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Laboratorio Clínico Hospital Nacional de Mazatenango

Determinación de Glucosa en Suero


Autorizado por: Licda. María Eugenia Abularach de Tercero
Revisión: 6-2013
Área: Química Sanguínea.

Nombre del Documento: Determinación de Glucosa en Suero

Método de Referencia: Ninguno

Responsable: Técnico de Área.

Ejecutado: Elida Zoraida Batres Arango y Oscar Danilo Enríquez Valladares

No. De Documento: Química Sanguínea 01 Versión 1

Válido desde: Junio 2013

Propósito: Establecer los procedimientos para llevar a cabo la práctica manual de


química sanguínea.

Alcance: Toda la documentación asociada a procedimientos manuales para la


determinación de glucosa en suero.
Principio: Análisis de glucosa en sangre

PRINCIPIO:

Glucosa en Suero:

El análisis de la glucosa mide la cantidad (concentración) de glucosa presente en la


sangre y sobre todo se realiza para estudiar la posible presencia de una diabetes
mellitus o sacarina. Como es una enfermedad muy compleja y con grandes
repercusiones de salud es un análisis muy discriminativo y útil que se realiza de forma
bastante rutinaria.. La determinación de glucosa sanguínea es una prueba muy
frecuente en bioquímica y se puede llevar a cabo tanto por métodos químicos como
enzimáticos , siendo estos últimos los más específicos.

Realizado Por Revisado Por Autorizado Por

Elida Batres y Oscar Enriquez Licda. María Eugenia Abularach de Licda. María Eugenia Abularach de
Tercero. Tercero.
Fecha de Realización Fecha de Revisión Fecha de Autorización

Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013

Hospital Nacional Mazatenango Suchitepéquez


2ª. Ave. Norte y 3ª. Calle zona 1, Mazatenango, Suchitepéquez, Guatemala, C. A.
Teléfono: 79326555 Ext. 219
Laboratorio Clínico Hospital Nacional de Mazatenango
Determinación de Glucosa en Suero
Autorizado por: Licda. María Eugenia Abularach de Tercero
Revisión: 6-2013
Área: Química Sanguínea.

FUNDAMENTO:

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene


fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el
hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa
en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el
hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el
páncreas. La concentración de glucosa en sangre es regulada por varias hormonas,
siendo las más esenciales la insulina y el glucagón. La cuantificación de glucosa en
sangre es usada para el diagnóstico de desordenes del metabolismo de los
carbohidratos , tales como diabetes, glicemia neonatal, hipoglicemia ideopática, y
enfermedad pancréatica.

La mayoría de problemas fisiológicos están ligados a hiperglicemia (diabetes mellitus


tipo II); esta diabetes no es insulinodependiente, y usualmente aparece después de los
40 años, puede aparecer tempranamente en personas obesas. Otra diabetes es la
mellitus tipo I que es insulinodependiente y aparece mayormente antes de los 30 años
de edad. Otras diabetes tienen un origen secundario y se presentan después de
enfermedades endocrinas y hepáticas; existen dos métodos enzimáticos para realizar
este análisis.

Método de la hexoquinasa:

emplea las enzimas hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. Por cada


molécula de glucosa se forma una de NADPH, que puede medirse
espectrofotométricamente a 340 nm. Es el método de referencia recomendado por las
organizaciones internacionales.

Método de glucosa oxidasa y peroxidasa (GOD-POD): es el que se utiliza en esta


práctica para medir los niveles de glucosa sanguínea.

Realizado Por Revisado Por Autorizado Por

Elida Batres y Oscar Enriquez Licda. María Eugenia Abularach de Licda. María Eugenia Abularach de
Tercero. Tercero.
Fecha de Realización Fecha de Revisión Fecha de Autorización

Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013

Hospital Nacional Mazatenango Suchitepéquez


2ª. Ave. Norte y 3ª. Calle zona 1, Mazatenango, Suchitepéquez, Guatemala, C. A.
Teléfono: 79326555 Ext. 219
Laboratorio Clínico Hospital Nacional de Mazatenango
Determinación de Glucosa en Suero
Autorizado por: Licda. María Eugenia Abularach de Tercero
Revisión: 6-2013
Área: Química Sanguínea.

MATERIAL:

ligaduras

tubos vacutainer con heparina


tubos vacutainer sin heparina
gradilla 
Palillos
pipeta de 100 µl
pipeta de 50 µ
reactivos de glucosa

reactivos de standar

Equipo:

Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 505nm

Centrífuga

Muestra:

Suero libre de hemólisis (El suero debe separarse lo antes posible del
coagulo)Estabilidad: La glucosa en suero o plasma es estable 3 días a 2-8°C, toda vez
estén congelados los sueros.

