CÓDIGO:

UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS

ESPE TIPO DE DOCUMENTO:

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y Version: 01 Revision:

AGRICULTURA 21-sep-2016

BIOTECNOLOGÍA x IASA I IASA II RE-026

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

PERIODO Abril 2017-agosto
ASIGNATURA: Bioquímica I NIVEL: Tercero
LECTIVO: 2017
DOCENTE: Petronio Gavilanes NRC: PRÁCTICA N°: 4

TEMA DE LA
Caracterización de las propiedades físicas y químicas de los lípidos.
PRÁCTICA:
INTRODUCCIÓN:

Las grasas, los aceites y los lípidos están formados por un gran número de compuestos orgánicos, entre los que se incluyen los
ácidos grasos (FA), monoacilgliceroles (MG), diacilgliceroles (DG), triacilgliceroles (TG), fosfolípidos (PL), eicosanoides, resolvinas,
docosanoides, esteroles, ésteres de esteroles, carotenoides, vitaminas liposolubles, alcoholes grasos, hidrocarburos y ésteres de
ceras. Tradicionalmente se ha definido a los lípidos como sustancias solubles en solventes orgánicos. (FAO, 2012) El sudán III tiñe
a los triglicéridos y otros lípidos, y es de esta manera que se utiliza para la identificación de grasas. (Lillie) El punto de fusión de
ácidos grasos de número par de carbonos se incrementa con la longitud de la cadena ya que tendrá un mayor número de
interacciones que se constituye entre ellas y disminuyen conforme con la insaturación. (Murray R, 2010). Es importante que
distintos tipos de organismos regulen la composición en ácidos grasos de sus lípidos constituyentes para así controlar el punto de
fusión del tipo de ácido graso que los constituyen, evitando que sus membranas cristalicen. El ácido laúrico y mirístico se encuentra
en ciertas grasas, particularmente la mantequilla, mientras en ácido oleico es el más común de grasas naturales, esencialmente alto
en el aceite de oliva. (Murray R, 2010). Con respecto a grasas de origen animal y vegetal el ácido palmítico y esteárico son
comunes. (Murray R, 2010).
OBJETIVOS:

 Realizar la identificación de lípidos de muestras vegetales y animales.

 Diseñar un perfil del experimento donde plantea y define el problema, preguntas, objetivos, metodología, resultados,
conclusiones, discusión.
 Aplicar el perfil elaborado en la práctica para la identificación de lípidos, propiedades de solubilidad, temperatura de
fusión, emulsificación, determinación acídica.
 Trabajar en equipo a través del grupo conformado e interactúa con conocimientos de otras asignaturas.
 Elaborar un informe en el que comunica sus resultados, además de utilizar la herramienta de plataforma virtual.

MATERIALES:

REACTIVOS: INSUMOS:
 Hidrosulfato sódico o potásico (cristalino).
 Sudán III.  Vidrios de reloj
 Aceite vegetal.  Gotero
 Alcohol etílico.  Gradillas
 Benceno.  Pipetas de 5 mL
 Cloroformo  Pipetas de 1mL
 Éter  Pipetas de 10 mL
 Jabón líquido  Vasos de precipitación de 250 mL
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 Vasos de precipitación de 100 mL

 Tubos de ensayo
 Capilares tubos
 Lupas
 Termómetros
 Anillos de goma. Ligas
 Sierra para cortar ampollas
 Tapones
 Embudo
 Espátulas
 Hielo  Lanza Analítica
 Hidróxido de potasio. O.1 N  Papel aluminio
 Fenolftaleína disolución al 0,1 %  Varilla de vidrio
 Alcohol industrial  Tijeras
 Ácido sulfúrico  Mechero
 Pinzas para tubos de ensayo
 Plancha de calentamiento
 Guantes
 Mascarillas
 Succionador de líquidos o peras para pipetas
 Papel filtro
 Balón de aforo de 250 mL
 Soportes universales, pinzas y nueces.
 Bureta
 Matraz Erlenmeyer

EQUIPOS: Balanza analítica.

MUESTRA:

Grasa animal, aceite vegetal, cera, grasa vegetal.

INSTRUCCIONES:

 Utilice ropa de protección: mandil, guantes, gafas, cabello recogido, zapato cerrado.
 Verificar la disponibilidad de los equipos a usar en la práctica.
 Proceder a verter los desechos químicos peligrosos en sus respectivos recipientes.
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ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

Procedimiento:
Prueba de identificación de grasas.
1. En un tubo de ensayo verter 2 mL de aceite vegetal.
2. Añadir una gotas de Sudan III
3. Observar

Prueba de solubilidad
1. En cuatro tubos de ensayo se añade la muestra de aceite vegetal.
2. En el primer tuvo se vierte 2 mL de agua, en segundo tubo se vierte 2 mL de alcohol, en el tercero 2 mL de benceno y en
el cuarto 2 mL de cloroformo.
3. Se mezcla y agita fuertemente cada uno de los tubos de ensayo.

