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Caracterización de polisácaridos naturales

obtenidos a partir de fuentes colombianas

ARTICLE · JANUARY 2007

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4 AUTHORS:

Catalina Álvarez Jorge Enrique Saldarriaga E.

Universidad Pontificia Bolivariana Universidad Pontificia Bolivariana
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Robin Zuluaga Piedad Felisinda Gañán

Universidad Pontificia Bolivariana Universidad Pontificia Bolivariana
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Available from: Jorge Enrique Saldarriaga E.

Retrieved on: 11 February 2016
Revista Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12
Publicada en línea por la Universidad Pontificia Bolivariana
http://convena.upb.edu.co/~revistaaplicada
ISSN

CARACTERIZACIÓN DE POLISÁCARIDOS NATURALES OBTENIDOS

A PARTIR DE FUENTES COLOMBIANAS

J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán †

Universidad Pontificia Bolivariana, Cq. 1 #70-01, of. 11-259, Medellín, Colombia

Grupo de Investigación sobre Nuevos Materiales

Recibido 22 Octubre 2007; aceptado 18 Diciembre 2007

Disponible en línea: 27 Diciembre 2007

Resumen: En este trabajo, se han estudiado dos polisacáridos semicristalinos, la

celulosa y la manosa, obtenidos a partir de tres tipos de fuentes naturales
colombianas. La celulosa fue aislada de residuos fibrosos (raquis) de Musaceas y de
cultivos de Acetobacter xylium spp. En el caso de la manosa, esta fue obtenida de
semillas maduras de Phytelephas Macrocarpa Palmae (marfil vegetal o Tagua).
Componentes no celulósicos fueron observados en ambas muestras de celulosa, los
cuales pueden afectar tanto la estabilidad térmica como el diámetro final de las
microfibrillas aisladas. Los ensayos de espectroscopía infrarroja FTIR indican que
componentes diferentes a la manosa están presentes en las muestras caracterizadas,
lo cual indica que tratamientos adicionales pueden mejorar la pureza del
polisacárido. Copyright © 2007 UPB.

Abstract: In this work, crystalline polysaccharides as cellulose and mannan isolated

from three different Colombian natural resources were studied. Cellulose
microfibrils were isolated from Musaceae fibrous residues as rachis and Acetobacter
xylium spp whereas mannan was obtained form maturate seeds of Phytelephas
Macrocarpa Palmae (Ivory nut or Tagua). Non-cellulosic component observed on
both cellulose samples affect the thermal stability and the diameter of cellulose
microfibrils. FTIR spectroscopy shows non-mannans components on ivory nut
samples. This result suggest than an additional treatment step improves the purity of
polysaccharide isolated.

Keywords: Polysaccharides, Cellulose, Mannan, Colombian natural resources,

Physical characterization, Morphology

1. INTRODUCCIÓN de compuestos sintéticos como los plásticos y su

incidencia sobre los suelos de cultivo, rellenos
En los últimos treinta años, la preocupación sanitarios y otros métodos de disposición de
debido a la contaminación asociada a la presencia residuos sólidos ha incrementado de manera

