AD-M30 Manual Procedimientos Laboratorio PDF

MANUAL DE PROCESOS Y Código
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HOSPITAL PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO
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SAN JOSÉ CLINICO
DE LA Versión
PALMA Y APOYO DIAGNOSTICO
YACOPÍ V02-2019
MANUAL DE PROCESOS Y PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO

CLINICO
Elaboró Revisó Aprobó
Cargo: Bacterióloga Cargo: Líder Cargo: Gerente

Laboratorio
Nombre: Alexandra Nombre: Nancy Nombre: Oscar
Villarreal Martínez Sánchez
Fecha: Julio 2019 Fecha: Julio 2019 Fecha: Julio 2019
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INTRODUCCIÓN
Este documento reúne todos los procedimientos que se realizan en el

laboratorio clínico del hospital San José la Palma. Debe ser conocido por todo
el personal que labora en esta área, ya que su finalidad es la estandarización
de todos los procesos que se llevan a cabo en el laboratorio.
Es importante que cada año se revise y actualice en caso de que sea necesario.
OBJETIVOS
• Proporcionar una guía de los diferentes procesos y procedimientos que se
realizan en el laboratorio clínico.
• Ser una herramienta, práctica, de fácil acceso y fácil compresión para todo
el personal que trabaja en el laboratorio clínico
ALCANCE
Este manual ha sido diseñado para personal de Bacteriología que se encuentre

procesando muestras biológicas en el laboratorio del hospital San José La
Palma.
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QUÍMICA SANGUINEA
MANUAL DE USO DE EQUIPOSBIOSYSTEM A-15
1. CAPTACIÓN DE PACIENTES
La toma de muestra en el Hospital San José La Palma inicia cuando los

médicos reciben por consulta externa o por el servicio de urgencias los
pacientes que residen tanto en la cabecera municipal así como los que
provienen del área rural. Después de haber realizado la captación, los médicos
generan órdenes de laboratorio para solicitar exámenes dependiendo de la
necesidad de cada uno de los pacientes. Estos ingresan al laboratorio y se le
otorga un nuevo número consecutivo interno para registrarlo en el libro de
registro diario (Nota: Este archivo se encuentra en drive en la cuenta de gmail
del Laboratorio clínico “hsjlapalmalab@gmail.com, contraseña: hsjlab2014)
(Imagen N°1)
(Imagen N°1)
Finalizada la jordana de toma de muestras, llevamos las muestras a

centrifugar durante 10 minutos a 3500 RPM y se realiza la preparación del
equipo Biosystem A-15 antes de procesar las muestras sanguíneas.
1.1 ENCENDIDO Y PREPARACIÓN DE EQUIPO BIOSYSTEM A-15

ANTES DEL PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
Antes de iniciar con el procesamiento de muestras, se debe realizar los
siguientes pasos:
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1. Encender el computador Samsung y la CPU

2. Encender el equipo con el botón de encendido/apagado ubicado en la parte
de atrás
3. Ingresar al sistema del equipo Biosystem A-15 ubicado en la parte inferior
de la pantalla (Barra de herramientas)
4. Ingresar con el Usuario: ADMIN y contraseña: A-15
5. Se debe revisar que el contenedor de residuos este vacío
Nota: Si por el contrario este contenedor posee residuos, se deben
desechar en recipientes plásticos especiales para este fin. Después de
haber desechado los residuos, se debe agregar 100 ml de solución de
hipoclorito de sodio y finalmente se vuelve a ubicar el contenedor en el
equipo Biosystem A-15.
6. Revisar que el contenedor de líquido de sistema y el de solución de lavado
estén llenos (Botella con punto azul y verde respectivamente).
Nota: Si los contenedores están vacíos, se procede a prepararlos de la
siguiente manera: Para preparar el líquido se sistema se agregan 3 Litros
de agua destilada y 6 mL de reactivo “CONCENTRATED SYSTEM LIQUID” y
para preparar la solución de lavado se agrega 3 Litros de agua destilada y
14 mL de solución “CONCENTRATED WASHING SOLUTION” y finalmente se
vuelve a ubicar el contenedor con punto azul en el equipo Biosystem A-15.
7. Encender el analizador dando clic en el botón “warm-up”, ubicado en la
parte superior derecha de la pantalla.
Nota: Al encender el analizador, el equipo inicia un lavado con solución de
lavado y por ende se debe sustituir el contenedor de líquido del sistema
por el contenedor de solución de lavado, una vez realizado el lavado, se
debe cambiar nuevamente el contenedor por el de líquido de sistema y
automáticamente realizará un lavado y aclarado del sistema de
dosificación.
8. A continuación se deben sacar los racks de reactivos que se encuentran en
refrigeración y ubicarlos en las dos primeras filas del equipo
Nota: Antes del procesamiento de las muestras, los reactivos deben estar a
temperatura ambiente a fin de evitar provocar alteraciones en la lectura de
las diferentes técnicas.
9. Verificar el volumen de los reactivos a utilizar, si necesita más cantidades
diríjase a preparar. Nota: Preparar los reactivos según el volumen que
necesite, para ello tenga en cuenta la tabla N°1.
REACTIVO PROPORCIONES PARA LA PREPARACIÓN

