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La intención de este artículo es ayudar a los patólogos sin experiencia en el examen de las secciones del sistema nervioso ce ntral (SNC) para
reconocer los tipos de células normales y anormales, así como algunos artefactos comunes. neuronas oscuras son el artefacto histológico más
común, pero, con la experiencia, pueden ser fácilmente distinguido de neuronas degenerativas (eosinófilos). Neuron manchas degeneración pueden
ser útiles en la reducción del umbral para la detección de la degeneración de neuronas, así como para la degeneración revelador dentro de las
poblaciones de neuronas que son demasiado pequeños para mostrar la alteración citoplasmática eosinofílica asociada dentro de las secciones
teñidas con H & E. Degeneración de neuronas también puede ser identificado por la presencia de REAC -ciones macrogliales y microgliales
asociados. El conocimiento de la distribución de los procesos de astrocitos citoplásmica es útil en la determinación de que ciertos patrones de
vacuolización neuropil relacionado con el tratamiento (así como algunos artefactos) representan hinchazón de estos procesos. Por otro lado, las
vacuolas con diferentes patrones de distribución pueden representar alteraciones de la vaina de mielina. Debido a que los cerebros son típicamente
submuestreadas para la evaluación microscópica, muchos patólogos no están familiarizados con los órganos circumventricuar (CVOs) que
representan las estructuras cerebrales normales, pero a menudo se confunden las lesiones. Por lo tanto, los seis voluntarios civiles que se
encuentran en el cerebro también se ilustran en este artículo. Debido a que los cerebros son típicamente submuestreadas para la evaluación
microscópica, muchos patólogos no están familiarizados con los órganos circumventricuar (CVOs) que representan las estructuras cerebrales
normales, pero a menudo se confunden las lesiones. Por lo tanto, los seis voluntarios civiles que se encuentran en el cerebro también se ilustran en
este artículo. Debido a que los cerebros son típicamente submuestreadas para la evaluación microscópica, muchos patólogos no están
familiarizados con los órganos circumventricuar (CVOs) que representan las estructuras cerebrales normales, pero a menudo se confunden las
lesiones. Por lo tanto, los seis voluntarios civiles que se encuentran en el cerebro también se ilustran en este artículo.
palabras clave: astrocitos; circumventricular órganos; microglia; neurona; neurona oscuro; manchas de la degeneración de neuronas;
oligodendrocitos.
(un marcador para astrocitos); gsiB4, Griffonia simplicifolia-IB4 (una mancha
para microglia); H & E, hematoxilina y eosina; Iba1, ionizada adaptador de
molécula de unión a calcio-1 (un marcador para las células micro-glial);
yoINTRODUCCIÓN MAG, glicoproteína asociada a la mielina; MAP2, microtúbulos proteína
Associ-nados 2; MBP, proteína básica de mielina; NeuN, una inmunotinción
Este artículo representa un mini-atlas que muestra las para '' Los núcleos neuronales ''; RER, retículo endoplasmático rugoso.
características de los morfológica normal y alterada de
neuronas, macroglia, y microglia dentro del SNC, así como
patrones clásicos de la degeneración celular y artefacto. Las
imágenes de los órganos circunventriculares también están
incluidos, ya que este autor ha encontrado algunas de estas
estructuras normales para ser malinterpretado como lesiones.
El sistema nervioso central se compone de cientos de diversas
regiones neuroanatómicas (muchos denomina '' núcleos '') y está
frecuentemente bajo-muestreado microscópicamente. Es
importante para los patólogos para apreciar esta diversidad, para
familiarizarse con puntos de referencia neuroanatómicas
rudimentarios, y para tener una apreciación de las sensibilidades
diferenciales de estas regiones Varying cerebrales para excito-
toxicidad, así como a insulto físico y / o químico. Algunos de los
conocimientos de la neuroquímica, así como de la aferentes y
eferentes conexiones de los núcleos cerebrales individuales, es
útil. Por lo menos, las lesiones que son detectados deben ser
identificados como a la localización neuroanatómica spe-CIFIC,
y las regiones que reciben aferencias de la región afectada (o
salientes a ella) también deben ser examinados
microscópicamente. Para interpretar las alteraciones citológicas,
FRÁFICOSe seleccionaron 1.-Los paneles de esta figura para mostrar que las poblaciones neuronales en el cerebro son heterogéneos. En 1a
(formación reticular), mezclas de mediano a neuronas de gran tamaño con prominente sustancia de Nissl están presentes. En contraste, el
cerebelo (1b) y el bulbo olfatorio (1c) se componen de una única capa de neuronas de gran tamaño de proyección (neuronas de Purkinje del
cerebelo y células mitrales [flechas] para el bulbo olfatorio) y un gran número de pequeñas dimensiones interneuronas que son ampliamente
clasificados como '' células granulares ''. por el contrario, el núcleo coclear (1d) contiene principalmente mediano a neuronas de gran tamaño
junto con un '' tope '' de las células granulares. Algunas regiones del cerebro tales como la amígdala (1e) se componen de una población
