Capitulo 15 | Secreciones vaginales 281 Pou 4Cual de las siguientes no seria una razén para recolectar liquido vaginal para su andlisis? A. Vaginitis B. Complicaciones del embarazo que conducen al arto prematuro C. Pruebas forenses por una agresién sexual D. Pruebas de embarazo {Cul de los siguientes organismos podria no ser detectado si la muestra para el andlisis de la secrecion vaginal hubiera sido refrigerada? A. Prevotella bivia B. Lactobacillus acidophilus C. Trichomonas vaginalis D. Candida albicans El aspecto de la secrecion vaginal en la candidiasis vulvovaginal se describe como: A. Claro e incoloro B. Secrecién blanca a gristcea homogenea y fina C. Blanca, similar al requesén D, Verde-amarillenta y espumosa Un rango normal para el pH vaginal es: A. 38245 B. 5a6 Cc. 6a7 D. 7a74 {Cual de las siguientes pruebas diferencia las células levadurifo A. pH B. Preparado en fresco en solucién salina C. Preparado de KOH D. Prueba de Whiff en gemaci6n de los eritrocitos? {Cuil de los siguientes constituyentes es normal en uudables del liquido vaginal? recolectadas de un preparado salina deben ser 2 preservar la motilidad onto como sea posible reo a un laboratorio de ido de potasio 8. 10. uu. 12. 13. {En cual de los siguientes sindromes se observa una prueba de aminas (Whiff) positiva? ‘A. Vaginosis bacteriana B. Candidiasis vulvovaginal CC. Vaginitis atrofica D. Vaginitis inflamatoria descamativa Una célula epitelial escamosa cubierta con cocobacilos, que se extiende mas allé del margen del citoplasma es una: A. Célula basal B. Célula parabasal C. Célula clave D. Blastosporo Todos los siguientes son diagnésticos de vaginosis bacteriana, excepto: A. pH vaginal de 3,8 B. Presencia de células clave CC. Prueba de aminas (Whiff) positiva D. Secrecion vaginal blanca a grisicea homogénea fina @Cual de los siguientes microorganismos produce Acido lactico y peréxido de hidrégeno para mantener un medio ambiente vaginal acido? A. Gardnerella vaginalis B._ Especies de Mobiluncus C. Especies de Lactobacilli D. Estreptococos B-hemoliticos Todos los siguientes son diagnésticos de la candidiadis vulvovaginal, excepto: A. Gran cantidad de leucocitos B._Presencia de células clave CC. Prueba de KOH positiva D. pH vaginal de 4 Todos los siguientes son diagnésticos de tricomoniasis, excepto A. pH vaginal de 6 B. Prueba de aminas positiva C. Prueba de KOH positiva ‘D. Presencia de tricomonas méviles282 Parte Tres | Otros liquidos corporales 14, La bacteria asociada con la vaginitis inflamatoria descamativa es: A. Estreptococo B-hemoliticos B. Trichomonas vaginalis C. Gardnerella vaginalis, D. Mycoplasma hominis 15. La proteina presente en las secreciones vaginales, que puede permitir la identificacion de las pacientes que se encuentran en riesgo de un parto prematuro es: A. Gonadotrofina coriénica humana B. Estrogeno Cc. PAMG-1 D. Fibronectina fetal ee eee er ets eg 1. Una mujer de 30 aftos presenta sintomas de disuria, prurito vaginal y una secreci6n blanca similar al requeson. Durante su visita al Centro Clinico de Mujeres, la paciente puso de manifiesto que recientemente habia completado un régimen de antibioticos de amplio espectro como tratamiento de una infeccion de las vias urinarias. Su prestador de atencién de salud realiza un hisopado de las secreciones vaginales para su andlisis. a. Qué pruebas se realizaran en la muestra vaginal? b. Sobre la base de los antecedentes de la paciente y la observacion de la secrecisn vaginal, gqué prueba sera diagndstica para el diagnéstico puede realizarse? to de primera eleccion? ve sexualmente activa visit6 el Centro ; refirid prurito, dolor vaginal y 0 de las secreciones vaginales, que eran y amarillas a verdes, En el examen, el stador de atencidn de la salud observ6 un cuello erino similar a una fresa y realiz6 una prueba de pH las secreciones. El pH fue de 5,5 y el preparado en ‘sco mostr6 microorganismos “que nadaban’. Mujer 2. gCual es el diagnéstico probable? éQué otras pruebas pueden realizarse para confirmar este diagnéstico? . @Cual es la mejor serie de tratamiento? dd. @Debe tratarse su pareja sexual? €. Mencione tres complicaciones que pueden producirse en este trastorno. 