†
Autor al que se le dirige la correspondencia:
Tel. (+574) 4159095 ext 117, fax 4112372.
E-mail: piedad.ganan@upb.edu.co (Piedad Gañán).
 J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12
considerable. Pese al uso de aditivos que buscan
incrementar la degradación de los materiales
sintéticos, la alternativa de emplear materias
primas de origen natural, buscando asegurar la
biodegradabilidad, se convierte cada vez en una
mejor opción, pues estos compuestos cumplen
con los requerimientos que desde el punto de
vista ecológico se han establecido para una
adecuada disposición final del material. Estos
criterios incluyen las siguientes etapas
(Albertsson, 1993; Arvanitoyannis et al., 1998):
1. Un tiempo de inducción durante el cual no se
presentan cambios en las propiedades.
2. Al final del período de inducción puede
presentarse un acelerado estado de
fragmentación.
3. En la etapa final se presenta una asimilación
de los productos de la fragmentación por el
ecosistema.
Dentro de las potenciales materias primas que
permiten cumplir con estos requerimientos se
encuentran los polisacáridos de origen natural,
que gracias a las múltiples fuentes de los cuales
pueden ser aislados, cuentan con una alta
disponibilidad y un costo moderado.
Sumado al desarrollo de materiales poliméricos o
composites, otros sectores como el alimenticio, el
cosmético o el biomédico ven en este tipo de
sustancias materias primas de calidad para el
desarrollo de múltiples productos. En este sentido
Colombia debido tanto a su biodiversidad como a
su alta vocación agrícola, cuenta con un gran
potencial para el aprovechamiento o explotación
de polisacáridos semicristalinos como la celulosa
y la manosa, los cuales pueden ser aislados bien
sea de las paredes vegetales de las plantas o como
producto de la actividad extracelular de
microorganismos como bacterias. Estos
compuestos pueden ser ampliamente utilizados
bien sea como reforzantes de compuestos, en el
caso de la celulosa, o como aditivo para pinturas,
papel, cuero, textiles, pinturas, industria plástica,
coméstica y de alimentos. Pese a lo anterior, hasta
ahora existen muy pocas referencias respecto al
aislamiento o aún más utilización de este tipo de
compuestos obtenidos a partir de fuentes
colombianas (Zuluaga et al., 2007).
La celulosa es un polímero semicristalino
homogéneo compuesto por unidades β-(1-4)
glucosa. Su principal fuente son las paredes
celulares de las plantas, en donde se encuentra
7
unida a hemicelulosas, lignina y pectinas
principalmente. La mayor parte de la celuosa de
origen vegetal que se extrae a nivel mundial
procede de maderas, sin embargo en los últimos
años otras especies vegetales no madereras e
incluso residuos agroindustriales se vienen
empleando, tal es el caso de los desechos de
cultivos de cereales (Sun et al., 2004), o
Musaceas (Zuluaga et al., 2007). Es posible
obtener celulosa de algas como la Valonia (Baker
et al., 1997) o la actividad extracelular de
microorganismos como el Acetobacter,
Agrobacteria, Rhizobia o Sarcina (Jung et al.,
2005). El tipo de fuente empleada condiciona
tanto las características físicas como morfológicas
y mecánicas de la celulosa.
En el caso de la manosa, se encuentra conformada
por unidades β-1,4-manosa. Es un material
abundante en la naturaleza y se encuentra como
homopolímero en los endospermas de plantas
como Phytelephas Macrocarpa Palmae
(conocida en Colombia como Tagua y en otras
regiones del mundo como marfil vegetal)
combinado con celulosa y hemicelulosas en
algunos casos. También se encuentra presente en
algas como Codiaceas o Dasycladaceas (Hori et
al., 2007) y semillas de leguminosas (Petkowicz
et al., 2001). Cuenta con dos fases, el tipo I se
encuentra en la naturaleza en un alto estado
cristalino, en tanto que la tipo II es más
semicristalina. Pese que existen varios estudios
sobre su composición y morfología (Chanzy et.
al., 1987, Hori et al., 2007, Kapoor et al., 1995)
no existen mayor información sobre especies
producidas en Colombia, pues hasta el momento
sus aplicaciones se encuentran orientadas al
desarrollo de artesanías. En el presente trabajo, se
exponen entonces los principales aspectos
relacionados con la composición química,
estructura cristalina y comportamiento térmico de
muestras de celulosa y manosa obtenidas de
fuentes naturales colombianas y que incluyen
desechos agroindustriales de Musaceas, obtenidas
mediante los procesos fermentativos del
