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ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE PRODUCTOS NO ESTÉRILES: PRUEBAS PARA

MICROORGANISMOS ESPECÍFICOS

INTRODUCCIÓN
Las pruebas que se describen en lo sucesivo se permitir la determinación de la
ausencia de, o la aparición limitada de, microorganismos específicos que se pueden
detectar en las condiciones descritas.
Las pruebas están diseñadas principalmente para determinar si una sustancia o
preparación cumple con una especificación establecida para la calidad
microbiológica. Cuando se utiliza para tales fines, siga las instrucciones que se indican
a continuación, incluidos el número de muestras que se deben tomar, e interpretar los
resultados como se indica a continuación.
Procedimientos microbiológicos alternativos, incluyendo métodos automatizados, se
pueden utilizar, siempre que su equivalencia con el método de la Farmacopea se ha
demostrado.

PROCEDIMIENTOS GENERALES
La preparación de las muestras se llevó a cabo como se describe en el examen
microbiológico de productos no estériles: Recuento microbiano Pruebas  61  .
Si el producto a ser examinado tiene actividad antimicrobiana, esto es en la medida de
lo posible, eliminado o neutralizado como se describe en el examen microbiológico de
productos no estériles: Las pruebas microbianas de enumeración  61  .
Si se utilizan sustancias tensoactivas para preparación de muestras, la ausencia de
toxicidad para los microorganismos y su compatibilidad con los inactivadores utilizados
debe demostrarse y describirse en el examen microbiológico de productos no estériles:
Las pruebas de enumeración microbiana  61  .

PROPIEDADES PROMOTORES DEL CRECIMIENTO E INHIBIDORES DE LOS


MEDIOS Y ADECUACIÓN DE LA PRUEBA
La capacidad de la prueba para detectar microorganismos en presencia del producto a
ensayar se debe establecer. Idoneidad debe ser confirmada si se introduce un cambio
en el rendimiento de las pruebas o un cambio en el producto, que puede afectar el
resultado de la prueba.
Preparación de cepas de ensayo
Utilice suspensiones estables estandarizadas de cepas de prueba indicados a
continuación. Técnicas de mantenimiento de cultivo de lotes de siembra (sistemas de
lotes de siembra) se usan para que los microorganismos viables utilizados para la
inoculación no son más de cinco pasajes extraídos del master original de lotes de
siembra.
MICROORGANISMOS AEROBIOS
Crece cada una de las cepas bacterianas de prueba por separado en recipientes que
contengan soja-caseína Resumen caldo o en soja-caseína Resumen Agar a 30  a 35 
de 18 a 24 horas. Crecer la cepa de prueba para Candida albicans por separado
en agar de dextrosa de Sabouraud o en caldo de dextrosa Sabouraud a 20  a 25 
durante 2 a 3 días.
Staphylococcus aureus tales como ATCC 6538, NCIMB
9518, CIP 4,83, o NBRC 13276
Pseudomonas aeruginosa tales como ATCC 9027, NCIMB
8626, CIP 82.118, o NBRC
13275
Escherichia coli tales como ATCC 8739, NCIMB
8545, CIP 53.126, o NBRC 3972
Salmonella enterica ssp. enterica serotipo tales como ATCC 14028
typhimurium o, como alternativa,
Salmonella enterica ssp. enterica serotipo abony tales como NBRC 100797, NCTC
6017, o CIP 80.39
Candida albicans tales como ATCC 10231, NCPF
3179, IP 48.72, o NBRC 1594
Utilice buffer Cloruro de sodio-peptona Solution pH 7.0 o Phosphate Buffer Solution pH
7.2 para hacer suspensiones de prueba. Utilice las suspensiones dentro de 2 horas o
de 24 horas si se conserva entre 2  a 8  .