relativamente monomórfica de las neuronas de tamaño medio, mientras que el cuerpo estriado (caudado-putamen), se muestra en la 1f, está
compuesto principalmente de las neuronas medianas junto con las interneuronas colinérgicas de gran tamaño dispersos (flecha). (Todas las
cifras son de secciones teñidas con H y E aumentos final:. 1a, 1c, y 1d¼277x; 1b¼554x; 1e¼138x. )
neuronales (Figuras 2D y 2E), o alteración vacuolar puede
adyacente a las neuronas en degeneración puede ser finamente
verse en el citoplasma
vacuolados como resultado de la hinchazón de los procesos
de las neuronas (Figura 2f). Además, las neuronas en
degeneración típicamente se encuentran en diferentes etapas
de la degeneración (por ejemplo, algunos núcleos de aspecto
normal que tienen pero eosinofílica
Vol. 39, No. 1, 2011 Histología del sistema nervioso central 25
FRÁFICO2.-estos paneles contraste artefacto de neuronas con degeneración de las neuronas. 2a muestra el patrón de monomórfica clásico d e neuronas
oscuras dentro de la capa piramidal del hipocampo. 2b neuronas shows oscuros bilateralmente dentro de dos grandes núcleos del cerebro medio en un
cerebro de rata (flecha blanca¼oculomotores núcleo; flecha negra¼núcleo rojo). 2c es una sección violeta manchado de cresilo del hipocampo muestran
neuronas oscuras en tres capas adyacentes de neuronas las cuchillas superior e inferior de la circunvolución dentada (lado derecho de esta micrografía
izquierda y, respectivamente), más la CA intervenir 4capa neurona piramidal, lo que sugiere que la presión ejercida sobre la superficie del cerebro puede
haber causado este cambio en las tres capas. shows 2d el clásico aspecto de eosinofílica (degeneración), las neuronas de Purk inje con núcleos
condensados y brillante citoplasma eosinófilo. Además, no hay vacío-lación dentro de la capa molecular que recubre sugiriendo concurrente inflamación
/ degeneración de las dendritas de las neuronas de Purkinje. La sección en 2e también se caracteriza por vacuolizació n neuropilo. Entre las dos flechas
son cuatro neuronas en degeneración. Los dos neuronas centrales tienen prominente citoplasma eosino-fílico, mientras que los otros dos se caracterizan
principalmente por picnosis nuclear. Es este aspecto heterogéneo que tipifica hueso FIDE degeneración neuronal. 2f se caracteriza de manera similar por
un patrón heterogéneo, incluyendo las neuronas eosinofílicas encogidos, ya sea con pyknotic o núcleos cariorrécticos (puntas de flecha), neurona
hinchazón y vacuolización (flecha larga), y una célula microglial de apariencia activa (flecha corta). (Todas las cifras distintas a 2c son de secciones
teñidas con H y E aumentos finales:. 2a y 2c¼277x; 2b¼55x; 1b¼554x; 2c¼138x; 2e y 2f¼554x. )
26 GARMAN TOXICOLOGIC
PAGATHOLOGY
En algunos modelos de lesión celular excitatorio, el punto de
citoplasma, mientras que otros tienen núcleos picnóticos o tiempo óptimo de muestreo para la detección de cuerpo celular
fragmentada) (Figuras 2d-2f). A menos que hiperaguda en la Degen-ración a menudo será relativamente aguda (dentro de unos
naturaleza, una respuesta secundaria micro-glial es por lo pocos días de dosificación en el caso de neurotóxicos
general también presente (Figura 2f). excitatorios), aunque las neuronas de mayor tamaño, tales como
Las tinciones especiales para degenerar neuronas se dividen en las neuronas de células piramidales del hipocampo
dos categorías básicas: manchas degeneración de plata tales como
el amino técnica con plata cúprica (de Olmos, Beltramino, y de
Olmos de Lorenzo 1994) y las manchas fluoro-Jade (B y C)
(Schmued y Hopkins 2000 ; Schmued et al 2005).. Estas manchas
son extremadamente útiles tanto para detectar y enumerar las
neuronas Dege-nerating y son muy recomendables para agudos
procesos degenerativos, en particular de las secciones están a
partir de cerebros de perfusión-fija (figuras 3a-3f). (El uso de
estas manchas en secciones de cerebros nonperfused puede ser
problemático ya que las células rojas de la sangre se resaltarán
con ambas técnicas. ) Las manchas de degeneración no sólo
ayudar al patólogo en la detección fácilmente mediano a neuronas
en degeneración de gran tamaño a aumentos de potencia más
bajos pero también revelan degeneración dentro de interneuronas
de pequeño tamaño que tienen cantidades insuficientes de
citoplasma para demostrar la alteración citoplasmática
eosinofílica normalmente presente dentro de H & E- secciones
teñidas. Estas manchas también son útiles para distinguir las
neuronas oscuras degenere neuronas dentro de los procesos
degenerativos hiperaguda en el que la alteración citoplasmática
eosinofílica no ha tenido tiempo para desarrollar (Figuras 3e y
3f).
Las principales ventajas de las manchas fluoro-Jade incluyen
su facilidad de realización y que se pueden utilizar para teñir
secciones de tejidos embebidos en parafina. Las manchas
degenera-ción de plata, por el contrario, son más difíciles de
realizar y se limitan a las secciones de los tejidos no
transformados a parafina (el material típicamente cryosectioned).
(En algunos estudios de evaluación de la seguridad, esto podría
significar que los dos conjuntos de cerebros serían uno requerido
para la inclusión en parafina y el otro para cryosec-namiento.)
