UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA y a DISTANCIA

ZONA CENTRO BOGOTÁ – CUNDINAMARCA

CEAD JOSÉ ACEVEDO y GÓMEZ
ESCUELA Ciencias Básicas, Tecnologías e Ingenierías - ECBTI

CURSO: Bioquímica
GRUPO: 3

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO PRÁCTICA No 3. EXTRACCIÓN DE ADN

ESTUDIANTES:
JUAN CARLOS LATORRE BASTO
LINA ANDREA GONZALEZ GOMEZ
LAURA MELISA VELASQUEZ GUILLEN
FABIAN RINCON

FECHA DE LA PRÁCTICA: ​7 DE MARZO DE 2020

CIUDAD:​ BOGOTÁ
FECHA DE PRESENTACIÓN INFORME: ​26 DE MARZO DE 2020 ​ RESULTADO

OBJETIVOS
● Obtener ADN de células vegetales del kiwi, por medio de un experimento químico.
● Identificar la manera de obtener ADN del kiwi, a través de una técnica en la que se utilizan materiales
de fácil obtención.
● Observar, de manera sencilla y macroscópica, la estructura del ADN del kiwi, luego de someter el
extracto de este producto natural a un proceso químico

FUNDAMENTO TEÓRICO

El descubrimiento de los ácidos nucleicos se debe al trabajo con leucocitos y espermatozoides de salmón, la
cual la encontraron rica en carbono, fósforo, nitrógeno, oxígeno, hidrógeno, y la llamaron nucleína por
encontrarse en el núcleo, pero luego tiempo después este se fragmentó y salieron dos componentes uno
proteico y un grupo prostético pero este último grupo al ser ácido lo llamaron ácido nucleico.

por mucho tiempo los científicos debatieron que esta molécula portaba instrucciones de la biología de la vida
y pensaban que la molécula era sencilla para poder desempeñar un papel importante, en cambio pensaban
que las proteínas podrían hacer este papel ya que por su complejidad y variedad de formas podrían cumplir
esta función.

Los ácidos nucleicos son biopolímeros de elevado peso molecular y estos biopolímeros son los que llevan la
información genética; desde otro punto de vista los ácidos son macromoléculas formadas por polímeros
lineales de nucleótidos, la composición química de los ácidos se clasifican en ácido ribonucleico (ARN) que son
los que actúan en el citoplasma y el ácido desoxirribonucleico (ADN) que se encuentran en el núcleo celular y
algunos organelos.

Estos ácidos están formados por cadenas nucleótidos enlazados con el grupo fosfato, de igualmente estas
moléculas son las encargadas de su transmisión hereditaria ya que tienen la información genética.

Los ácidos nucleicos tienen como unidad básica el nucleótido que se compone de tres elementos ya que es
una molécula orgánica. Estos son:
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Base nitrogenada que es una purina o una pirimidina

Pentosa que es una ribosa o una desoxirribosa según el ácido nucleico

Grupo fosfato que son los causantes de las cargas negativas de los ácidos nucleicos y son los que le brindan
características ácidas.

¿Qué es el ADN?

El ADN es una macromolécula que se encuentra dentro del núcleo de las células y es quién forma el material
genético, o sea los genes. Este estructura es demasiado pequeña para poder verse a simple vista; sin embargo,
si se liberan varias de ellas al mismo tiempo, las moléculas son visibles. (European Researchers’ Night. 2012)

¿Para qué sirve la extracción de ADN?

Su extracción tiene incontables usos: desde el estudio antropológico de seres con miles de años, para saber
qué enfermedades tenían, o como podían verse físicamente, pasando por la medicina forense en la que se
toman muestras de ADN de piel, sangre o cualquier fluido, obtenido en una escena de crimen para identificar
un delincuente, hasta la creación de seres genéticamente idénticos, en un laboratorio (clonación) para
obtener seres “excepcionales y perfectos”. (Martínez. 2015)

El ADN contiene la información que necesita un organismo para desarrollarse, sobrevivir y reproducirse; para
que esto funcione el ADN manda mensajes a las cuales las traducen para fabricar proteínas, las cuales hacen la
mayor parte de trabajo en nuestro cuerpo; para elaborar estas proteínas el ADN manda instrucciones a otras
proteínas llamadas enzimas quien lee la información de una molécula de ADN y la transcriben a otra molécula
intermediaria llamada ácido ribonucleico.

Para realizar la extracción de ADN a partir de células vegetales se debe conocer que las plantas tienen tres
tipos de ADN que son el mitocondrial, el nuclear, el citoplasmático, además las plantas casi la mayoría posee o
presenta más de un grupo de cromosomas a esto se le llama poliploidia, para esta práctica se escogerá la fruta
Kiwi quien contiene 29 cromosomas y es tetraploide aunque también sirven las cebollas, lentejas, banano,
plátano u otro vegetal.
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PROCEDIMIENTO
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DATOS EXPERIMENTALES Y CÁLCULOS

REACTIVOS CANTIDAD MEZCLA + MEZCLA +

Agua destilada 50 ML 1 ML JABON 2GR CLORURO SOLUCIÓN DE LISIS

DE SODIO

Cloruro de sodio 2 GR X X X

Alcohol 1.5 ML X X X
Isopropílico

Kiwi (fruta) TROZOS MACERAR 3ML DE LA FILTRAR

PEQUEÑOS MEZCLA
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RESULTADOS
De acuerdo a los reactivos y siguiendo el procedimiento mostrado anteriormente se logra extraer el ácido
nucléico ADN a partir de células vegetales (Kiwi). Estas fibras de ADN se pueden observar en la siguiente
imagen como fibras blancas.