3. Durante una visita de rutina al ginecélogo, una mujer de 60 anos refirio sequedad y dolor vaginales. Durante el examen, el facultativo observe eritema de la mucosa vaginal. El pH de las secreciones vaginales era de 6. Las pruebas de pH y de aminas (Whi) fueron negativas. El examen microscopico puso de manifesto células epiteliales, células basales, disminuci6n de lactobacilos y aumento de cocos grampositivos y de bacilos gramnegativos. a. (Cual es el nombre de este trastomo? b. _Explique por qué puede presemtarse. c. QCual es el tratamiento?APENDICE A Automatizacién del analisis de orina y los liquidos corporales Mf Automatizacién del anal de orina Algunos estudios han mostrado que la principal variable en el examen de analisis de orina es la concientizacion del personal de laboratorio en cuanto al momento oportuno y a las interpretaciones de las reacciones de color. Las lectu- ras correctas de color dependen de la exactitud de la opor- tunidad. El objetivo final de la automatizacién del andlisis de orina es mejorar la reproducibilidad y la discriminacion de colores mientras aumenta la productividad y la estan- darizacion para el informe de los resultados del andlisis. La subjetividad asociada con la discriminacion visual entre los colores se ha mejorado con el desarrollo de lec- tores automaticos de tiras reactivas que utilizan una medi- cign espectrofotomeétrica del reflejo de la luz denominada Sfotometria de reflectancia.” La fotometria de reflectancia utiliza el principio segtin el cual el reflejo de la luz desde las almohadillas de prueba disminuye en proporcion a la intensidad del color producida por la concentracisn de la sustancia de prueba. En la fotometria de reflectancia, se dirige una fuente Iuminosa monocromatica hacia las al- mohadillas reactivas y se coloca un filtro entre la fuente Tuminosa y la superficie reflectante de la almohadilla con el uso de un diodo emisor de luz, para proporcionar la longitud de onda especifica necesaria para cada reaccion de color de la almohadilla de prueba. La luz se refieja en un fotodetector y un convertor de luz digital. Los instru- ‘mentos comparan la cantidad del reflejo de luz con las de las concentraciones conocidas, muestran 0 imprimen ast Jas unidades de concentracion o transmiten los datos al sistema de informacion de laboratotio. Existen varios instrumentos automatizados que estan- darizan el procesamiento de las muestras, analizan las tiras reactivas, realizan el andlisis del sedimento urinario e infor- man los resultados con calidad conveniente y recuccién del tiempo de manipulacion. Los insirumentos son faciles de ‘usare incluyen alertas visuales y auditivas para la operacion. Los instrumentos de distintos fabricantes incluyen diferen- tes caracteristicas y principios para el examen. Vease en el Cuadro A-1 la division de la tecnologia de medicion utiliza- da por los principales fabricantes de analizadores de orina ‘Otras ventajas de la automatizacion incluyen la capa~ cidad computarizada en linea con la interfaz de sistema de informacion del laboratorio, codificacién de barras, entrada manual de color, claridad y resultados microscé- picos que son incluidos en el informe impreso, alerta de resultados anormales, puntuacion de los resultados de los pacientes y de control, con calibracion, limpieza y mante- nimiento minimos. Los instrumentos automatizados en el anilisis de orina incluyen los analizadores semiautomatizados y to- talmente automatizados, analizadores automatizados de células en orina y sistemas totalmente automatizados. Los instrumentos semiautomatizados dependen de un opera- dor para que mezcle la muestra, sumerja las tiras reactivas € ingrese los resultados microsc6picos. En un analizador quimico totalmente automatizado, los tubes de orina se colocan en wn estante o en un carrusel y se mueven de tun modo automatico a través del instrumento. Los anali- zadores automatizados de células en orina mezclan, aspi- ran, diluyen y tifien la orina para clasificar las particulas del sedimento urinario. Estos sistemas realizan un andlisis completo que incluye las partes fisica, quimica y mictos- cépica de un anélisis de orina de rutina. Los instrumentos disponibles en Ia actualidad se mencionan en el Cuadro A-2; sin embargo, nuevos instrumentos estén desarrollan- dose de manera continua. Analizadores semiautomatizados de quimica urinaria Los analizadores semiautomatizados de orina evaltian os componentes quimicos de la orina. Los instrumentos leen e interpretan los resultados de las tiras reactivas de un modo preciso, estandarizan la interpretacin de los resultados de las tiras reactivas y eliminan el sesgo de co- lor y las discrepancias del personal en cuanto al momento oportuno. Segiin el instrumento y la tira reactiva utilizada, pueden realizarse las siguientes pruebas: leucocitos, nitri- tos, proteinas, sangre, glucosa, cetona, bilirrubina, urobi- linégeno, pH, densidad, color, creatinina y cociente pro- teina-creatinina. Los analizadores semiautomatizados son muy adecuados para los laboratorios de volumen pequeno ¢ intermedio y los consultorios de los médicos, y cumplen Tecnologia de medicién de la orina Fabricante Color Claridad Densidad [ARKAY, Ine Inis Diagnostics Fotometria ‘Transmision de la Iuz/dispersion de la uz Roche Diagnostics Fotometria de reflectancia Siemens Healthcare Fotometria de reflectancia Diagnosties, Ine Dispersion de la luz Indice de refraccion Transmision de la luz/dlspersion dela luz Indice de refraccion Turbidez Refractometria ‘Transmision de la luz/dispersion de la luz Indice de refraccion 283284 Apéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales Equipo Fabricante Instrumentos semiautomatizados para quimica ‘Siemens Healthcare Diagnostics, Inc Clinitek Advantus ‘Siemens Healthcare Diagnostics, Inc Clinitek Status Sistema Urisys 1800 Roche Diagnostics COBAS u4l1 Roche Diagnostics DiaScteen 50 U.S. ARKRAY iChem 100 Inis Diagnostics Instrumentos completamente automatizados para quimica ‘Clinitek Atlas ‘Siemens Healthcare Diagnostics, Inc Sistema Urisys 2400 Roche Diagnostics Aution Max AX-4030 U.S. ARKRAY IChem Velocity Is Diagnostics automatizada Analizador de celulas en orina UF-10001 Sysmex Corporation Microscopia automatizada de orina iQ 200 Tris Diagnostics Analizador de orina (iQ 200 Sprint) mas de andlisis de orina automatizados Sistemas de andlisis de orina iRICELL Iris Diagnostics GRICELL 3000plus, RICELL 2000plus, iRICELL 3000pr0, iRICELL 2000pro, iRICELL 1500) Sistema CLINITEK AUWi Iris Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics, Inc. Analizadores de | idos corporales ADVIA 21201 con software para Siemens Healtheare liquidos corporales Diagnostics, Inc, ‘Sysmex XE-5000 con el uso del moda Sysmex Corporation de liquidos corporales §Q 200 con el uso del software pata lHquidos corporales Iris Diagnostics con los estandares emitidos por las Enmiendas de Mejoria del Laboratorio Clinico. Estos analizadores se autocalibran, y algunos instru- ‘mentos realizan controles automaticos (Auto-Checks) para identificar el tipo de tira y la exposicién a la humedad. Para un instrumento semiautomatizado, las tiras reactivas se sumergen en forma manual y se colocan en el lector de la tira, se leen las almohadillas de la reaccién en el momento correcto y se mueve la tira hacia el recipiente de desecho. Los resultados son exhibidos, impresos 0 transmitidos hasta un sistema de informacion del laboratorio. La identi- ficacion de los pacientes, asf como el color y la claridad de las pruebas, pueden ingresarse en forma manual o puede utilizarse un lector de codigos de barras para identificar las muestras. Se marcan los resultados positivos para indicar la muestra de un paciente que requiere pruebas adicionales de confirmacién 0 evaluacién microscépica. El instrumento semiautomatizado requiere que el operador: 1, Sumerja la tira reactiva en una muestra de orina bien mezclada. 2. Presione la tira para remover el exceso de orina 3. Coloque la tira en la plataforma para tiras reactivas. 4. Presione el boton de analizarfentrar. Los resultados se imprimen y, en forma automatica, se seftalan los que son anormales. A medida que la tira se mueve a través del instrumento, se toman las lecturas de reflectancia a los intervalos temporales correctos. Las tiras reactivas de algunos fabricantes poseen una almoha- dilla de compensacién de colores que ajusta los resultados para el color de la orina. Esta caracteristica permite que el instrumento sustraiga el color de la orina del color desa- rrollado en la almobadilla de reaccién, lo que proporciona un resultado preciso para cada almohadilla, a pesar de la interferencia. Las tiras son eliminadas luego en el reci- piente de desechos. Los resultados son almacenados en el analizador, impresos 0 enviados al sistema de informacién del laboratorio. Se muestran ejemplos de instrumentos se- jautomatizados en las Figuras A-I-a A-6. El mantenimiento diario es minimo e incluye la lim- pieza de la plataforma de las tiras reactivas y el vaciado del recipiente de desecho de las tiras. Analizadores completamente automatizados de quimica en orina Los instrumentos completamente automatizados estan di- sehados para un laboratorio de andlisis de orina de alto volumen, con capacidad para que el usuario se retire. Los distintos instrumentos tienen la