Está en la página 1de 7

Nombre: Calisaya Quecaño, Luis Alberto

REPORTE DE LA PRACTICA Nº 11
AMINOACIDOS Y PROTEINAS
3.1 Determinación de propiedades físicas de aminoácidos y proteínas

Glicina Alanina Caseína


Estado Físico solido solido solido
Olor característico característico característico
Color blanco blanco blanco
Solubilidad soluble soluble insoluble
agua

3.2 Acción amortiguadora de los aminoácidos

Observaciones:
Se observa la mezcla de 1gota de indicador fenolftaleína con dos tubos de ensayo que
contienen 2 mL de agua destilada contenidos y 2 mL de solución acuosa de glicina al 1%
respectivamente. Luego se añadio 1 gota de solución de hidróxido de sodio 0,1 N a cada
tubo de ensayo. Se repite el ensayo usando indicador anaranjado de metilo y solución de
ácido clorhídrico 0,1 N.
Conclusiones:
Agua + fenolftaleína (incoloro) + 1 gota de hidróxido de sodio → coloración rojo grosella
Glicina + fenolftaleína (incoloro) + 6 gotas de hidróxido de sodio → tonalidad rosada
Agua + anaranjado de metilo (naranja) + 1 gota ácido clorhídrico → rojo débil
Glicina + Anaranjado de metilo (naranja) + 8-10 gotas ácido clorhídrico → rojizo
Significa que los aminoácidos tienen o ejercen acción amortiguadora, es decir amortiguan

los cambios bruscos de pH.

3.3 Reacciones coloreadas de las proteínas


a) Reacción del Biuret
Observaciones:
Se coloca en un tubo de ensayo 2 mL de solución de albúmina, añadiendo 1 ml de solución
de hidróxido de sodio al 10%. Agitar y añadir a continuación unas gotas de solución de
sulfato de cobre al 1%.
Reacciones:

Conclusiones:
Se observa la aparición de un color violeta, lo que indica la presencia de proteínas en la
albúmina. La prueba de Biuret reconoce las uniones peptidicas presentes en polipéptidos
y proteínas, si la reacción es positiva se manifiesta por la aparición de una coloración
violeta, esto se debe a la formación de un complejo de coordinación entre los cationes
cúpricos presentes en el reactivo de Biuret en un medio alcalino con las uniones peptídicas
de las proteínas.
b) Reacción con la ninhidrina

Observaciones:
En un tubo de ensayo se coloca 2 mL de la solución proteica, agregando 7 gotas de
solución de ninhidrina. Se calienta en baño maría por unos segundos. La formación de un
producto coloreado indicará la presencia de alfa aminoácidos.
Reacciones:
Albumina + Ninhidrina + NaNO3 → Reacciona
Caseina + Ninhidrina + NaNO3 → Reacciona
Conclusiones: Reconoce alfa aminoácidos carboxílicos, los reconoce tanto estando
libres como cuando están en la proteína, se colorea de purpura violeta cuando hay
aminoácidos y amarillo cuando hay prolina.
c) Reacción con Millón

Observaciones: En un tubo de ensayo se coloca 2 mL de la solución proteica, agregando


5 - 6 gotas de reactivo de Millón, seguidamente se calienta.
Reacciones:

Conclusiones:
Sirve para identificar anillo fenólicos en una proteína, si hay anillos aromáticos al
calentar, la solución se torna de color rojo.
3.4 Reacción con Xantoproteica:
Observaciones:
Se añade 1 mL de ácido nítrico concentrado a 2 ml de la solución de albúmina. Luego se
agrega gota a gota 1 mL de solución concentrada de hidróxido de amonio o de NaOH.
Reacciones:

Conclusiones: Esta reacción es característica para aminoácidos que contienen núcleo


aromático (fenilalanina, tirosina, triptófano). El compuesto que se forma al calentar es
amarillo y después si se agrega hidróxido de sodio se intensifica el color, un color
medio naranja
3.5. Cromatografía de aminoácidos
Observaciones:
Cortar el papel cromatográfico: Whatman (fase estacionaria) con las siguientes
dimensiones: 10 cm de alto, 7 cm de ancho, trazar una línea a 1,5 cm del borde inferior
y 1,5 cm del borde superior. Marcar en la línea inferior un punto cada 1,5 cm, sembrar
las muestras (soluciones de aminoácidos puros, dos de ellas y la tercera una mezcla de
aminoácidos) con la ayuda de un capilar sembrar cinco veces por punto cada uno, dejar
secar. En un recipiente cerrado colocar 10 mL de una mezcla de n-butanol/ácido
acético/agua (12:3:5), disolvente apolar: la fase móvil y luego colocar el papel en forma
vertical sin que toque las paredes del recipiente, el disolvente debe quedar a 2 mm de las
muestras sembradas. Esperar el desarrollo del cromatograma, por lo menos 30 minutos,
sacarlo cuando el eluyente llegué a la línea superior. Dejar secar y señalar con un lápiz
donde ha llegado la fase móvil que será el frente cromatográfico. Para revelar las
manchas, se pulveriza con una solución de ninhidrina (al 0,1 % en etanol con 2 mL de
piridina) se calienta para que aparezca el color característico de esta reacción.
Calculo del Rf:
Rf = (𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑜 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒)
Rf = Factor de retención. (O relación de frente o relación de flujo).
Conclusiones:
La ninhidrina revela al aminoacido , demostrandose con la aparicion de manchas azul
violeta
3.6 Desnaturalización de Proteínas

