INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Gutiérrez Trejo José Alberto, Sánchez Alonso Juan Eduardo
Grupo: 3FV1 Secc.2
Aislamiento del DNA de origen vegetal y su
caracterización espectrofotométrica

Centrifugamos y recuperamos el primer sustrato ya

Objetivo General
 Aislar purificar y caracterizar el DNA del
chícharo.
Introducción
El DNA dirige el funcionamiento de las células y se
transmite a la progenie. Consiste en 2 cadenas
polinucleotidicas que forman una doble hélice. La
información contenida en el DNA esta codificada en la
forma de bases púricas y pirimídicas. Cada monómero
nucleótido del DNA está formado por una base
nitrogenada, un azúcar desoxirribosa y un grupo fosfato.
El DNA lleva la información necesaria para dirigir la
síntesis de proteínas y la replicación. La mayoría de las
moléculas de DNA poseen dos cadenas antiparalelas
unidas entre sí mediante las bases nitrogenadas, por
medio de puentes de hidrógeno.
que es el que contiene el DNA y lo depositamos en
un frasco con alcohol al 96° para que precipitara.
Recuperamos el DNA y lo disolvimos en una
solución de citrato salina diluida e hicimos una
disolución.
Conclusiones
 Se obtuvo DNA a partir de extracto de
chícharo.
Referencias
 Mckee y. Mackee J. (2014). Bioquímica las
bases moleculares de la vida. 5° Edición. Mc
Graw Hill. p.p 572-576

Discusión de Resultados

Para aislar el DNA pesamos y después maceramos los

chicharos con Tris/EDTA/NaCl para mantener un pH de
8.5 y asegurar la carga negativa de los grupos fosfato,
también protegemos a nuestro DNA de las nucleasas ya
que el EDTA es un agente quelante por lo que forma un
complejo con el cofactor de estas enzimas. Después de
macera por 5 minutos adicionamos amilasa que es una
enzima encargada de romper enlaces glucósidicos para
poder posteriormente eliminarlos. Agregamos una
solución de NaCl saturada para lisar a la célula, por
gradiente de concentración para posteriormente agregar
SDS el cual es un detergente que disuelve fosfolípidos
de la membrana nuclear. Filtramos y lo
recuperar en un tubo Falcón al cual le adicionamos
mezcla de cloroformo:alcohol isoamilico para extraer a
los lípidos y cambiar la constante dieléctrica lo cual
provoca la precipitación de proteínas.