Cromatografía de Aumentar K al aumentar Rs y

tr.
Gases FM (g) aumenta K con
aumento de T.
Generalidades
FM (l) aumenta K con comp.
Si: FM.

K´<1  elución rápida E) Variación de selectividad

Cambiar FM y FS
K´~1-5  tr cortos
Cambio T
K´~ 20-30  tr largos Efectos químicos

A) Picos cromatográficos
 El tr y la selectividad se 1) Gas de arrastre
relacionan directamente con
el ancho. ~H2 ~He
 Muchas transferencias analito
~N2 ~Ar-CH4
entre FS Y FM.
 El ancho aumenta conforme *El gas depende del detector
pasa por la columna.
*Seco
B) Parámetros de eficiencia
*Puro
N=establece equivalencia
entre FS y FM. *Inerte
Eficiencia aumenta con N
grande y H pequeño. *Barato

H=A+B/u+Csu+Cmu
Fm lenta  Transferencia de
masa rápida.
C) Rendimiento columna
Velocidad de FM
Propiedades termodinámicas
de componentes a separar
K,V,FM y FS.
Variación de la T modifica la
selectividad y K.
Variar tipo relleno, diámetro,
L FM Y FS para modificar H y
N.
D) Variación de K
a. Gas Hidrógeno
 Es explosivo
 Buen sistema de extracción
 Verificar fugas
Gases para detectores
1. FPD, FID y NPD
Make up (auxiliar)
Aire (oxidante)
H2 (combustión)
2. ECD, TCD y PID
Make up
Gas arrastre
 Contenedores de gases
A. Cilindros de gas
 Reguladores de presión
 Manómetro
 Medidor de flujo
 Tamices moleculares
Recomendaciones:
1. Estar en casetilla
2. Encadenados a la pared
3. Con capucha
4. Tener reservas
5. Con reguladores
6. Cambiar cuando la P esté a
200-300psi
7. Impurezas, Humedad e
hidrocarburos dañan
8. Usar etiquetas informativas
B. Generador de gases
 Producen H2, N2 y aire.
 Seguros
 No ocupan mucho espacio
 Uso de filtros
Hidrocarburos Humedad Oxígeno
 Un gas limpio aumenta
vida columna y reduce
ruido.
Tuberías acero se lavan
con metanol u otro
solvente.
Inyectores
Reproducible, precisa y predecible
introducción de la muestra.
1) Jeringas
2) Válvulas
3) Automuestreadores
Debe tener T por encima del p.e
componente menos volátil.
*SI T ES MUY GRANDE
- DESCOMPOSICIÓN MUESTRA
-SANGRADO
-BACKFLASH Y FUGAS
A. Liner
Guía el gas de arrase
directamente a la columna
Sufre activación con compuestos
polares produciendo coleo.
Si hay descomposición de
muestra
1. Desactivar Liner
2. Bajar T
3. Cambiar empaque de zona
del liner
Backflash: volumen de muestra
muy grande en liner de volumen
pequeño.
 Picos fantasma
 Pérdida de muestra
 Descomposición de la
muestra
B. Septums
Previene introducción de aire del
exterior
*Septums suaves sellan mejor
1.a) Al calentar por encima de T
 Perdida de muestra
 Picos fantasma
Los picos fantasmas se pueden Ventajas
eliminar con pre acondicionamiento
o purga del septum. A. Trazas
B. Baja discriminación
Si hay fugas:
Desventaja
Tr diferentes
A. Contaminación más rápida de
Área varía la columna.

Degradación columna por entrada *PARA BUENA RESPUESTA

de aire
TECNICA INYECCIÓN
Sistemas de Inyección
VOLUMEN INYACTOR
1. Capilar directa (Vaporizante)
T COLUMNA

