenos es el gene (el determinante genético que controla las
propiedades de los organismos). Los genes están localizados a lo largo de los cromosomas en
el núcleo de la célula. Los cromosomas se dividen (duplican) antes de la división celular y
cuando la célula se divide, cada célula hija recibe un idéntico set de cromosomas y por lo
tanto un idéntico set de genes. Esta duplicación es un proceso exacto que asegura la herencia;
sin embargo un gene puede mutar (cambia) y producirse una variación. Los genes que han
mutado son usualmente estables y se duplican en la nueva forma en generaciones posteriores;
la mutación de un gene por tanto causa un cambio hereditario en una o más propiedades de
los organismos.

En las bacterias y hongos, la sustancia química del cromosoma que es responsable por la
duplicación y función de los genes es el ácido disoxirribonucléico (DNA); en los virus puede
ser el DNA o el ácido rubonucléico (RNA).

El DNA se dice que trasmite de una a otra célula “información genética” de allí la transmisión
del carácter hereditario. El DNA se encuentra sólo en el núcleo en cambio el RNA se
encuentra en el núcleo y citoplasma de la célula. En estos casos la función del RNA es la de
trasmitir al citoplasma la información genética y otras influencias del DNA. El DNA en el
núcleo actúa como un administrador siendo el citoplasma la sala de trabajos y el RNA el
mensajero entre ambos, que asegura que el trabajo se haga bien, controlando el metabolismo
celular a través del control de la síntesis de las enzimas.

GENOMA BACTERIANO

El material genético de las bacterias está constituido por ácido disoxirribonucléico (ADN),
que contiene la información necesaria para llevar a cabo la biosíntesis de todos los
componentes bacterianos. Este ADN también se le llama genóforo o cromosoma
procariótico. En las bacterias, en ocasiones, se puede apreciar, además del cromosoma, una o
más moléculas de ADN circular pequeño, que recibe el nombre de plásmidos.

ESTRUCTURA DE LOS CROMOSOMAS

Cuando el DNA bacterial es extraído y purificado por medio de métodos químicos se obtiene
un preparado que tiene un peso molecular de 5 x 10 5. Utilizando métodos muy delicados se ha
podido extraer de la Escherichia coli el cromosoma intacto. Se ha demostrado que el
cromosoma bacterial tiene una estructura (cadena) continua de DNA de aproximadamente de
1 mm de largo. La estructura de la molécula de DNA consiste de una hélice doble hecha de
dos polinucleótidos complementarios, en cada uno de los cuales hay bases purinas y
pirimidinas que están dispuestas a lo largo de una cadena alternada de grupos fosfato y
desoxirribosa. Las cadenas de los dos polinucleótidos son mantenidos juntos por enlaces de
H entre adenina y tiamina (par A – T) y entre guanina y citosina (par G –C).

MUTACIONES

Las mutaciones se consideran alteraciones estables y heredables de la secuencia genética, y

habitualmente, aunque no siempre se producen cambios en el fenotipo.
Los ácidos nucleicos se pueden alterar por varios mecanismos. Las mutaciones pueden ser
espontáneas o inducidas por la acción de distintos compuestos químicos mutágenos
(químicos) o por la acción de la radiación. Cuando se produce una alteración en el fenotipo,
el cambio en el comportamiento de la bacteria se puede manifestar de formas diferentes. Así,
se puede producir una mutación bioquímica cuando se altera una vía de biosíntesis de una
determinada enzima, que hace que el microorganismo sea incapaz de crecer en ciertas
condiciones en que sea imprescindible la utilización de esta enzima. Un ejemplo de mutante
bioquímico es la adquisición de resistencia por parte de las bacterias a la acción de
determinados antimicrobianos.