Por otra parte, es probable que las manchas degeneración plata se
emplean sólo para el fase aguda de un estudio y que los tejidos
embebidos en parafina sería utilizado para las evaluaciones en
puntos de tiempo posteriores. Varias ventajas de las manchas de
la degeneración de plata son que las secciones se pueden ver con
brillante campo micro-scopy, las secciones son más fácilmente
Archivo, y procesos celulares degenerativos se reconocen más
fácilmente. Como visual Compari-hijo de diferencias en la
tinción de los procesos neuronales degenerativas con estas dos
técnicas, las Figuras 3c y 3d representan dos lados del cerebro-el
lado izquierdo misma rata procesado para parafina (y se tiñeron
con fluoro-Jade B) y el derecho cryosectioned lado (y teñidas con
plata cúprica amino). Es importante señalar que algunos grados
de dendríticas y los axones degeneración terminal también serán
revelados con las manchas fluoro-Jade a pesar de que no están
bien ilustradas en las imágenes de baja potencia relativamente
que constituyen la Figura 3. La conclusión es que no hay una sola
'' mejor mancha '' para la detección de células en degeneración, y
la mancha seleccionada (así como el mejor punto de tiempo para
la detección de un proceso neurodegenerativo) dependerán de la
dinámica del artículo de prueba y / o el protocolo experimental.
elevaciones que implican en el calcio intracelular) a otros
pueden mostrar cambios degenerativos durante al menos dos astrocitos en distancias relativamente largas (Agulhon et al.
semanas (datos no publicados). En la experiencia de este autor, 2008). Las importantes funciones de los astrocitos en apoyo a la
también se puede detectar una lesión axonal (tanto con el fluoro- función de la neurona es subrayada por el gran número de estas
Jade y las manchas de la degeneración de plata) durante un células presentes en el
período de tiempo más largo después de la lesión. Por ejemplo,
los axones dañados se resaltarán con la tinción de plata amino
cúprico durante al menos dos semanas siguientes inury cerebral
traumática (Garman, datos no publicados). Además, este autor ha
encontrado que tanto las manchas degeneración de plata y las
manchas fluoro-Jade resaltan los tractos ópticos de ratas que
tienen '' unilateral atrofia del nervio óptico '' (una condición
degenerativa de los nervios ópticos y tractos ópticos que
generalmente se considera a ser de naturaleza crónica; Shibuya,
Tajima, y Yamate 1993).
Además de las manchas degeneración acabamos de discutir,
una serie de manchas de inmunohistoquímica para las proteínas
son importantes en la detección y diferenciación de una variedad
de enfermedades neurodegenerativas (por ejemplo, beta amiloide
en la enfermedad de Alzheimer, la alfa sinucleína en la
enfermedad de Parkinson, la proteína tau en una serie de las
enfermedades neurodegenerativas, y las proteínas priónicas en las
encefalopatías spongi-forma). La acumulación de proteínas
intraneuronales en una variedad de enfermedades
neurodegenerativas crónicas puede ser el resultado de aumento de
la fosforilación o la proteolisis, debido a la afluencia de calcio en
las células estresadas. Las proteínas que se des-ignated por la
célula para la destrucción se conjugan con una proteína de estrés
llamada ubiquitina, por el cual una tinción inmunohistoquímica
también está disponible. detalle mayor en el uso de estas
tinciones especiales está más allá del alcance de esta discusión.
UNASTROCYTES
FRÁFICO3.-El uso de colorantes especiales para mejorar la detección de las neuronas en degeneración. 3a es de una sección teñida con H y E que muestra
eosinofílicas neuronas (degeneración) dentro de la capa piramidal del hipocampo de una rata. Las flechas apuntan a dos de estas neuronas en
degeneración, pero aproximadamente nueve pueden ser visualizados en este campo. 3b es una sección adyacente teñido con fluoro -Jade B. Muchas
neuronas más degenerativas son evidentes, y los procesos neuronales dentro del estrato radiado también están manchadas. 3c y 3d son micrografías de la
corteza retroesplenial de una rata tratada con MK-801. La mitad izquierda del cerebro se procesó a parafina y las secciones se tiñeron con fluoro-Jade B
(3c), mientras que el lado derecho del cerebro se crioseccionó y se tiñó con plata amino cúprico (3d). En 3c, una banda de neuronas manchados de
amarillo (muertos) está presente entre las flechas. En esta figura, principalmente los cuerpos de las células muertas se reve lan por el fluoro-Jade, aunque
los procesos de células teñidas pueden ser vistos a ampliaciones superiores. La tinción de los procesos neuronales degenerati vas es más fácil detectar a
ampliaciones de baja potencia con el amino tinción de plata cúprico (por ejemplo, los terminales dendríticas en la capa 1 a la izquierda y la que apunta la
punta de flecha a la degeneración de los axones dentro de la materia blanca subyacente). 3e es una micrografía de baja potencia del hipocampo de un
ratón que fue necrop sied-3 horas después de la aparición del estado epiléptico. (Obsérvese que la hemorragia presente en la corteza parietal en la parte
superior derecha fue el resultado de una lesión de conmoción leve.) Muchas neuronas oscuras son evidente que, en Aumento a ma yor potencia, eran
difíciles de diferenciar de artefacto neurona oscuro. Sin embargo, un fluoro-Jade B mancha (3f) justificada la naturaleza degenerativa de estas neuronas
oscuras. (Los puntos de punta de flecha para neuronas granulares degenerativos en el giro dentado; las flechas apuntan a la degeneración de las neuronas
piramidales en el CA1 y CA3sectores). Observe que la señal fluorescente presente a lo largo de la interfaz entre el hipocampo y el tálamo subyacente
representa la autofluorescencia de las células rojas de la sangre dentro de la zona de congestión y hemorragia que puede ser reconocida en esta región en
3e. (Aumentos final: 3a y 3b¼277x; 3c¼70x; 3d¼138x; 3e¼55x; 3f¼ 69x).
