QUIMICA

ANALÍTICA PARA INTRODUCCIÓN

BIOTECNOLOGOS PARTE 2

OPERACIONES
COMUNES Y MÉTODOS
QUÍMICOS HÚMEDOS
EN LABORATORIOS
AMBIENTALES
 QUÍMICA ANALÍTICA PARA BIOTECNOLOGOS

OPERACIONES COMUNES Y MÉTODOS QUÍMICOS HÚMEDOS EN

LABORATORIOS AMBIENTALES

INTRODUCCIÓN

Los propósitos de este módulo son (i) presentar algunas de las operaciones esenciales
en los laboratorios ambientales que realizan análisis químicos húmedos junto con la
seguridad y actividades de eliminación de desechos, y (ii) ayudar a comprender los
principios químicos involucrados en la medición de parámetros ambientales comunes
utilizando métodos químicos húmedos.

La importancia de los métodos químicos húmedos se explica por sí misma. El método

químico húmedo basado en gravimetría o volumetría no requiere un equipo costoso y,
por lo tanto, puede emplearse habitualmente en muchos laboratorios ambientales. Los
métodos químicos húmedos no son inferiores, pero son igualmente importantes para el
análisis instrumental. Para algunos parámetros de monitoreo, son absolutamente
necesarios para la preparación de muestras antes del análisis instrumental. Incluso con
un sofisticado análisis instrumental, la precisión de los datos a veces depende de la
calibración cuidadosa usando métodos químicos húmedos clásicos o las técnicas
comunes descritas en este capítulo.

Una característica importante es la descripción de los principios químicos subyacentes

de los métodos químicos húmedos comunes. Las reacciones químicas y la
estequiometría a menudo están excluidas en los libros estándar por la EPA y la APHA
de EE. UU. La comprensión de estos principios fundamentales no solo es importante
para la adquisición de datos de calidad, sino que también es importante para mejorar la
eficiencia del trabajo. En muchos casos, este conocimiento ayuda a resolver el problema
cuando surgen complicaciones al seguir las indicaciones de los métodos estándar, o
cuando se necesitan modificaciones debido a interferencias específicas de la muestra.

1. OPERACIONES BÁSICAS EN LABORATORIOS AMBIENTALES

1.1 Protocolos de limpieza de laboratorio para el análisis de trazas

Las técnicas de limpieza adecuadas son críticas para obtener datos de calidad. Esto es
particularmente esencial para el análisis ambiental de trazas. Una limpieza a fondo
reducirá la posibilidad de obtener resultados erróneos y simplificará los procedimientos
de solución de problemas. A pesar de que ha habido un mayor uso de artículos de
laboratorio desechables, no todos los artículos de laboratorio serán desechables y la
limpieza del laboratorio puede representar una parte significativa (hasta un tercio) del
tiempo de un analista en el análisis de trazas. En un laboratorio multiusuario, como el
caso en entornos académicos, es imperativo no compartir la cristalería y el material
plástico de otras personas. En muchos casos, parece limpio a simple vista, pero, de

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

hecho, contiene suficiente residuo para abrumar por completo la cantidad de un rastro
químico en una muestra ambiental.

La técnica de limpieza varía según el analito de interés: el método de limpieza óptimo

para analizar trazas orgánicas no será el mismo que el método para el análisis de trazas
de metales. Una regla general es que se requiere un lavado con ácido si los metales
traza son los analitos de interés, y un lavado con acetona se requiere mínimamente si
los contaminantes orgánicos traza son los analitos objetivo. Las siguientes son pautas
básicas para la limpieza de rutina, pero pueden no ser relevantes para cada tipo de
análisis:

✓ Inmediatamente después de cada uso, sumerja la cristalería sucia en una solución

de detergente caliente al 2%. No use detergentes domésticos, pero use detergentes
de laboratorio disponibles en el mercado. Cepille bien para limpiar los residuos
obvios, pero evite rayar. Un lavado con detergente no debe usarse si un surfactante
es el analito de interés.

✓ Para el análisis de metales, prepare un baño ácido con 10-15% de HNO3 (excepto
para el análisis de N) o 10-15% de HCl para productos de laboratorio. No se debe
aplicar un enjuague ácido a artículos metálicos como tapas, espátulas y cepillos con
partes metálicas.

✓ Para el análisis de trazas orgánicas, use botellas de lavado llenas de isopropanol,

acetona o metanol de grado pesticida para enjuagar bien la cristalería. La acetona
es la más utilizada.

✓ Entre el lavado con detergente y el lavado con ácido o acetona, use agua corriente
caliente del grifo para permitir que el agua corra dentro y sobre el material de
laboratorio por un corto tiempo, y luego llene cada material con agua, agitando y
vaciando completamente al menos tres veces. Después del lavado con ácido o
acetona, use agua con reactivo para enjuagar al menos tres veces.

✓ Una vez que el material de laboratorio se limpia, seca y almacena adecuadamente

en un lugar que evita la contaminación del polvo en el aire u otras partículas, los
tubos de ensayo, los tubos de cultivo y los matraces se secan al aire en una cesta
con la boca hacia abajo sobre toallas de papel dobladas. Si se utiliza el secado al
horno, no exceda más de 140 ºC para cristalería o 60 ºC para material plástico.
Nunca hornee buretas, pipetas o matraces volumétricos, ya que su precisión de
medición se verá afectada.

✓ En el trabajo biológico, los artículos de vidrio (tubos de serología, placas de Petri)

contaminados con coágulos de sangre o bacterias deben esterilizarse con una
solución desinfectante al 2% o agua hirviendo antes de la limpieza. Si hay virus o
bacterias que contienen esporas, el autoclave es absolutamente necesario.

✓ Para tipos especiales de precipitados, el enfoque preferido es agua regia (HCl

concentrado: HNO3 en una proporción de 3: 1). Esta es una sustancia muy corrosiva
y debe usarse solo cuando sea necesario. Para la cristalería extremadamente sucia
y aquellos con residuos orgánicos coagulados, un lavado con ácido crómico es muy

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

efectivo, pero ha sido desaprobado en muchos países. La solución de limpieza de

ácido crómico se puede preparar agregando 20 g de dicromato de sodio en polvo de
grado técnico en 300 ml de H2SO4 concentrado. Esta solución ahora se reemplaza
con otras soluciones no basadas en cromo, como Nochromix®.