Agua destilada Llenar el contenedor con agua destilada
Solución de
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lavado
Glicemia Llenar el contenedor con reactivo
Colesterol Llenar el contenedor con reactivo
Triglicéridos Llenar el contenedor con reactivo
Ácido úrico Llenar el contenedor con reactivo
Bilirrubina Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo AD y 1 ml (1.000
directa µL) de reactivo BD
Bilirrubina Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo AT y 1 ml (1.000
total µL) de reactivo BT
Proteínas Llenar el contenedor con reactivo
totales
Transaminasa Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo A y 1 ml (1.000
ALT µL) de reactivo B
Transaminasa Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo A y 1 ml (1.000
AST µL) de reactivo B
Fosfatasa Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo A y 1 ml (1.000
Alcalina µL) de reactivo B
Amilasa Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo A y 1 ml (1.000
µL) de reactivo B
Creatinina Agregar proporciones iguales de reactivo A y B
Urea/Bun Agregar 4 ml (4.000 µL) de reactivo A y 1 ml (1.000
µL) de reactivo B
Albúmina Llenar el contenedor con reactivo
Colesterol HDL Llenar el contenedor con reactivo de colesterol total
Tabla N°1
1.2. INGRESO Y POSICIONAMIENTO DE MUESTRAS
Para el ingreso de nuevas muestras se realiza teniendo en cuenta los

siguientes pasos:
1. Ir a la pestaña de “Sesión de trabajo”, ubicado en la parte superior

izquierda de la pantalla, luego hacer clic en “Nueva muestra” y luego dar
clic en “Datos pacientes” ubicado en la parte inferior izquierda de la
pantalla. (Imagen N°2)
2. Ir a “Crear nuevo” en la parte inferior izquierda y en “Código de
paciente”
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3. se ingresa el consecutivo nuevo interno, y se procede a llenar los datos