Acetobacter xylinum spp y de semillas maduras
de Phytelephas Macrocarpa Palmae.
2. METOLOGÍA
2.1. Materiales
Las muestras analizadas proceden de dos fuentes:
 J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12
• Haces fibrosos extraídos de raquis de banano
(Musa AAB, variedades Valery y Gran
Enano) cultivadas en la región de Urabá
(Colombia).
• La celulosa bacteriana fue obtenida de la
actividad extracelular del Acetobacter
xylinum spp, tradicionalmente empleado para
la elaboración de vinagre casero.
• Semillas maduras de Phytelephas
Macrocarpa Palmae recolectadas en la región
norte del departamento de Chocó (Colombia)
y que tradicionalmente son empleadas para la
elaboración de productos artesanales.
2.2. Obtención de los polisacáridos
Tras someterlos a un proceso de secado a 105 °C
durante 24 h, los haces fibrosos de raquis de
banano obtenidos mediante extracción mecánica
en un equipo de desfibrado mecánico dotado con
cuchillas de acero, fueron sometidos a la acción
de diversos tratamientos químicos sucesivos, y
que esencialmente son:
• Disposición de los haces fibrosos en una
solución de KOH al 5 % en peso durante 14 h
a temperatura ambiente.
• Tras alcanzar un pH neutro, el precipitado se
dispone en una solución al 1 % en peso de
NaClO2 a 70 ºC durante 1h.
• El precipitado es nuevamente puesto en una
solución de solución al 5 % en peso de KOH
durante 14 h a temperatura ambiente.
• Los tratamientos químicos finalizan
utilizando una solución de HCl al 1 % en
peso a 80 ºC durante 2 h.
Una vez el residuo final alcanza un pH neutro, es
sometido a la acción mecánica, utilizando un
waring blender, durante varios minutos. Estas
muestras serán denominadas en el resto del texto
como R.
En el caso de la celulosa bacterial, una cepa de un
precultivo elaborado a partir de Acetobacter
xylinum spp fue utilizada. Para ello, se realizó la
inoculación de 10 ml del sobrenadante de un
precultivo, la cual fue dispuesta en 1 l de sustrato
rico en glucosa, como el jugo de piña. El pH del
medio fue ajustado a 4,0 con ácido acético al 10
% con miras a estimular la producción de
celulosa. Este cultivo se realizó en condiciones
estáticas, a temperatura ambiente y en un lugar
oscuro. Las muestras de celulosa fueron extraídas
a partir del quinto día del montaje del cultivo.
8
Para su análisis fueron lavadas cuidadosamente
utilizando agua destilada hasta alcanzar un pH
neutro. La denominación para estas muestras en
el texto será B.
Para realizar una adecuada caracterización, las
semillas de maduras de Phytelephas Macrocarpa
Palmae fueron sometidas a un vigoroso raspado
mecánico utilizando herramientas tradicionales
como sierras metálicas. El resultado fue un polvo
blanco con un tamaño de malla de 240. Estas
muestras serán denominadas en lo sucesivo como
T.
2.3. Caracterización de los polisacáridos
Los ensayos de espectroscopia infrarroja FTIR
fueron realizados empleando un equipo marca
Nicolet 460 ESP. Al menos 20 barridos usando
una resolución de 4 cm-1 fueron llevados cabo en
cada una de las muestras. En cuanto al estudio de
la estructura cristalina, fue utilizado un
difractómetro Rigaku Miniflex 3D/Max con una
radiación de Ni filtrada con CuKα en una
longitud de onda de 0,1542 nm. La unidad fue
operada a 40 kV y 30 mA, con un velocidad de
evaluación del ángulo de 5-50º a 2 º/min.
El análisis térmico de las muestras fue realizado
en un equipo de termogravimetría marca Metler
Toledo TGA/SDTA85, utilizando atmósfera de
nitrógeno y una velocidad de calentamiento de 10
°C/min.
Con miras a establecer el tamaño de las muestras
de celulosa aisladas, un microscopio de fuerza
atómica marca Nanoscope IIIa (Digital
Instruments, Santa Barbara CA, USA) con una
cabeza multimodo fue utilizado para la muestra
R. Mientras que la celulosa bacterial, muestra B,
fue analizado a través de micrografías realizadas
en un microscopio electrónico de barrido, Jeol
JSM 5910 LV. Debido a la naturaleza no
conductora de las muestras, estas fueron
recubiertas con oro empleando un sputter coater.
3. RESULTADOS
Los espectros de los tres tipos de muestras
aisladas se presentan en la Fig. 1. En las tres
muestras existe una marcada presencia de los
grupos hidrófilos, especialmente en la región
entre 3400 y 3300 cm-1 así como alrededor de
1650 cm-1, lo cual indica su tendencia a la
captación de humedad. En el caso de la muestra
 J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12