1.2 Pureza del Reactivo Químico, Estándar y Materiales de Referencia

1.2.1 Reactivo de agua

El agua es el solvente analítico más utilizado para la preparación de blancos analíticos,
muestras y soluciones estándar. La mala calidad del agua es uno de los problemas más
fáciles de solucionar, pero su calidad también puede ser uno de los factores menos
conocidos en muchos laboratorios analíticos. Hay muchas formas de preparar agua pura
para cumplir con los requisitos de calidad para el análisis de parámetros orgánicos,
inorgánicos o biológicos. El agua reactiva ha sido definida en tres o cuatro niveles o
tipos de pureza distintos por varias organizaciones profesionales, incluido el Comité
Nacional de Normas de Laboratorio Clínico (NCCLS), el Colegio de Patólogos
Americanos (CAP) y la Sociedad Estadounidense para Pruebas y Materiales (ASTM).
La Tabla 1 es un conjunto de especificaciones de pureza del agua establecidas por
ASTM. Por ejemplo, el agua Tipo I tiene la más alta calidad y puede usarse para
métodos de prueba que requieren mínima interferencia y sesgo. Se prepara por
destilación, desionización u ósmosis inversa seguido de pulido con un desionizador de
lecho mixto y pasando a través de un filtro de membrana de tamaño de poro de 0.2 mm.
Los pasos de pulido eliminan trazas orgánicas, partículas y bacterias. El agua tipo II se
prepara por destilación o desionización y se puede usar si se puede tolerar la presencia
bacteriana. El agua tipo III se puede utilizar para el lavado de cristalería, enjuague
preliminar de cristalería y agua de alimentación para la producción de aguas de mayor
pureza.
Tabla 1: Especificación de agua de grado reactivo ASTM

Tipo
Tipo I Tipo II Tipo IV
III
Materia total, máx. mg / l 0,1 0,1 1,0 2,0
Conductividad eléctrica, máx. mmho / cm a
0,06 1,0 1,0 5,0
25 ºC
Resistividad eléctrica, min. M / cm a 25 ºC 16,67 1,0 1,0 0,2
6,2 –
pH a 25 ºC NS NS 5,0 – 8,0
7,5
Min. tiempo de retención de color de KMNO4,
60 60 10 10
min
10 Sin
Max. sílice soluble ND ND
µg/L límite
NS = no especificado. Las mediciones de pH en aguas reactivas Tipo I y Tipo II no tienen sentido, ya que
los electrodos utilizados en esta prueba contaminan el agua. ND = no detectado.

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

El agua destilada es excelente con respecto a las partículas y bacterias, es buena en

compuestos orgánicos disueltos, pero puede ser pobre en gases ionizados disueltos. El
agua DI es excelente en términos de especies ionizadas, pero pobre en materia orgánica
disuelta, partículas y bacterias. El agua de grado reactivo de mayor pureza es
equivalente al agua Tipo I. El agua reactiva es el agua sin concentración detectable de
compuesto o elemento a analizar en el límite de detección del método analítico (APHA,
1998). Sin embargo, esta definición de agua reactiva tiene un uso limitado.

En la práctica, un indicador utilizado comúnmente para agua de alta calidad es la alta

resistividad (> 10 megaohm-cm a 25 ºC) o la baja conductividad (<0.1 mmho / cm a 25
ºC). Sin embargo, estos parámetros no indican la cantidad de contaminantes orgánicos
o no ionizados, ni proporcionarán una evaluación precisa de los contaminantes iónicos
al nivel de ppb. Afortunadamente, con la mayoría de los sistemas de purificación de
agua disponibles comercialmente, obtener la calidad de agua deseada no es tan
problemático como antes si se sigue un mantenimiento adecuado. Esto, sin embargo,
puede no ser cierto para ciertos análisis instrumentales de trazas. Como Mabic et al.
(2005) señalaron que entre el 70 y el 80% de los problemas de rendimiento de HPLC
son atribuibles directamente a la calidad del agua utilizada en la preparación de
eluyentes, estándares y muestras de HPLC.

1.2.2 Soluciones ácidas y alcalinas comunes

La Tabla 2 enumera las propiedades de los ácidos y bases comerciales comúnmente
utilizados en laboratorios ambientales. Para preparar una solución diluida, agregue con
precaución la cantidad requerida de ácido / alcalino concentrado como se recibió y
mezcle hasta un volumen designado del tipo apropiado de agua destilada. Diluir a 1 L y
mezclar bien.
Tabla 2: Preparación de soluciones ácidas y alcalinas.

Ácido/Base HCl H2SO4 HNO3 H3PO4 NH4OH

Gravedad específica
1,18 1,84 1,42 1,70 0,90
(temperatura ambiente)
% de ingrediente activo en
36 96 71 85 28
conc. reactivo en masa
Molaridad (normalidad) del 11,6 18,0 16,0 14,7 14,8
reactivo concentrado (11,6) (36,0) (16,0) (44,1) (14,8)
Volumen (ml) necesario para
83,3 27,8 64,1 22,71 66,7
preparar 1 L de solución 1 N

1.2.3 Pureza del reactivo

Al preparar una solución, primero se debe decidir qué grado de pureza química se
necesita sobre la base de su propósito analítico y el costo del químico. En general, los
reactivos con el grado más alto disponible se compran para el análisis de trazas
ambientales, particularmente para la preparación de soluciones estándar. Los productos
químicos de baja calidad solo se pueden usar para fines especiales, como la acetona
para lavar la cristalería. Tres grados químicos comunes, en orden decreciente de

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pureza, son ACS, reactivo y técnico. El grado ACS cumple con los requisitos del Comité
de Reactivos Analíticos de la American Chemical Society. El grado de reactivo es
adecuado para la mayoría de los trabajos analíticos y es más que adecuado para el uso
general de laboratorio. Para estos productos químicos de grado analítico (de
investigación), las impurezas especificadas a menudo están en niveles de 10–1,000
ppm. El grado técnico es adecuado para usos industriales generales y su idoneidad para
el uso en laboratorio debe verificarse cuando se sustituyen los grados superiores.

Como no existen especificaciones universales sobre los grados químicos, se pueden

ver varios otros grados en las etiquetas de los contenedores, dependiendo de los tipos
de químicos, los usos finales del químico y la fabricación. Esto puede convertirse en un
factor de confusión si se quiere comparar la pureza de los químicos de varias fuentes.

Los siguientes son algunos ejemplos más de grados químicos: (a) los solventes de
grado HPLC normalmente se recomiendan para su uso en HPLC y todas las
aplicaciones cromatográficas relacionadas; (b) SpectrAR se utiliza para
espectrofotometría; (c) Los solventes ChromAR están especialmente purificados para
su uso en cromatografía; (d) ScitillAR se utiliza en centelleo líquido para análisis
radiactivo; y (e) USP denota productos químicos farmacéuticos probados de acuerdo
con la Farmacopea de los Estados Unidos.

