UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI

PROGRAMA DE QUIMICA
TALLER #4 DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL I
Profesor: Harold Díaz Cali, Marzo 28 de 2020

1. Definir los siguientes términos (a) Fluorescencia, (b) Fosforescencia, (c) Fluorescencia de
resonancia, (d) estado singulete, € estado triplete, (f) relajación vibracional, (g) conversión
interna, (h) conversión externa, (i) cruce entre sistemas, (j) predisociación, (k) disociación,
(l) rendimiento cuántico y (m) quimioluminiscencia.
2. Explicar la diferencia que existe entre un espectro de emisión fluorescente y un espectro
de excitación fluorescente. ¿Cuál de ellos se parece más a un espectro de absorción?
3. ¿Por qué la espectrofluorometría es potencialmente
más sensible que la espectrofotometría?
4. Para cuál de los siguientes compuestos se espera un mayor rendimiento cuantico de
florescencia? Explicarlo.

5. En formaldehído, la transición n π* (T1) ocurre a 397 nm, y la transición n π* (S1)

llega a 355 nm. ¿Cuál es la diferencia de energía (kJ / mol) entre los estados S 1 y T1? Esta
diferencia se debe a los diferentes giros de electrones en los dos estados.
6. ¿Cuál es la diferencia entre fluorescencia y fosforescencia?
7. ¿Cuál es la diferencia entre luminiscencia y quimioluminiscencia?
8. Considere una molécula que puede fluorescer desde el estado S 1 y fosforescencia desde el
estado T1. ¿Cuál se emite a longitudes de onda más largas, fluorescencia o fosforescencia?
Haz un boceto que muestre absorción, fluorescencia y fosforescencia en un solo espectro.
9. ¿Cuál es la diferencia entre un espectro de excitación de fluorescencia y un espectro de
emisión de fluorescencia? ¿Cuál se asemeja a un espectro de absorción?
10. El selenio de 0,108 g de nueces de Brasil se convirtió en el producto fluorescente en la
reacción 1, que se extrajo en 10,0 ml de ciclohexano. Luego, se colocaron 2,00 ml de la
solución de ciclohexano en una cubeta para la medición de fluorescencia. Las adiciones
estándar de productos fluorescentes que contienen 1,40 g de Se / mL se dan en la tabla.
Construya un gráfico de adición estándar para encontrar la concentración de Se en la
solución desconocida de 2.00 mL. Encuentre el % en peso de Se en las nueces y su
incertidumbre e intervalo de confianza del 95%.
 Reacción 1.
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PROGRAMA DE QUIMICA
TALLER #4 DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL I
Profesor: Harold Díaz Cali, Marzo 28 de 2020

Volumen de Intensidad de
estándar agregado fluorescencia
(µL) (unidades arbitrarias)
0.00 41.4
10.0 49.2
20.0 56.4
30.0 63.8
40.0 70.3

11. La forma reducida del dinucleótido de adenina y nicotinamida (NADH) es una importante
coenzima y altamente fluorescente. Tiene un máximo de absorción a 340 nm y un máximo
de emisión a 465 nm. Unas soluciones patrón de NADH dieron las siguientes intensidades
de fluorescencia:

Concentración de NADH (µmol/L) Intensidad relativa, I

0.100 2.24
0.200 4.74
0.300 6.59
0.400 8.98
0.500 10.93
0.600 14.01
0.700 15.49
0.800 18.02

a) Construir la curva de calibrado para el NADH

b) Calcular, por mínimos cuadrados, los parámetros de la regresión de la ecuación de la
recta correspondiente a la representación gráfica del apartado (a)
c) Calcular la desviación estándar de la pendiente y la ordenada en el origen
d) Una disolución problema presenta una fluorescencia relativa de 12.16. Calcular la
concentración de NADH.
e) Calcular la desviación estándar relativa del resultado del apartado (d)
f) Calcular la desviación estándar relativa del resultado apartado (d). si la lectura 12.16
fuera la medida de tres medidas.