del paciente como el apellido y nombre, y se finaliza al dar clic en
“Aceptar” (Imagen N°3)
4. Para ingresar más pacientes se da clic nuevamente en “Crear nuevo” ”
(Imagen N°3) Nota: El paso 2 y 3 se realiza cada vez que se quiera
ingresar pacientes al sistema del analizador. Si se desea borrar
pacientes ya ingresados, se hace clic en el paciente que se quiere
eliminar y se utiliza el botón de “Eliminar” (Imagen N°3)
5. Después de haber ingresado los diferentes pacientes, dar clic
nuevamente en “Sesión de trabajo”, y luego hacer clic en “Nueva
muestra” allí encontrará tres variables: “Datos de muestra, código de
paciente y técnicas y perfiles”( Imagen N°4)
• En “código de pacientes” se ingresa el consecutivo interno dado por
el Laboratorio y se elegirá las técnicas que necesite realizar a cada
uno de los pacientes
Nota: Para seleccionar varias técnicas de un solo paciente, se oprime
el botón “shift” de teclado y se selecciona todas las técnicas de
interés, finalmente se da la flecha gris.
• En “Datos de muestra”, se despliega una primera lista dependiendo
si se quieren pasar controles, blancos, calibradores, urgencias y
muestras normales
• En “Datos de muestra”, se despliega una segunda lista dependiendo
el tipo de muestra a analizar como sueros, orina, sangre total o
líquidos
6. Luego de haber ingresado todos los pacientes y sus técnicas, damos en
el botón “Posicionar” ubicado en la parte inferior derecha de la pantalla
(Imagen N°5).
7. Los botones “Blancos y calibradores” y “Controles” se usaran
dependiendo de las técnicas que quiera calibrar o las técnicas a las que
le quiera pasar control de calidad (Normal y patológico), finalmente se
dará clic en el botón “Posicionar” para ubicarlos en el rack junto con las
muestras (Imagen N°5)
Nota: Los controles de calidad se deben pasar diariamente, de esta
forma se garantiza el funcionamiento del analizador.
Para posicionar y/o realizar modificaciones de las muestras, dar en
“Sesión de trabajo”, y luego en “Posiciones” (Imagen N°6).
8. En la parte superior en el centro, se podrán observar 4 racks, dos de
ellos pertenecen a los reactivos, y dos estarán disponibles para la
ubicación de las muestras, para realizar esta selección se da clic en
“Predefinidos” y luego en “Rack de muestras” ” (Imagen N°7).
9. Después se da clic en “Automuestras” ubicado en la parte inferior
izquierda de la pantalla y automáticamente las muestras, controles de
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calidad, blancos y/o calibradores se posicionaran en los respectivos

racks” (Imagen N°7).
10. Luego se da clic en el botón “Aceptar” ubicado en la parte superior
central (Imagen N°7).
11. Finalmente dar en el botón “Start” (Imagen N°7).
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1.3. PROCEDIMIENTO PARA INGRESO Y POSICIONAMIENTO DE

MUESTRAS
Imagen N°2 Imagen N°3
Imagen N°4
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Imagen N°5
Imagen N°6
Imagen N°7
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Nota: Las muestras representadas con un círculo de color azul indicaran

aquellas que se ubicaran en el tubo vacutainer original las cuales van a
contener suficiente cantidad de suero, y las muestras de color café serán
aquellas que por su mínimo contenido de suero en el tubo vacutainer serán
envasadas en copillas especiales. Para realizar la modificación se debe hacer
clic encima del círculo.
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1.4. INGRESO DE NUEVOS LOTES DE CONTROLES DE CALIDAD

Para ingresar el lote de un reactivo nuevo, se realiza lo siguiente:
1. Se debe iniciar sesión de trabajo

2. Dar clic en “Programación”, luego en “Técnicas”
3. En la parte izquierda de la pantalla, aparecen las técnicas y en la
derecha las configuraciones y las generalidades para cada técnica.
4. Dar doble clic en cada técnica para editar la información de los
controles
5. El tipo de control es múltiple, pulsar la flecha que indica el ingreso
para las técnicas a excepción de Colesterol HDL que es especifico
(Imagen N° 11)
6. En la parte inferior derecha se da la opción de nueva hoja que indica
poner el nombre que desee el usuario y el número de lote.
7. A la izquierda de la pantalla, aparecen las técnicas; se da clic sobre
una de ellas (aparecen dos veces, una para el control I o normal y
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otra para el patológico o nivel II) por lo tanto, se escoge el nombre o

el número del nuevo lote para ingresar los valores (Imagen N° 12)
8. En la parte inferior de la pantalla se da la opción para introducir las
concentraciones, estas están en las hojas que trae cada Kit tanto para
el nivel I y el II. (Importante, introducir primero la concentración
mayor y en seguida la menor)
9. Para cada técnica de debe pulsar guardar, y al final después de
introducir las técnicas requeridas, pulsar en “Aceptar” y así guardar
los cambios realizados (Imagen N°13)
Imagen N°11
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Imagen N°12
Imagen N°13
1.5 SEGUIMIENTO A CONTROLES DE CALIDAD
Para llevar a cabo el control de calidad de las diferentes pruebas, se