1.2.4 Materiales estándar y de referencia

Los estándares son materiales que contienen una concentración conocida de un analito.
Proporcionan una referencia para determinar concentraciones desconocidas o para
calibrar instrumentos analíticos. Hay dos tipos de soluciones estándar utilizadas en el
análisis de tipo titulación. El estándar primario se prepara a partir de un reactivo que es
extremadamente puro, estable y no tiene aguas de hidratación. Sin estas propiedades,
es difícil obtener una determinación precisa de la masa del estándar. Los productos
químicos que absorben agua o CO2 fácilmente del aire son malos candidatos para los
estándares primarios. Las reacciones entre el estándar y otros químicos deben ser
rápidos, completos y estequiométricos. Los importantes utilizados en el análisis
ambiental son carbonato de sodio (Na2CO3, MW= 105.99), ftalato de hidrógeno y potasio
(KHC8H4O4, MW¼= 204.23), dicromato de potasio (K2Cr2O7, MW= 294.19) y
permanganato de potasio (KMnO4, MW= 158.03). Un estándar secundario es un reactivo
cuya concentración generalmente se estandariza (por ejemplo, mediante valoración)
frente a un estándar primario. Ejemplos son H2SO4, HCl, NaOH y tiosulfato de sodio
(Na2S2O3). Estos productos químicos no pueden prepararse con precisión a partir de
sus formas originales debido a varias razones (concentración indefinida para H2SO4 y
HCl concentrados, absorción de humedad para NaOH e inestabilidad para Na2S2O3).
Debido a que no son tan estables como los estándares primarios, la mayoría de los
estándares secundarios tienen una vida útil corta.

Los Materiales de Referencia Estándar (SRM) son estándares particulares porque sus
concentraciones se conocen en matriz líquida o de muestra (por ejemplo, sedimento).
Por lo general, se compran a un proveedor acreditado o una organización certificadora.
Los SRM se utilizan para establecer la precisión de la instrumentación analítica. La EPA
requiere que los estándares utilizados para la calibración y otros propósitos sean de
pureza conocida y trazables a una fuente de referencia confiable. Mientras que la EPA

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y el Instituto Nacional de Estándares y Tecnología (NIST) han proporcionado depósitos
administrados para los estándares en el pasado, la práctica común en la actualidad
generalmente depende de los proveedores comerciales de SRM. Estos materiales
disponibles comercialmente generalmente se pueden rastrear hasta los estándares de
referencia mantenidos por la EPA o el NIST, y prácticamente todos los proveedores
proporcionan documentos de certificación para la pureza y trazabilidad de los materiales
que suministran.

1.3 Cristalería volumétrica y calibración

Los artículos de vidrio volumétricos están sujetos a error si se usan incorrectamente.
Tenga en cuenta que los vasos de precipitados, los matraces Erlenmeyer y los cilindros
graduados nunca se utilizan para medir con precisión el volumen en la preparación de
soluciones. Solo los matraces, buretas y pipetas volumétricos son lo suficientemente
precisos para medir el volumen. Los matraces volumétricos se calibran a un volumen
específico (5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1000 ml) cuando se llenan hasta la línea
grabada en el cuello. Se usan comúnmente en la preparación de soluciones estándar
para fines de calibración. Las buretas son cilindros graduados especializados en los que
se utiliza una llave de paso en la parte inferior como válvula para controlar la liberación
de la solución en un matraz receptor. Se usan particularmente para la titulación. Las
pipetas se utilizan para transferir volúmenes conocidos de líquido de un recipiente a
otro, que vienen en dos rangos de tamaño principales y los precios difieren
considerablemente: (a) micropipetas con volúmenes menores de 1 ml (1, 10, 50, 100,
500 ml), que incluyen pipetas de jeringa y pipetas automáticas que vienen con puntas
de pipeta desechables. (b) pipetas regulares de vidrio o plástico con un volumen mayor
(1, 2, 5, 10, 25, 50, 100 ml), que se pueden dividir en dos tipos:

- Las pipetas volumétricas entregan volúmenes fijos (1, 2, 5, 10, 25, 50, 100 ml). Las
etiquetadas como Clase A tienen un cierto tiempo en segundo impreso cerca de la
parte superior. Este es el tiempo que transcurre desde el momento en que se suelta
el dedo hasta que la pipeta está vacía. Al vaciar una pipeta volumétrica, se permite
que el líquido drene, pero no se expulsa. Por lo tanto, las pipetas volumétricas no
son pipetas de soplado. También son más precisas que las pipetas de medición.

- Las pipetas de medición tienen líneas de graduación que están calibradas en

unidades convenientes para que se pueda entregar cualquier volumen hasta la
capacidad máxima (1, 2, 5, 10, 25, 50, 100 ml). No son tan precisas como las pipetas
volumétricas debido a que cualquier imperfección en su diámetro interno tendrá un
mayor efecto en el volumen entregado. Se dividen en pipetas serológicas (las
marcas de graduación continúan hasta la punta) y las pipetas de Mohr (las
graduaciones terminan antes de la punta). Tenga en cuenta que las pipetas
serológicas pueden ser de soplado si tienen una banda esmerilada o dos anillos
delgados en la parte superior. Esto significa que después de que todo el líquido haya
sido drenado por gravedad, la última gota restante en la punta también se ve
obligada a salir. La mayoría de las pipetas desechables hoy en día son del tipo
serológico de "soplado". La última gota de la solución se debe soplar con un bulbo
de pipeta.

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

La cristalería volumétrica se calibra para contener (TC) o para entregar (TD). La

cristalería designada TD lo hará con precisión solo cuando la superficie interna esté
limpia para que el agua la moje inmediatamente y forme una película uniforme al
vaciarse. Esta película delgada no será parte del volumen entregado. Si la cristalería se
designa TC, se calibra que la película debe ser parte del volumen contenido. Las pipetas
marcadas con TC están diseñadas para transferir soluciones generalmente viscosas, y
una película delgada que quede dentro debe enjuagarse con un solvente adecuado.

Consejos prácticos

✓ Para calibrar un dispositivo volumétrico, pese un cierto volumen de agua en la

balanza analítica. Por ejemplo, un agua de 1 ml debe estar cerca de 1.0000 g.
✓ Para minimizar el error al medir las pipetas, es una buena práctica no utilizar la parte
de la punta de la pipeta. Por ejemplo, use solo un máximo de 4 ml para una pipeta
de 5 ml. Alternativamente, dado que casi todas las pipetas serológicas tienen un ml
adicional marcado por encima de la línea de 0 ml, la precisión puede mejorarse al
no usar el líquido de 1 ml cerca de la punta.
✓ No utilice pipetas desechables para ciertos solventes hidrofóbicos como el hexano
y el cloroformo. Estos solventes fuertes disolverán las pipetas desechables, por lo
tanto, se recomiendan las pipetas de vidrio.
✓ No sumerja la porción marcada de las pipetas en el líquido, ya que pueden
contaminar la solución.

2. MÉTODOS QUÍMICOS HÚMEDOS Y TÉCNICAS COMUNES EN EL ANÁLISIS

AMBIENTAL

2.1 Métodos químicos húmedos gravimétricos y volumétricos

La medida esencial involucrada en los métodos gravimétricos es pesar con una balanza
analítica. Los métodos gravimétricos rara vez se usan en el análisis de contaminantes
ambientales porque sus concentraciones son a menudo bajas en el rango de menor a
menor nivel. Los métodos gravimétricos se usan solo para unos pocos parámetros,
como sólidos, humedad, sulfato y aceite y grasa. El análisis volumétrico (es decir,
titrimétrico), por el contrario, todavía encuentra amplias aplicaciones para la medición
de una variedad de parámetros importantes. Aunque las titulaciones se pueden realizar
automáticamente (en su mayoría mediante instrumentos basados en electroquímica), la
simplicidad de la titulación manual basada en bureta apunta a muchas aplicaciones
empleadas en el análisis ambiental.