capacidad de cargar mu- chas muestras en un catrusel o una raqueta a la vez; se puede insertar una muestra de inmediato durante la corri- da, Se presiona el botén de iniciar o analizar para comenzar la prueba, y la muestra se mueve de manera automatica a través del instrumento, Se identifica la muestra; una sonda Figura A-1 Analizador semiautomatizado de quimica urinaria DiaScreenS0. (Imagen cortesla de U.S. ARKRAY).Apéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales. 285 Figura A-2 Analizador semiautomatizado de quimice urinaria Cobas u 411. (Imagen cortesia de Roche Diagnostics). Figura A-3 Analizador semiautomatizado de quimica urinatia LUtisys 1100. (Imagen cortesia de Roche Diagnostics. Figura A-4 Clinitek Status + Analzador. A. Conexién de Clinitek Status con Dispositivo de Cédigo de Barras. B. lintek Status con tire de prueba, (Imagenes cortesia de Siemens Healthcare Diag- nostcs, Inc.) Figura A-5 Analizador seriautomatizado de quimica urinaria Cli nitek Advantus. (Imagen cortesta de Siemens Healthcare Diagnos- ties Inc),286 Apéndice A |. Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales Figura A-6 Analizador semiautomatizado de quimica urinaria Chem 100. (Imagen cortesia de iis Diagnostics). aspira una cantidad exacta de la muestra de orina y la vierte directamente en la tira reactiva, Esta tira avanza en forma automatica hasta el fotometro de reflectancia para medir el cambio de color de cada almohadilla reactiva. La tira avan za luego hasta el area de descarte. Las pruebas se miden con la prueba de almohadilla seca mediante fotometria de reflectancia para detectar cambios de color, y se toman lecturas en el momento y la longitud de onda apropiados para cada prueba especifica. Los analitos medidos varlan segiin el instrumento y pueden incluir leucocitos, cetonas, proteinas, glucosa, nitrites, sangre, urobilindgeno, pH, bi- lirrubina, color, claridad, creatinina y baja contenido pro- teico. El color es medido con fotometria de reflectancia 6 espectrofotometria en multiples longitudes de onda. Se mide la densidad mediante la metodologia del indice de relraccién, y la claridad es una medida de la luz transmi- tida o dispersada. Los instrumentos ttilizan identificacién de Ia muestra con barras de cédigo integradas y permiten seleccionar rangos anormales, de modo que las muestras que requieren examen microsc6pico o pruebas confirma- torias puedan ser identificadas y marcadas. Los resultados de los pacientes y los resultados del control de calidad y las calibraciones se almacenan para su exhibicién visual, se imprimen 0 se transmiten al sistema computarizado de laboratorio. Se corren controles estandarizados segin lo establezea el protocolo del laboratorio. En las Figuras A-7 a A-10, se muestran ejemplos de analizadores de quimica urinaria completamente automatizados, Microscopia automatizada En un andlisis de rutina, una tira de prueba determina los analitos quimicos, y se determinan los elementos formados mediante microscopia. La microscopia manual no es facil- mente estandarizada debido a la alta variacion entre los operadores, incluso en la misma institucton. El procesa- miento de rutina de las muestras, como la centrifugacion, puede afectar la exactitud porque los elementos escasos, como los cilindros o las céhulas, pueden perderse durante la manipulacion. Se ha demostrado que la recuperaci6n de los elementos formados en el sedimento después de la cen- trifugacion es sumamente variable, Los resultados no son cuantitativos porque deben ser comunicados en rangos 0 promedios. De un modo global, la microscopia manual no es costo-efectiva debido al trabajo y al tiempo necesarios Figura A-7 Analizador automatizado de quimica urinaria Urisys 2400. (Imagen cortesia de Roche Diagnostics). Figura A-8 Analizador automatizado de quimica urinaria Clinitek Atlas. (Imagen cortesta de Siemens Healthcare Diagnostics Inc.) para procesar y analizar la muestra, lo que en definitiva reduce los tiempos de recambio para los resultados. Los analizadores automaticos de células urinarias proporcio- nan resultados estandarizados eficientes en menos de 1 minuto, en comparacién con aproximadamente 6 minutos que utiliza el método manual, lo que mejora de un modo notable los tiempos de recambio. En la actualidad, existen dos analizadores automaticos de orina en los Estados Uni- dos: el Sysmex UF-1000 y el iQ 200 de Iris Diagnostics Sysmex UF-1000i* El Sysmex UF-1000i (Sysmex Corporation, Kobe, Japén) utiliza la citometria de flujo basada