T, en esta región se encuentran las bandas 3504,

3479 y 3375 cm-1, que están asociadas a la
presencia de manosa cristalina, posiblemente de R
tipo I, tal como lo indican autores como Hori et
al. (2007).

Transmitancia
En todas las muestras, bandas asociadas con la
celulosa tales como 1426 cm-1 relacionada con las B

vibraciones asimétricas del grupo CH y simétricas

del grupo CH alrededor en la zona entre 1380- T
1320 cm-1 son observadas. En las muestras R y B
se aprecian adicionalmente vibraciones de los
grupos C-O-C en la región entre 1200 a 1100 cm-1 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
y de los CO en la región cercana a 1060 cm-1, aún -1
Número de onda (cm )
cuando en la muestra B existe un alto grado de
saturación de la región. Lo cual indica una
marcada presencia de celulosa en las muestras R Fig. 1. Espectros infrarrojos de los polisacáridos
y B. aislados de muestras de haces fibrosos de raquis
(R), cultivos bacteriales (B) y tagua (T).
En el caso de la muestra R, se observan
vibraciones en la región de 1730 cm-1 que se
relacionan con componente no celulósicas, tales
como hemicelulosas residuales como la xilosa, y
cuya presencia puede afectar el tamaño de la
Intensidad (unidad arbitraria)

muestra aislada. En la muestra B, también existen

vibraciones en esta región, y que sumadas a
apreciada en 1250 cm-1 indican la presencia de
pectinas (Kacuráková et al., 2002). De acuerdo
con esto, la muestra bacterial debe ser sometida a
mayores procesos de limpieza con miras a
incrementar la pureza de la celulosa obtenida.
En los tres espectros se aprecian bandas en la
región entre 950–890 cm-1 asociadas a las uniones
β presentes tanto en la celulosa como en la
manosa. Para la muestra T, existe una fuerte
vibración en 872 cm-1 que puede estar ligada
directamenete a la presencia de unidades D-
manopironosa, la cual ha sido observada en otras
fuentes de manosa de origen vegetal (Navarini et
al. 1999). En tanto que las vibraciones observadas
en 1739 y 1251 cm-1, y asociadas con grupos
carboxílicos indican la presencia de componentes
tipo glucoxilanos.
Respecto a la estructura cristalina, en la Fig. 2 se
presentan los difractogramas de algunas de las
muestras aisladas. En el caso de la muestra R,
éste se encuentran dominados por la estructura
típica de la celulosa tipo I debido a la presencia
del ángulo a 22º. En la muestra tipo B, no
incluida, se observa el mismo pico aunque más
ancho, resultado que guarda relación con el nivel
de cristalización, tal como lo sugieren otros
autores como Watanabe et al. (1998).
9
T
R
10 20 30 40
2θ (°)
Fig. 2. Difractogramas de los polisacáridos
aislados de muestras de haces fibrosos de raquis
(R) y tagua (T).
En el caso de la muestra T, el difractograma
indican claramente la presencia de cristales de
manosa con un alto grado de cristalinidad, así se
deriva de la presencia de los ángulos a 16, 18, 20,
24, 25 y 29, y que son comparables a los
observados por otros autores para este tipo de
hemicelulosa (Kapoor et al., 1995, Hori et al.,
2007). A su vez este resultado confirma lo
comentado antes en los resultados de la
espectroscopía infrarroja de esta muestra. Así
mismo, en este caso no se aprecia presencia de
celulosa cristalina combinada con esta muestra.
Estos ángulos indican que el tipo de celda unitaria
 J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12

observada corresponde a una de tipo ortorómbica
(Hori et al., 2007).
El comportamiento térmico de las muestras de
polisacáridos aislados se presenta en la Fig. 3. La
muestra B, contiene una región de degradación
adicional cuando se compara con las demás, en
especial con la otra muestra de celulosa, en este
caso vegetal denominada R. Es posible que esta
región de degradación se encuentre asociada con
componentes no celulósicas tales como pectinas,
proteínas, ácidos nucleicos y demás restos de
membrana de las células bacteriales, siendo
alguno de estos componentes observado antes en
los ensayos de espectroscopia infrarroja (George
et al., 2005). Estas sustancias pueden ser
removidas mediante la utilización de tratamientos
químicos que mejoren la pureza de la muestra de
celulosa. La primera región de degradación que se
observa para todas las muestras se relaciona con
la tendencia a la captación de humedad, tal como
se observo antes en los resultados obtenidos
usando espectroscopia infrarroja. Respecto a la
tercera zona de pérdida en peso, para las muestras
R y B corresponde a la degradación de la
celulosa. Superada esta región, la muestra B
contiene un mayor nivel de residuos, esto puede
estar ligado a impurezas de carácter mineral
asociados al sustrato empleado para el cultivo y
que no fueron removidos por el proceso de
limpieza de la muestra.
antes tiene baja influencia en la degradación de la
muestra. Se aprecia también que aún a 800 °C, la
pérdida de peso no es total, sugiriendo la
presencia de impurezas, posiblemente sales.
En la micrografia por AFM de la Fig. 4 se
observan microfibrillas de celulosa aisladas de
raquis de banano. En este caso se aprecian tanto
microfibrillas individuales con diámetros
promedios entre 5 y 10 nm así como haces con
diámetros entre 50 y 60 nm. La existencia de los
mismos, se encuentra asociada con la
hemicelulosa residual presente en la muestra, tal
como se comentó antes. Haces fibrosos con
diámetros del orden de 160 nm son observados en
la micrografía obtenida mediante microscopía
SEM para la celulosa procedente de los cultivos
bacteriales. Es posible que a su vez estos se
encuentren conformados por microfibrillas de
menor tamaño, y que para obtenerlas es necesario
emplear tratamientos químicos o mecánicos
adicionales.