realiza lo siguiente:
1. Ir a la pestaña de “Históricos” y luego “Control de calidad”.
2. En la parte superior izquierda de la pantalla se encuentra “Técnicas”,
aquí se despliega un listado de todas las pruebas a las que diariamente
se le pasan controles de calidad normal y patológico (Imagen N°14)
3. En el botón de “Gráfica” se muestra la gráfica de Levey Jennings para
cada técnica, de esta manera se puede analizar si el equipo está
funcionando de manera correcta (Imagen N°15)
4. Si se llega a los 30 datos, debe ir al botón de “Introducir serie” para
agregar una nueva hoja.
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Imagen N°14
Imagen N°15
Nota: A final de cada mes se debe tomar pantallazo de cada gráfica para cada
una de las pruebas, pasarlas a Word y se deben guardar como archivo en la
carpeta ubicada en el escritorio.
1.6 PROGRAMACIÓN DE TÉCNICAS
Para programar una técnica debe realizar los siguientes pasos:

 Dar clic en el botón “Programación” en la parte superior izquierda de la
barra de herramientas.
 Se desplegará una lista con las técnicas ya programadas anteriormente
en el analizador.
 En la parte inferior izquierda, dar clic en el botón “Nuevo”, allí aparecerá
un perfil para crear una nueva técnica donde principalmente debe
ingresar los datos básicos en la pestaña “General” como: nombre de la
técnica, el modo de análisis (monoreactiva o birreactiva), el tipo de
reacción (Creciente o decreciente), reactivos compartidos (si se usan
uno o más reactivos).
 En la pestaña “Procedimiento”, se debe poner el tipo de lectura
(Monocromática o Bicromática), los filtros dependiendo del tipo de
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lectura, los volúmenes de muestra y reactivo, tiempos y factor de

dilución.
 La siguiente pestaña es la de “Calibración”, se insertan todos los datos
de acuerdo a la calibración de la técnica que está en el inserto.
 Seleccionar el tipo de calibrador (Múltiple o Específico), el número de
replicados del calibrador y blanco, y por ultimo poner la concentración
del calibrador.
 Para la pestaña “Controles” se debe poner el número de controles a
ingresar, en nuestro caso 2 (Normal y patológico), el criterio de rechazo
(número de desviaciones estándar), el tipo de control (Múltiple o
Específico), modo de cálculo (Manuel o Estadístico), y los datos de cada
control, tanto para el I como para el II se debe ingresar el lote, valor
mínimo y valor máximo.
 En la pestaña “Opciones”, se deben ingresar los límites analíticos,
principalmente el Límite de Absorbancia del blanco y el límite de
linealidad. Por último se ingresan los valores de referencia en la parte
inferior donde dice “Intervalo de Referencia”, agregar valor mínimo y
valor máximo.
 Finalmente dar clic en el botón “Aceptar” para que la técnica
programada quede guardada y se agregue al listado de técnicas del
analizador.
Nota: Si desea modificar alguna técnica ya creada, debe dar clic en el botón
“Programación” en la parte superior izquierda de la barra de herramientas. A
continuación se desplegará una lista con las técnicas ya programadas en el
analizador, dar doble clic sobre el nombre de la técnica que desee modificar y
automáticamente el sistema le permitirá agregar o eliminar datos de dicha
técnica, finalmente pulsar el botón “Aceptar” y la técnica quedará modificada.
1.7. BUSQUEDA DE RESULTADOS ANTIGUOS
Para buscar un resultado antiguo, hacer lo siguiente:

1. Ir a la pestaña de “Históricos” y luego “Resultados”
2. En la parte superior izquierda de la pantalla en “Fecha sesión” se
despliega las cada una de fechas en las que se ha iniciado nueva sesión
para el procesamiento diario, ya sea de consulta externa y/o urgencias.
3. La búsqueda se puede realizar ya sea eligiendo la fecha en la que se
procesó la muestra que desea captar o puede dar clic en “todas las
sesiones”, de esta manera el equipo desplegara el listado total de los
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pacientes ingresados, y puede proceder a buscar el paciente de acuerdo al

consecutivo interno del laboratorio (Imagen N°16)
1.8. ALARMAS
Imagen N°16
 Volumen de muestra insuficiente: Se debe detener el