CLOSTRIDIOS
Utilice Clostridium sporogenes como ATCC 11437 (NBRC 14293, NCIMB 12343, CIP
100651) o ATCC 19404 (NCTC 532 o CIP 79.3). Crece la tensión de prueba clostridial
en condiciones anaeróbicas en Reinforced Medio para clostridios en 30  a 35  de 24 a
48 horas. Como una alternativa a la preparación y diluyendo luego hacia abajo una
suspensión fresca de células vegetativas de Cl. sporogenes, una suspensión de
esporas estable se utiliza para la inoculación de prueba. La suspensión de esporas
estable puede mantenerse a 2  a 8  por un período validado.
Control negativo
Para verificar las condiciones de prueba, un control negativo se realiza utilizando el
diluyente elegido en lugar de la preparación de ensayo. No debe haber ningún
crecimiento de microorganismos.
Promoción de Crecimiento y propiedades inhibidoras de los Medios de Comunicación
Pruebe cada lote de medio previamente elaborado, y cada lote de medio preparado ya
sea de medio deshidratado o de ingredientes. Verifique las propiedades más
convenientes de los medios de comunicación pertinentes descritos en la Tabla 1 .
Tabla 1. Crecimiento Promoción, inhibitoria y Propiedades indicativos de Medios
Prueba / Medium Propiedad Las cepas de ensayo
De prueba para las bacterias Gram-negativas bilis-tolerantes
Enterobacterias caldo Promotores del E. coli
de enriquecimiento de crecimiento
Mossel
P. aeruginosa
Inhibitorio S. aureus
Violeta Rojo Bilis Promotores del E. coli
Glucosa Agar crecimiento +
indicativo
P. aeruginosa
Prueba para Escherichia coli
MacConkey Caldo Promotores del E. coli
crecimiento
Inhibitorio S. aureus
MacConkey Agar Promotores del E. coli
crecimiento +
indicativo
Prueba de Salmonella
Rappaport Vassiliadis Promotores del Salmonella
Salmonella crecimiento enterica ssp. enterica serotipotyphimurium o
Enrichment Broth
Salmonella
enterica ssp. enterica serotipo abony
Inhibitorio S. aureus
Xilosa lisina Promotores del Salmonella
desoxicolato Agar crecimiento + enterica ssp. enterica serotipotyphimurium o
indicativo
Salmonella
enterica ssp. enterica serotipo abony
Indicativo E. coli
Prueba para Pseudomonas aeruginosa
Agar cetrimida Promotores del P. aeruginosa
crecimiento
Inhibitorio E. coli
Prueba para Staphylococcus aureus
Agar sal manitol Promotores del S. aureus
crecimiento +
indicativo
Prueba / Medium Propiedad Las cepas de ensayo
Inhibitorio E. coli
Prueba para clostridios
Medio reforzado para Promotores del Cl. sporogenes
clostridios crecimiento
Columbia Agar Promotores del Cl. sporogenes
crecimiento
Prueba para Candida albicans
Sabouraud Dextrosa Promotores del C. albicans
Caldo crecimiento
Sabouraud Dextrosa Promotores del C. albicans
Agar crecimiento +
indicativo
Prueba para la Promoción de Crecimiento-Propiedades, Liquid Media- Inocular una
porción del medio apropiado con un número pequeño (no más de 100 ufc) del
microorganismo apropiado. Se incuba a la temperatura especificada por no más que el
menor período de tiempo especificado en la prueba. Claramente visible el crecimiento
del microorganismo comparable a la obtenida previamente con un lote de medio
previamente probado y aprobado se produce.
Propiedades de la prueba para el crecimiento de la promoción, Solid
Media- Realizar Método de dispersión en la superficie (véase Métodos Plate-
Count bajoexamen microbiológico de productos no estériles: Las pruebas de
enumeración microbiana  61  ), inoculando cada placa con un número pequeño (no
más de 100 ufc) del microorganismo apropiado. Se incuba a la temperatura
especificada por no más que el menor período de tiempo especificado en la
prueba.Crecimiento del microorganismo comparable a la obtenida previamente con un
lote de medio previamente probado y aprobado se produce.
