UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR.

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMÁTICAS.

ESCUELA DE QUÍMICA.
Bioquímica.
EXTRACCIÓN DE ADN
Edwin Bladimir Binilla Ascencio
Diego Romero Castañeda.
Objetivo: Aislar y observar el ADN de las fresas.
Fundamento teórico
Todos los seres vivos tenemos genes, estos son las unidades de almacenamiento de la
informació n genética, segmentos de ADN que contienen la informació n sobre có mo deben
funcionar las células del organismo. Los genes tienen elementos que indican de dó nde a
dó nde se ha de leer y su contenido determina la composició n de las proteínas que se han
de formar.
El ADN comenzó a ser estudiado en el añ o 1868 por Friedrich Miescher que denomina
junto con el ARN como ácidos nucleicos. La descripció n del ADN fue publicada por primera
vez en el añ o 1953 por Jamen Watson y Francis Crick, ambos galardonados con el Premio
Nobel de Medicina de 1962.
¿Qué es el ADN?
Es la macromolécula base de la herencia. Es un ácido nucleico que contiene la informació n
de las características hereditarias de cada ser vivo y las secuencias para la creació n de
aminoá cidos que generará n las
proteínas vitales para el
funcionamiento de los
organismos. El ADN o DNA (por
sus siglas en inglés) son siglas
para á cido desoxirribonucleico y
tiene como funció n principal el
almacenamiento de toda la
informació n necesaria para la
expresió n de determinadas
características, en segmentos
denominados genes o
empaquetada en cromosomas.
¿Dónde se ubica el ADN?
En las células procariotas (sin
nú cleo celular definido), el ADN se encuentra en el citosol, junto con los otros elementos
que flotan en ella. por lo tanto. su replicació n es inmediata, es decir no necesita recurrir a
otros procesos para transmitir la informació n genética en el momento de la divisió n
celular.
En las células eucariotas (con nú cleo celular definido), el ADN se encuentra ubicado en el
nú cleo celular. Existen 2 formas en que el ADN transmite la informació n genética en su
interior:
Antes de la división celular: esta se replica y es empaquetada con otras moléculas y
proteínas formando una molécula má s grande denominada cromosoma. De esta manera,
durante la mitosis, las 2 células hijas llevará n una copia del ADN original.
Para la traducción o síntesis de proteínas: la informació n de las secuencias de 3 bases
nitrogenadas (codó n) que determinará n las funciones de las proteínas del ADN de cada
organismo necesitan del á cido ribonucleico mensajero (ARNm) para viajar seguros hacia
fuera del nú cleo, hacia los ribosomas.
Como el ADN es un polímero de nucleó tidos es altamente hidrofílico y con carga neta
negativa debido a la presencia de un grupo fosfato en cada monó mero. Por esta razó n su
solubilidad en solventes polares es muy alta.
Este método se basa en la solubilidad diferencial del ADN. Una muestra de ADN en
solució n acuosa precipita al agregá rsele cationes (para neutralizar las cargas negativas
que posee) y alcohol. El alcohol disminuye la constante dieléctrica del solvente acuoso,
provocando una disminució n en la solubilidad del ADN, que, en presencia de altas
concentraciones de sales, precipita. Este método es ampliamente utilizado como una
forma de concentrar ADN. Se utilizan dos tipos de alcohol en este método: el etanol y el
isopropanol. La diferencia entre ambos es la capacidad de disminuir la constante
dieléctrica. Mientras que el isopropanol posee una mayor capacidad y por lo tanto es
posible usar menor volumen, tiene la desventaja de precipitar má s sales y por lo tanto
rinde un ADN de menor pureza que el etanol. La elecció n se basa en el volumen manejable,
prefiriéndose el etanol siempre que sea posible debido a la mejor calidad del ADN
obtenido.

¿Por qué utilizar una fresa como fuente de ADN?

Las fresas son ideales para hacer este experimento por dos motivos: son la fruta con la que
se obtiene má s cantidad de ADN y, ademá s, son octoploides, es decir, tienen ocho juegos
idénticos de cromosomas (las células humanas son diploides, tienen dos juegos de
cromosomas a excepció n de los gametos). Estas circunstancias hacen que el ADN de la
fresa sea fá cil de extraer y de ver. En cuanto a los componentes presentes en la solució n de
extracció n: el jabó n ayuda a disolver las membranas celulares y se añ ade la sal para
romper las cadenas de proteínas que unen los ácidos nucleicos liberando las cadenas de
ADN.

Procedimiento experimental
1. En un beaker de 50mL colocar 30 ó 40mL de alcohol isopropílico y dejarlo enfriar
en el congelador.
2. En un beaker de 150mL colocar 90mL de agua destilada y 10mL jabó n líquido para
platos y una pequeñ a cantidad de sal (NaCl). Esta será la disolució n de extracció n
de ADN.
3. En una bolsa de cierre hermético depositar de 3 ó 4 fresas, machacar bien las
fresas lo má s posible a modo de no dejar grumos.
 4. Verter la disolució n de extracció n de ad ADN y mezclar bien. Deshacer cualquier
grumo restante de fresa.
5. Con la ayuda de un colador, filtrar la mezcla en beaker de 250mL.
6. Filtrar nuevamente con papel filtro para deshacerse de los residuos má s pequeñ os.
Repetir 3 ó 4 veces.
7. Verter 15 ó 20mL de alcohol frío al filtrado. Dejar reposar y observar la formació n
de una capa blanca.
8. Separar la capa blanca con ayuda de papel filtro y realizar varios lavados con
alcohol isopropílico frío.

Referencias bibliográ ficas.

1. Lehninger. (2008). En M. M. David L. Nelson, PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY.
Madison, Wisconsin .

2. Mathews, C. K. (2013). Bioquímica. En C. K. Mathews, Bioquímica. Madrid, Españ a:

PEARSON EDUCACIÓ N, S.A. .