Observaciones: Se coloca 2 mL de solución de albúmina en tres tubos de ensayo, al


primero se le agrega unas gotas de HNO3 concentrado y se agita. Al segundo tubo se le
agrega 3 mL de solución de NaOH al 20% y al tercer tubo se le agrega 1 mL de etanol.
Finalmente se deja en reposo.
Conclusiones: En el primer tubo se observará que la proteína se ha desnaturalizado, está
sólida; en el segundo no ocurre mayor cambio y en el tercero ligera coagulación. En el
tubo 1 acurre desnaturalización irreversible.

CUESTIONARIO
1. Defina el punto isoeléctrico de un aminoácido
La presencia de grupos acido (-COOH) y básico (-NH2) otorga a los aminoácidos
unas propiedades ácido base características.
En medios ácidos fuertes, tanto el grupo amino como el grupo ácido se encuentran
protonados y el aminoácido tiene la siguiente forma:

Al subir el pH se desprotona el grupo más ácido, H de menor pKa, formándose una


especie neutra llamada Zwitterión.

Cuando el aminoácido se encuentra en medios básicos pierde el protón del grupo


amino, dando lugar a la especie desprotonada.

Se llama pH isoeléctrico o punto isoelectrico al pH en el que la concentración de


Zwitterión es máxima (el aminoácido no presenta carga neta).
Otra definición de punto isoelectrico es: pH al que la concentración de especies
protonadas y desprotonadas se iguala.

El pH isoelectrico se calcula como media de pKa,1 y pKa,2, es decir, la media de los


pKas de las etapas que forman y descomponen el Zwitterión.

2. ¿Por qué produce el ácido nítrico una coloración amarilla cuando se pone en
contacto con la piel?
El ácido nítrico concentrado tiñe la piel humana de amarillo al contacto, debido a
una reacción con la Cisteina presente en la queratina de la piel.

3. ¿Por qué se utiliza frecuentemente la clara de huevo como antídoto contra


varios venenos?
En general puede utilizarse con acidos y bases pero es especialmente recomendable
en causo de ingesta accidental de causticos. El agua con clara de huevo actua en
cualquier caso como un protector gastrico que retrasara la absorcion a la sangre y
defendera la mucosa intestinal reduciendo los daños.

4. Al someter a ebullición prolongada un huevo, entre la clara y la yema se forma


una aureola negruzca, explique su presencia.
Los huevos en su clara contienen proteínas. Proteínas contienen aminoácidos. Entre
estos existen dos que contienen azufre - metionina y cisteína. Al guardar por mucho
tiempo el huevo (o cocer demasiado tiempo), aminoácidos sufren descomposición y
de cisteína y metionina se libera sulfuro de hidrogeno - gas responsable por el mal
olor del huevo podrido. Por otro lado la yema de huevo esta rica en hierro. Sulfuro
de hidrogeno se difunde hasta la zona donde se juntan la clara y la yema y entra en
reacción con el hierro - color azul-negruzco es color del sulfido de hierro.

5. Señale las especies vegetales oriundas de nuestro país con mayor contenido
proteico, precisando el porcentaje de proteínas.
Tabla de composición de vegetales/composición de proteínas por cada 100 g
1 Ají amarillo seco 7,3%
2 Ají colorado seco 9,5%
3 Estragón 22,8%
4 Llampun Cjana 29,5%
5 Ajos variedad Napuri 7,7%
Nota: Datos extraídos de Tablas peruanas de composición de alimentos según el
Instituto Nacional de Salud. 2017

6. ¿Cuánto de proteína debe consumir un estudiante universitario diariamente?


Es claro que no hay una cantidad exacta de proteínas que un estudiante debe
consumir diariamente, más bien los nutricionistas recomiendan que se consuma
entre 1,7 a 2,5 por peso corporal.
BIBLIOGRAFIA
Fernández</a>, &. (2020). Aminoácidos - Punto Isoeléctrico. Retrieved 27 July
2020, from https://www.quimicaorganica.org/aminoacidos-peptidos/528-aminoacidos-
punto-isoelectrico.html
Ácido nítrico. (2020, 25 de mayo). Wikipedia, La enciclopedia libre. Fecha de consulta:
00:33, julio 27, 2020 desde
https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=%C3%81cido_n%C3%ADtrico&oldid=1263
57486.

También podría gustarte