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QUIMICA FARMACEUTICA

Control de microorganismos por agentes


físicos y químicos
Definiciones

• Desinfección: Destrucción, remoción o inhibición de


microorganismos patógenos vegetativos o no patógenos pero
no endosporas. Reducir la población microbiana.
Generalmente usada únicamente en objetos inanimados

• Desinfectante: agentes usualmente químicos que realizan


desinfección.

• Sanitización: relacionado con la desinfección. Reducción de la


población microbiana a niveles considerados seguros por
estándares de salud pública (p.e. Limpieza de utensilios para
comer en restaurantes)
Definiciones

• Esterilización: Destrucción o remoción completa de todo


microorganismo viable (incluyendo esporas) o entidades
acelulares (virus, viroides y priones). Usado en objetos
inanimados
Definiciones

• Antisepsis: (anti: contra; sepsis: putrefacción)


Compuestos químicos aplicados sobre superficies
corporales con el fin de destruir o inhibir patógenos
vegetativos.

• Antiséptico: agentes químicos aplicados sobre tejidos


para prevenir infecciones al matar o inhibir el crecimiento
de patógenos, también disminuyen la población total
microbiana. No son tan tóxicos como los desinfectantes.
Definiciones

• Quimioterapia: Compuestos químicos usados


internamente para matar o inhibir el crecimiento de de
microorganismos dentro del tejido del hospedador.
Definiciones

• Otros términos (sufijos)

• Substancias que matan microorganismos: -cida


• Germicida
• Bactericida
• Fungicida
• Agicida
• Viricida

• Substancias que previenen el crecimiento: -stático


• Bacteriostático
• Fungistático
Gráfica de muerte microbiana

• Sesgo por los microorganismos


viables pero no cultivables
(VBNC)
• La linealidad se pierde cuando
la población es muy pequeña
porque solo quedan los
microorganismos más
resistentes.

Gráfica de muerte microbiana


Efectividad de agentes
antimicrobianos

Condiciones que influencian la efectividad de los antimicrobianos

• Tamaño de la población: una mayor población requiere mayor


tiempo para morir que una población pequeña

• Composición de la población: diferentes especies de MO tienen


susceptibilidades diferentes
• Endosporas Vs MO vegetativos
• Células jóvenes Vs Células maduras
• Mycobacterium tuberculosis Vs Escherichia coli
Efectividad de agentes
antimicrobianos
Condiciones que influencian la efectividad de los antimicrobianos

• Concentración o intensidad del agente antimicrobiano:


• A veces el aumento de la concentración destruye más
rápidamente los MO
• No siempre la efectividad del agente antimicrobiano esta
relacionado con la concentración.
• Algunas veces un agente es más efectivo a concentraciones
mas bajas
• Etanol al 70% es más efectivo que al 95% porque la
presencia de agua potencia el efecto.
Efectividad de agentes
antimicrobianos
Condiciones que influencian la efectividad de los antimicrobianos

• Duración de la exposición: a mayor exposición al agente


microbicida mayor tasa de muerte del MO

• Temperatura: Un incremento en la temperatura a la cual un


microbicida actúa, mejora su actividad.
• Frecuentemente, bajas concentraciones de agentes
desinfectantes o esterilizantes pueden ser usadas a altas
temperaturas obteniendo buenos resultados
Efectividad de agentes
antimicrobianos

Condiciones que influencian la efectividad de los antimicrobianos

• Factores ambientales: puede ayudar a proteger a los MO o ayudar a


destruirlos
• pH ácido con calor ayuda a destruir MO
• Comidas y bebidas ácidas (frutas y tomates) son mas fáciles
de pasteurizar que alimentos menos ácidos (leche)
Efectividad de agentes
antimicrobianos
Condiciones que influencian la efectividad de los antimicrobianos

• Factores ambientales: puede ayudar a proteger a los MO o ayudar a


destruirlos
• Material orgánico: puede proteger a los MO contra el
calentamiento o desinfectantes químicos
• Biopelículas: protege a los MO que contiene, es más difícil de
eliminar. Los MO son mas resistentes.
• Limpiar objetos (p.e. Jeringas, equipos médicos o
dentales) antes de desinfectarlos o esterilizarlos.
• Tratamiento de agua potable: buscar bajar el contenido
de materia orgánica o agregar más cloro.
Métodos físicos de control