La valoración se basa en las relaciones estequiométricas simples de las reacciones

químicas. Si bien la titulación se puede realizar con muchos dispositivos de titulación
electroquímica, los métodos titrimétricos clásicos se basan en un cambio de color
mediante indicadores. La química subyacente al cambio de color se basa en una de las
siguientes cuatro reacciones principales: (a) reacción ácido-base, (b) reacción de
oxidación-reducción (redox), (c) reacción de complejación / quelación y (d) reacción de
precipitación. Cada una de estas reacciones tiene sus aplicaciones únicas en

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

mediciones ambientales. Por ejemplo, las valoraciones basadas en redox son aplicables
a metales de transición o elementos que poseen más de un estado de oxidación. Las
titulaciones ácido-base pueden emplearse para compuestos inorgánicos u orgánicos
ácidos / básicos, y el indicador cambia de color a un rango de pH específico durante la
titulación.

2.2 Técnicas comunes de laboratorio

Las técnicas básicas de laboratorio introducidas aquí no solo están relacionadas con los
métodos químicos húmedos, sino también con los conceptos básicos de todas las fases
del trabajo de laboratorio ambiental. Se presentan brevemente varios puntos clave o
incluso dificultades para cada una de estas técnicas.

Filtración

La filtración se utiliza para eliminar (recoger) materiales de una matriz líquida o de aire
en la que los materiales están suspendidos. Los medios de filtro pueden ser papeles de
filtro de varios tipos o bajo filtración por gravedad o filtración de vacío (succión) usando
un aspirador de agua o una bomba de vacío. La filtración se utiliza para el análisis de
sólidos en suspensión en agua, o el análisis de contaminantes en fase disuelta después
de la eliminación de sólidos en suspensión. En el muestreo de aire, el medio filtrante se
conecta con una bomba de muestreo para recoger partículas atmosféricas. Para el
análisis cuantitativo de sólidos, utilice papeles de filtro cuantitativos sin cenizas como
Whatman y Schleicher & Schuell. Para eliminar (recoger) partículas pequeñas con
tamaños de poro de 0.025 a 14 µm, use solo filtros de membrana como Millipore y
Gelman. Los de 0.22 µm son los más comunes en la eliminación de bacterias o la
recolección de partículas coloidales. Los filtros de membrana tienen una estructura
polimérica delgada con poros extraordinariamente finos. Cuando se utiliza filtración al
vacío, use papeles de grado endurecido y matraces de pared gruesa. Los papeles de
grado endurecido tienen una gran resistencia a la humedad para mantener el vacío.

Centrifugación

Una centrífuga se usa para separar sólidos o partículas líquidas de diferentes

densidades o tamaños al rotarlos en un tubo de centrífuga. Si se van a separar partículas
coloidales o macromoléculas (proteínas, ácidos nucleicos), se usa una ultracentrífuga a
una velocidad mayor. La centrífuga de baja velocidad puede ejecutar hasta 5.000
revoluciones por minuto (rpm) y la ultracentrífuga de alta velocidad puede ejecutar hasta
100.000 rpm. Otra forma de centrífuga común es la microcentrífuga utilizada con tubos
de plástico desechables de 0,5 o 1,5 ml, que pueden generar de 10,000 a 13,000 rpm.
A continuación, se presentan las precauciones comunes: (a) Utilice siempre pares de
tubos de centrífuga equilibrados. El equilibrio es extremadamente importante para evitar
el calentamiento excesivo y las vibraciones o incluso dañar la centrífuga. Apague de
inmediato si se producen vibraciones o ruidos. (b) Nunca llene los tubos de centrífuga
por encima del máximo recomendado por el fabricante. Utilice solo tubos de centrífuga
con cojines protectores de goma. Los tubos de ensayo normales no soportarán la fuerza
centrífuga y se romperán. (c) Asegure completamente el rotor y el sello del rotor antes
de la operación. Los rotores en centrífugas de alta velocidad o unidades de
ultracentrífuga están sujetos a una tensión mecánica poderosa que puede provocar la

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falla del rotor. En el caso extremo, la carga y el equilibrio incorrectos de los rotores
pueden hacer que los rotores se suelten mientras giran, lo que da como resultado un
daño total de la centrífuga, fragmentos de metal volador y ondas de choque.

Destilación

La destilación es el procedimiento necesario para el análisis de amonio, cianuro, sulfuro

y fenol. El dispositivo de destilación consiste en un matraz de destilación, un
condensador de agua de enfriamiento y un matraz receptor para recoger el destilado.
Cuando el matraz de destilación que contiene productos químicos volátiles se calienta,
el componente más volátil se vaporiza a la temperatura más baja, y el vapor pasa a
través de un tubo enfriado (condensador), donde se condensa nuevamente en su estado
líquido en el matraz receptor. Use destilación al vacío si el compuesto se descompondrá
a presión atmosférica antes de alcanzar su punto de ebullición.

Reflujo

El reflujo se usa en el análisis de COD donde los compuestos orgánicos se oxidan

mediante un agente oxidante fuerte en condiciones de calentamiento y acidez. Un
aparato de reflujo permite que una mezcla de reacción se caliente durante un período
prolongado de tiempo sin pérdida de agua o disolvente. El vapor de agua o disolvente
se refluye a la mezcla de reacción mediante un condensador que se une verticalmente
al matraz calentado. Un dispositivo de reflujo es similar a la destilación en cierto sentido,
por lo tanto, las reglas operativas y de seguridad también se aplican al reflujo.

Concentración

El aparato de concentración es común en todos los laboratorios que realizan análisis de

trazas. El aparato puede ser tan simple como una corriente suave de N2 desde un
cilindro de gas, o un aparato de vidrio como el concentrador evaporativo Kuderna-
Danish (K-D) o un evaporador rotativo (rotavap) (Fig. 1). Su propósito es eliminar el
exceso de solvente de la mezcla de analito y solvente para que la concentración de
analitos sea lo suficientemente alta como para ser detectada.

En un concentrador K-D, se deben agregar chips de ebullición y se debe colocar el

conjunto sobre un baño de agua hirviendo vigorosamente. El nivel del agua debe
mantenerse justo debajo de la junta inferior y el aparato montado de modo que la
superficie redondeada inferior del matraz se bañe con vapor. Se permite que el solvente
volátil se escape debajo de la campana, y el analito refluye hasta que el concentrado
final se recoge en el tubo inferior de aproximadamente 1–2 ml.

En un rotavapor, el matraz de destilación giratorio se baja a un baño de agua donde la

temperatura del agua no debe exceder el punto de ebullición del disolvente. El disolvente
se elimina al vacío (con un simple aspirador de agua o una bomba de vacío), queda
atrapado por un condensador y se recoge en el matraz receptor. Si las muestras
contienen solventes muy volátiles como el éter dietílico o el cloruro de metileno, algunos
solventes en el matraz receptor pueden evaporarse y perderse al vacío. Para evitar esto,
se puede usar un baño de enfriamiento en el receptor o un condensador de hielo seco.