Realizado Por Revisado Por Autorizado Por

Elida Batres y Oscar Enriquez Licda. María Eugenia Abularach de Licda. María Eugenia Abularach de
Tercero. Tercero.
Fecha de Realización Fecha de Revisión Fecha de Autorización

Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013

Hospital Nacional Mazatenango Suchitepéquez


2ª. Ave. Norte y 3ª. Calle zona 1, Mazatenango, Suchitepéquez, Guatemala, C. A.
Teléfono: 79326555 Ext. 219
Laboratorio Clínico Hospital Nacional de Mazatenango
Determinación de Glucosa en Suero
Autorizado por: Licda. María Eugenia Abularach de Tercero
Revisión: 6-2013
Área: Química Sanguínea.

PROCEDIMIENTO:

- Tomar la muestra (esperar por lo menos media hora a coagule )


- Centrifugar la muestra por 5 minutos de 2,500 a 3,000 revoluciones por minuto.
- Separar el suero.
- Rotular 3 tubos de ensayo como: 

 -    BL ( blanco, sirve para calibrar el espectrofotómetro, solo contiene reactivo)


 -    ST ( estándar, sirve como valor de referencia, contiene reactivo de glucosa y
reactivo estándar)
 -   M   ( muestra que contiene reactivo de glucosa y suero o plasma que dará el valor
de los niveles de glucosa)
- Agregar a todos los tubos 500 ul de reactivo.
- Agregar al tubo de muestra 5 ul de suero o muestra.
- Agregar al tubo de estándar 5 ul del reactivo de estándar.
- Incubar de 5 a 30 minutos a temperatura ambiente o dependiendo del reactivo
- Leer en el espectrofotómetro la absorbancia de todos los tubos a 555 nm
- Calcular concentraciones o resultados de la siguiente manera:

Abs de la muestra
- ______________ X Concentración del stándar
- Abs de estándar
- Reportar resultados
-

Valores de Referencia de 75 a 110 mg/dl

Realizado Por Revisado Por Autorizado Por

Elida Batres y Oscar Enríquez Licda. María Eugenia Abularach de Licda. María Eugenia Abularach de
Tercero. Tercero.
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Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013

RESULTADOS:
Hospital Nacional Mazatenango Suchitepéquez
2ª. Ave. Norte y 3ª. Calle zona 1, Mazatenango, Suchitepéquez, Guatemala, C. A.
Teléfono: 79326555 Ext. 219
Laboratorio Clínico Hospital Nacional de Mazatenango
Determinación de Glucosa en Suero
Autorizado por: Licda. María Eugenia Abularach de Tercero
Revisión: 6-2013
Área: Química Sanguínea.

Cuando se realiza un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100


miligramos se considera normal.

Si se realiza un examen de glucemia aleatorio, los resultados normales dependen de


cuándo fue la última vez que comió. La mayoría de las veces, los niveles de glucemia
estarán por debajo de 125 mg/dl.

Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre laboratorios.

Cuando se realiza un examen de glucemia en ayunas:

Un nivel de 100 a 125 mg/dl significa que tiene una alteración de la glucosa en ayunas,
un tipo de prediabetes. Esto incrementa el riesgo para la diabetes tipo 2.

Un nivel de 126 mg/dl o mayor casi siempre significa que tiene diabetes.

Los niveles aleatorios de glucosa en la sangre superiores a los normales pueden ser un


signo de diabetes. En alguien que tenga diabetes, puede significar que la enfermedad
no está bien controlada. El médico probablemente ordenará una glucemia en ayunas o
un examen de tolerancia a la glucosa, dependiendo del resultado del examen aleatorio
de varias partes del cuerpo.

Realizado Por Revisado Por Autorizado Por

Elida Batres y Oscar Enriquez Licda. María Eugenia Abularach de Licda. María Eugenia Abularach de
Tercero. Tercero.
Fecha de Realización Fecha de Revisión Fecha de Autorización

Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013

FLUJOGRAMA:

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2ª. Ave. Norte y 3ª. Calle zona 1, Mazatenango, Suchitepéquez, Guatemala, C. A.
Teléfono: 79326555 Ext. 219
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Determinación de Glucosa en Suero
Autorizado por: Licda. María Eugenia Abularach de Tercero
Revisión: 6-2013
Área: Química Sanguínea.

Recepción de muestra

Centrifugar Separar suero

Agregar reactivos y
muestra

Calibrar
Incubar de 5 a 30 minutos Espectrofotómetro

Leer absorbancia de todos Calcular


los tubos concentraciones

Resultados

Realizado Por Revisado Por Autorizado Por

Elida Batres y Oscar Enriquez Licda. María Eugenia Abularach de Licda. María Eugenia Abularach de
Tercero. Tercero.
Fecha de Realización Fecha de Revisión Fecha de Autorización

Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013

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