Métodos físicos de control de crecimiento microbiano

1. Calor
2. Bajas temperaturas
3. Filtración
4. Radiación
Métodos físicos de control

1. Calor

Usado para esterilizar y desinfectar desde la Grecia clásica

Métodos usados en la actualidad:


• Calor húmedo
• Calor seco
Métodos físicos de control

• Calor húmedo

• Destruye virus, bacterias y hongos


• Degrada ácidos nucleicos
• Desnaturaliza enzimas y otras proteínas
• Rompe membranas celulares

• Agua en ebullición por 10 minutos:


• Destruye células vegetativas
• Destruye esporas eucariotas
• No destruye endosporas bacterianas
• Tratamiento útil para desinfectar agua potable y objetos que
resisten el agua a esa temperatura
• No es un proceso esterilizante
Métodos físicos de control

• Calor húmedo

• Esterilización por calor húmedo


• Temperaturas mayores a 100 oC
• Requiere vapor saturado a alta presión
• Uso de Autoclave
• El vapor de agua desplaza el aire
• 121 oC y 15 libras de presión (psi) (1,02 atm)
• Tiempo de tratamiento:
• Pequeños volúmenes: al menos 15 minutos
• 5 litros: 70 minutos
• El vapor de agua debe circular entre el material.
• Controles
• Indicador biológico: Geobacillus stearothermophilus
• Cintas indicadoras de esterilidad
Métodos físicos de control

• Calor húmedo
Métodos físicos de control

• Calor húmedo
Métodos físicos de control

• Calor húmedo

• Cintas indicadoras de esterilidad

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Métodos físicos de control

• Calor húmedo

ORGANISMO CÉLULAS VEGETATIVAS ESPORAS


Levaduras 5 minutos a 50-60 oC 5 minutos a 70-80 oC
Moho 30 minutos a 62 oC 30 minutos a 80 oC
Bacterias mesófilas 10 minutos a 60-70 oC 2 a 800 minutos a 100 oC
0,5 a 12 minutos a 121 oC
Virus 30 minutos a 60 oC ---
Métodos físicos de control

• Pasteurización

• Desarrollada por Louis Pasteur (1860s)


• Tratamiento por debajo del punto de ebullición
• Entre 55 a 60 oC (72 oC) durante 15 o 20 segundos; luego enfriar a
4 oC, varios ciclos
• Leche, Cerveza y otros productos

• Ultrapasteurización (UHT: Ultra High Temperature / UAT: Ultra


Alta Temperatura)

• 150 oC durante 15 o 20 segundos; luego enfriar a 4 oC, varios


ciclos
• Apenas pierde un 10% de las vitaminas C y B1 y un 20% de la B2.
Métodos físicos de control

• Pasteurización

https://sites.google.com/site/assumarltda/project-updates/lineas-de-ultrapasteurizacion-uht?tmpl=%2Fsystem%2Fapp%2Ftemplates%2Fprint%2F&showPrintDialog=1
Métodos físicos de control

• Esterilización por calor seco

• Usado en algunos materiales de laboratorio (p.e. Asas de


inoculación)
• Oxidación de constituyentes celulares
• Desnaturalización de proteínas
• Menos efectivo que el calor húmedo

Especie Esterlilización por Esterilización por


calor húmedo calor seco
Clostridium botulinum 5 minutos 121 oC 120 minutos 160 oC
Métodos físicos de control

• Esterilización por calor seco

• No corroe los instrumentos de metal


• Usualmente sirve para esterilizar
material de vidrio (p.e. Pipetas)
• No recomendado para materiales
sensibles al calor (p.e. Utensilios de
plástico o caucho)
• Puede usarse para esterilizar polvos
y aceites
Métodos físicos de control

• Expresiones utilizadas para medir la eficiencia de la muerte


por calor

• Tiempo Decimal de Reducción (Valor D): Tiempo requerido


para matar el 90% de microorganismos o esporas en una
muestra a una temperatura dada