Determinación de la prueba de fusión

1. En capilar seco se llena de grasa hasta los 2 cm del mismo y se lo enfría en agua.
2. Se corta el capilar dejando 0.5 cm de altura que contiene la grasa.
3. El capilar se sujeta con un anillo de goma en el termómetro en su parte inferior, dejando la parte libre de grasa dirigida
hacia abajo y la llena hacia arriba.
4. El termómetro se introduce en un tubo de ensayo y se ajusta con un tapón.
5. El tubo de ensayo se sumerge en un vaso con agua y se lo sujeta en un soporte.
6. El nivel de agua en el vaso debe ser superior a la parte de término del capilar.
7. El agua se calienta poco a poco y removiéndola constantemente.
8. Observar con la lupa la temperatura en la que funde la grasa.
9. Repetir el ensayo por tres ocasiones y fijar un promedio.

Determinación del número acídico

1. En un matraz erlenmeyer se añade 1 g de aceite de girasol.
2. Se añade 10 mL de la mezcla alcohol – éter (1:2) agitando cuidadosamente.
3. Se añade 2 a 3 gotas de fenolftaleína.
4. La solución se valora rápidamente con disolución de hidróxido de potasio 0.1 N, con agitación hasta la aparición de una
coloración rosa que persista más de un 1 minuto.

Prueba de emulsificación
1. En un tubo de ensayo se añade 2 mL de agua y 2 mL de aceite.
2. Se agita y se espera unos 3 minutos.
3. Se observa lo ocurrido
4. Luego se añade jabón y se agita esperando unos minutos.
RESULTADOS OBTENIDOS:
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Prueba de solubilidad.
En el primer tubo se forma una emulsión inestable que se separa rápidamente.
En el segundo se produce una disolución turbia que muestra la poca solubilidad en alcohol.
En tercero y cuarto tubos de ensayo son disoluciones transparentes.

Prueba del punto de fusión

La temperatura a la cuál funde la grasa se la debe fijar según la medida en el termómetro.

Determinación del índice acídico

Es una de las pruebas importantes para establecer la calidad de las grasas. El número acídico normalmente no supera los valores
entre 1.2 a 3.5 mg. En el curso del almacenaje de las grasas tiene lugar la hidrólisis de los glicéridos y acumulación de los ácidos
grasos libres. Una elevada acidez de una grasa indica una pérdida de la calidad.

Cálculos matemáticos y estadísticos:

Índice acídico:

x = a 5.6 K
cc
x = Es el número acídico en mg
a = Es el volumen de disolución de hidróxido de potasio 0. 1 N consumido en la valoración de la prueba.

Es 5.6 mg la cantidad de hidróxido de potasio contenido en una disolución 0.1 N de hidróxido de potasio.
K = Es el coeficiente de corrección de la disolución 0.1 N de hidróxido potásico.
C = Es la muestra de aceite pesada en gramos y transformado a mililitros con la densidad

CONCLUSIONES:

Los lípidos como los aceites vegetales no son solubles en solventes polares como es el agua, en el tubo de aceite-agua se puede
observar una emulsión de unos pocos segundos. Los aceites son muy solubles en disolventes orgánicos como el éter y el
cloroformo y su solubilidad con los alcoholes dependen de la cantidad de carbonos presentes en el alcohol a utilizar. El aceite no se
solubiliza completamente en presencia de etanol.
En la prueba de Sudán III para la identificación de grasas que al principio se dividía en dos fases causado porque estos colorantes
siempre van en solución alcohólica o bien son una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua, los cuales no son miscibles en
lípidos, pero al agitar se ve como poco a poco se va mezclando lo que indica la presencia de lípidos en las muestras porque este
colorante tiene afinidad por los lípidos y al final toma un atonalidad rojiza
Los valores obtenidos de la temperatura de fusión respecto a las grasas vegetales fueron de 37 °C, mientras que de la grasa animal
fue de 42 °C como valores promedios. Con lo que probamos nuestra hipótesis planteada, las grasas animales
tiene un mayor punto de fusión respecto a las vegetales

RECOMENDACIONES:
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Las catidades de reactivos a utilizar para la medición del índice acídico son pequeñas debido a que se consume poco hidróxido de
sodio para neutralizar los ácidos grasos de los aceites.

FIRMAS

F: …………………………………………. F: …………………………………………. F: ……………………………………………..

Nombre: Nombre: Nombre:

COORDINADOR DEL AREA DE COORDINADOR DE LABORATORIOS
DOCENTE CONOCIMIENTO