procesamiento de las muestras al dar clic en “sampling-stop”,
luego dar clic en “Sesión de trabajo – Posiciones” el equipo
mostrará la muestra insuficiente cambiándolo de azul o café a un
color azul pálido. Para volverlo al color original doble clic en la
muestra, finalmente se llena la copilla con muestra suficiente y se
da clic en la fecha para continuar con el procesamiento (Imagen
N°17).
 Volumen de reactivo insuficiente: Se debe detener el

procesamiento de las muestras al dar clic en “sampling-stop”,
luego dar clic en “Sesión de trabajo – Posiciones” el equipo
mostrará el reactivo que finalizó cambiando el frasco a un color
verde pálido. Para volverlo de color verde se da doble clic en el
frasco, finalmente se prepara el reactivo y se da clic en la fecha
para continuar con el procesamiento (Imagen N°17).
 Movimiento anormal de la punta dosificadora: A la hora de

ingresar los pacientes y las diferentes pruebas, se debe tener en
cuenta destapar los reactivos a utilizar, de lo contrario la punta va
a chocar con las tapas de los reactivos, y a largo plazo provocará
que la punta dosificadora se doble o se parta. Si aparece esta
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alarma, sólo debe destapar el reactivo con el que la punta chocó

y dar clic en la flecha para continuar el procesamiento (Imagen
N°17).
 Finalización del rotor: El Analizador del Laboratorio clínico

Hospital San José cuenta con 9 rotores en total, 6 en uso y 3 de
reserva. Cada rotor contiene 120 pocillos para que se den cada
una de las reacciones de las prueba, sin embargo, debido a la alta
carga de pruebas por cada paciente, el rotor finaliza y se debe
hacer lo siguiente: Levantar la tapa del analizador, girar la tapa
del rotor para desajustarlo, cambiarlo por uno limpio y seco,
volver a ajustar la tapa del rotor y tapar el analizador luego dar
clic en “N-Rotor”, esperar que el analizador realice la
termostatización, luego dar clic en “Aceptar” y finalizar dando clic
en “Continuar” (Imagen N°17).
Imagen N°17
1.9. CAMBIO DE LAMPARA
Para poder acceder a esta utilidad debe:
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1. Iniciar sesión de trabajo

2. Ir al botón de “Sleeping”
Nota: La lámpara debe substituirse con el analizador apagado. Si el
analizador está en Stand by, el programa lo apaga automáticamente.
3. Ir a la pestaña “Utilidades” y luego en “Cambiar lámpara”.
4. “Aceptar” para entrar en “Modo Test” (Imagen N°18)
5. Retire las tapas del rotor y de la óptica.
6. El sistema del equipo indicará la forma en la que debe poner la nueva
lámpara.
7. Nunca debe tocarse la lámpara con los dedos, debe manipularlo con
guantes
Imagen N°18
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1.10. DESMONTE DE PUNTA DOSIFICADORA

1. Ir a la pestaña “Utilidades” y luego en “Desmontar punta dosificadora”.
2. Dar clic en “Aceptar” para entrar en “modo test”
3. Retirar todos los racks de la bandeja de racks.
4. Pulsar el botón “Cambiar punta” y luego en “Bajar punta” (Imagen N°19)
5. Una vez la punta baje, puede proceder a sustituirla o lavar la que ya está
usando, este lavado lo puede realizar con una solución de hipoclorito y
una jeringa, para retirar residuos dentro de la punta.
Nota: si la punta sube antes de acabar de cambiarla, dar clic en “bajar
punta” y continuar el proceso.
6. Por último, pulsar aceptar y salir de “Modo test”.
Imagen N°19
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1.11. LAVADO DE SISTEMA DOSIFICADOR

1. Ir a la pestaña “Utilidades” y luego dar clic en “Lavar sistema
dosificador”.
2. Dar clic en “Aceptar” para entrar en “modo test”.
3. Cada vez que pulse “Lavar” se realizan varios ciclos de lavado del sistema
dosificador (Imagen N°20)
4. Según el tipo de lavado seleccionado se deben cambiar algunos
elementos del analizador.
5. En esos casos, siga las instrucciones que aparecerán por pantalla.
6. Por último pulsar “cerrar” y salir de “Modo test”.
Nota: Existen dos tipos de lavado para el sistema dosificador, con líquido de
sistema y con solución de lavado/hipoclorito de sodio, cada vez que seleccione
un tipo de lavado, deberá cambiar el contenedor y luego dar clic en “Lavar”.
Imagen N°20
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2. HEMATOLOGÍA
El laboratorio del Hospital san José La Palma cuenta con el equipo

