Bioquimica.

miércoles, 16 de noviembre de 2011

“Preparación de Soluciones Amortiguadoras”

Objetivos:
1.  Preparar experimentalmente diferentes soluciones
amortiguadoras.
2.  Determinar el pH de las soluciones anteriormente
preparadas.
3.  Establecer la relación entre el pH y un amortiguador.
Resumen
Preparamos soluciones amortiguadoras de Acido
Cítrico/Citrato de sodio, fosfato dibásico de sodio, fosfato
monobásico de potasio; hicimos mediciones de pH a distintos
volúmenes de cada amortiguador, y se estableció la relación
que existe entre el pH y el amortiguador. Se concluyó que el
pH de una solución amortiguadora depende de la naturaleza
del acido débil que lo integra, es decir del pKa de acido.
Marco Teórico:
Solución amortiguadora es aquella que se opone los cambios
de pH cuando se agrega ácido o álcali.  Tales soluciones se
utilizan en muchos experimentos bioquímicos en los cuales
se necesita controlar exactamente el pH.

De la ecuación de Henderson-Hasselbalch, se puede deducir

que el pH de una solución amortiguadora depende de dos
factores uno es el de pKa y el otro es la proporción de sal a
ácido.  Esta proporción se considera igual a las cantidades de
sal y ácido mezclado en el intervalo de pH entre 4 y 10,
donde la concentración de hidrogeniones e hidroxilos del
medio acuoso son muy baja y se puede ignorar.

                     PH = pKa   +  log 10 [sal] / [ácido]

Tomemos por ejemplo los amortiguadores de acetato que

están compuestos por una mezcla de ácido acético y acetato
de sodio:

                        CH3COOH         ↔         CH3COO-  + H+
                        CH3COONa      →      CH3COO-  + Na+

Puesto que el ácido acético está tan solo débilmente

disociado, la concentración de ácido será casi la misma que
se agregó a la mezcla; en la misma forma la concentración de
iones acetato puede ser considerada como igual a la
concentración de acetato de sodio añadido a la mezcla, ya
que la sal estará completamente disociado.  La máxima
capacidad amortiguadora de la solución se cumple cuando la
concentración de la sal es igual a la concentración del ácido,
en este punto pH = pKa.  Si el pKa del ácido acético es 4.8,
en la práctica las soluciones amortiguadoras se usan en el
intervalo de pH entre 3.8 y 5.8, es decir 1 unidad alrededor
del pKa.  Esto se cumple generalmente para todas las
soluciones amortiguadoras.
Algunas de las soluciones amortiguadoras que se usan más
frecuentemente en el laboratorio se muestran en la Tabla
1.  Como se dijo anteriormente, el intervalo útil para la
mayoría de los amortiguadores es de una unidad de pH por
encima o por debajo del valor de pKa.
El amortiguador que se escoja en un momento dado debe
seleccionarse con cuidado, ya que los resultados
experimentales pueden deberse a efectos específicos de los
iones utilizados y no al pH.  Algunos amortiguadores que
producen reacciones desfavorables son: boratos, citratos,
fosfatos y tris.
Tabla 1: Amortiguadores usados en investigaciones
biológicas.
Ácido o base pka pKa pKa
Ácido  fosfórico 2.1 7.2 12.3
Ácido cítrico 3.1 4.8 5.4
Ácido carbónico 6.4 10.3 -
Glicil glicina 3.1 8.1 -
Ácido Acético 4.8 - -
Tris 8.3 - -
Hepes 7.6 - -

Materiales
·        Volumétrico de 100 mL
·        Vaso químico
·        Probetas
·        Espátula
·        Balanza
Reactivos
·        Fosfato monobásico de potasio KH2PO4
Ø Causa irritación al tracto respiratorio, tos, asfixia.
Ø Ingestión: causa náusea, vómito, cólicos y diarrea.
Ø Irritante al contacto con la piel.
·        Ácido cítrico
Ø Irritación al tracto respiratorio, asfixia.
Ø Irritación al tracto gastrointestinal, náusea, vómito.
Ø Irrita la piel, produce enrojecimiento, prurito u dolor.
Ø Irrita los ojos.
·        Citrato Trisódico
Ø Náuseas, vómitos y calambres.
Ø Produce irritación acídica de boca y garganta.
·        Fosfato dibásico de sodio
Ø Irritante del tracto respiratorio, tos, respiración acortada.
Ø Poco efecto sistémico.
Ø Vómito, diarrea, disturbios del corazón.
Ø Irrita la piel.
·        Hidróxido de sodio 0.2 M
Ø Irritante severo (por inhalación) de las vías respiratorias.
Ø La ingestión puede causar quemaduras severas de la boca,
garganta y estómago.
Ø Causa irritación de la piel o severas quemaduras.
·        HCl

Ø Corrosivo para los ojos, la piel y membranas mucosas.

Ø Por inhalación puede causar tos, ronquera y úlceras.
Ø Por ingestión puede causar fiebre babeo, fuerte dolor de
garganta, dolor de pecho.

Esquema Experimental

 Capacidad amortiguadora de las sustancias