100
R
Pérdida en peso (%)

80 B T Fig. 4. Micrografía AFM de muestras de celulosa

aislada de raquis.
60

40

20

200 400 600 800

Temperatura (°C)

Fig. 3. Análisis térmico de muestras de haces

fibrosos de raquis (R), cultivos bacteriales (B) y
tagua (T).

Para la muestra T, la máxima región de

degradación se encuentra asociada a la presencia
de la manosa, siendo la temperatura máxima 291 Fig. 5. Micrografía SEM de muestras de celulosa
ºC. La influencia de los componentes diferentes a aislada de cultivos bacteriales.
la manosa presentes en la muestra y comentados

10
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Adicionalmente, sobre la superficie de los haces
de microfibrillas de celulosa de la muestra B, ver
Fig. 5, se aprecian sustancias con forma poco
definida, a modo de recubrimiento, que se
relacionan con los componentes no celulósicos
comentados antes.
4. CONCLUSIONES
En el presente trabajo dos tipos de polisacáridos,
la celulosa y la manosa, obtenidos a partir de tres
tipos diferentes de fuentes naturales han sido
estudiados. Los diferentes resultados indican que
gracias a su estructura y características, estos
polisacáridos pueden ser empleados para el
desarrollo de múltiples tipos de materiales bien
sea desde su desempeño térmico o mediante el
aprovechamiento de sus estructuras cristalinas.
De otro lado, tratamientos químicos
principalmente, deben ser considerados con miras
a incrementar la pureza de las muestras, en
especial a las obtenidas a partir de la actividad
extracelular del Acetobacter xylium spp, en el
caso de la celulosa o de las semillas de
Phytelephas Macrocarpa Palmae para la manosa.
AGRADECIMIENTO
Los autores expresan su agradecimiento al CIDI-
UPB y Colciencias por el apoyo financiero al
desarrollo de los proyectos de investigación cuyos
resultados se presentan en este trabajo.
Igualmente a los estudiantes del programa de
Ingeniería Mecánica por su motivación y esfuerzo
para el desarrollo del mismo.
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DOI 10.1007/s10570-007-9118-z.
 J. Saldarriaga, R. Zuluaga, C. Álvarez, P. Gañán / Investigaciones Aplicadas No. 2 (2007) 6-12

SOBRE LOS AUTORES

Jorge Saldarriaga

Profesor de la Facultad de Ingeniería Mecánica de

la Universidad Pontificia Bolivariana, Magíster
en Ingeniería Énfasis en Nuevos Materiales. Área
de interés investigativo: polímeros y materiales
compuestos de matriz polimérica.
Robin Zuluaga

Ingeniero Agroindustrial de la Universidad

Pontificia Bolivariana, estudiante de doctorado en
Ingeniería y miembro del Grupo de Investigación
sobre Nuevos Materiales de la misma
Universidad. Área de interés investigativo:
materiales compuestos a partir de fuentes
naturales.
Catalina Álvarez

Ingeniera Agroindustrial de la Universidad

Pontificia Bolivariana, estudiante de doctorado en
Ingeniería y miembro del Grupo de Investigación
sobre Nuevos Materiales de la misma
Universidad. Área de interés investigativo:
materiales compuestos a partir de fuentes
naturales.
Piedad Gañán

Profesor de la Facultad de Ingeniería Mecánica de

la Universidad Pontificia Bolivariana y
Investigador del Grupo de Investigación sobre
Nuevos Materiales de la misma Universidad.
Doctor en Ingeniería de Materiales. Área de
interés investigativo: polímeros y materiales
compuestos de matriz polimérica.

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