Perfil fotoquímico de pulpa, hojas, raíz, semilla y cascara de la

planta de calabaza
Protocolo de prueba

Bio: Mario Felipe González González

20/02/20

Procedimiento.

1.- Obtención de los extractos

1.1.- Extracción de los alcaloides.

Se realizó según la metodología escrita por Juárez y Gutiérrez., (2004), con
algunas modificaciones. En el cual, se colocó el material vegetal en un
recipiente ámbar y se le coloco metanol o etanol al 70%(v/v) en agua en
proporción 1:2, se colocó en un agitador por 30 minutos. Una vez transcurrido
el tiempo se filtró y el líquido se conservó en un vaso depreciado, a la torta
que es el sólido que se quedó en el filtro se devolvió al recipiente y se le
volvió a realizar otra extracción como al principio y posteriormente se
juntaron los sobrenadantes, a estos se les agrego HCl 1 M hasta alcanzar un
pH 5. Se colocó en una pera de decantación y se le agrego cloroformo se
basifica con NaOH o hidróxido de amonio hasta alcanzar un pH de 11, se
recupera la fase orgánica y se elimina el volumen en un rota vapor hasta
sequedad.

1.2.-Extracción con solventes de polaridad creciente.

Se realizó la extracción por maceración con disolventes en forma creciente. En
un recipiente de boca ancha se le agrego una cantidad de material vegetal y se
le agrego primero con Hexano 1:2. Se dejó reposar por 24 h y se realizó el
filtrado con vacío se recuperó el filtrado y se guardó a 4°C hasta su uso. El
residió que quedo de la primera extracción se secó a 32°C y se le coloco
acetato de etilo como la primera extracción y se realizó el mismo
procedimiento anterior. Al residuo se le agrego etanol y se siguieron los
mismos pasos anteriores y por último se le agrego agua al residuo para obtener
una extracción acuosa, cada filtrado fue guardado en recipientes ámbar y
almacenados en refrigeración hasta su uso.
1.3 eliminación de clorofilas
Si el material vegetal presenta gran cantidad de pigmentos como son las hojas,
lo recomendable seria eliminárselos colocando carbón activado en el papel
filtro y pasar la muestra para su eliminación. Otra opción sería que al extracto
etanólico agregarle éter etílico y separarlo en una pera de decantación.
2.- Perfil fotoquímico de las partes de la planta de calabaza
1.1