• Valor z: incremento en la temperatura requerido para reducir D


1/10

• Valor F: Tiempo en minutos a una temperatura específica


(usualmente 121 oC) necesaria para matar una población de
células o esporas
Métodos físicos de control

• Expresiones utilizadas para medir la eficiencia de la muerte


por calor
Métodos físicos de control

• Expresiones utilizadas para medir la eficiencia de la muerte


por calor
Métodos físicos de control

• Calor húmedo

ORGANISMO SUBSTRATO VALOR D (°C) VALOR Z (°C)


(Minutos)
Clostridium botulinum Buffer fosfatos D121 = 0.204 10
Clostridium perfringens Medio de cultivo D90 = 3-5 6-8
Salmonella spp. Pollo à la King D60 = 0,39 – 0,40 4,9 – 5,1
Staphylococcus aureus Pollo à la King D60 = 5,17 – 5,37 5,2 – 5,8
Staphylococcus aureus Pavo relleno D60 = 15,4 6,8
Staphylococcus aureus NaCl 0,5% D60 = 2,0 – 2,5 5,6
Métodos físicos de control

• Filtración

• Para soluciones sensibles al calor


• Esterilizar soluciones
• No destruye, remueve MO
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros de profundidad
• Capa gruesa de materiales fibrosos o granulares
• Tierra de diatomeas, porcelana sin esmaltar, asbesto

Tierra de diatomeas

Filtro Berkefeld
https://www.basicwaterfilter.com/93-thickbox_default/british-berkefeld-hba-mkii.jpg
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros de profundidad

Filtro Chamberlain (porcelana)


https://www.basicwaterfilter.com/93-thickbox_default/british-berkefeld-hba-mkii.jpg
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros de membrana
• Membranas porosas
• Cerca de 0,1 mm de grosor
• Acetato de celulosa, nitrato de celulosa, policarbonato,
fluoruro de polivinilideno.
• Tamaño de poro 0,2 μm (remosión de células)
• Tratamiento de grandes cantidades de volumen
• Uso de presión para forzar a pasar la solución por el filtro
• Generalmente se combina con filtros de profundidad
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros de membrana
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros de membrana
• Soluciones oftálmicas
• Medios de cultivo
• Aceites
• Antibióticos

https://www.deperu.com/abc/salud/4999/aplicacion-de-gotas-oftalmicas
https://optica-optima.com/salud-visual/systane-ultra-10ml-gotas-oftalmicas.html
http://www.jpfarma.com.br/es/historia/
http://www.inforecikla.eus/es/buscar-residuo/residuo/709/
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros de membrana

Bacillus megateirum Enterococcus faecalis


Membrana nylon Membrana policarbonato
Poro: 0,2 mcm Poro: 0,4 mcm
Prescott
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros para aire


• Máscaras quirúrgicas
• Tapones de algodón en vasos de
cultivo
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros para aire


• Cabinas de seguridad biológica de flujo laminar
• Filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air): 99,97% de
eficiencia para la remoción de materia particulada de
diam. 0,3µm o mayor
• Filtros ULPA (Ultra-Low Particulate Air): 99,9995% de
eficiencia para la remoción de materia particulada de
diam. 0,12µm o mayor
• Elaborados en fibra de vidrio
• Generan cortinas de aire esteril

Filtro HEPA
Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros para aire


• Cabina de flujo laminar horizontal

https://www.idelsur.com/wp-content/uploads/2014/06/aura-HZ-48-c_603.jpg
https://lh3.googleusercontent.com/proxy/ZvsMiMENAnG4R3JXvKNvZm1TeRuFyAGrfZVEkRjHetg2VfEUhnWNy5GcLTpddClJGhoY4jampneMQZvvq6slmPgB3xY-glbqLvHsSoR-
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Métodos físicos de control

• Filtración

• Filtros para aire


• Cabina de flujo laminar vertical

https://img.medicalexpo.es/images_me/photo-g/84663-9242954.jpg
http://www.uciencia.uma.es/Banco-de-Imagenes/Matematica-Fisica-y-Quimica/Cabina-de-flujo-laminar-vertical

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