AGENTES MUTAGENICOS

Son agentes que inducen mutaciones, pudiendo ser agentes físicos, químicos o biológicos.
A los agentes mutagénicos los agrupamos como sigue:

A.- Agentes mutagénicos extrínsecos

1.-Agentes microbianos
a) Macromoléculas como ciertos ácidos disoxirribonucléicos
b) Virus
c) Bacterias
2.- Radiaciones, especialmente ultravioleta y rayos X
3.-Sustancias químicas ejemplo: arsénico, aceites minerales, creosota, alquitrán.
B.- Agentes mutagénicos intrínsicos.
1.- Recombinación de cromosomas no idénticos o porciones de cromosomas.
2.-Translocación de genes dentro de un cromosoma o crossing- over de genes entre
dos cromosomas.
3.-Cambios espontáneos de un gene, debido posiblemente a un impacto molecular,
modificaciones químicas.

TRANSFERENCIA DE CARACTERES HEREDITARIOS EN LAS BACTERIAS.

Todas las bacterias, levaduras, hongos, protozoos y rickettsias, (los virus se multiplican en
otra forma) se multiplican en forma asexual; por división binaria transversal de la célula, en
dos células hijas completas, idénticas a la célula madre, que puede continuar esta
reproducción asexual indefinidamente si hay suficiente alimento y las condiciones son
favorables.
En los últimos años se han hecho estudios sobre formas de transferencia de caracteres
hereditarios (transformación, conjugación y transducción) que vienen a ser (mezcla de
parte).
Transformación.

Es un procedimiento utilizado por las bacterias para adquirir información genética. Consiste
en que cuando una bacteria se cultiva en presencia de otra, la primera adquiere una o más
propiedades de la segunda, aparentemente algo es transferido de una a otra. Hay
incorporación de fragmentos de ADN extracelular en la bacteria viva, produciéndose a
continuación la recombinación del fragmento incorporado con la región homóloga del
cromosoma bacteriano. La transformación da lugar a un cambio genético estable en la célula
receptora. Por ejemplo si un estreptococo no patógeno del queso (no hemolítico) se cultiva en
presencia del Streptococcus pyogenes (hemolítico), el primero, adquiere la propiedad de
producir hemólisis. Otro ejemplo está dado por la transformación del neumococo II rugoso,
no capsulado, en liso cuando es cultivado en presencia de extractos de neumococo tipo III
muertos encapsulados y lisos.
A la habilidad de tomar al ADN se denomina “suficiencia”; el estado de suficiencia aparece
solamente en ciertas etapas de la división binaria y solamente una fracción de la población
bacteriana tiene tal suficiencia en cualquier momento.

Conjugación

Para que se lleve a cabo este proceso es necesario el contacto físico entre las bacterias. Esto
quiere decir que hay una cepa donadora (F+) y una cepa receptora (F-) para que el DNA
sea transferido. En la conjugación hay la transferencia de gran cantidad del cromosoma del
donador al receptor, es decir que la transferencia de genes no es recíproca. La “conjugación”
ha sido observada solamente en bacterias entéricas (Escherichia coli, Shigella y Salmonella) y
en la Pseudomona aeruginosa.
Al donador de DNA se le denomina macho y al receptor hembra y estos han sido
determinados genéticamente en la E. coli. La capacidad de ser donador (macho), depende de
la presencia en la célula de un elemento pequeño de DNA denominado “factor sexual” o
“F”. Las células que no contienen F o sea la llamada (F-), pueden actuar sólo como
receptores (hembras) y pueden conjugarse solo con machos. Las células F+ pueden actuar
como donadores o receptores y pueden conjugarse con machos y hembras.
Células F+ transmiten el factor F durante la conjugación en alta frecuencia. Sin embargo
solamente uno de 104 células F+, transfieren el DNA de los cromosomas; por lo tanto las
células femeninas es convertida en masculina durante el proceso de conjugación. El factor
sexual lleva dentro de su DNA el gene funcional que determina la presencia de sitios en la
superficie de la célula para conjugación.