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

Figura 1: Aparatos utilizados para concentrar: (a) Concentrador evaporativo Kuderna-Danish (K-D) y (b)
Evaporador rotativo (rotavap)

Digestión

La digestión se usa comúnmente para metales, fósforo total y nitrógeno total en

condiciones de calor. El procedimiento de digestión descompone una sustancia unida
orgánicamente y convierte la sustancia en la forma analizada mediante el uso de
agentes oxidantes líquidos como H2SO4, HNO3, HClO4, HCl, o el uso de mezclas
oxidantes como agua regia. A veces, la adición de bromo (Br2) o H2O2 a los ácidos
minerales aumentará su acción solvente y acelerará la oxidación de los materiales
orgánicos en la muestra. Si se necesita la descomposición de silicatos, se usa HF, pero
nunca use recipientes de vidrio con HF. La digestión es a veces peligrosa,
particularmente si la muestra contiene una gran cantidad de compuestos orgánicos.

Extracción

Los productos químicos tienen diferentes solubilidades en diferentes solventes, que

pueden usarse para eliminar selectivamente un soluto de una mezcla. Este proceso de
extracción a menudo se usa como preparación de muestras para concentrar trazas de
compuestos orgánicos. Dos procedimientos de extracción clásicos son la extracción
líquido-líquido (L – L) utilizando un embudo separador para muestras líquidas, y la
extracción Soxhlet para muestras sólidas (suelo, lodo).

Asegúrese de que se recolecte (deseche) la fase correcta en la extracción L – L. El

dietiléter, el benceno, el éter de petróleo y el hexano son más livianos que el agua,
mientras que el cloroformo, el dicloruro de etileno, el cloruro de metileno y el
tetraclorometano son más pesados que el agua.

10
3. PRINCIPIOS ANALÍTICOS PARA MÉTODOS QUÍMICOS HÚMEDOS COMUNES
En esta sección se analizan algunos de los métodos de química húmeda más comunes
que tal vez se emplean habitualmente en muchos laboratorios ambientales (Sanyer et
al., 1994; Smith, 1997; Williams, 2001). Nos centramos aquí en la química subyacente
y los principios operativos para la medición de estos parámetros seleccionados. Los
detalles de estos métodos se pueden encontrar en los métodos de las series EPA 100–
400 o APHA 2000, 4000 y 5000.

3.1 Humedad en muestras sólidas y biológicas

El contenido de humedad de las muestras sólidas (suelo, lodos, sedimentos) y
biológicos debe medirse de modo que la concentración de contaminantes pueda
notificarse en seco. Esta determinación implica pesar una porción de la muestra en un
crisol alquitranado, secar hasta un peso constante a 104 ° C y luego calcular el
porcentaje de humedad mediante:
𝑝𝑒𝑠𝑜 ℎú𝑚𝑒𝑑𝑜 − 𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑠𝑒𝑐𝑜
% 𝑑𝑒 𝐻𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑 = ( ) ∗ 100
𝑝𝑒𝑠𝑜 ℎú𝑚𝑒𝑑𝑜
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑒𝑛 𝑏𝑎𝑠𝑒 ℎú𝑚𝑒𝑑𝑎
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 (𝑏𝑎𝑠𝑒 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑠𝑒𝑐𝑜) =
100 − % 𝑑𝑒 ℎ𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑

3.2 Sólidos en agua, aguas residuales y lodos (TS, TSS, TDS, VS)
Los sólidos son la materia suspendida o disuelta en agua o aguas residuales. Las aguas
con alto contenido de sólidos disueltos (minerales) no son aptas para beber ni para usos
industriales. Los sólidos suspendidos en aguas superficiales y efluentes de aguas
residuales son estéticamente insatisfactorios e indeseables desde el punto de vista de
la calidad del agua. Los sólidos (lodos) en las aguas residuales están relacionados con
la biomasa en el proceso biológico y, por lo tanto, son un parámetro importante de
control del proceso. Como se describe a continuación, hay varios tipos de sólidos que
pueden medirse gravimétricamente y volumétricamente.

Sólidos totales (TS)

"Sólidos totales" es el término aplicado al residuo de material que queda en el recipiente

después de la evaporación de una muestra y su posterior secado en un horno a una
temperatura definida. Los sólidos totales (TS) incluyen los sólidos suspendidos totales
(TSS) y los sólidos disueltos totales (TDS), es decir, TS = TSS + TDS.

Total de sólidos suspendidos y total de sólidos disueltos

TSS es la porción del total de sólidos retenidos por un filtro (el tamaño de poro de 0.45
µm es el más común), mientras que TDS es la porción que pasa a través del filtro. La
temperatura a la que se seca el residuo tiene una influencia importante en los resultados,
porque las pérdidas de peso debido a la volatilización de la materia orgánica, el agua

11
ocluida mecánicamente, el agua de cristalización, los gases de la descomposición
química inducida por el calor, así como las ganancias de peso debido a la oxidación,
depende de la temperatura y el tiempo de calentamiento. Cada muestra requiere mucha
atención a la desecación después del secado. Tenga en cuenta las diferentes
temperaturas utilizadas para la medición de TSS (104 ± 1 ºC) y TDS (180 ± 2 ºC). Debido
a la diferencia de temperatura, en la práctica, la ecuación TS = TSS + TDS puede no
funcionar para algunas muestras.

Sólidos Volátiles (VS)

Esta es la diferencia entre los sólidos secos y la misma muestra encendida

adicionalmente a 550 ± 50 ºC en un horno de mufla. VS es útil en el control de la
operación de la planta de tratamiento de aguas residuales porque se aproxima a la
cantidad de materia orgánica en la fracción sólida. Por lo tanto, TVS = TS - TSash; TVSS
= TSS - TSSash; TVDS = TDS TDSash. "Ceniza (ash)" es el residuo a 550 ± 50 ºC en un
horno de mufla.

Sólidos Asentables

Los sólidos sedimentables se pueden medir gravimétricamente o volumétricamente. El

método volumétrico común se define como el volumen (ml) de sólidos sedimentables
por litro de aguas residuales después de 1 h de sedimentación en condiciones de reposo
(ml / L). Normalmente se realiza en un cono Imhoff, que es simplemente un recipiente
de plástico en forma de cono con un volumen de retención de 1 L y el lado del cono
graduado en ml. Los sólidos sedimentables se pueden usar para estimar el índice de
volumen de lodo (SVI), que representa el volumen (ml) ocupado por 1 g de lodo activado
después de 30 minutos de sedimentación, es decir, SVI (ml / g) = sólidos sedimentables
(ml / L) / TSS (g / L). Un SVI alto (> 100) indica una mala calidad de sedimentación y un
posible problema de volumen en el clarificador secundario de la planta de tratamiento
de aguas residuales.