28 GARMAN TOXICOLOGIC
PAGATHOLOGY
binucleadas. Tales astrocitos reactivos se refieren a menudo como
'' astrocitos gemistocíticos '' o '' gemistocytes '' (que significa
cerebro. Los astrocitos son el tipo de célula glial
predominante y comprenden aproximadamente la mitad del literalmente '' células rellenas '') (Figura 4C). La inmunotinción
más frecuentemente realizado para demostrar astrocitos detecta la
volumen del cerebro mam-maliano adulto (Agulhon et al.
2008). En la mayoría de las áreas del cerebro (y dependiendo proteína del citoesqueleto proteína ácida fibrilar glial (GFAP).
de la especie), hay una aproximadamente de 1 a 1 entre el Grados de tinción GFAP variarán dependiendo de la especie, la
número de astrocitos y el número de neuronas, aunque la región neuroanatómica, el método de fijación, y el anticuerpo y
relación es más alta en algunas regiones del cerebro y también procedimiento de tinción utilizados. secciones de cerebro normal
más alta se encuentra en los cerebros de aquellas especies que en GFAP-manchada
poseen mayores capacidades cognitivas. Para una descripción
más completa de la biología celular de los astrocitos, se remite
al lector a un artículo en este número (Sidoryk-Wegrzynowicz
et al. 2011), así como a un estudio reciente realizado por
Sofroniew y Vinters (2010).
Para cumplir con sus diversas funciones vitales, los astrocitos
tienen extensiones cytoplas-MIC que toque en las superficies de
todas las principales regiones de la anatomía de la neurona (es
decir, los cuerpos celulares, axones, dendritas y sinapsis) y
también se extienden a la superficie pial del cerebro para formar
los limitans glia (gliales membrana limitante). La glía límite-
American National Standard sella la superficie del cerebro y
también se sumerge en el tejido cerebral a lo largo de la
perivascular (Virchow-Robin) espacios. pie Astro-cyte procesa
también los capilares cerebrales de sonido envolvente y, durante
el desarrollo, inducir a las células endoteliales para formar
uniones estrechas.
El término '' astrocyte '' significa '' de células estrella '', en
referencia a la múltiple dispuestos radialmente procesos
citoplásmicos que se pueden apreciar solamente con tinciones
especiales. Sin embargo, mientras que los astrocitos tienen
extensiones a largo citoplasmáticos que llegan desde las neuronas
a la superficie pial y / o capilares, estos procesos no son vistos
dentro de las secciones teñidas con H & E. De hecho, no
reactivos astro-citos se caracterizan dentro de secciones teñidas
con H y E por '' núcleos desnudos '' y poco citoplasma observable
(Figura 4a). Los astrocitos se clasifican a menudo en términos
generales en tipos fibrosos y protoplásmicas, con el primero de
ser encontrado dentro de las regiones de la sustancia blanca y la
última que residen dentro de la materia gris. Esto es una
simplificación, sin embargo, con las nuevas pruebas que indican
que las poblaciones de astrocitos son heterogéneos de una región
del cerebro a otra (Yeh et al 2009;. Hewett 2009).
En las regiones de la materia gris del sistema nervioso
central, los núcleos celulares astrocíticas se encuentran a
menudo a estar en estrecha proximidad a las neuronas (Figura
4a), pero se pueden encontrar en cualquier lugar dentro del
neuropilo. núcleos de astrocitos típicamente han pálido,
finamente patrones de cromatina granular y nucléolos
relativamente pequeñas o indistintas. Una de las muchas
funciones del astrocito es eliminar y amoníaco Detoxify; y en
estados de hiperamonemia, 'pueden verse' de tipo Alzheimer
astrocitos II '' con los núcleos hinchado '', de agua clara '' en
las secciones de inmersión-fijo (pero no de perfusión-fijo)
cerebros (Norenberg et al. 2007) (Figura 4b).
En astrocitosis reactiva, el citoplasma de astrocitos se hace
más distinta. astrocitos reactivos también tienen más grandes (es
decir, más activo de aspecto) núcleos que son típicamente
excéntrica en posición, y estas células son ocasionalmente
Los oligodendrocitos son responsables de la formación y el
mantenimiento de las vainas de mielina del sistema nervioso
tejido, los astrocitos fibrosos de la materia blanca
central. Aunque las células de Schwann sirven a este papel en el
normalmente manchan más prominente que hacen los
sistema nervioso periférico, se encuentran los oligodendrocitos
astrocitos protoplasmáticos. A Pau-ciudad de GFAP tinción
para extender hacia fuera desde el cerebro para una cierta
en algunas regiones neuroanatómicas (espe-cialmente en
distancia en los segmentos proximales de los nervios craneales
fijado en formol vs. tejido congelado) sugiere que algunos (así como a lo largo de todo el nervio óptico). Dentro de estos
astrocitos pueden tener concentraciones menores o diferentes
craneal
epítopos de GFAP y / o que los grados de expresión de GFAP
se han alterado por la proceso de fijación. Sin embargo, las
manchas GFAP son muy útiles para la identificación de los
astrocitos reactivos. En las secciones teñidas con GFAP,
astrocitos reactivos se identifican por sus procesos
citoesqueleto engrosadas (Figura 4D). '' Gliosis '' se refiere a
una proliferación de astrocitos dentro de las regiones dañadas
del SNC. Sin embargo, un diagnóstico de gliosis debe
utilizarse con cau-ción si se encuentran aumento del número
de astrocitos dentro H & secciones E-manchado en ausencia
de cualquier proceso de histo-patológico subyacente tal como
la pérdida de neuronas, vacuolización neuropilo, y así
sucesivamente. Si astrocitos reactivos tales como
gemistocytes están presentes o hay tinción prominente con
GFAP, el uso del término '' gliosis '' es apropiado. Sin
embargo, los primeros celulares gliales neo-plasmas pueden
ser mal diagnosticados como gliosis. El término ''
mielinización gliosis '' se utiliza para describir la proliferación
normal de las células gliales (principalmente
oligodendrocitos) dentro del cerebro en desarrollo justo antes
de la mielinización.