en el laser que mide la dispersion anterégrada de la luz, la dispersion lateral, lasApéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales. 287 Figura A-9 Analizador completamente automatizado de quimica Utinaria Auction Mex AX-4030. (Imagen cortesia de US. ARKHAY). Figura A-10 Analizador automatizado de quimica urinaria iChem Velocity. (Imagen cortesia de lis Diagnostics). caracteristicas de tincion de fluorescencia y el andlisis de grupos adaptatives para identificar particulas tefidas del sedimento urinario (Fig. A-11), Para realizar un andlisis con microscopia automatizada, se aspiran 4 mL de orina no cen- trifugada en el instrumento y se dividen en dos canales: uno para el anzlisis de las particulas de la orina; otro, para la tin- cin y deteccién de las bacterias (Fig. A-12). Cada canal po- see tun componente especifico que marca los constituyentes internos de las células. La muestra de orina tenida atraviesa lacelda de flujo, donde es enfocada en forma hidrodinamica y presentada a un laser semiconductor rojo (635 nm) (Fig, ‘A-13). Las particulas se identifican mediante la medicion de Jaaltura y el ancho de las sefales de dispersion fluorescente y de la luz, los que se presentan en graficos de dispersion € +histogramas. En el canal de las bacterias, el diluyente esta- biliza el pH y lisa las particulas no bacterianas, y elimina los cristales amorfos. La tincién es especifica del RNA en la cel- da bacteriana, lo que elimina cualquier tincion inespecifica del detrito. El ancho de la sefial fluorescente mide las inclu- siones celulares y el ancho de la dispersion anterograda de la luz mide el largo de las células (Fig. A-14). Los valores resultantes se presentan en celdas cuantitativas por micro- litro y celdas por campo de gran aumento y bajo aumento. Se pueden establecer umbrales que marcan los elementos primarios y se marcan los resultados anormales para tea lizar una revisién confirmatoria. Las principales particulas enumeradas son eritrocitos, leucocitos, células epiteliales, cilindros hialinos y bacterias, Los resultados se muestran como diagramas de dispersion (Fig. A-15). Estos parame tros son directamente comunicadas, con intervencién del tecnico, y pueden ser autovalidados. Las particulas que son seftaladas incluyen cilindros patologicos, cristales, células pequenas redondas (células epiteliales tubulares renales 0 ccélulas epiteliales transicionales), espermatozoides, moco y células levaduriformes, y deben ser confirmadas mediante microscopia manual. Un sistema de contral de calidad de particulas de latex monitoriza el rendimiento, y pueden vi- sualizarse los registros de control de calidad en la pantalla del instrumento, en un grafico de Levy-Jennings. Los ana- lizadares pueden almacenar hasta 10 000 resultados de los pacientes, que incluyen gréficos de dispersion, histogramas y caracteristicas de las muestras, los que pueden ser guar- adios y visualizados por el usuario. Se prove una interfaz bidireccional para descargar ¢ informar los resultados. El UF-1000i puede ser utilizado de forma independiente o in- tegrado con un lector automatica de tiras para quimica uri- naria para crear un sistema completo de andlisis de orina ~~ Figura A-11 Analizador de quimica urinaria Sysmex UF 100i. ‘(imagen cortesta de Sysmex Corporation, Mundelein, IL). ‘Arpliicador ‘Ampliicador de soiales ‘ol cisprsor lateral ‘Sensor de conductiidas Din y tren para anata de bactenas D>] Diueén ytincion para ‘nals Ge Secimento Gromer dee Figura A-12 Diagrama de andlsis de particulas de orina en el Sysmex UF 106i.288 Apéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales Sedimentos Sedimentos doteccién Sedimentos Bacteria, Figura A-13 Elementos de tincién para el Sysmex UF 1000, Formas de las ondas de las sefiales de UF-1000/ para células Forma de onda de la luz de lspersion anterégrada Eritrocito 4 Leucocito Bacteria Células epiteliales iQ 200" El iQ 200 Automated Urine Microscopy Analizer (Iris Diagnostics, Chastworth, Calif.) utiliza escaneres digitales y reconocimiento de autoparticulas para analizar y precla- Sificar de un modo automatico las particulas de orina en la muestra no centrifugada, sobre la base del tamano y de la forma. El instrumento también puede ser empleado para recuentos de células en Iiquidos corporales, si se agrega el médulo de sofiware de los liquidos corporales (Fig. -16) Puede ser utilizado de forma independiente o integrado con un analizador automatizado de quimica en orina para crear un sistema