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Taller No.

1 Microbiología General y laboratorio

Desarrolle los siguientes puntos 1 al 5 de manera individual. El punto 6 en sus grupos de trabajo.
Puede desarrollarlo a mano o en computador.

1- Piensa en los siguiente: Si ambos colorantes usados en la técnica de la tinción de Gram son
básicos ( es decir, cargados positivamente) que pasaría si invertimos el orden de aplicación
de los mismos?

Suponiendo que en primer lugar se tiñen las celulas a analizar con el colorante de
safranina este tiñe a todas las celulas de un color rosa o purpura claro, posteriormente
haciendo un tratamiento con etanol este es capaz desintegrar los lipidos de la membrana
de las celulas gram negativas ingresar al citoplasma y retirar la safranina concentrada en
este tipo de células, posteriormente si se adiciona el cristal violeta, el cual es un colorante
purpura intenso, luego adicionando agua y observandolas en el microscopio todas las
celulas de la muestra se observarían de un mismo color (morado intenso) enmascarando
la tinción que tenían las celulas gram positivas impidiendo identificar correctamente Gram
positivas de Gram negativas.

2- La pared celular de las bacterias está compuesta, generalmente por cadenas de amino-
azúcares llamadas comunmente péptidoglicano. Este péptidoglicano puede formar una
pared más o menos gruesa dependiendo del tipo de bacteria, sea Gram positiva o Gram
negativa. A sus manos han llegado dos tubos de caldo, en apariencia estan bastante
turbios : Una con un inóculo de Bacillus subtilis genéticamente modificado para inhibir la
síntesis de péptidoglicano y otra con un inóculo de E. coli modificada geneticamente para
inhibir la síntesis de triptofanasa. Ya que las cajas no estan rotuladas es imposible saber
qué caja pertenece a qué bacteria. ¿Cómo resolvería el enigma?

De acuerdo con la situación presentada no es posible realizar una tinción de Gram debido
a que la bacteria Bacillus subtilis no puede producir peptidoglucano así que no sería la
prueba indicada, pero tenemos una información importante, ya que esta bacteria tiene la
capacidad de formar una gran espora mientras que la E coli no tiene esta habilidad, por
tanto se podría realizar una tinción de esporas después de haber sometido a ambos
inoculos a condiciones de escasas de nutrientes y condiciones ambientales desfavorables,
lo que conyebaría a la formación de la gran endospora de Bacillis subtilis, luego con el
colorante verde de maraquita el cual permitirá observar las esporas de un color azul
oscuro o verde azulado.
3- Analice las dos imágenes. ¿Qué diferencias y similitudes encuentra?

https://cuadroscomparativos.com/bacterias-gram-positivas-vs-gram-negativas-cuadros-comparativos/

-Diferencias

* Las celulas Gram positivas sólo presentan una membrana de lípidos mientras que las Gram
negativas se muestra una bicapa de lipidos

* Las Gram positivas tienen una mayor cantidad de peptidoglucano

* Las Gram positivas tiene embebido en su porcion de peptidoglucano acido teicoico mientras
que en la Gram negativa se encuentra ausente

* Las Gram negativa tiene una membrana mucho más compleja, esta presenta una gran cantidad
de lipopolisacarido

- SIMILITUDES

* Ambas tienen presencia de peptidoglucano

* Ambas poseen peptidoglucano

4- Explique y detalle el fundamento teórico de la tinción de Gram ¿Porqué cada sustancia


química empleada en el proceso del actúa de la forma en que lo hace?

 A continuación se presentan los compuestos quimicos que se usan


5- El agar MacConkey es un medio de cultivo para el aislamiento de enterobacterias y otros
bacilos Gram negativos no fermentadores y su composición se muestra a continuación.
¿Qué podemos decir de este medio de cultivo basados en la información suministrada y su
composición? ¿Qué papel cumplen en el medio de cultivo cada item?

6- Elabore un organizador gráfico


donde conecte las temáticas y los conceptos de las prácticas 1,2,3 y 4 Por ejemplo: medios
de cultivo, tipos de medios, buenas prácticas de laboratorio, instrumentos de laboratorio,
caracterización bioquímica de bacterias, caracterización morfológica de bacterias etc,
importancia del tema

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