Los patólogos que examinan secciones del SNC a partir de
muestras de inmersión-fijo son muy conscientes de la típica
'contracción o de fijación artefactos' '' que con más frecuencia se
manifiestan como perivascular '' retracción 'espacios' y la
formación de hendidura o vacuolización dentro de la zona de
células de Purkinje o a lo largo de las palas de el giro dentado del
hipocampo. Estas son las regiones que también sucede que tiene
procesos celulares astrocıticos abundantes. Además, el examen
cuidadoso de estos artefactos por lo general revela que estos
espacios no son en realidad '' hendiduras '', sino que representan
agregados de vacuolas (Garman en prensa). Este autor ha visto
por lo menos varios tratamientos farmacéuticos que mejoraron
este patrón de artefacto, que, basado tanto en ubicación
(perivascular y paraneuronal con predilección por sitios tales
como la capa de células de Purkinje) y la tinción con GFAP
sugirió que el proceso fue uno de hinchazón de procesos celulares
de astrocitos inmediatamente después de la muerte (Figuras 4e y
4f). En el caso de uno de estos productos farmacéuticos,
secciones de criostato de cerebros se congelaron no tenían
vacuolas, pero vacuolas eran prominentes dentro de las secciones
de parafina de los animales tratados de manera similar. De gran
interés para este patólogo también fue la distribución heterogénea
de las vacuolas observadas con estos artículos de prueba. Por
ejemplo, en el caso de la alteración vacuolar muestra en la Figura
4f, el globus pallidus se vio afectada pero no el caudado-
putamen, una vez más indica la heterogeneidad en las
poblaciones de astrocitos (o al menos niveles alterados de la
actividad de los astrocitos dentro de las regiones afectadas).
OLIGODENDROCYTES
Vol. 39, No. 1, 2011 Histología del sistema nervioso central 29
FRÁFICO4.-Variaciones en la morfología de astrocitos. 4a es una micrografía de corteza cerebral de rata. Los puntos de punta de flecha para un
oligodendrocyte para-neuronal (a menudo referido como un '' de células satélite ''), mientras que los puntos de flecha completos para dos astrocitos de
apariencia normal. (Los astrocitos se encuentran a veces en pares.) En comparación con los oligodendrocitos, astrocitos tienen núcleos más grandes con
pálido patrones de cromatina vesiculares. Los astrocitos tienen nucleolos muy pequeñas o nonprominent. 4b es de la corteza cerebral de un perro con
hiperamonemia inducida experimentalmente. Los astrocitos (flechas) han ampliado, relativamente '' núcleos 'CLEAR'. Estas célu las se denominan como
Alzheimer tipo II astrocitos y se ven típicamente en la encefalopatía hepática. (Tenga en cuenta que esta imagen representa una copia de una
transparencia de la película prestado, y no se hizo ningún intento de alterar el tinte de color. ) 4c es un ejemplo extremo d e astrocito hiper-trofeo (corteza
visual primaria de un mono macaco con la intoxicación metil mercurio crónica). En este campo, la gran células citoplasma rico en rep-reenviado ''
astrocitos gemistocíticos ''. 4d representa un fibrilar proteína glial ácida (GFAP) sección -immunolabeled de hipocampo de rata después de la pérdida de
un gran número de neuronas dentro de la CA1capa piramidal. Estos astrocitos pueden ser identificados como ser reactivo / hipertrofiados basan en sus
gruesos procesos citoesqueleto (flechas). 4e es una micrografía de una corteza cerebelosa mono macaco en el que vacuolas fueron evidentes en las
secciones teñidas con H y E. Dentro de esta sección GFAP-immunolabeled, llantas delgadas de la proteína ácida fibrilar glial pudieron ser identificados
en el perímetro de muchas vacuolas, proporcionando evidencia presuntiva de que estas vacuolas se encontraban dentro de los astrocitos. 4f es una
micrografía del globo pálido de una rata caracterizado por extensa vacuo-mento. Aunque los lugares específicos de estas vacuolas no se pueden
determinar a nivel microscópico de luz, hay una tendencia a que las vacuolas que ser adyacentes a los vasos (flecha roja) y n euronas (flecha negro), pero
a no ser dentro de las neuronas. Este patrón sugiere que las vacuolas son dentro de los procesos celulares astrocíticas. (Todas las cifras distintas a 4d y
4e son de secciones teñidas con H y E 4b representa una exploración de una kodachrome prestado por el Dr. MD Norenberg aument os final:.. 4a¼554x;
4b incierto [a partir de una kodachrome escaneada]; 4c, d, y f¼277x; 4e¼ 554x).