Solamente una pequeña minoría de las células de un cultivo F+ se comporta como donador
del DNA de los cromosomas. Las células donantes del cultivo son “mutantes”, muchas de las
cuales son estables y pueden ser aisladas.
Hay un tipo de conjugación denominado conjugación Hfr (high frequency of recombination),
mediante el cual las cepas donadoras transfieren sus genes con una gran facilidad y no suelen
convertir en dadoras a las células receptoras. La principal diferencia con las células F+ es que
aquéllas presentan una mayor eficacia en la transferencia génica cromosómica. En las
bacterias Hfr, el factor F se ha integrado en diferentes lugares del cromosoma bacteriano,
mediante la recombinación entre secuencias de inserción homólogas.
La transferencia de ADN comienza con un corte en el sitio de origen de transferencia del
factor F integrado. Dado que sólo se trasmite una parte del factor F, el receptor F- no se
transforma en F+ salvo que se transfiera todo el cromosoma. La transferencia del cromosoma
puede realizarse tanto en el sentido de las agujas del reloj como en sentido contrario. El
 sentido de la transferencia depende de la orientación del factor F integrado. Cuando el
cromosoma bacteriano de la célula Hfr se encuentra en el citoplasma de la célula receptora,
puede ser degradado o incorporado al genoma de esta célula mediante el procedimiento de
recombinación.

Transducción

Es el mecanismo por el cual se transfiere ADN de una bacteria donadora a una bacteria
receptora mediante el concurso de un virus (bacteriófago). El fenómeno de transducción
ocurre en muchos géneros bacterianos: Salmonella, Escherichia, Shigella, Pseudomona,
Vibrio, Proteus, Staphylococcus, Bacillus, etc.
La transducción es posible solamente con lo que se denomina “temperate DNA phages”
(Bacteriófago DNA templado). Un fago “temperate” o “templado” es aquel cuyo material
genético se adiciona a una determinada parte del cromosoma del huésped, reproduciéndose
posteriormente como una parte integral de éste.
Ejemplo si cultivamos un bacteriófago en un cultivo (donador), lactosa positivo (lac +)
aproximadamente 1 x 10-6 de las partículas del fago llevarán el gene lac +. Si este
bacteriófago es usado para infectar un cultivo (lac-) entonces muchas de estas bacterias (las
que sobrevivan) adquirirán la propiedad lac+.

La transducción por fagos puede transmitir muchos otros caracteres genéticos en los gérmenes
mencionados; así en el género Salmonella se han trasladado mediante fagos: diferentes
requerimientos nutritivos, funciones enzimáticas, resistencia o susceptibilidad a los
antibióticos, movilidad, composición química de los flagelos etc.

VARIACIONES EN LA FORMA DE LAS COLONIAS

a) Colonias S y R.- Estos dos tipos de colonias pueden ser presentados por una misma cepa.
Las formas S, se caracterizan porque las colonias son bien lisas (smooth), húmedas,
homogéneas, convexas, circulares y con bordes regulares. Si se cultivan en caldo producen
un enturbamiento uniforme; las cepas móviles muestran una movilidad bien clara, las cepas
capsulares muestran una cápsula bien manifiesta y las cepas patógenas son muy virulentas.
Si se prepara vacuna, estás tendrán un alto poder antigénico por esta razón se debe
seleccionar las formas S para prepara vacunas.
b) Las formas R, producen colonias opacas, rugosas (rouge), arrugadas de bordes irregulares y
de consistencia seca. En medios líquidos, presentan gran cantidad de filamentos, las cepas
móviles no presentan una movilidad clara, las cepas capsuladas, no presentan cápsula y las
cepas patógenas no son virulentas. Si se prepara vacuna con estas formas R estas serán
poco antigénicas, por esta razón no se recomienda su empleo para preparar vacunas. La
única excepción a la regla es la vacuna contra la fiebre carbonosa para las cabras, en este
caso se emplea para preparar la vacuna una cepa de B. anthracis rugosa, que ha sido
obtenida cultivando el germen por varias generaciones en presencia de CO2.
En muchas especies el cambio de formas S a R o de R a S es fácilmente inducida, pero
pueden ocurrir espontáneamente.

c) Colonias mucoide.- Algunas bacterias desarrollan colonias muy grandes, viscosas y

brillantes, se les denomina “Mucoide” o M. El material mucoide es debido al desarrollo de
una gran cápsula.