3.3 Acidez, alcalinidad y dureza de las aguas

Acidez

Todas las aguas que tienen un pH inferior a aproximadamente 8.3 deben contener
acidez. La acidez es la capacidad del agua para neutralizar una base (OH). Las fuentes
de acidez en el agua natural incluyen CO2 (aire, degradación bacteriana), H2PO4, H2S,
proteínas, ácidos grasos y sal de metales trivalentes como Fe3+ y Al3+ hidratados. En el
agua contaminada, la acidez puede ser causada por el ácido mineral libre (H2SO4, HCl)
de la industria metalúrgica, el drenaje ácido de minas, la lluvia ácida y los desechos
ácidos orgánicos.

Para medir la acidez, se utilizan una solución alcalina (NaOH) y dos indicadores. El
primer indicador (naranja de metilo) cambia de color de rojo a amarillo a un pH
aproximado de 3.7. Esto corresponde a la acidez mineral o la acidez de naranja de
metilo. Si se continúa valorando NaOH, el segundo indicador de fenolftaleína cambia de

12
color de incoloro a rosa a pH 8,3. La valoración hasta el punto final de fenolftaleína de
pH 8.3 mide la acidez de los ácidos minerales y ácidos débiles. Esta acidez total también
se denomina acidez de fenolftaleína.

Para calcular la acidez mineral o la acidez total a partir de los datos de titulación, la
cantidad de NaOH debe convertirse a la cantidad equivalente de CaCO3 (en mg) por
litro de agua. Como el peso molecular (MW) de CaCO3 es 100 g / mol o 1 x105 mg / mol,
su peso equivalente es ½ MW o 5 x104. Esto se usa como factor de conversión para que
la acidez se pueda informar como mg de CaCO3 / L:

𝑁 ∗ 𝑉 ∗ 5 ∗ 104
𝐴𝑐𝑖𝑑é𝑧 =
𝑉𝑠

donde N es la normalidad de la base utilizada en la valoración y Vs el volumen de la

muestra de agua (ml), V el volumen de la base utilizada en la valoración (ml). Para la
acidez mineral, se necesitan V = mL de NaOH hasta el primer punto final (pH 3.7) y para
la acidez total, se necesitan V = mL de NaOH para el segundo punto final (pH 8.3).

Alcalinidad

La alcalinidad es la capacidad del agua para neutralizar un ácido (H+). En agua natural,
la alcalinidad se debe al H2CO3 (CO2 disuelto en agua). La alcalinidad de otros
materiales es insignificante y puede ser ignorada. En aguas contaminadas, pequeñas
cantidades de NH3 y sales de ácidos débiles como borato, silicato y fosfato (es decir, las
bases conjugadas de HBO3, H4SiO4, H3PO4) y ácidos orgánicos contribuirán a la
alcalinidad. El procedimiento de titulación puede distinguir dos tipos de alcalinidad, es
decir, alcalinidad de fenolftaleína y alcalinidad total (alcalinidad de naranja de metilo).
La alcalinidad de la fenolftaleína es el poder neutralizador de ácido de los iones de
hidróxido y carbonato (HO- y CO2-3) presentes en la muestra de agua, mientras que la
alcalinidad total representa todas las bases en ella (HO-, CO2-3 y HCO3-).

El procedimiento de titulación para la alcalinidad es exactamente lo contrario del

procedimiento para la acidez. Se usa ácido (H2SO4) en lugar de NaOH para la titulación
y se usan los dos mismos indicadores, pero en el orden inverso. El procedimiento utiliza
el primer indicador, fenolftaleína, para señalar los puntos finales (pH 8,3) en la valoración
de HO- y CO2-3. Una valoración adicional con H2SO4 alcanza el punto final del segundo
indicador (naranja de metilo) a un pH de alrededor de 4.5, que mide la alcalinidad total.
Tenga en cuenta que el pH para el cambio de color no está en un valor fijo, sino más
bien en un rango, es decir, pH 3.1–4.4 y pH 8.0–9.6 para metil naranja y fenolftaleína,
respectivamente.

Al igual que la acidez, la alcalinidad también se informa comúnmente como mg de

CaCO3 / L, por lo tanto, la ecuación anterior de acidez puede usarse para calcular tanto
la alcalinidad de fenolftaleína como la alcalinidad total. Para alcalinidad, el volumen (V)
y la concentración (N) se refieren a H2SO4 en lugar de NaOH. Para interpretar los
resultados de acidez y alcalinidad, uno debe conocer su significado físico y su diferencia
con el pH comúnmente medido. Aunque el agua con una alta acidez (acidez mineral) es
corrosiva e indeseable, el agua con una alta alcalinidad puede no ser totalmente
indeseable. En algunos casos, se debe mantener un nivel adecuado de alcalinidad para

13
 ESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

retener la capacidad de amortiguación del agua. La acidez o alcalinidad están

relacionadas con el pH, pero difieren en que el pH es un parámetro intensivo, que es
independiente del volumen de agua.

Dureza

La dureza del agua es causada por cationes metálicos multivalentes, principalmente el

Ca2+ y el Mg2+ divalentes. Los aniones y los cationes monovalentes como Na+ y K+ no
contribuyen a la dureza. El agua dura afecta negativamente la idoneidad del agua para
usos domésticos e industriales. Las aguas duras producen incrustaciones en tuberías
de agua caliente, calentadores y calderas. También requieren cantidades considerables
de jabón para producir espuma. Si hay disponibles instrumentos de medición directa (es
decir, AA o ICP), la dureza del agua se puede calcular a partir de las concentraciones
medidas de Ca2+ y Mg2+.

3.4 Demanda de oxígeno en agua y aguas residuales (DO, BOD y COD)

Oxígeno disuelto

El OD en el agua natural se origina en el oxígeno molecular (O2) en la atmósfera. La

atmósfera tiene 20.95% de O2 en volumen de aire seco, pero el OD en el agua está
típicamente en el nivel de mg / L debido a la baja solubilidad del O2. Muchos organismos
acuáticos no pueden sobrevivir si el OD se agota por debajo de 4 mg / L. En el proceso
biológico aeróbico, el OD se suministra por aireación, mientras que en el proceso
anaeróbico el OD es perjudicial para las bacterias y debe eliminarse. La cantidad de OD
en el agua natural depende de muchos factores físicos, químicos y bioquímicos:
aireación, viento, velocidad del flujo de agua, algas, temperatura, presión atmosférica,
compuestos orgánicos, contenido de sal, bacterias, animales, etc. El oxígeno disuelto
en el agua contaminada depende en gran medida de la cantidad y los tipos de
contaminantes y, por lo tanto, de la presencia de bacterias, es un parámetro importante
para la evaluación de la calidad del agua. Con mayor frecuencia, los contaminantes que
consumen oxígeno son compuestos orgánicos (proteínas, azúcar y ácidos grasos) que
las bacterias aeróbicas biodegradan fácilmente, aunque en algunos casos los
contaminantes inorgánicos en formas reducidas también consumirán una cantidad
significativa de oxígeno.