30 GARMAN TOXICOLOGIC
PAGATHOLOGY
componente mye-lin (Ibrahim y Levine 1967). Estas estructuras
nervios, demarcaciones afilados serán vistos entre las zonas de son típicamente pálido, pero pueden ser ligeramente basófilo o
la mielinización central y periférico (Figura 5a). Oligodendro- gris en color, así como ácido-Schiff metacromática o periódico
citos, en contraste con células de Schwann-ensheath múltiples (PAS) -positivo (Vinters y Kleinschmidt-DeMasters 2008). En la
axones, mientras que una sola célula Schwann forma la vaina década de autor Las vacuolas se muestran en la Figura 5f- a veces
de mielina por sólo una entrenudo axonal. Dentro de denominados cuerpos Buscaino, mucocitos, o meta-cromática
extensiones de materia blanca, oligodendrocitos están cuerpos se desarrollan como resultado de la manipulación del
típicamente dispuestos en filas lineales entre las fibras cable de cerebro o la médula demasiado pronto después de la
nerviosas (Figura 5A). Para una revisión reciente de la exposición al formaldehído FIXa tivos y, según la experiencia del
biología y patología de los oligodendrocitos, se remite al autor, tienden a ser más prominente en tejidos fijados con
lector a Bradl y Lassmann (2010). formalina preparados que también contienen alcohol. Se cree que
La '' huevo frito 'clásico' aparición de oligodendrocitos dentro Buscaino cuerpos para ser causado por solubili-zación y la
de tejido del sistema nervioso nonperfused representa cytoplas- posterior precipitación (por fijación) de algún componente mye-
MIC artefacto (Figura 5b) y no se ve en las secciones de los lin (Ibrahim y Levine 1967). Estas estructuras son típicamente
cerebros de perfusión fijo (Figura 5C). Dentro de la materia gris, pálido, pero pueden ser ligeramente basófilo o gris en color, así
oli-godendrocytes se encuentran con frecuencia inmediatamente como ácido-Schiff metacromática o periódico (PAS) -positivo
adyacente a los cuerpos celulares de las neuronas, en el que se (Vinters y Kleinschmidt-DeMasters 2008). En la década de autor
refiere a menudo como '' células satélite '' (Figura 5C). (Tenga en Las vacuolas se muestran en la Figura 5f- a veces denominados
cuenta que las células satélite dentro de los ganglios sensoriales cuerpos Buscaino, mucocitos, o meta-cromática cuerpos se
del sistema nervioso periférico están presentes en gran número, desarrollan como resultado de la manipulación del cable de
sino que representan las células de Schwann). El término '' cerebro o la médula demasiado pronto después de la exposición
satelitosis '' se refiere a un mayor número de células que rodean al formaldehído FIXa tivos y, según la experiencia del autor,
las neuronas. Cómo siempre, como '' gliosis '', este término se tienden a ser más prominente en tejidos fijados con formalina
debe utilizar con precaución ya que el número de células satélite preparados que también contienen alcohol. Se cree que Buscaino
neuronas asociada varían de una región del cerebro a otra. cuerpos para ser causado por solubili-zación y la posterior
satelitosis neoplásica (visto con mayor frecuencia en asociación precipitación (por fijación) de algún componente mye-lin
con malignas neo-plasmas astrocíticos) es mucho más común que (Ibrahim y Levine 1967). Estas estructuras son típicamente
satelitosis reactivo excepto en procesos de degeneración de las pálido, pero pueden ser ligeramente basófilo o gris en color, así
neuronas, en el que las células satélite representan microglia. como ácido-Schiff metacromática o periódico (PAS) -positivo
manchas inmunológicas para la glicoproteína asociada a la (Vinters y Kleinschmidt-DeMasters 2008). En la década de autor
mielina (MAG) y de la proteína básica de la mielina (MBP) se o los meta-cromática cuerpos se desarrollan como resultado de la
han utilizado para oligodendroglia la mancha con mayor o menor manipulación del cable de cerebro o la médula demasiado pronto
éxito, pero los resultados no siempre son fiables o reproducible. después de la exposición al formaldehído FIXa tivos y, según la
experiencia del autor, tienden a ser más prominente en los tejidos
La mielina vacuolización o vaina de mielina de división puede
fijados con formalina preparados que también contienen alcohol.
o no puede ser el resultado de la función comprometida de los
Se cree que Buscaino cuerpos para ser causado por solubili-
oligodendrocitos. estaño trietilestaño, por ejemplo, produce el
zación y la posterior precipitación (por fijación) de algún
patrón clásico de edema intramielínico sin alterar la morfología
componente mye-lin (Ibrahim y Levine 1967). Estas estructuras
de los núcleos de oligodendrocitos (aunque algunos celular
son típicamente pálido, pero pueden ser ligeramente basófilo o
astrocytic hinchazón ha informado) (Krinke 2000) (Figura 5d).