Prueba de las propiedades inhibitorias, líquido o sólido de prensa- inocular el medio
apropiado con al menos 100 ufc del microorganismo apropiado. Se incuba a la
temperatura especificada durante al menos el período más largo de tiempo
especificado en la prueba. No hay crecimiento del microorganismo de prueba se
produce.
Prueba de indicativo Propiedades- Realizar Método dispersión en la
superficie (ver Métodos Plate-Count bajo examen microbiológico de productos no
estériles: Las pruebas de enumeración microbiana  61  ), inoculando cada placa con
un número pequeño (no más de 100 ufc) del microorganismo apropiado. Incubar a la
temperatura especificada durante un período de tiempo dentro del intervalo
especificado en la prueba. Las colonias son comparables en apariencia y la indicación
de las reacciones a los obtenidos previamente con un lote de medio previamente
probado y aprobado.
Adecuación del método de ensayo
Para cada nuevo producto a ensayar realizar la preparación de muestras como se
describe en el apartado correspondiente de acuerdo con la prueba de productos. En el
momento de la mezcla, añadir cada cepa de ensayo en el medio de crecimiento
prescrita. Inocular las cepas de prueba de forma individual. Utilice un número de
microorganismos que equivale a no más de 100 ufc en la preparación de ensayo
inoculados.
Realizar la prueba como se describe en el apartado correspondiente de acuerdo con la
prueba de productos utilizando el período de incubación más corto prescrito.
Los microorganismos específicos deben ser detectados con las reacciones de
indicación como se describe en la prueba de productos .
Cualquier actividad antimicrobiana del producto requiere una modificación del
procedimiento de prueba (ver Neutralización / eliminación de la actividad
antimicrobiana bajo examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de
enumeración microbianos  61  ).
Para un producto dado, si la actividad antimicrobiana con respecto a un
microorganismo para los que se prescribe la prueba no puede ser neutralizado,
entonces es de suponer que el microorganismo inhibida no estará presente en el
producto.

PRUEBAS DE PRODUCTOS
Bile-tolerantes bacterias Gram-negativas
Preparación de la muestra y Pre-incubación- Preparar una muestra usando una dilución
de 1 en 10 de no menos de 1 g del producto a ser examinado, como se describe en
el examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de enumeración
microbianos  61  , pero utilizando soja-caseína Resumen Caldo como el diluyente
elegido, la mezcla, y se incuba a 20  a 25  durante un tiempo suficiente para resucitar
las bacterias, pero no suficiente para estimular la multiplicación de los organismos (por
lo general 2 horas pero no más de 5 horas).
Prueba de Ausencia- A menos que se prescriba lo contrario, utilizar el volumen
correspondiente a 1 g del producto, como se ha preparado en Preparación de la
muestra y Pre-incubación, para inocular caldo de enriquecimiento de Enterobacterias
Mossel . Incubar a 30  a 35  de 24 a 48 horas. Subcultivo en placas de Agar Violeta
Rojo Bilis glucosa . Incubar a 30  a 35  durante 18 a 24 horas.
El producto cumple con la prueba si no hay crecimiento de colonias.
Quantitative Test-
Selección y Subcultura- cantidades adecuadas Inocular de enterobacterias caldo de
enriquecimiento de Mossel con la preparación según se indica en la preparación de
muestras y de Pre-incubación y / o diluciones del mismo que contienen
respectivamente 0,1 g, 0,01 gy 0.001 g (o 0,1 ml, 0,01 ml, y 0,001 ml) del producto a
ser examinado. Incubar a 30  a 35  de 24 a 48 horas. Subcultura de cada una de las
culturas en un plato de Violeta Rojo Bilis Glucose Agar . Incubar a 30  a 35  durante 18
a 24 horas.
Interpretación- Crecimiento de colonias constituye un resultado positivo. Tenga en
cuenta la cantidad más pequeña del producto que da un resultado positivo y la cantidad
más grande que da un resultado negativo. Determinar a partir de la Tabla 2 el número
probable de bacterias.