Hay dos métodos para el análisis de OD: el método clásico de Winkler (método
yodométrico) y el método de electrodo de membrana polar. El procedimiento de
electrodo de membrana es un método electroquímico basado en la velocidad de difusión
del oxígeno molecular a través de una membrana, que es el método más común para la
medición in situ. El método yodométrico es un procedimiento titrimétrico basado en la
propiedad oxidante del OD. Esta prueba yodométrica es el método más preciso y
confiable para el análisis de OD; en algunos casos, se usa para calibrar el método del
electrodo.

14
 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

Demanda bioquímica de oxígeno (DBO)

La DBO se refiere a la cantidad de oxígeno que se consumiría si todas las sustancias

orgánicas biodegradables en un litro de agua fueran oxidadas por bacterias aeróbicas.
La prueba de DBO se basa en la determinación de OD. Para la prueba estándar de 5
días de DBO5, se utilizan botellas de DBO de 300 ml (tapón de sellado de agua cónico),
saturadas con OD a aproximadamente 9 mg / L, y se mide el OD inicial (DO 0). Las
muestras paralelas se incuban a 20 °C en la oscuridad durante 5 días, y el OD se mide
nuevamente (DO5). La DBO5 se calcula como:
𝑚𝑔
𝐵𝑂𝐷5 ( ) = 𝐷𝑂0 − 𝐷𝑂5
𝐿
El método directo anterior es para muestras con DBO5 de menos de 7 mg / L. Sin
embargo, la mayoría de las muestras de aguas residuales exceden este valor, y se
necesita una dilución en serie. Las diluciones utilizables deben tener un OD inicial de 7–
9 mg / L y valores finales de> 1 mg / L, y se requiere un agotamiento mínimo entre el
OD inicial y final de 2.0 mg / L para calcular con precisión la DBO. También es crítico
asegurar la presencia de nutrientes esenciales (sales de Ca, Mg, Fe y tampón fosfato),
la ausencia de materiales tóxicos y la inoculación con semillas de microorganismos
múltiples.

Demanda química de oxígeno (DQO)

Una prueba de DBO proporciona la medida más cercana de los procesos que realmente
ocurren en el sistema de agua natural. Sin embargo, esta prueba lleva mucho tiempo (5
días) e involucra muchos factores inciertos como el origen, la concentración, los
contaminantes, el número y la viabilidad de los microorganismos activos presentes que
afectan la oxidación de todos los contaminantes. La prueba de DQO se usa como una
medida del equivalente de oxígeno del contenido de materia orgánica de una muestra
que es susceptible a la oxidación por un oxidante químico fuerte en oposición a la
oxidación biológica en la prueba de DBO.

En una prueba de DQO, los resultados se pueden obtener en 2 horas o menos. Además,
el método es simple y económico. Cuando las aguas residuales contienen solo materia
orgánica fácilmente oxidable y están libres de toxinas, los resultados de una prueba de
DQO proporcionan una buena estimación de la DBO. Una desventaja del método es
que el dicromato puede oxidar materiales que normalmente no se oxidarían en la
naturaleza. Por lo tanto, la prueba de DQO no puede diferenciar entre materia orgánica
biológicamente oxidable y biológicamente inerte. La prueba de DQO también puede
generar un gran volumen de desechos líquidos peligrosos (ácido, cromo, plata y
mercurio).

3.5 Aceite y grasa en agua y aguas residuales

El término "aceite" representa una amplia variedad de sustancias, desde hidrocarburos
de bajo a alto peso molecular que se encuentran en el petróleo hasta gasolina ligera,
combustible pesado y aceites lubricantes. "Grasa" representa hidrocarburos de mayor
peso molecular y todos los glicéridos de origen animal y vegetal. El término "aceite y

15
 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

grasa" se define por el procedimiento operativo en lugar de la representación de distintos

productos químicos o grupos de compuestos.

El método de partición gravimétrica descrito en este documento incluye la acidificación

y extracción seguida de una medición gravimétrica. Se requiere acidificación antes de
la extracción si hay ácidos grasos presentes en la muestra. Los ácidos grasos se
presentan principalmente en forma precipitada como sales de Ca y Mg con jabones.
Como tales, son insolubles en los solventes. La acidificación con HCl a PH 1.0 liberará
los ácidos grasos libres para el análisis.

Luego se usa hexano para extraer aceite y grasa en un embudo separador. La fase
extraída se drena a un matraz de destilación alquitranada a través de Na2SO4 anhidro
para eliminar el agua residual, y luego el hexano se separa por evaporación en un
dispositivo de destilación (el punto de ebullición es de 69 °C para el hexano; mantenga
la temperatura del baño de agua a 85 °C). El matraz alquitranado se pesa nuevamente
y la ganancia en el peso del matraz alquitranado se debe al aceite y la grasa.

La modificación del procedimiento anterior es necesaria para muestras sólidas como el

lodo. El método para muestras sólidas consiste en pesar una cantidad definida de
muestra, acidificarla para liberar ácidos grasos y luego agregar suficiente MgSO 4.H2O
para combinar con toda el agua libre formando formas hidratadas más altas,
MgSO4.7H2O para facilitar la extracción con hexano. La extracción se realiza luego en
un extractor Soxhlet en lugar de un embudo separador para muestras líquidas.

3.6 Cloro residual y cloruro en agua potable

Cloro residual

La desinfección con cloro gaseoso (Cl2) es la más utilizada en el suministro de agua

doméstica y en las plantas de tratamiento de aguas residuales. Cuando se agrega cloro
al agua, se hidroliza rápidamente para formar ácido hipocloroso (HOCl) y ácido
clorhídrico (HCl). HOCl es un ácido débil que se puede disociar aún más en hipoclorito
(OCl-). Las reacciones son:

En equilibrio, la fase acuosa Cl2 normalmente es insignificante por encima de pH 3. Por

lo tanto, las dos especies formadas por Cl2 en agua son principalmente HOCl y OCl-.
Estas dos especies se denominan residuos de cloro libre que tienen la capacidad de
desinfección para matar bacterias y patógenos. A diferencia de HOCl y OCl-, el cloruro
(Cl-) no es efectivo en la desinfección en absoluto.

En presencia de amoníaco (a veces se agrega intencionalmente), se producirán las

siguientes reacciones para formar mono, di y tricloroaminas:

16
 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

Las cloroaminas se denominan residuos combinados de cloro. Son menos efectivos en

la desinfección, pero pueden durar más tiempo, lo cual es esencial para la desinfección
continua en los conductos de distribución de agua.

Los manuales actuales de EPA y APHA enumeran tres métodos titrimétricos junto con
varios otros métodos instrumentales para la medición de cloro residual. Estos tres
métodos titrimétricos son (a) titulación yodométrica, (b) titulación inversa yodométrica y
(c) titulación DPD-FAS. El método yodométrico es aplicable a la medición de los
residuos de cloro total en aguas naturales y tratadas a concentraciones superiores a 0.1
mg / L. El método de titulación inversa yodométrica es aplicable a todos los tipos de
aguas, pero se utiliza principalmente para aguas residuales. Tanto el método de
titulación inversa como el método DPD-FAS son adecuados para diferenciar cloro libre
y cloro combinado. Estos tres métodos químicos húmedos son comúnmente empleados
en laboratorios debido a su simplicidad.

