UNIVERSIDAD REGIONAL AMAZÓNICA IKIAM

Realizado por: Jefferson Sánchez

Biología I

Tronco común grupo: 5

Tema de la práctica: Actividad enzimática de los peroxisomas.

INTRODUCCIÓN

Según García, G. “Los peroxisomas son organelos membranosos subcelulares misteriosos.

Hasta ahora se han identificado 50 enzimas peroxisomales, las cuales contribuyen a varios
procesos metabólicos cruciales” (2009). Las funciones que cumplen en la célula responden a
“respuesta a cambios ambientales y demanda celular” (Salceda, 2008).

Su importancia radica en que:

Se asemejan a los lisosomas en que contienen varias enzimas de gran variabilidad

funcional; por ejemplo: las que participan en la oxidación de los ácidos grasos de
cadena larga, síntesis de colesterol y ácidos biliares en el hígado, síntesis de
plasminógenos en la neurona, la catalasa que degrada el nocivo peróxido de hidrógeno
(H2O2) (Robolledo, sf).

En cuanto a su historia:

Se cree que los peroxisomas provienen de un orgánulo antiguo, que en los antecesores
primitivos de las células eucariotas realizaba todo tipo de metabolismo del oxígeno
antes de que existiera las mitocondrias. Al aparecer las mitocondrias, los peroxisomas
perdieron importancia, ya que muchas de las reacciones que ellos producían sin
generar energía, fueron acopladas a la formación de ATP. Por tanto, las reacciones
oxidativas que realizan actualmente los peroxisomas podrían ser las que siguen siendo
útiles a pesar de la presencia de las mitocondrias (Cerchón, 2019).

El objetivo de esta práctica es identificar los procesos enzimáticos de los peroxisomas ante la
oxidación del peróxido de hidrogeno, la hipótesis de la práctica es comprobar la existencia de
los peroxisomas en la célula animal.
MATERIALES Y MÉTODOS

Actividad 1
En esta actividad se evidenciará la liberación de O2 producto de la actividad enzimática de la
catalasa. Para ello se colocará 5 gramos de cada muestra orgánica en tubos de ensayo, además
se agregar 10 ml de agua normal y finalmente, se añadirá directamente 2 ml de peróxido de
hidrógeno. La longitud de la columna de burbujas formada será la variable de respuesta.

Actividad 4:
La forma tridimensional de la enzima es la que le permite formar su sitio activo de unión al
sustrato. Si esta conformación plegada se pierde por algún factor externo, la enzima se
desnaturaliza y pierde su actividad catalítica. En esta actividad se evidenciará el efecto de la
temperatura y el alcohol sobre la actividad de la catalasa. Para esto se pesará y machacará 5 g
de la fuente de catalasa y se colocará en 2 tubos de ensayo diferentes el primero se someterá a
un baño maría a 100°C y el segundo se bañará en alcohol 70%, durante 10 minutos.
Finalmente se añade 10 ml de solución a pH 7 a cada muestra, una gota de jabón líquido y
finalmente añade 2 ml de agua oxigenada.

RESULTADOS
Actividad 1
Para comprender los resultados de esta practica se ha tabulado los datos recopilados en
diferentes tablas para cada muestra, las variables serán variables dependiente altura de la
columna en el tubo de ensayo y la independiente es el tiempo.
Tabla 1
Muestra Tallo de Apio (apium graveolens).
Con una masa inicial de 5,01g
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 4,1 7 2,9
60 4,1 8,8 4,7
120 4,1 9,2 5,1
180 4,1 10,1 6
240 4,1 10,9 6,8
300 4,1 11,7 7,6

Gráfica 1
Velocidad enzimática de peroxisomas de Tallo de Apio.
 Altura VS Tiempo
8

0
0 50 100 150 200 250 300 350

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 300 segundos

Tabla 2
Muestra de Papa (Solanum tuberosum)
Con una masa de 5,13 g.
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 4,1 7,7 3,6
60 4,1 9,5 5,4
120 4,1 11 6,5
180 4,1 --- ---
240 4,1 --- ---
300 4,1 --- ---