Tabla 2. Interpretación de los resultados
Resultados para cada cantidad 
de producto Probable número 
0,1 g o  0,01 g o  0,001 g o  de bacterias 
0,1 ml 0,01 ml 0,001 ml por gramo o ml de producto
+ + + más de 10 3
+ + - menos de 10 3 y más de 10 2
+ - - menos de 10 2 y más de 10
- - - menos de 10
Escherichia coli
Preparación de la muestra y Pre-incubación- Preparar una muestra usando una dilución
de 1 en 10 de no menos de 1 g del producto a ser examinado, como se describe en
el examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de enumeración
microbianos  61  , y el uso de 10 ml o de la cantidad correspondiente a 1 g o 1 ml,
para inocular una cantidad adecuada (determinado como se describe en idoneidad del
método de prueba ) de soja-caseína Resumen caldo, mezcla, y se incuba a 30  a 35 
de 18 a 24 horas.
Selección y Subcultura- Agite el envase, la transferencia de 1 ml de soja-caseína
Resumen caldo a 100 ml de caldo de MacConkey, y se incuba a 42  a 44  de 24 a 48
horas. Subcultivo en una placa de agar MacConkey a 30  a 35  durante 18 a 72 horas.
Interpretación- Crecimiento de colonias indica la posible presencia de E. coli . Esto es
confirmado por las pruebas de identificación.
El producto cumple con la prueba si hay colonias están presentes o si las pruebas de
identificación son negativos.
Salmonela
Preparación de la muestra y Pre-incubación- Preparar el producto a ser examinado,
como se describe en el examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de
enumeración microbianos  61  , y utilizar la cantidad que corresponde a no menos de
10 g o 10 ml para inocular una cantidad adecuada (determinado como se describe
bajo idoneidad del método de prueba ) de soja-caseína Resumen caldo, mezcla, y se
incuba a 30  a 35  de 18 a 24 horas.
Selección y Subcultura- Transfer 0.1 mL de soja-caseína Resumen caldo a 10 ml
de Rappaport Vassiliadis Salmonella caldo de enriquecimiento, y se incuba a 30  a 35 
de 18 a 24 horas. Subcultivo en placas de agar xilosa lisina desoxicolato . Incubar a
30  a 35  durante 18 a 48 horas.
Interpretación- La posible presencia de Salmonella se indica por el crecimiento de bien
desarrollados, colonias de color rojo, con o sin centros negros. Esto es confirmado por
las pruebas de identificación.
El producto cumple con la prueba si las colonias de los tipos descritos no están
presentes o si las pruebas de identificación confirmatorias son negativos.
Pseudomonas aeruginosa
Preparación de la muestra y Pre-incubación- Preparar una muestra usando una dilución
de 1 en 10 de no menos de 1 g del producto a ser examinado, como se describe en
el examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de enumeración
microbianos  61  , y el uso de 10 ml o de la cantidad correspondiente a 1 g o 1 ml
para inocular una cantidad adecuada (determinado como se describe en idoneidad del
método de prueba ) de soja-caseína Resumen caldo, y mezclar.Al probar los parches
transdérmicos, filtrar el volumen de la muestra correspondiente a una parcela de la
preparación (ver parches transdérmicos bajo Preparación de la muestra en el análisis
microbiológico de productos no estériles: Pruebas de enumeración microbiana  61  )
a través de una membrana de filtro estéril, y el lugar en 100 ml de soja-caseína
Resumen caldo . Incubar a 30  a 35  durante 18 a 24 horas.
Selección y subcultivo- subcultivo en una placa de agar cetrimida, y se incuba a 30  a
35  durante 18 a 72 horas.
Interpretación- Crecimiento de colonias indica la posible presencia
de P. aeruginosa . Esto es confirmado por las pruebas de identificación.
El producto cumple con la prueba si las colonias no están presentes o si las pruebas de
identificación confirmatorias son negativos.