automatizado Counter 19 (Imagen N° 21), el cual está diseñado para realizar
cuadros hemáticos, sin embargo, existen ocasiones en las que se debe a
realizar cuadros hemáticos de forma manual, como por ejemplo:
1. Finalizan los reactivos como el Lisante, Diluyente o Rinse necesarios

para el procesamiento de las muestras, y el hospital no cuenta con
repuestos.
2. El equipo se encuentra en reparación
3. El hospital se queda sin fuente de energía
Imagen N°21
Nota: Para realizar cuadros hemáticos a través del equipo automatizado,

recurrir al libro de manual de uso, de lo contrario seguir leyendo el manual de
procesos para realizar cuadros hemáticos manuales.
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MANUAL DE USO DE EQUIPO COUNTER 19
2.1. ENCENDIDO Y PREPARACIÓN DE EQUIPO BIOSYSTEM A-15

ANTES DEL PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
Antes de iniciar con el procesamiento de muestras, se debe realizar los

siguientes pasos:
1. Encender el equipo con el botón de encendido/apagado ubicado en la
parte de atrás
Nota: Después de encendido, debe asegurarse de que todos los
parámetros estén en cero, Si por el contrario algún parámetro evidencia
algún número de células, oprimir “STARTUP” para volver a hacer lavado
de sondas.
2. Ir a “Menú”, “Mantenimiento” y luego “Limpieza con limpiador E-Z”
utilizando las flechas para desplazarse en la pantalla.
Nota: Este proceso se debe realizar diariamente, ya que el equipo se
utiliza 24 horas. Semanalmente se debe realizar el lavado en “Limpieza
con limpiador de sonda WL19 Probe cleanser AA).
3. Esperar a que el equipo realice el respectivo lavado (Dura aprox. 10-15
minutos)
2.2. BORRAR CONTROLES DE CALIDAD ANTIGUOS
Para llevar borrar los controles de calidad antiguos se realiza lo siguiente:
1. Ir a “Menú”, “Control de calidad” , “Tabla L-J” y luego “Archivo 1 o

“Control bajo”
2. Oprimir “DEL” para borrar todos los resultados.
3. Y finalmente “Intro”
Nota: Este procedimiento debe realizarse para el Archivo 2 y 3, ya que
pertenecen a los controles normal y patológico respectivamente.
2.3. INGRESO DE NUEVOS CONTROLES DE CALIDAD
1. Ir a “Menú”, “Control de calidad” , “Análisis L-J” y luego “Edición L-J”

2. Se procede a llenar los datos con los nuevos controles de calidad,
como el lote, la fecha de vencimiento, media y rango.
Nota: Este procedimiento debe realizarse para el Archivo 2 y 3, ya
que pertenecen a los controles normal y patológico respectivamente.
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Utilizar los valores de referencia de “instrumen MINDRAY BC-3200”

ubicados la hoja que acompaña los controles de calidad.
3. Al finalizar oprimir “Enter” para guardar lo realizado.
2.4. SEGUIMIENTO A CONTROLES DE CALIDAD
1. Ir a “Menú”, “Control de calidad” , “Análisis L-J” y luego “Gráfica L-J”

2. Con ayuda de una cámara, tomar foto a cada una de las gráficas (6
gráficas para cada archivo)
Nota: Este procedimiento debe realizarse para el Archivo 2 y 3, ya
que pertenecen a los controles normal y patológico respectivamente
3. Se deben descargar las imágenes, y en un archivo Word se deben
organizar para luego guardarlas en una carpeta ubicada en el
escritorio
Nota: Este seguimiento de los controles de calidad, se deben realizar
de forma mensual.
2.5. INGRESO Y PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
1. Antes del procesamiento colocarse los elementos de bioseguridad