completo de andlisis de orina El analizador mezcla la muestra y aspira alrededor de 1 mL de orina a una celda de flujo planar, donde se toman 500 imagenes fotomicroscopicas por muestra. La luz estroboscopica atraviesa el colimador en un haz tinico para iluminar la muestra que attaviesa la celda de flujo. La muestra est rodeada de una lamina que funciona con el fin de orientar las particulas para su visualizacién micros- copica. La videocamara digital toma entonces 500 image- Forma de onda de la uz ‘luorescente lateral dispersion lateral Forma de onda de la luz de { 4 Figura A-14 Forma de onda de la seal UF1000/ para las células. nes, a medida que la muestra atraviesa la celda de flujo. Las imagenes digitales se envian al ordenador, donde tiene lugar el analisis real! (Fig, A-17). El sistema utiliza el software de reconocimiento de autoparticulas (Auto Particle Recognition, APR) (Fig A-18) que preclasifica las particulas de orina en las foto- sgrafias sobre la base del tamafo, la forma, la textura y el contraste en 12 categorias: eritrocitos, leucocitos, grupos de leucocitos, cilindros hialinos, cilindros no clasificados, células epiteliales escamosas, células epiteliales no esca- ‘mosas, bacterias, levaduras, cristales, maco y espermato- zoides (Fig, A-19). Se confirma la identificacion de parti- culas, se da un alerta y es controlada por el usuario antes de informarla. Los resultados son enviados a la pantalla de un operador o comparados con los parémetros de au- toliberacion definidos por el usuario. Si los resultados se encuentran dentro de los criterios definidos, son enviados directamente al sistema de informacion del laboratorio. Como las fotografias son archivadas en formato digital, los resultados pueden ser revisados y reclasificados con facili-Apéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales. 289 SSC s2 Ertrocto SLL BFSC 1 Detrto ‘SuFLLW RLM Figura A-15 Diagrama de dispersion que muestra los resultados al microscopio de Sysmex UF1000% Figura A-16 Analizador de microscopic iQ 200. (Imagen cortesla de tris Diagnostics) ‘Ordena Deseche ‘dor 0 digital de captura de flujo iQ Diagnostics) de realizar un examen ¢ el usuario subclasifique 27 2 indicar los tipos especificos ulas epiteliales, levaduras con suetpos grasos ovales. Pueden texto libre al informe, segin Figura A-18 Proceso de reconocimiento de autoparticulas. (Ima- gen cortesia de lis Diagnostics). RED NERVIOSA Figura A-19 Exhibicién de los resultados del andlisis de orina iQ 200, que muestra las categorias de particulas disponibles para el andlsis 0 el recuento. (Imagen cortesia de Irs Diagnostic). El sedMAX® (77Elektronika, distribuido en Europa y Asia por A. Menarini Diagnostics) realiza un andlisis de mi- ctoscopia automatizada con imagenes digitales. El instru- ‘mento utiliza tecnologia mas reciente y, al escribir este libro, atin no ha sido aprobado por la FDA para su uso en los Estados Unidos. El sedMAX requiere un minimo de 2 mL de orina que es centrifugada en una cubeta especial para pro- ducir una monocapa de sedimento urinario. El sedimento 3 analizado con un microscopio de campo brillante y una camara digital para capturar y categorizar 15 imagenes de particulas sobre la base del tamano y la forma, con el uso de un software de procesamiento de imagenes.’ Una ventaja de este instrumento consiste en la capacidad de zoom para visualizar imagenes; asimismo, su interpretacién de las ima- genes es similar a los extendidos microscapicos manuales. Sistemas de andlisis de orina automatizados La combinacién de analizadores automatizados de quimi- ca de la orina y analizadores automatizados de células en orina para crear sistemas de analisis de orina completa- ‘mente automatizados ha mejorado de un modo significa- tivo los tiempos de procesamiento del andlisis de orina. El tiempo de trabajo de los técnicos se ha reducido tambien en gran medida. Utilizando raquetas similares para las muestras y la movilizacion de un sistema de trasmisores, se transfieren con facilidad las muestras de un instrumento al siguiente, lo que permite la minima manipulacion de la muestra desde el muestreo a los resultados. Al realizar una interfaz con el sistema de informacion del laborsto- tio, las muestras codificadas por barra son identificadas de manera automatica y procesadas de acuerdo con las pruebas solicitadas. Los sistemas pueden actuar en forma independiente para pruebas fisicas y quimicas, analisis de microscopia y una combinacién de ambas, Puede enviars directamente