Para resaltar la formación de estas hebras se puede adicionar suavemente 1 gota de azul de metileno al tubo
de ensayo.
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ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Cuando se realiza un experimento de extracción de ADN se puede observar como resultado tres capas bien
diferenciada, en la parte de encima estará el alcohol, en la parte de abajo se ubica los restos celulares y otros
componentes de la solución y, en la interfase, observaremos una especie de hilos blancos rodeados de
burbujas, eso son los filamentos de ADN.
En nuestro experimento, no fue evidente la extracción del ADN (Fibras blancas) y en discusión grupal creemos
que uno de los causantes fue la extracción del zumo de piña; nuestro papel filtro se rompió y no logramos que
el zumo fuera totalmente puro; sin embargo, para resaltar la formación de estas hebras se aplicó azul de
metileno lo que nos permitió evidenciar la extracción de ADN para el Kiwi.

CUESTIONARIO
● ¿Cuál es la función de los componentes de la solución de Lisis?

El detergente hace que la célula vacié su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve
el ADN en ese momento. El tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,
carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción las proteínas asociada al ADN, de gran
longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente. La sal
sirve para romper la membrana plasmática y nuclear e incluso la pared celular. (Aguilar, 2014).

Las membranas de la célula están formadas por dos capas de lípidos con proteínas transmembrana a través de
estas. El detergente ayuda a romper la bicapa de fosfolípidos de las membranas plasmáticas y en la envoltura
nuclear. Los lípidos de la membrana se descomponen debido al detergente que deshace las uniones que
mantienen la membrana rompiéndola. La estructura de los lípidos es similar a la del detergente y eso hace que
se combinen, formando una burbuja de detergente y lípidos. (Martinez, 2015).

● ¿Para qué se usa el zumo de piña, cuál es el compuesto clave y su función durante el proceso de
extracción de ADN?

El zumo de piña contienen un enzima, la bromelaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan
contaminar el ADN. Esta enzima hace separar el ADN de las histonas, desfragmenta el ARN, para que de esta
manera se pueda extraer mucho más fácil y puro.

● Explique las diferencias de solubilidad del ADN en medio salino y alcohólico.

La solubilidad diferencial del ADN, una muestra de ADN en solución acuosa, se precipita al agregarsele
cationes (para neutralizar las cargas negativas que posee) y alcohol. El alcohol disminuye la constante
dieléctrica del solvente acuoso, provocando una disminución en la solubilidad del ADN, que, en presencia de
altas concentraciones de sales, se precipita. Este método es ampliamente utilizado como una forma de
concentrar ADN. Se utilizan dos tipos de alcohol: el etanol y el isopropanol. La diferencia entre ambos es la
capacidad de disminuir la constante dieléctrica. Mientras que el isopropanol posee una mayor capacidad y por
lo tanto es posible usar menor volumen (solo 0,7 volúmenes, contra 2,5 volúmenes de etanol), tiene la
desventaja de precipitar más sales y por lo tanto rinde un ADN de menor pureza que el etanol. La elección se
basa en el volumen manejable, prefiriéndose el etanol siempre que sea posible debido a la mejor calidad del
ADN obtenido. (Ciochinni, 2015)

El alcohol se utiliza para extraer el ADN de la muestra de tampón y detergente. El ADN se precipita en el
alcohol fuera de la solución, donde puede ser visto. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el
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ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. (Aguilar, 2014). El ADN de
una célula se encuentra enrollado a proteínas formando la cromatina. Para aislar el ADN hay que hacer que
precipite en alcohol; el ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita
en la interfase entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros
componentes celulares (proteínas), los cuales son dejados en la solución acuosa. (Herrera, 2012)

CONCLUSIONES

● Los ácidos nucleicos son las biomoléculas portadoras de la información genética.

● Sirven para la generación de nuevas células e individuos.
● Sirven para la síntesis de proteínas.

REFERENCIAS

Herrera, M. (2012). Práctica: extracción y separación de ADN. Altamirano México. Recuperado el 18 de Marzo
de 2020 desde: ​ https://bit.ly/3cNPCVT

Martinez, L. (2015). Extracción de DNA. Recuperado el 18 de Marzo de 2020 desde:​ https://bit.ly/2xPgp5x

Castellanos, C. (2018). Informe de extracción de ADN . Bogotá. Recuperado el 18 de Marzo de 2020 desde:
https://bit.ly/3eQDDsE

Aguilar, A. (07 de octubre de 2014). SlideShare. Obtenido de Extracción del ADN. Recuperado el 18 de Marzo
de 2020 desde: https://bit.ly/2S2b8OP

Martínez, L. (2015) Extracción de DNA, experimentos con reactivos de la vida cotidiana. Recuperado el 18 de
Marzo de 2020 desde: https://bit.ly/2VCAsgr

Buitrago V. Estructura y propiedades de los ácidos nucleicos. Recuperado el 19 de marzo de 2020 desde:
https://n9.cl/n0ae

Mendoza L. (2015). Extracción de DNA. Recuperado el 19 de marzo de 2020 desde:​ ​https://n9.cl/3ka3

Ariza D (2016) Guía componente práctico 201102 –Química general. Recuperado el 10 de Marzo de 2019
desde:​ ​https://n9.cl/mif9

National human genome research institute. (2019). ácido desoxirribonucleico. recuperado el 20 de marzo
desde: https://cutt.ly/typSoEL