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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


Gutiérrez Trejo José Alberto, Sánchez Alonso Juan Eduardo
Grupo: 3FV1 Secc.2
Aislamiento del DNA de origen vegetal y su
caracterización espectrofotométrica

Centrifugamos y recuperamos el primer sustrato ya


Objetivo General
que es el que contiene el DNA y lo depositamos en
 Aislar purificar y caracterizar el DNA del un frasco con alcohol al 96° para que precipitara.
Recuperamos el DNA y lo disolvimos en una
chícharo.
solución de citrato salina diluida e hicimos una
disolución.
Introducción Conclusiones
El DNA dirige el funcionamiento de las células y se  Se obtuvo DNA a partir de extracto de
transmite a la progenie. Consiste en 2 cadenas chícharo.
polinucleotidicas que forman una doble hélice. La
información contenida en el DNA esta codificada en la Referencias
forma de bases púricas y pirimídicas. Cada monómero
nucleótido del DNA está formado por una base  Mckee y. Mackee J. (2014). Bioquímica las
nitrogenada, un azúcar desoxirribosa y un grupo fosfato. bases moleculares de la vida. 5° Edición. Mc
El DNA lleva la información necesaria para dirigir la Graw Hill. p.p 572-576
síntesis de proteínas y la replicación. La mayoría de las
moléculas de DNA poseen dos cadenas antiparalelas
unidas entre sí mediante las bases nitrogenadas, por
medio de puentes de hidrógeno.

Discusión de Resultados

Para aislar el DNA pesamos y después maceramos los


chicharos con Tris/EDTA/NaCl para mantener un pH de
8.5 y asegurar la carga negativa de los grupos fosfato,
también protegemos a nuestro DNA de las nucleasas ya
que el EDTA es un agente quelante por lo que forma un
complejo con el cofactor de estas enzimas. Después de
macera por 5 minutos adicionamos amilasa que es una
enzima encargada de romper enlaces glucósidicos para
poder posteriormente eliminarlos. Agregamos una
solución de NaCl saturada para lisar a la célula, por
gradiente de concentración para posteriormente agregar
SDS el cual es un detergente que disuelve fosfolípidos
de la membrana nuclear. Filtramos y lo
recuperar en un tubo Falcón al cual le adicionamos
mezcla de cloroformo:alcohol isoamilico para extraer a
los lípidos y cambiar la constante dieléctrica lo cual
provoca la precipitación de proteínas.

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