2. 7.

Timina limitación
Limitación de timina puede ser utilizado para curar la timina-
que requieren auxótrofos. Caro et al. [4] informó de que se
sólo se ha empleado con E. coli, y ha resumido un protocolo
para su uso con este organismo. A medio mínimo que
contenía 50 # g / ml timina es inoculado con la cepa
auxotróficos, y se incubaron durante la noche (12 h). Las
células son asépticamente diluido en una serie de tubos que
contienen el mismo medio y mínimo de las concentraciones
de timidina entre 0-25 # g / ml. Después de la incubación
durante la noche, diluciones en serie y la placa están
preparados DONTO timina-complementado agar nutritivo [4].
Las colonias individuales pueden ser probados por la pérdida
del plásmido. Clowes et al. [34] y Pinney y Smith [35] han
descrito curado timina hambre plásmido en E. coli K12. Este
organismo contiene una 1818 R-Factor, que es refractaria a la
cura de acridina y bromuro de etidio. Sin embargo, se curó
con éxito en los mutantes thymineless de este organismo en
condiciones de hambre timina crecimiento [35]. Similares
experimentos curado también se han descrito para los
plásmidos Col en E. coli K12.
2.8. Formación y regeneración de protoplastos
Se ha informado de que la eliminación de ciertos plásmidos
en el 80% de las células de S. aureus puede ocurrir durante
la formación y regeneración de lysostaphin producidos
protoplastos [36]. Se sugirió que la curación de plásmido
puede ocurrir durante las divisiones de protoplastos varios
que tienen lugar antes de la regeneración de las células de la
pared. Curado se postula que se debe a una alteración del
mecanismo de fraccionamiento plásmido cuando la pared
celular se ha eliminado. Este proceso de curado puede llegar
a ser especialmente adecuado para bacterias Gram-positivas
que son difíciles de curar mediante otros procedimientos, sin
embargo, son fáciles de hacer en los protoplastos a través de
tratamiento de lisozima.