Gráfica 2
Velocidad enzimática de peroxisomas de papa.
 Altura VS Tiempo
7

0
0 20 40 60 80 100 120 140

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 120 segundos

Tabla 3
Muestra de hígado de pollo ( Gallus gallus domesticus)
Con una masa de 5,00 g.
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 3,9 12,3 8,4
60 3,9 --- ---
120 3,9 --- ---
180 3,9 --- ---
240 3,9 --- ---
300 3,9 --- ---

Gráfica 3
Velocidad enzimática de peroxisomas de Hígado de pollo.
 Altura VS Tiempo
9

0
0 5 10 15 20 25 30 35

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 30 segundos

Actividad 4
Se tabulo los datos obtenidos al someter a diferentes desnaturalizaciones a las diferentes
muestras unas a desnaturalización de sumergencia en alcohol y las otras aumentando la
temperatura a 100 grados Celsius.

Desnaturalización de peroxisomas por sumersión en metanol al 70 por ciento, durante

10 minutos.
Tabla 4
Muestra Tallo de Apio (apium graveolens), desnaturalizado en alcohol.
Con una masa inicial de 5,03g
 Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 5,3 6,2 0,9
60 5,3 6,5 1,2
120 5,3 7 1,7
180 5,3 7,3 2
240 5,3 7,7 2,4
300 5,3 7,9 2,6

Gráfica 4
Velocidad enzimática de peroxisomas de muestra tallo de Apio (apium graveolens),
desnaturalizado en alcohol.

Altura VS Tiempo
3

2.5

1.5

0.5

0
0 50 100 150 200 250 300 350

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 300 segundos.

Tabla 5
Muestra Papa (Solanum tuberosum), desnaturalizado en alcohol.
Con una masa inicial de 5,05g
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 6 6 0
 60 6 6,1 0,1
120 6 6,2 0,2
180 6 6,3 0,3
240 6 6,4 0,4
300 6 6,5 0,5

Gráfica 5
Velocidad enzimática de peroxisomas de muestra tallo de Papa (Solanum tuberosum)
desnaturalizado en alcohol.

Altura VS Tiempo
0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 50 100 150 200 250 300 350

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 300 segundos.

Tabla 6
Hígado de pollo (gallus gallus domestucus), desnaturalizado en alcohol.
Con una masa inicial de 5,08g
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 6 13 7
60 6 - -
120 6 - -
180 6 - -
240 6 - -
300 6 - -
 Gráfica 6
Velocidad enzimática de peroxisomas de Hígado de pollo (gallus gallus domestucus),
desnaturalizado en alcohol.

Altura VS Tiempo
8

0
0 5 10 15 20 25 30 35

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 30 segundos

Desnaturalización de peroxisomas por aumento de 20 a 100 grados Celsius, durante 10

minutos.

Tabla 7
Muestra Tallo de Apio (apium graveolens), desnaturalizado por aumento de
temperatura.
Con una masa inicial de 5,0g
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 4 4,5 0,5
60 4 4,6 0,6
120 4 4,6 0,6
180 4 4,6 0,6
240 4 4,6 0,6
 300 4 4,6 0,6

Gráfica 7
Velocidad enzimática de peroxisomas de muestra tallo de Apio (apium graveolens),
desnaturalizado por aumento de temperatura..

Altura VS Tiempo
0.7

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 50 100 150 200 250 300 350

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 30 segundos.

Tabla 8
Muestra Papa (Solanum tuberosum), desnaturalizado por aumento de temperatura.
Con una masa inicial de 5,05g
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 6,5 6,7 0
60 6,5 6,9 0,1
120 6,5 7 0,2
180 6,5 --- ---
240 6,5 --- ---
300 6,5 --- ---

Gráfica 8
 Velocidad enzimática de peroxisomas de muestra tallo de Papa (Solanum tuberosum)
desnaturalizado por aumento de temperatura.

Altura VS Tiempo
8

0
0 1 2 3 4 5 6 7

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 120 segundos.

