CENTRO DE GESTIÓN INDUSTRIAL – SENA

ASEGURAR LA CALIDAD DE LOS ENSAYOS DESARROLLADOS EN EL LABORATORIO

TALLER DE QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL
Instructor: David Leonardo Sotelo

CROMATOGRAFIA LÍQUIDA HPLC

1. Defina cromatografía en general.

2. Cuáles son los métodos cromatográficos, defina cada uno de ellos.
3. Consulte la clasificación de los métodos cromatograficos en columna, para cada uno de
ellos diga: método especifico, Fase estacionaria, tipo de equilibrio.
4. Defina elución y eluyente.
5. Que es un cromatograma para que se usa en cromatografía, dibuje uno y explique
cómo interpretarlo.
6. Que métodos existen para mejorar el rendimiento de las columnas de cromatografía,
como mejoro la velocidad de separación de las bandas y el ensanchamiento de estas?
Donde se presenta este fenómeno.
7. Que es la velocidad de migración de los solutos? A que hace referencia las constantes
de distribución?
8. Defina: Tiempo muerto, Tiempo de retención.
9. Defina velocidad de flujo volumétrico y velocidad lineal, como las relaciono en
cromatografía.
10. Que es y cómo se calcula el factor de retención.
11. Que es y cómo se calcula el factor de selectividad.
12. Describa la relación entre el ensanchamiento de banda y la eficiencia de una columna.
13. Como se determina de manera cuantitativa la eficiencia de la columna.
14. Como se determina el número de platos teóricos?
15. Que variables afectan la eficiencia de la columna? Explique como la afecta y en que
unidades se expresan esas variables.
16. Explique la teoría del ensanchamiento de banda.
17. Que es y cómo se determina la resolución de una columna.
18. Defina cromatografía líquida
19. Como se clasifica los tipos de cromatografía líquida de alta resolución según el
mecanismo de separación o el tipo de fase estacionaria.
20. Consulte el diagrama de bloques de los componentes de un equipo HPLC, identifique
cada una de sus partes.
21. Consulte las aplicaciones de la HPLC según el peso molecular y la polaridad del
analito.
22. Como deben ser los recipientes y el sistema de tratamiento de los disolventes usados
en HPLC.
23. Como es el sistema de bombeo, que tipos de bombas existen?
24. Que detectores existen en HPLC, que aplicaciones tiene cada uno de ellos.
25. Para los siguientes tipos de cromatografía HPLC: Reparto(Fase Normal, Fase
Reversa), Adsorción, Intercambio iónico, Exclusión Molecular, Afinidad y quiral.
Realice:
a. Definición
b. Qué tipo de empaquetamiento tienen las columnas.
c. Que fase móvil y estacionario se usa.
d. Aplicaciones de este tipo de cromatografía.