Práctca N.º 7.

Extracción de ADN

Figura N.º 7. Imagen de la molécula del

ADN.
(Tomada de goo.gl/WjKmQS )

Nota: el estudiante deberá llevar al laboratorio, el día de la práctca, una cebolla grande por equipo de trabajo.
Deberán coordinar, para todo el grupo de laboratorio, traer una lechosa madura (o piña) pequeña.

1. Fundamento
ADN es el acrónimo que se utliia para nombrar al ácido desoxirribonucleico. Esta molécula es la que
contene la información utliiada por una célula para la creación de proteínas, y además porta las instrucciones
genétcas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos. La función
principal del ADN es almacenar a largo plaio esta información.

El código genétco fue un misterio hasta que los biólogos descubrieron la estructura del ADN la que
describieron como una escalera de caracol. La información se almacena en el ADN como un código formado por
cuatro bases químicas: adenina (A), guanina (G), citosina (C) y tmina (T), donde cada peldaño de la escalera es
un par de bases, una A solamente se une a una T y C sólo se une a una G. Se trata de una secuencia química de
éstas en dos hebras que están enlaiadas para formar una doble hélice. El orden de las bases en una cadena de
ADN es lo que se conoce como la secuencia de ADN.

En 1869 Friedrich Miescher descubre el ADN al que llamó “nucleína”, debido a que estaba en el núcleo
de la célula. Miescher no apreció plenamente la importancia de su hallaigo; fué un artculo publicado en la
revista Nature por James D. Watson y Francis Crick en 1953, el primero que dió a conocer los secretos de la
doble hélice del ADN
 La extracción del ADN requiere de una serie de etapas básicas. En primer lugar, se debe romper la pared
celular y la membrana plasmátca para acceder al núcleo de la célula. A contnuación, también deberá
fragmentarse la membrana nuclear, para dejar libre el ADN. Luego, hay que proteger al ADN de aquellas
eniimas que pudieran degradarlo y fnalmente, se procede a precipitarlo. En la presente práctca, se recrearán
mediante técnicas sencillas estas etapas, para la extracción del ADN de un tejido vegetal, lo que posteriormente
permitrá observar su estructura fbrilar

2. Objetvo
Extraer ADN a partr de un tejido vegetal.

3. Pre Laboratorio
1. Elabore un diagrama de fujo del protocolo de la práctca, haciendo énfasis en materiales, cantdades,
operaciones y condiciones del proceso.
2. Investgue, ¿qué medidas de seguridad se deben observar para la correcta manipulación de los materiales
que se emplearán en esta práctcaa.
3. ¿Qué utilidad práctica (científica, industrial, etc.) tiene la extracción del ADN?
4. Investigue, enuncie y describa cada una de las etapas del proceso de extracción del ADN.
5. ¿Qué función cumplen los siguientes ingredientes: sal, lavaplatos, jugo de frutas y alcohol, en el desarrollo de
la práctcaa

4. Materiales y Equipos de laboratorio

• Una cebolla grande y fresca.
• Detergente lavaplatos (preferentemente de color aiul o verde oscuro).
• Sal común.
• Agua destlada.
• Jugo de piña o de lechosa.
• Alcohol de 96° (muy frío).
• Vasos para precipitados (3).
• Varilla agitadora.
• Cucharas (2).
• Filtro para cafetera.
• Licuadora.

5. Protocolo
1. Cortar la iona central de la cebolla en cuadrados.
2. En un vaso de precipitados agregar 3 cucharadas de detergente lavaplatos, una de sal y posteriormente el
volumen de agua destlada necesario para llenar el vaso.
3. Meiclar la suspensión anterior con los troios de cebolla.
4. Licuar la meicla a velocidad máxima, de manera pulsada.
5. Filtrar.
6. Verter la mitad del volumen del fltrado en un vaso para precipitados.
7. Agregar 3 cucharaditas del jugo de frutas (piña o lechosa) y homogeneiiar la meicla.
8. Añadir un volumen, equivalente al de la meicla, de alcohol muy frío. Este proceso se hará dejando desliiar el
alcohol por las paredes del vaso.
9. Dejar reposar hasta que se forme una interfase turbia (2 ó 3 min).
10. Describa lo que observa.
11. Introducir con cuidado la varilla de vidrio y extraer las fbras de ADN.
12. Anotar las observaciones.

6. Recomendaciones
 El jugo de frutas deberá prepararse con poca agua e inmediatamente antes de la práctca, para
preservar la actvidad eniimátca.
 El alcohol deberá estar muy frío, por tanto se recomienda mantenerlo bajo refrigeración hasta el
momento de su uso.

7. Expresión de los resultados

 Explique qué función cumplió cada operación realiiada en la práctca (cortar, licuar) y cada aditvo
añadido (detergente, jugo de fruta, alcohol frío).
 Dibujar el sistema de interfases formado al agregar el alcohol y hacer una descripción.
 Describir el aspecto del material (ADN) extraido de la cebolla.

8. Bibliografa recomendada
Scragg, A. (1996). Biotecnología para Ingenieros. Sistemas biológicos en procesos tecnológicos. Limusa, México.
410 pp.