Staphylococcus aureus
Preparación de la muestra y Pre-incubación- Preparar una muestra usando una dilución
de 1 en 10 de no menos de 1 g del producto a ser examinado, como se describe en
el examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de enumeración
microbianos  61  , y el uso de 10 ml o de la cantidad correspondiente a 1 g o 1 ml
para inocular una cantidad adecuada (determinado como se describe en idoneidad del
método de prueba ) de soja-caseína Resumen caldo , y homogeneizar. Al probar los
parches transdérmicos, filtrar el volumen de la muestra correspondiente a una parcela
de la preparación (ver parches transdérmicosbajo Preparación de la muestra en
el análisis microbiológico de productos no estériles: Pruebas de enumeración
microbiana  61  ) a través de una membrana de filtro estéril, y el lugar en 100 ml
de soja-caseína Resumen caldo . Incubar a 30  a 35  durante 18 a 24 horas.
Selección y subcultivo- subcultivo en una placa de Agar Sal Manitol , y se incuba a 30 
a 35  durante 18 a 72 horas.
Interpretación- La posible presencia de S. aureus se indica por el crecimiento de
colonias de color amarillo o blanco rodeadas por una zona amarilla. Esto es confirmado
por las pruebas de identificación.
El producto cumple con la prueba si las colonias de los tipos descritos no están
presentes o si las pruebas de identificación confirmatorias son negativos.
Clostridios
Preparación de la muestra y el tratamiento térmico- Preparar el producto para ser
examinados como se describe en el examen microbiológico de productos no estériles:
Las pruebas de enumeración microbiana  61  . Tomar dos porciones iguales que
corresponde a no menos de 1 g o 1 ml del producto a ser examinado.Heat porción de
uno en 80  durante 10 minutos y enfriar rápidamente. No caliente la otra parte.
Selección y Subcultura- Transfer 10 ml de cada una de las porciones mezcladas a dos
contenedores (38 mm × 200 mm) u otros recipientes que contenían 100 ml de  medio
reforzado para clostridios . Incubar en condiciones anaerobias a 30  a 35  durante 48
horas. Después de la incubación, realizar subcultivos de cada tubo sobre agar
Columbia , y se incuba en condiciones anaerobias a 30  a 35  durante 48 horas.
Interpretación- La ocurrencia de crecimiento anaeróbico de varillas (con o sin
endosporas) que dan una reacción catalasa negativo indica la presencia declostridios.
Si no se detecta el crecimiento de microorganismos anaerobios en Columbia Agar o la
prueba de la catalasa es positivo, el producto cumple con la prueba.
Candida albicans
Preparación de la muestra y Pre-incubación- Preparar el producto a ser examinado,
como se describe en el examen microbiológico de productos no estériles: Pruebas de
enumeración microbianos  61  , y el uso de 10 ml o la cantidad que corresponde a no
menos de 1 g o 1 ml, para inocular 100 ml de Sabouraud Dextrosa caldo y
mezclar. Incubar a 30  a 35  durante 3 a 5 días.
Selección y Subcultura- Subcultura en una placa de Sabouraud Dextrosa Agar , y se
incuba a 30  a 35  de 24 a 48 horas.
Interpretación- El crecimiento de las colonias de blancos puede indicar la presencia
de C. albicans . Esto es confirmado por las pruebas de identificación.
El producto cumple con la prueba de si tales colonias no están presentes o si las
pruebas de identificación confirmatorias son negativos.

SOLUCIONES RECOMENDADAS Y MEDIOS DE CULTIVO


[ NOTA : esta sección se ofrece a título informativo. ]
Las siguientes soluciones y medios de cultivo se han encontrado satisfactorio para los
fines para los que se prescriben en la prueba de contaminación microbiana en la
Farmacopea. Otros medios pueden ser utilizados si tienen propiedades que promueven
el crecimiento e inhibidores similares.