un informe completo de anilisis de orina al sistema de informacion del laboratorio o imprimirlo, 1o que reduce el error administrativo,290 Apéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales El Clinitek Atlas® (Siemens Healthcare Diagnostics, Deerfield, IL), un analizador automatizado de quimica en orina, y el Sysmex UF-L000i (Sysmex Corporation, Mundelein, IL), un analizador automatizado de células uri- narias, han sido integrados para desarrollar el CLINITEK AUWi System? (Siemens), que realiza un andlisis de orina completamente automatizado (Fig, A-20). Se requiere un mfnimo de 5 mL de rina en el tubo automatico, Los tubos codificados por barras se colocan en la raqueta y se ubican enel sistema. La raqueta avanza hacia el analizador ATLAS, donde la muestra es identificada, mezclada, aspirada y eva- luada para componentes fisicos y quimicos. La muestra viaja luego a través del puente conector hasta el UF-1000i para el anzlisis microsc6pico. El instrumento refleja de ma- nera automatica las muestras que requieren un examen de sedimento, lo que reduce el tiempo asociado con el analisis microsc6pico manual. Los resultados son verificados au- tomaticamente e integrados en un informe completo del andlisis de orina para ser enviados al LIS 0 impresos. El Iricell Automated Urinalysis Systems® (Iris Diag- nostics) consiste en el analizador de quimica de orina iChem VELOCITY y el iQ 200 (Fig. 4-21). Se requiere un minimo de 4 mL de orina. Se colocan los tubos codifica- dos por barra en la raqueta de 10 posiciones y se mueven hasta el Chem VELOCITY, donde la muestra es mezclada y la orina es aspirada. Después de completar el andlisis fisico y quimico, la raqueta se mueve a través del puente conector hasta el iQ 200 para su evaluacién microscépica Las muestras pueden ser derivadas a microscopia urinaria sobre la base de las resultados de la quimica de orina. No se requiere una microscopia del 100% con iRICELL. Los resultados de un andlisis de orina completo se transmiten al sistema de informacién del laboratorio o se imprimen, Figura A-20 AUW, un sistema de andlisis de orina completamen- te automatizado que combina el analizador de quitmica Siemens Glintek Atlas con el analizador de particulas Sysmex UF-1000i. (imagen cortesia de Siemens Healthcare Diagnostics Inc), er Figura A-21 iRICELL3000, un sistema de andliss de ovina comple- tamente automatizado que combina el analizador de quimica en rine de iChem Velocity con el analizador del microscopio iQ 200. (imagen cortesia de Iris Diagnostics). WW Automatizacién del analisis de liquidos corporales Los recuentos de celulas de liquidos corporales y recuen- tos diferenciales tradicionalmente se realizan en forma ma- nual mediante el uso de un hemocitometro de Neubauer Son procedimientos laboriosos, que demandan tempo y estan sometidos a la variabilidad de los técnicos. La auto- ‘matizacion lleva el control de calidad y la precision a un método que previamente no era controlado. Sin embar- 0, los instrumentos automatizados no han eliminado por completo el uso del recuento manual con hemocitometro, Los liquidos corporales con recuentos bajos de células 0 células malignas ain requieren un recuento diferencial manual que wtlice un frotis de citocentrifugado tenido. El laboratorio debe definir los limites para el instrumento y establecer los limites inferiores del recuento celular para determinar cuando se debe realizar un procedimiento ma- nual? Por ejemplo, el iQ 200 es lineal hacia abajo hasta cero (0a 10 000 células/L). La linealidad puede éxtenderse durante la comparaci6n del método. Ademis, el laborato- rio debe seguir los procedimientos recomendados por los fabricantes para el tratamiento especial necesario para el liquido corporal especifico analizado.” Los analizadores de hematologta que se utilizan para realizar recuentos de células en Uquides corporales inclu- yen el ADVIA2120i° (Siemens), el Sysmex XE 5000® (Sys- mex) y el Beckman Coulter LH780® y UniCel DxH800* (Beckman Coulter, Inc.).. El ADVIA 21201 utiliza citome- tla de flujo, dispersion de la luz y absorbancia para contar eritrocitos y leucocitos, ademas de realizar un recuento di- ferencial de leucocitos, que incluye porcentajes y numero absoluto de células mononucleares y células polimorfonu- cleares en las muestras con mas de 20 leucocitos/jL. El recnento diferencial de leucocitos incluye el numero de neutrofilos, linfocitos, monocitas y eosindfilos. Una mues- ta de liquido celalorraquideo (LCR) es tratada