Tabla 9
Muestra hígado de pollo, desnaturalizado por aumento de temperatura.Con una masa
inicial de 5,08g
Tiempo Altura inicial Altura final Variación de altura
(s) (cm) (cm) (cm)
30 5 6,2 1,2
60 5 6,5 1,3
120 5 7,4 2,4
180 5 8,5 3,5
240 5 9,3 4,3
300 5 9,8 4,8
 Gráfica 9
Velocidad enzimática de peroxisomas de Hígado de pollo (gallus gallus domestucus),
desnaturalizado por aumento de temperatura.

Altura VS Tiempo
6

0
0 50 100 150 200 250 300 350

Se puede observar que la velocidad de reacción de los peroxisomas en la muestra disminuye

con el paso del tiempo durante los primeros 300 segundos y sigue aumentando.

DISCUSIÓN

Condiciones Normales

Los peroxisomas
Se asemejan a los lisosomas en que contienen varias enzimas de gran variabilidad
funcional; por ejemplo: las que participan en la oxidación de los ácidos grasos de
cadena larga, síntesis de colesterol y ácidos biliares en el hígado, síntesis de
plasminógenos en la neurona, la catalasa que degrada el nocivo peróxido de hidrógeno
(H2O2), en agua y oxígeno molecular. (Robolledo, sf).

Por tal motivo se evidencio la presencia de burbujas y desplazamiento horizontal del líquido
en los tubos de ensayo.
Muestras desnaturalizadas
Desnaturalización por incremento de temperatura.
Según Charles el efecto de una temperatura mayor a la optima en los peroxisomas provoca
mayor desestabilización de las estructuras ósea (desnaturalización) (2012). Entonces la
disminución de la reacción y por ende la liberación del oxigeno en la muestra es menor tal
como se puede observar en las gráficas.
Desnaturalización por sumersión en metanol al 70 por ciento.
La enzima que precisa de cofactores como el metanol se ve limitada en su actividad debido a
la presencia de estos cofactores, eso explica una menor velocidad en la reacción (Charles,
2012).
CONCLUSIONES
Luego de realizar la práctica se concluye que se identificó los procesos enzimáticos de los
peroxisomas en la descomposición del peróxido de hidrogeno. Adicionalmente se puede
acotar que al someter los peroxisomas a desnaturalización ya sea por incremento de
temperatura en las muestras o al contacto con metanol al 70 por ciento, el rendimiento de los
peroxisomas al descomponer el peróxido de hidrógeno disminuye considerablemente.

La conclusión de la hipótesis, se comprobó la existencia de los peroxisomas en la célula

animal y la velocidad en la que reacciona estos al ser sometidos a diversas
desnaturalizaciones.

BIBLIOGRAFÍA
Corchón, L.(2019). “Los peroxisomas”.asturnatura.com Num.502. Recuperado de:
https://www.asturnatura.com/articulos/ribosomas-membranas/peroxisomas.php

Rebolledo, I. (sf) “Peroxisomas”. bibmed.ucla. Recuperado de:

http://bibmed.ucla.edu.ve/edocs_bmucla/materialdidactico/celular/peroxisoma.pdf

Salceda, R. (2008). “PEROXISOMAS: ORGANELOS POLIFACÉTICOS*”, Departamento de

Neurociencias,Instituto de Fisiología Celular y Departamento de Biología, Facultad de
Ciencias, Universidad Nacional. Recuperado de:
https://www.medigraphic.com/pdfs/revedubio/reb-2008/reb083c.pdf

García, G. (2009). “Los peroxisomas y su importancia biomédica: un tema mal entendido y

muy mistificado”. Rev.Medica.Sanitas 12 (2). Recuperado de:
http://www.unisanitas.edu.co/Revista/1/gregory%20garcia.pdf
Charles, J. (2012). “Factores que inhiben la actividad enzimática de los peroxisomas”.
Recuperado de:
https://www.desnaturalizacion+de+peroxisomas+a+incremento+de+temperatura&rlz=1C1C
HBF_esEC849EC849&oq=desnaturalizacion+de+peroxisomas+a+incremento+de+temperatu
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