gris en color, así como ácido-Schiff metacromática o periódico
edema intramielínico también se puede caracterizar por vacuolas
(PAS) -positivo (Vinters y Kleinschmidt-DeMasters 2008). En la
redondas que no están restringidos a tractos de sustancia blanca
década de autor o los meta-cromática cuerpos se desarrollan
(Gibson et al. 1990) (Figura 5e). Artefactos vacuolización
como resultado de la manipulación del cable de cerebro o la
mielina es común, y es importante que el patólogo sea capaz de
médula demasiado pronto después de la exposición al
distinguir este arti-hecho de vacuolas debido a la alteración antes
formaldehído FIXa tivos y, según la experiencia del autor,
de la muerte de las vainas de mielina. Las figuras 5e y 5f
tienden a ser más prominente en los tejidos fijados con formalina
proporcionan una comparación de este tipo. Las vacuolas en las
preparados que también contienen alcohol. Se cree que Buscaino
figuras 5e y 5f son algo similares en que ambos tipos contienen
cuerpos para ser causado por solubili-zación y la posterior
pequeñas cantidades de material mal teñido. Sin embargo, las
precipitación (por fijación) de algún componente mye-lin
vacuolas en la Figura 5f (que representan artefacto) son más
(Ibrahim y Levine 1967). Estas estructuras son típicamente
irregulares en su forma. Las vacuolas se muestran en la Figura 5f-
pálido, pero pueden ser ligeramente basófilo o gris en color, así
a veces denominados cuerpos Buscaino, mucocitos, o meta-
como ácido-Schiff metacromática o periódico (PAS) -positivo
cromática cuerpos se desarrollan como resultado de la
(Vinters y Kleinschmidt-DeMasters 2008). En la década de autor
manipulación del cable de cerebro o la médula demasiado pronto
Se cree que Buscaino cuerpos para ser causado por solubili-
después de la exposición al formaldehído FIXa tivos y, según la
zación y la posterior precipitación (por fijación) de algún
experiencia del autor, tienden a ser más prominente en tejidos
componente mye-lin (Ibrahim y Levine 1967). Estas estructuras
fijados con formalina preparados que también contienen alcohol.
son típicamente pálido, pero pueden ser ligeramente basófilo o
Se cree que Buscaino cuerpos para ser causado por solubili-
gris en color, así como ácido-Schiff metacromática o periódico
zación y la posterior precipitación (por fijación) de algún
(PAS) -positivo (Vinters y Kleinschmidt-DeMasters 2008). En la
década de autor Se cree que Buscaino cuerpos para ser causado
por solubili-zación y la posterior precipitación (por fijación) de experiencia, cuerpos Buscaino son también a menudo (pero no
algún componente mye-lin (Ibrahim y Levine 1967). Estas siempre) refringente cuando se ve con luz polarizada.
estructuras son típicamente pálido, pero pueden ser ligeramente
basófilo o gris en color, así como ácido-Schiff metacromática o
periódico (PAS) -positivo (Vinters y Kleinschmidt-DeMasters METROICROGLIA
2008). En la década de autor
La microglía comprenden el sistema reticuloendotelial del
SNC y constituyen el 5-20% de la población de células gliales
del cerebro. Al igual que con las neuronas y las macroglía,
microglia son funcionalmente heterogéneo. Para una
descripción concisa de los conceptos actuales de la biología de
células de la microglia, se remite al lector a la revisión arti-cle
en este número (Kofler y Wiley 2011), así como a un estudio
reciente realizado por Graeber y Streit (2010).
En las secciones teñidas con H y E de regiones cerebrales
normales, sólo un pequeño número de microglía son
típicamente reconocidos. Los núcleos de microglia que
descansan son alargadas o '' forma de cigarro '' y se com-
plantean principalmente de la heterocromatina (es decir, están
oscuramente manchadas y, por lo tanto, no está activo en
apariencia) (Figura 6a). De hecho, estos núcleos se confunden
a veces núcleos-o células endoteliales núcleos de las células
endoteliales puedan confundirse con micro-glía cuando
rebanadas tangenciales de las paredes capilares son vistos en
las secciones de los cerebros de perfusión-fijo. (Como un
ejemplo de esto, comparar la morfología de la célula
microglial indica por la flecha en la Figura 6a con las células
endoteliales encontraron adyacentes a los espacios vasculares
vacíos dentro de este mismo campo.) El citoplasma de
microglia no reactivo es poco visualizó con manchas de
rutina. Sin embargo, con los procedimientos especiales de
tinción, tales como calcio ionizado vinculante adaptador
molécula 1 (Iba1), los extensos procesos dendríticos de
microglia se pueden visualizar (Figura 6b). marcadores
inmunohistoquímicos utilizados con más frecuencia para las
células microgliales incluyen Iba1 y lectina (Griffonia sim-
plicifolia; GS-IB4), Con el CD68 (ED1) mancha de ser útil
para los macrófagos reveladores. Un número de otros
inmunotinciones se han utilizado con éxito para demostrar la
microglia, pero no será discutido aquí.
En las lesiones se caracterizan por degeneración neuronal,
microglia individuo típicamente se verá en las proximidades de
las neuronas Degen-erating (Figura 2f). insultos mayores en el
SNC pueden resultar en infiltrados densos de microglia, algunos
de los cuales asumirán una morfología celular histiocítico (6c) o
la forma incluso granuloma-como patrones inflamatorios (Figura
6D). Bajo apro-piado condiciones, microglia pueden transformar
en los macrófagos y, en este estado, se refieren a veces como ''
células gitter ''. En la mayoría '' neurotóxico '' lesiones,
degeneración neuronal será evidente por el tiempo microglia se
agregan en el escena. Sin embargo, este no es siempre el caso.
Figura muestra 6e microglia rodean-ing una neurona
relativamente de apariencia normal. Aunque esta imagen es de
una infección experimental lentivirus, este autor ha visto un
patrón similar (es decir, de microglia que rodean las neuronas de
apariencia normal) en algunas lesiones tóxicas (como en ciertas
etapas de la intoxicación metilmercurio). (Parece que la microglia
saben mucho más sobre el estado de salud de las neuronas de lo
que Pathol-gos hacen con nuestros microscopios.) Después de las
neuronas dañadas se han eliminado por microglia activada,
nódulos microgliales residuales pueden permanecer (Figura 6f).