Foto de la solución tampón de- transferencia de 34 g de dihidrógeno fosfato de potasio
a un matraz aforado de 1000 ml, se disuelven en 500 ml de agua purificada , ajuste con
hidróxido de sodio a un pH de 7,2 ± 0,2, añadir agua purificada hasta el volumen, y
mezclar. Vierta en recipientes, y esterilizar. Guarde a una temperatura de 2  a 8  .
Phosphate Buffer Solution pH 7.2- Preparar una mezcla de agua purificada y
la Reserva de Estabilización Solution (800:1 v / v), y esterilizar.
Buffer Cloruro de sodio-peptona Solution pH 7.0
Dihidrógeno fosfato de potasio 3,6 g
Hidrógeno disódico dihidrato de fosfato 7,2 g (equivalente 
a 0,067 M de fosfato)
Cloruro de Sodio 4,3 g
Peptona (carne o caseína) 1,0 g
Agua purificada 1000 ml
Esterilizar en autoclave usando un ciclo validado.
Soja-caseína Resumen Caldo
Pancreático Recopilación de caseína 17,0 g
Papaico Recopilación de soja 3,0 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Hidrógeno Fosfato dibásico 2,5 g
Monohidrato de glucosa 2,5 g
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH para que, después de la esterilización, sea de 7,3 ± 0,2 a 25   . Esterilizar
en autoclave usando un ciclo validado.
Soja-caseína Resumen Agar
Pancreático Recopilación de caseína 15,0 g
Papaico Recopilación de soja 5,0 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH para que, después de la esterilización, sea de 7,3 ± 0,2 a 25   . Esterilizar
en autoclave usando un ciclo validado.
Sabouraud Dextrosa Agar
Dextrosa 40,0 g
Mezcla de péptica Recopilación de Animal  10,0 g
Tissue y digerido pancreático de 
caseína (01:01)
Sabouraud Dextrosa Agar
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH para que, después de la esterilización, sea de 5,6 ± 0,2 a 25   . Esterilizar
en autoclave usando un ciclo validado.
Papa Dextrosa Agar
La infusión de las patatas 200 g
Dextrosa 20,0 g
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH para que, después de la esterilización, sea de 5,6 ± 0,2 a 25   . Esterilizar
en autoclave usando un ciclo validado.
Sabouraud Dextrosa Caldo
Dextrosa 20,0 g
Mezcla de péptica Recopilación de Animal  10,0 g
Tissue y digerido pancreático de 
caseína (01:01)
Agua purificada 1000 ml
Ajuste el p . Esterilizar en autoclave usando un ciclo validado.
Enterobacterias caldo de enriquecimiento de Mossel
Pancreático Recopilación de gelatina 10,0 g
Monohidrato de glucosa 5,0 g
La bilis de buey deshidratada 20,0 g
Dihidrógeno fosfato de potasio 2,0 g
Hidrógeno disódico dihidrato de fosfato 8,0 g
Verde Brillante 15 mg
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH de manera que después del calentamiento es 7,2 ± 0,2 a 25  . Calentar a
100  durante 30 minutos, y enfriar inmediatamente.
Violeta Rojo Bilis Glucosa Agar
Extracto de levadura 3,0 g
Pancreático Recopilación de gelatina 7,0 g
Las sales biliares 1,5 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Violeta Rojo Bilis Glucosa Agar
Monohidrato de glucosa 10,0 g
Agar 15,0 g
Rojo Neutro 30 mg
Cristal Violeta 2 mg
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH de manera que después del calentamiento es 7,4 ± 0,2 a 25  . Calentar
hasta que hierva; no calentar en autoclave.
MacConkey Caldo
Pancreático Recopilación de gelatina 20,0 g
Lactosa monohidrato 10,0 g
La bilis de buey deshidratada 5,0 g
Bromocresol púrpura 10 mg
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH para que, después de la esterilización, sea de 7,3 ± 0,2 a 25   . Esterilizar
en autoclave usando un ciclo validado.
