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352001_30
BIOQUÍMICA METABÓLICA
OCTUBRE
2019
Introducción
La bioquímica es la ciencia que estudia los componentes químicos de los seres vivos,
especialmente las proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos, además de otras
pequeñas moléculas presentes en las células. la bioquímica se basa en el concepto de
que todo ser vivo contiene carbono y en general las moléculas biológicas están
compuestas principalmente de carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, fósforo y
azufre. es la ciencia que estudia la mismísima base de la vida: las moléculas que
componen las células y los tejidos, que catalizan las reacciones químicas de la
digestión, la fotosíntesis y la inmunidad, entre otras.
PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES
EQUIPO REACTIVOS
● Buffer Fosfato de pH = 7
● Ureasa al 0,1%
● Urea 0,25 M
● HCl 0.1N
● HgCl2 al 1%
● Indicador de Tashiro
Extracción y cuantificación
Como primer paso para el análisis de ureasa pesamos 1 gramo de muestra de suelo en una
balanza analítica, posteriormente lo añadimos a un tubo de ensayo, igualmente adicionamos 10
ml de Nacl al 15, agitamos por 5 minutos.
Como segundo paso colocamos nuestra muestro de suelo en la centrifuga por 5 minutos, (3500
RPM) en la cual se separa el líquido del sólido.
En un soporte universal, colocamos un aro de metal y sobre el un embudo con su respectivo filtro
en el cual extraemos la muestra y medidos el volumen: VF: 6
Rotular 3 tubos a los cuales adicionaremos lo siguiente:
Luego de adicionar los respectivos reactivos, agitaremos por 10 segundos, y procedemos a
llevarlos a baño maría a una temperatura de 37 grados centígrados por un tiempo de 20 minutos
y procedemos a titular:
Titulación:
Blanco: verde
Estándar: verde
Muestra: verde
Al obtener un color azul- verdoso indica que es Positivo para ion amonio (NH4).
En teoría, absolutamente todas las biomoléculas que se encuentran en una muestra cualquiera del
eje SPA al estar bajo las condiciones de la mufla (550ºc por 4 horas), se desnaturalizan y el
remanente (denominado cenizas, por obvias razones) es una representación relativamente
cercana al contenido de minerales de la muestra analizada.
En este sentido;
% Minerales = 100 - % MO
Minerales crisol 1:
%Minerales=100−0,0075
%Minerales=99,9925
Minerales crisol 2:
%Minerales=100−0,0059
%Minerales=99,9941
ANALISIS DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES.
● Balanza analítica
● Baño de María
● Agitador de vidrio
● Vaso de precipitados
REACTIVOS
● NaOH 0,6N
● Fenol al 5%
● Glucosa al 1%
● HCl 0,6N
● H2SO4 concentrado
- El primer paso que debemos hacer es pesar 2g de la muestra en la balanza analítica en este caso
concentrado.
Peso de la muestra = 2,024
- Luego aplicamos a los 2,024g de la muestra 50ml de HCL 0,6N Ácido clorhídrico y agitamos por 3
minutos.
- Después se lleva a baño maría a 90°c durante 20 minutos.
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- Cernimos para separar lo solido de lo liquido lo cual se hace en un soporte universal,
colocamos un aro de metal y sobre el un embudo con su respectivo filtro en el cual
extraemos la muestra y medidos el volumen:
VF= 48ml.
- El siguiente paso es rotular 3 tubos de ensayo y adicionar en cada uno las siguientes
proporciones que indica la tabla.
- Después de adicionar a cada tubo las proporciones indicada en la tabla, a cada tubo lo agitamos
durante 20 segundos.
- Llevamos los tres tubos de ensayo rotulados a baño maria a una temperatura de 90°C durante
10m.
- Pasados los 10 minutos en el baño maria los sacamos los tubos de ensayo los agitamos por 10
segundo y enfriamos para hacer el siguiente paso.
CALCULOS
Para calcular el contenido de CNE (%) se debe Hallar el factor de dilución (Fd) y luego aplicar la siguiente
ecuación.
Donde;
Am = Absorbancia de la solución muestra
Ast = Absorbancia de la solución Estándar
Fd = Factor de dilución
Vf = Volumen del filtrado de muestra
Wm = Peso de Muestra
Absorcion muestra:2.339
absorcion estandar: 1.342
5 ml
∗25
2 ml
∗100
48 ml
Fd= =65.104
2 G 7 ML
2.339
%CNE= ∗0.01∗65.104=1.134
1.342
Conclusión