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Resumen. - el western blot es una técnica métodos de detección con el fin de obtener
de laboratorio empleada para detectar una resultados más precisos y que permitan además
proteína especifica en una muestra ya sea de un análisis cuantitativo de las proteínas.
sangre o tejido. También es conocido como
Palabras claves. – Muestra, anticuerpos,
“protein blotting” o “inmunoblotting”, fue
antígenos, proteína, inmunodeficiencia.
introducida en 1979. Con esta se determina la
presencia y cantidad de antígenos y de
anticuerpos específicos, tiene una sensiblididad y
fiabilidad superior respecto a otras pruebas de
laboratorio que tienen la misma finalidad, aunque
el VIH suele detectarse mediante la técnica ELISA,
Introducción. - La transferencia de
el Western Blot se usa como prueba confirmatoria
proteínas o blotting supone la inmovilización de
cuando el ELISA da un resultado positivo en un
las proteínas o acidos nucleicos sobre membranas
grupo que no es de riesgo o en una población
sintéticas, seguido de la detección empleando
donde la prevalencia del virus es muy baja. La
sistemas especialmente diseñados para tinción de
técnica utiliza tres etapas para lograr esto:
blots. Western Blot es una técnica poderosa
separación por tamaño, transferencia a un
utilizada por muchos investigadores para
soporte sólido y, finalmente, visualización
identificar la presencia de proteínas específicas en
mediante la marcación de proteínas con el uso
una muestra separados electroforéticamente con
de anticuerpos primarios o secundarios
anticuerpos. El método implica el uso de
apropiados. Esta técnica es hoy en día
electroforesis en gel para separar las proteínas de
imprescindible en varios campos de la biología,
la muestra. Las proteínas separadas se transfieren
como la biología molecular, la bioquímica, la
del gel a la superficie de una membrana. La
biotecnología o la inmunología. A pesar de que el
membrana se expone a un anticuerpo especifico
fundamento de la técnica se mantiene, a lo largo
contra la proteína de estudio. La unión del
de los años se han ido desarrollando nuevos
Catedra de Inmunología, Escuela de Medicina, Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí.
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María Alexandra Zambrano Muñoz; Jorge Cañarte Alcívar; Revisión bibliográfica Western blot:
Generalidades e implicación con el VIH
Catedra de Inmunología, Escuela de Medicina, Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí.
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María Alexandra Zambrano Muñoz; Jorge Cañarte Alcívar; Revisión bibliográfica Western blot:
Generalidades e implicación con el VIH
membrana supone una gran herramienta para la infecciones oportunistas y/o neoplasias malignas.
detección y caracterización de proteínas, (4)
especialmente las que están en baja abundancia.
La infeccion por VIH/SIDA constituye uno de los
(3).
principales problemas en salud en el mundo con
Las ventajas específicas que supone la técnica de elevadas tasas de morbilidad y mortalidad
Western Blot son las siguientes: demostradas a lo largo de la historia. En diferentes
estudios epidemiológicos ha quedado confirmado
Las membranas humedad son flexibles y
que 36.3 millones de personas vivían con VIH
fáciles de manipular.
hasta el año 2015 alrededor de todo el mundo.
Las proteínas bloqueadas en la membrana
Hasta este momento la OMS ha reportado que han
son accesibles para los diferentes ligandos
sido infectadas 78 millones de personas desde el
Se necesitan pocos reactivos para el
año 1981, año en que comenzó esta epidemia, y el
análisis.
25% de los pacientes desconocen que están
Se pueden mantener las membranas útiles
infectados, lo cual propicia el contagio. (5)
durante más tiempo.
El tratamiento antirretroviral (ARV) de alto
A estas ventajas hay que sumarle la evolución
impacto surgió en el mundo en 1996, y en Cuba,
constante que tiene esta técnica desde sus inicios
en el año 2001. Este tratamiento ha permitido
en 1979, lo que permite trabajar con diferentes
convertir esta enfermedad, antes letal, en una
medios y modos de transferencia de proteínas. (3)
enfermedad crónica con una larga expectativa de
Hay 3 etapas principales de esta técnica que son vida debido a la disminución de la aparición de
esenciales para un resultado de calidad: enfermedades oportunistas y tumores malignos.
Este tratamiento consiste en combinar varias
Electroblotting, Immunoblotting y detección.
drogas ARV de alta eficiencia, las cuales aumentan
Antes de estas etapas, se debe realizar SDS-PAGE,
su efecto sobre el VIH y disminuyen notablemente
en el que desnaturalizado las proteínas se separan
la morbilidad y mortalidad por el virus, de modo
por tamaño en un gel de poliacrilamida.
que hoy día esta enfermedad se comporte como
Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) una enfermedad crónica. No obstante, la
utilización de estas drogas se ha asociado a
Para meternos más en contexto en el trabajo se
importantes inconvenientes, entre los que
debe dar a conocer una de las afecciones más
destaca el desarrollo de resistencia y la gran
asociadas a la prueba de western blot, el Virus de
toxicidad que producen estos fármacos. (5)
Inmunodeficiencia humana. En 1981, en los
Estados Unidos de América se reportaron los Las manifestaciones clínicas de la enfermedad por
primeros casos de una enfermedad desconocida el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH)
que producía una intensa inmunodepresión en comprometen diferentes órganos y sistemas,
varones homosexuales, quienes padecían estas alteraciones varían en gravedad y dependen
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