previamen- te con reactivo de LCR para fijar y esferizar las células La muestra preparada se mantiene estable durante 4 mi- nutos a 4 horas cuando se la almacena a 18 °C a 30 °C. La muestra es aspirada en el instrumento, y las células se diferencian y enumeran mediante tres mediciones opticas. Las sefales son digitalizadas y utilizadas para construir el citograma del LCR. Con este sistema, se cuentan mas célu- las, Io que permite un aumento de la exactitud y la preci- sion, Los resultados automaticos de eritrocitos, leucocitos, polimorfonucleares, mononucleares y el recuento diferen- cial estan disponibles dentro del minuto de aplicacién de la muestra. Ademas, el ADVIA 2120i puede proveer una prueba diagnéstica rapida para madurez pulmonar fetal, al contar los cuerpos laminates en el liquido amniotico. Los ccuerpos se cuentan en el canal de las plaquetas con disper- sion de luz de laser alta y baja. El analizador esta aprobado para el recuento de células en liquidos pleurales, fluidos peritoneales y dializados peritoneales. El Sysmex XE-5000 es el analizador de hematologia de generacién més nueva que incluye un modo exclusive para liquidos corporales.* El modo para liquidos corpora~ les incluye un conteo de células extendido para aumentar la precision en las muestras con pequefias cantidades de células. Los liquidos corporales pueden ser analizados sin preparacidn de la muestra o tratamiento previo. En el modo para liquidos corporales, se utiliza un algoritmo nuevo deApéndice A | Automatizacién del andlisis de orina y los liquidos corporales 291 software para contar los eritrocitos mediante la impedan- cia del flujo de la vaina y los leucocitos, por medio de la dispersion lateral y la intensidad de Mluorescencia después de la tincién con colorante del DNA o el RNA nuclear. Las células morfonucleares y las mononucleares se cuentan en el canal diferencial (DIFF). Las células mesoteliales y los macrofagos se enumeran, pero no estan incluidos en el recuetito celular, Se recomienda analizar solo el liquido no maligno en el XE-5000. Ademias, los graficos diferen- ciales de dispersion deben ser inspeccionados visualmente para detectar materia particulada no celular, Cryptococcus e interferencia por células grandes (macrofagos y células ‘mesoteliales). Con los recuentos de leucocitos por debajo de 10 x 10%1L, no debe realizarse diferenciacion entre células polimorfonucleares y mononucleares.* E] iQ 200 que utiliza imagenes digitalizadas de célu- las de flujo puede emplearse para los liquidos corporales al agregar el médulo de software de liquidos corporales. El menti de liquidos corporales incluye el LCR, liquido sinovial, pleural, peritoneal, dializado peritoneal, lavado peritoneal, liquido pericardico y liquidos serosos en ge- neral. Se realizan dos diluciones en el liquido especifico segiin el tipo de Iiquido y su aspecto. Un tubo se diluye con un diluyente Iris (iQ) y el otto, con un reactivo Tris que lisa los eritrocitos. Los tubos codificados por barras especificos de la diluctén se cargan en los instrumentos para el recuento. Se obtiene un recuento total de células del tubo de diluyente del Iris (IQ), y el recuento de célu- las nucleadas del Iris es obtenido al lisar la dilucion del reactivo. La diferencia entre estos dos ntimeros es igual al recuento de eritrocitos. Como sucede en la microscopia de orina, los resultados y las imagenes celulares se envian a la pantalla de un operador para la revision 0 autoverificacisn y pueden ser remitidos directamente al sistema de infor- macién del laboratorio. Referencias 1. Laboratory Production Solutions, Iris Diagnostics, August 31, 2012. 2. Block, DR, and Lieske, JC: Automated Urinalysis in the Clinical Lab, Medical Laboratory Observer (MLO), 44(10), Oct 2012. 3. Clinical and Laboratory Standards Institute: Body fluid anal- ysis for cellular composition: approved guideline, CLSI doc- ument H-56A. CLSI, Wayne, PA, 2006. 4, deJonge R, Brouwer R, de Graaf MT, et al: Evaluation of the new body fluid mode on the Sysinex XE-5000 for counting leukocytes and erythrocytes in cerebrospinal fluid and other body fluids. Clin Chem Lab Med 48:605-675, 2010 Fuentes de informacién adicionales ARKRAY Inc., Kyoto, Japan: wawarkrayusa.com Iris Diagnostics, Chatsworth, CA: wwwirisdiagnostics.com Roche Diagnostics, Indianapolis, IN: www:roche.com/products ‘Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Deerfield, IL: www.usa.sie- ‘mens comv/diagnostics Sysmex America, Inc. Mundelein, IL: wwwsysmex.com/asa