Además de las células microgliales, otras células de origen
mesenquimal (que no serán discutidos aquí) incluyen aquellos
dentro de
Vol. 39, No. 1, 2011 Histología del sistema nervioso central 31
FRÁFICO5.-Morfología de los oligodendrocitos y los patrones seleccionados de vacuolaton mielina. 5a es de un nervio trigémino y muestra la diferencia
entre el patrón de mielinización normal del SNC (a la derecha) y PNS (a la izquierda). Oligodendrocitos en el SNC tractos de sustancia blanca a menudo
se alinean (flecha). 5b oligodendrocitos shows normales con prominentes halos perinuclear, produciendo el típico '' huevo frito '' aparición de estas
células en el material de inmersión-fijo (micrografía de un cerebro perro inmersión-fijo). Tales halos no se ven en material de perfusión fijo. En 5c
(corteza cerebral de una rata), flechas apuntan a 5 oligodendrocitos. Estas células tienen pequeños, redondos, núcleos relati vamente oscuras y, dentro de
las regiones de la materia gris del cerebro, son a menudo en las proximidades de las neuronas (siendo así que se hace referencia como '' células satélite
''). shows 5d extensa vacuolización de la mielina dentro de la materia blanca del cerebelo de una rata (debido a la toxicidad de trietilestaño). Sin
embargo, los núcleos de oligodendrocitos son microscópicamente normal. Estas hendiduras vacuolar son típicamente vacío y repr esentan el patrón
clásico de '' vaina de mielina división ''. Aunque las vacuolas en 5e (presente dentro de uno de los núcleos profundos del cerebelo de una rata) difieren
en la morfología de las hendiduras de la mielina que se muestran en 5d, ultraestructural las evaluaciones revelaron que estas vacuolas también
representados vaina de mielina split-ting. Tenga en cuenta que algunas de estas vacuolas contienen pequeñas cantidades de material mal teñido. Las
vacuolas en 5e deben diferenciarse de artefacto mielina del tipo mostrado en 5f. Estos '' vacuolas '' también contener algún material mal teñido y con
frecuencia demostrar birrefringencia parcial cuando se ve con luz polarizada. Estos artefactos se ven con mayor frecuencia en el cerebro que maneja
demasiado pronto después de la fijación de perfusión con formalina preparados que contienen alcohol y algunas veces se denominan cuerpos Buscaino o
mucocitos. Tenga en cuenta que estas vacuolas '' '' (en realidad depósitos) son menos regulares en config -URACIÓN que los de 5e. (Todo Figura 5
paneles son de secciones teñidas con H y E aumentos final:. 5a-5c¼554x; 5d y 5e¼277x; 5f¼ 138x).
32 GARMAN TOXICOLOGIC
PAGATHOLOGY
FRÁFICOla morfología celular 6.-Microglial. Dentro del neuropilo normal (6a), núcleos de las células microgliales se observan en un número
relativamente pequeño (flecha). Estos núcleos son en forma de barra y, a menudo contorneada irregularmente. En las secciones teñidas con
ionizado adaptador molécula 1 (Iba1) de unión a calcio (6b), muchos más microglia serán visualizados, al igual que sus patrones dendríticas
citoplasmáticos complejos. Dentro de focos inflamatorios en el SNC, microglia típicos en forma de barra (flechas en 6c) a menudo se
encuentran junto con otras células mononucleares tales como histiocitos (-resentir rep activado posiblemente / microglia transformado). focos
bien circunscrita de la inflamación mononuclear junto con infiltrados linfoides puede tomar en una '' granulomatosa '' morfología (6d). La
microglía se puede encontrar en asociación con neuronas eosinofílica. Sin embargo, en las infecciones virales del sistema nervioso central,
microglia se pueden encontrar neuronas circundantes relativamente de apariencia normal (6e, flecha). Como las neuronas degeneran, residual ''
microglial nódulos '' puede ser todo lo que queda del proceso degenerativo (6f, puntas de flecha apuntan a dos células microgliales). (Todo
Figura 6 paneles que no sea 6b son de secciones teñidas con H y E paneles 6e y 6f se prepararon de una diapositiva prestado por el Dr. J. Ward
aumentos final:.. 6a, c, e, y f¼554x; 6b y 6d¼ 277x).
Vol. 39, No. 1, 2011 Histología del sistema nervioso central 33
FRÁFICO7.-órganos circunventriculares (CVOs). Estas seis regiones cerebrales se caracterizan por las barreras sangre-cerebro incompletas y tienen una
apariencia heteroge-nea en cerebros de rata. Incluyen el organum vasculosum de las lámina terminal (7a), órgano subfornical (7b), eminencia media
(7c), el órgano subcomisural (7d), pineal (7e), y área postrema (7f). Sólo los CVOs en 7a, b, y f contienen neuronas. El órga no subfornical (7b) es de
vez en cuando confundirse con una lesión (por ejemplo, como un granuloma subependimario). La comisura posterior (flechas en 7d) Aparece
hypomyelinated, ya que esta imagen fue tomada desde el cerebro de un cachorro de rata en el día postnatal 21 (una edad en la mielinización no es
completa). (Todo Figura 7 paneles son de secciones teñidas con H y E aumentos final:. 7a, c, y d¼55x; 7b, e, y f¼ 138x.) Tenga en cuenta que todas las
micrografías son de cerebros de ratas.
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