Cloruro

La medición del cloruro (Cl-) es necesaria para determinar la idoneidad del agua para
usos domésticos, industriales o agrícolas. La alta concentración de cloruro puede ser el
resultado de la intrusión de agua de mar debido al bombeo excesivo de agua
subterránea, la evaporación del agua regada que deja sales en el suelo o la descarga
de excreta humana en las aguas residuales municipales. Además, el cloruro es un
marcador común en el destino químico y en los estudios de transporte, cuando se
requiere un método analítico simple y confiable. Hay dos métodos químicos húmedos
disponibles para la medición de cloruro. La selección es en gran medida una cuestión
de preferencia personal. El método argentométrico (método de Mohr) es adecuado para
agua relativamente limpia cuando hay 0,15 a 10 mg de Cl- en la porción titulada. El punto
final del método de nitrato mercúrico es más fácil de detectar.

- Método Argentométrico (Método Mohr)

En una solución neutral o ligeramente alcalina, el cromato de potasio (CrO42-) puede
indicar el punto final de la valoración del nitrato de plata para una solución que contiene
Cl-. El cloruro de plata (AgCl, Ksp = 3x10-10) se precipita cuantitativamente antes de que
se forme el cromato de plata naranja (Ag2CrO4, Ksp = 5x10-12).

- Método de nitrato mercúrico

Cl- se titula con nitrato mercúrico, Hg (NO3)2, debido a la formación de cloruro mercúrico
soluble, ligeramente disociado. En el rango de pH de 2.3 a 2.8, la difenilcarbazona (DPC)
indica el punto final de la titulación por la formación de un complejo púrpura con exceso
de iones mercúricos.

17
 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

3.7 Amoníaco en aguas residuales

El amoníaco se produce principalmente por descomposición de compuestos orgánicos
que contienen nitrógeno y por hidrólisis de urea en las aguas residuales. La
concentración de amonio en las aguas superficiales y subterráneas suele ser baja. El
método titrimético se puede usar directamente en el caso de agua potable o aguas
residuales altamente purificadas. Se necesita un paso de destilación preliminar para
otras matrices de muestra, que transfiere NH3 a un matraz receptor que contiene ácido
borato de pH 9 (H3BO3). El amoníaco en el destilado se titula con H2SO4 en presencia
de un indicador mixto (rojo de metilo y azul de metileno). La muestra se titula luego hasta
que se torna lavanda pálida.

3.8 Cianuro en agua, aguas residuales y extracto de suelo

El cianuro se refiere a todos los grupos de cianuro en los compuestos de cianuro que
pueden determinarse como el ion cianuro (CN-), que es la base conjugada del gas HCN
más tóxico. El cianuro a menudo está presente en forma de un complejo metálico, que
es estable y menos tóxico. Los cianuros unidos orgánicamente, como los acrilonitrilos
(cianoeteno) son químicos industriales importantes. Los cianuros se usan en plásticos,
galvanoplastia, metalurgia, fibras sintéticas y productos químicos. El método titrimétrico
es aplicable si la concentración de cianuro es superior a 1 mg / L en la muestra acuosa
o el destilado de las aguas residuales, el suelo o el extracto de desechos.

Primero, el cianuro de hidrógeno (HCN) se libera de una muestra acidificada por

destilación y purga con aire a través de una solución de lavado que contiene NaOH. La
concentración de cianuro en la solución de lavado se titula con nitrato de plata estándar
(AgNO3) para formar el complejo de cianuro soluble, Ag (CN)2-. Tan pronto como todo
el CN- se ha complejado y se ha agregado un pequeño exceso de Ag+, el exceso de Ag+
se combina con un indicador de rodadanina sensible a la plata, que inmediatamente
cambia la solución de amarillo a marrón-rosado. La valoración se basa en la siguiente
reacción:

18
 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

La concentración de CN- en mg / L en la muestra original se puede calcular de la

siguiente manera. Nuevamente, el lector debe conocer los principios operativos y la
estequiometría detrás de esta fórmula.

donde A es el ml de AgNO3 para la titulación de la muestra, B el ml de AgNO3 para la

titulación del blanco, C el ml de la muestra titulada, D la normalidad real de AgNO3, E el
ml de la muestra después de la destilación, F el ml de la muestra original utilizada para
la destilación.

3.9 Sulfuro en agua y desechos

El sulfuro a menudo está presente en el agua subterránea debido a las condiciones
reductoras prevalentes. En los desechos y las aguas residuales, el sulfuro proviene en
parte de la descomposición anaeróbica de la materia orgánica, y principalmente de la
reducción bacteriana del sulfato (SO2-4). El término "sulfuro" puede incluir sulfuro de
hidrógeno (H2S, disuelto y sindicalizado), bisulfuro (HS) y sulfuro (S2-), todo en formas
disueltas. A un pH ambientalmente relevante, S2- es a menudo insignificante. Además,
el "sulfuro" también está presente como sulfuros metálicos; algunos de ellos son
"solubles en ácido" (ZnS) y otros son "insolubles en ácido" como CuS y SnS2. Estos
sulfuros metálicos tienen una solubilidad en agua muy baja y, por lo tanto, son los
precipitados asociados con la materia suspendida en agua, suelos o sedimentos.

Al igual que varios otros parámetros discutidos anteriormente, el sulfuro también puede
determinarse mediante un método yodométrico basado en la valoración. Las muestras
de sulfuro se conservan mediante la adición de acetato de zinc y NaOH para mantener
un pH> 9. El precipitado de sulfuro de zinc se oxida a azufre con la adición de un exceso
de yodo (I2) en solución ácida. Luego, el yodo restante se determina mediante valoración
con una solución estándar de tiosulfato de sodio hasta que el complejo azul de yodo-
almidón desaparezca.

Este método titrimétrico es aplicable a todos los efluentes y materiales de desecho

sólidos acuosos. Los procedimientos específicos pueden diferir ligeramente
dependiendo de las matrices y las formas de las especies de sulfuro a medir. La
destilación no es necesaria para muestras acuosas limpias, pero en la mayoría de los
casos, se requiere. El sulfuro se separa de la muestra mediante la adición de H2SO4, se
calienta a 70 °C y el H2S resultante se transporta mediante una corriente de N2 en
botellas de lavado con gas de acetato de zinc, donde se precipita como ZnS. Este
pretratamiento medirá todas las especies de sulfuro solubles en ácido. Si este paso se
reemplaza por la adición de HCl, cloruro de estaño (II) y 100 ºC, se puede liberar y
determinar semi cuantitativamente sulfuro "insoluble en ácido". El estaño (II) se agrega
para evitar la oxidación de sulfuro a azufre por los iones metálicos como Cu2+.

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 MUESTREO Y ANÁLISIS AMBIENTAL

BIBLIOGRAFÍA

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