MacConkey Agar
Pancreático Recopilación de gelatina 17,0 g
Peptonas (carne y caseína) 3,0 g
Lactosa monohidrato 10,0 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Las sales biliares 1,5 g
Agar 13,5 g
Rojo Neutro 30,0 mg
Cristal Violeta 1 mg
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH para que, después de la esterilización, sea de 7,1 ± 0,2 a 25   . Hervir
durante 1 minuto con agitación constante, y luego esterilizar en un autoclave usando un
ciclo validado.
Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth
Peptona de soja 4,5 g
Cloruro de magnesio hexahidrato 29,0 g
Cloruro de Sodio 8,0 g
Fosfato dipotásico 0,4 g
Dihidrógeno fosfato de potasio 0,6 g
Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth
Malaquita Verde 0,036 g
Agua purificada 1000 ml
Disolver, calentando ligeramente. Esterilizar en autoclave usando un ciclo validado, a
una temperatura no superior a 115  . El pH debe ser 5,2 ± 0,2 a 25  después del
calentamiento y esterilización en autoclave.
Xilosa lisina desoxicolato Agar
Xilosa 3,5 g
L -lisina 5,0 g
Lactosa monohidrato 7,5 g
La sacarosa 7,5 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Extracto de levadura 3,0 g
Rojo de fenol 80 mg
Agar 13,5 g
Desoxicolato de sodio 2,5 g
Tiosulfato de sodio 6,8 g
Citrato de amonio férrico 0,8 g
Agua purificada 1000 ml
Ajustar el pH de manera que después del calentamiento es 7,4 ± 0,2 a 25   . Caliente
hasta hervir, enfriar a 50  , y verter en placas de Petri. No caliente en un autoclave.
Agar cetrimida
Pancreático Recopilación de gelatina 20,0 g
Cloruro de Magnesio 1,4 g
Sulfato dipotásico 10,0 g
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6 g
Agua purificada 1000 ml
Glicerol 10,0 ml
Calentar hasta ebullición durante 1 minuto con agitación. Ajustar el pH para que,
después de la esterilización, sea de 7,2 ± 0,2 a 25  . Esterilizar en autoclave usando un
ciclo validado.
Agar sal manitol
Pancreático Recopilación de caseína 5,0 g
Péptica Recopilación de tejido animal 5,0 g
Agar sal manitol
Extracto de carne de vaca 1,0 g
D -manitol 10,0 g
Cloruro de Sodio 75,0 g
Agar 15,0 g
Rojo de fenol 0,025 g
Agua purificada 1000 ml
Calentar hasta ebullición durante 1 minuto con agitación. Ajustar el pH para que,
después de la esterilización, sea de 7,4 ± 0,2 a 25  . Esterilizar en autoclave usando un
ciclo validado.
Medio reforzado para clostridios
Extracto de carne de vaca 10,0 g
Peptona 10,0 g
Extracto de levadura 3,0 g
Almidón soluble 1,0 g
Monohidrato de glucosa 5,0 g
Clorhidrato de cisteína 0,5 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Acetato de sodio 3,0 g
Agar 0,5 g
Agua purificada 1000 ml
Hidrato el agar, y se disuelve calentando a ebullición con agitación continua. Si es
necesario, ajustar el pH de modo que tras la esterilización sea alrededor de 6,8 ± 0,2 a
25  . Esterilizar en autoclave usando un ciclo validado.
Columbia Agar
Pancreático Recopilación de caseína 10,0 g
Carne péptica Resumen 5,0 g
Corazón de páncreas Resumen 3,0 g
Extracto de levadura 5,0 g
Almidón de maíz 1,0 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Agar, de acuerdo con el poder gelificante 10,0 a 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Hidrato el agar, y se disuelve calentando a ebullición con agitación continua. Si es
necesario, ajustar el pH de modo que tras la esterilización sea de 7,3 ± 0,2 a 25
. Esterilizar en autoclave usando un ciclo validado. Dejar enfriar a 45  a 50  ; añadir, en
caso necesario, sulfato de gentamicina correspondiente a 20 mg de base de
gentamicina, y se vierte en placas de Petri.