T INYECTOR

1. On colum ( No Vaporizante) LINER

Muestras sucias y lábiles COLUMNA

Se atrapan componentes no Dispositivos auxiliares

volátiles.
 Válvulas
1. Split (Vaporizante)  Automuestreadores
 Desorción térmica
Parte de muestra va a la columna.  Pirrolisis
Ventajas  Headspace
 Purga y trampa
A. Mayoría muestras
B. Muy volátiles
C. Que no se pueden diluir
1. Pirrolizador
D. Sucias
Fragmentación térmica
Desventajas
Sustancias baja volatilidad
A. Inyección caliente
B. No trazas 2. Desorción térmica
C. Discrimina alto PM
D. Pre columna Horno donde la muestra es
desorbida a T alta bajo corriente
de gas portador, una vez
desorbidos son retenidos en una
2. Splitless (Vaporizante)
trampa criogénica hasta
Toda la muestra va a la columna. finalización de la desorción, se
 efectúa la inyección por medio
de calentamiento rápido de la
trampa fría.
3. Headspace
Analiza alícuota de atmosfera en
equilibrio con la muestra, se
mantiene control de T y los
vapores en equilibrio son
arrastrados por el gas portador.
4. Purga y trampa
Solo a muestras líquidas
Renovación del gas en equilibrio,
consigue desplazar componentes
volátiles a la fase gaseosa, los
vapores quedan en la trampa y
se van concentrando luego esta
es calentada y los vapores se
arrastran al cromatógrafo.
Horno y columnas
Horno: control de T
 Enfriamiento y
calentamiento rápido
 Programación T
*Aumentar T : tr reducidos, Rs
reducida y agudiza picos.
Columnas:
*Soporte
 Poro uniforme
 Inerte
 Resistente
 Partículas pequeñas
 Ser desactivado
Ladrillos refractarios o tierras
diatomeas
En cromatografía gas-sólido no se
usa FS.
*Carbón
*Alúmina
*Sílica gel
*Tamices moleculares
Los grupos silanol provocan coleo
por puentes de H con muestras
polares.
Lavar con ácido.
Silanización: disolver DCMS en
hexano, añadir fase inerte, calentar
a 50° C por 10 min y enjuagar con
metanol 4 o 5 veces y secar con
aire.
1. Columnas empacadas
FS  Fase líquida
Mesh: entre más grande menor
es el tamaño de partícula que
retiene.
Aumenta la P al aumentar el
largo y el tamaño del soporte.
Acondicionamiento: elimina H2O,
compuestos orgánicos, gases
adsorbidos y disolvente.
Procedimiento:
Conocer máx. T de la columna,
conectar el inyector pero no el
detector, hacer pasar el gas de
arrastre a T ambiente y calentar
el horno a T indicada.
2. Columnas capilares
WCOT (pared recubierta)
 -Más frecuentes
-Película sobre las paredes.
SCOT (soporte recubierto) para
líquidos
-PLOT es para gases
F 
SOT (sílice fundida)
-Recubierta con poliimida
*Resistencia, más flexible y
menos reactiva
Entrecruzamiento: unir FS con la
columna ya enlazada
FS polimerizada: mayor duración
columna, limpieza, menor
sangrado y mayor estabilidad T.
*POLARES EN GRUPOS SILANOL
ORIGINA PICOS ANCHOS,
COLEO…
Película gruesa analito volátil
Película delgada analito poco
volátil
Precolumna
*No tiene FS
*Alineación de analitos
Detectores
LC: mínima concentración que
puede detectar.
*10 veces señal ruido
LD: mínima cantidad de analito
que puede ser detectada.
*3 veces señal ruido
Sensibilidad: cantidad de analito
que debe pasar por el detector
en un segundo para aumentar
1% la respuesta de la línea base.
Características:
 Sensible
Estable
 Tiempo respuesta corto
1) TCD (conductividad
térmica)
*Universal
*Sensible a concentración.
*No destructivo
*Orgánicos e inorgánicos,
cualquier compuesto con CT
diferente al gas de arrastre.
*No H2
*Utiliza He como gas de
referencia, no debe contener O2
porque disminuye vida
filamento.
Funcionamiento: aplica voltaje a
un filamento calentándolo,
aumenta la resistencia (mayor R
mayor Sensibilidad), Filamento
de W-Au y W-Re
Temperatura límite: 400°C
*SE PUEDE RECOGER SOLUTO AL
FINALIZAR DETECCIÓN.
*SE PUEDE CONECTAR EN SERIE *Iones son recogidos como FID.
POR SER NO DESTRUCTIVO O
USAR TRAMPA FRÍA. *No lavar con jabones

*NO SE PUEDE USAR COLUMNA *No usar solventes con cloro

CAPILAR PORQUE SE USA *Cambiar bola por desgaste
MUCHO FLUJO.
*No reactivos silanizados
2) FID (ionización llama)
4. FPD (fotométrico llama)
*Mezcla aire y H2 10:1 (provocan
llama pequeña). *Para S y P.

*El jet y colector constituyen el *P---HPO y S en S2

par de electrodos a los que se le
aplica diferencia de potencial de *Se usan filtros y
400V que generan pequeña fotomultiplicador.
corriente.
*Más sensible que NPD.
*Los comp. orgánicos se
*Más sensible P
pirrolizan y producen iones y e-
que conducen electricidad a *Tiene dos llamas
través de la llama.
5. ECD (captura electrónica)
*Sensible a masa.
*Para grupos funcionales
*Gas N2 y He electronegativos

*Es destructivo *Insensible para alcoholes,

hidrocarburos y aminas.
*Respuesta solo a orgánicos.
*T 400°C
3) NPD (termoiónico)
*N2 como gas de arrastre sin O2
*Sólo N y P
*No destructivo
*Modificación del FID.

*Selectividad P>N 10:1

*Más sensible que un FID para P

y N.

*Contiene esfera de silicato que

ayuda a la emisión de e-.

*Aire e H2 forman plasma que

alcanza T 600-800°C.
 6.PID

Tipos de ionización

A. Impacto electrónico
Calentamiento de muestra
para producir vapor
molecular se ioniza con
bombardeo de e- de un
filamento emitidos por efecto
termoeléctrico.
*Fuente dura
*Rompe enlaces
*Forma iones positivos
*Grupos Funcionales

B. Impacto químico
*Fuente blanda
*Rompe poco
*Masa molecular del analito
*Introduce CH4 en región de
ionización se forma CH4+,
CH3+…

Obtención de datos

SIC (escoge MM sencilla)

SIM (MM fija + sensible)

SCAN (lee todo)

TIC (su0ma todos iones)