EVALUACIÓN DE Trichoderma spp COMO MICROORGANISMO

ANTAGONISTA FRENTE AL HONGO Penicillium digitatum GENERADO EN

LA POSTCOSECHA DE LA NARANJA VALENCIA

KAREN VIVIANA RAMIREZ MONTENEGRO

DIEGO ANDRES BERNAL BOHORQUEZ
WILLIAM CHALA CADENA

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE COLOMBIA

FACULTAD DE ING. AMBIENTAL

BOGOTA D.C
2017
Materiales
Cajas de Petri
Cinta Adhesiva
Cultivo PDA (papa Destroza Agar)
Microscopio
Laminas y Laminillas
Azul de lactofenol
Naranjas
Varilla de vidrio
Agua destilada
Erlenmeyer 1000 ml
PBS (phosphate buffered saline)

Tubos de vidrio

Metodología
Para realizar la correspondiente caracterización del hongo presente en la
superficie de la naranja; es necesario el uso de cinta adhesiva, la cual permite
tomar una muestra sobre la superficie del fruto. Para ser observada y analizada
posteriormente en el microscopio, determinando sus estructuras fúngicas. Una vez
identificadas las características del hongo es permisible proceder a su cultivo;
ubicando inóculos en cajas de Petri con Papa Destroza Agar, para su
conservación.
Para realizar el correspondiente tratamiento sobre el fruto es necesario obtener
esporas de Trichoderma spp, preparándolas con agua destilada a una
concentración de 1 x 109 esporas/ml en un volumen final de 10 ml en PBS; así,
será posible colocar en suspensión la naranja sin lavar en las esporas con agua
destilada. Para obtener esta concentración se prepara cultivos de hongo en papa
dextrosa Agar a una temperatura de 28°C por 48 horas, siendo cubiertos con agua
destilada en un volumen de50 ml, para que posteriormente con una varilla de
vidrio estéril se pase la suspensión a frascos Erlenmeyer de 1000 ml de
capacidad, adicionando agua hasta conseguir la concentración adecuada, de tal
manera que sea aplicada y almacenada a 27°C durante 14 días.
A partir de este aislamiento en los tubos de vidrio se realiza un repique en cajas de
PDA, para así lograr tomar dato en diferentes lapsos de tiempo.