2. Ir a “Menú”, “Recuento” y en la pestaña que se abre, ingresar el
número interno del laboratorio.
3. Mezclar muy bien cada uno de los tubos a procesar
4. Abrir el tubo y ubicarlo debajo de la punta aspiradora
5. Oprimir el botón gris
6. Esperar el análisis de la muestra y anotar resultados en el cuaderno
de registro diario
2.6. CALIBRACION DE PUEBRAS
1. Ir a “Menú”, “Configuración” y “Contraseña”

2. Ingresar 3210 y oprimir “Enter”
3. Clic a ganancia
Nota: La hemoglobina debe estar entre 8-9 (4.05)
4. Ir a menú nuevamente, para guardar los cambios realizados
5. Luego “Enter”
6. Y finalmente “STARUP”
2.7. OTRAS MODIFICACIONES

 Cada vez que finalice algún reactivo, se le debe dan ingreso (Fecha en la
que llega el nuevo reactivo) y se le debe dar salida al que finalizó, no
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olvidar registrar estos cambios en el CARDEX, carpeta ubicada en el

escritorio.
 Cuando se inicia un reactivo nuevo, en el equipo se realiza lo siguiente:
1. Ir a “Menú”, “Mantenimiento” y luego, “Purga de lisante” “Purga de
diluyente” “Purga de Rinse”
Nota: Se le realizará la purga dependiendo del reactivo que se vaya a
iniciar.
2. Esperar a que el equipo realice la purga y continuar con el
procesamiento de muestras
3. EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA
El frotis de sangre periférica suministra un medio para estudiar la sangre y

determinar las variaciones y anormalidades de estructura forma y tamaño de
los eritrocitos, así como también su contenido de hemoglobina y sus
propiedades de coloración.
Es útil en el estudio de algunas alteraciones hematológicas y como indicador de
la respuesta y los efectos deletéreos de diferentes tratamientos. Permite
además observar agrupaciones de plaquetas y los glóbulos blancos, cada uno
con su morfología característica.
Debido a ello, la técnica de realización del frotis debe ser impecable,

procurando que éste no sea excesivamente fino ni excesivamente grueso. Con
ello se conseguirá una distribución adecuada de las células en diferentes áreas
del frotis, cuyo conocimiento es fundamental tanto para observar la morfología
eritrocitaria, como para realizar la formula leucocitaria o recuento diferencial
de leucocitos.
Materiales
Para realizar el frotis sanguíneo se utilizan los siguientes materiales:
 Laminas nuevas y limpias, preferentemente con un extremo blanco

rugoso para el etiquetado (escribir el consecutivo interno).
 Marcador sharpie
 Una micropipeta para colocar 10 μL de sangre en la lamina
 Solución de Wright
Procedimiento (Imagen N°22)

1. Mezclar la muestra de sangre contenida en el tubo antes de preparar el
frotis. Nota: La sangre mal mezclada puede dar lugar a una distribución
inadecuada de las células.
2. Colocar 10 μL sobre la superficie la lámina nueva
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3. Utilice un segundo portaobjetos para distribuir la gota de sangre y

extenderla sobre la superficie.
4. Mantenga el segundo portaobjetos en un ángulo de 45o sobre la gota de
sangre y mueva un poco hacia atrás hasta tocar la gota de sangre,
dejado que la sangre se extienda a todo el ancho de la lámina
5. Empuje con rapidez y suavemente hacia adelante, extendiendo la gota
en forma constante y uniforme para formar una película fina de sangre
bien distribuida sin agujeros ni surcos.
Nota: El grosor del extendido se pude variar según sea el ángulo que
formen entre si ambos portaobjetos o ya sea por la cantidad de sangre
que ponga en la lámina.
6. Dejar secar la lámina a temperatura ambiente y en forma horizontal.
Imagen
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3.1. PARTES DE UN EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA

El frotis para su visualización tiene que tener cumplir características como el
grosor y presencia de sus tres zonas bien definidas para lograr una distribución
celular adecuada.
Cabeza
 Es la zona inicial de la extensión.
 Es la región más gruesa.
 En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los
hematíes forman aglomerados (pilas de monedas).
Cuerpo
 Es la zona media del frotis.
 Su espesor es el apropiado.
 En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos de
leucocitos.
 Contiene la "zona ideal" de observación, que corresponde a la
porción que limita con la cola.
Cola
 Es la zona final de la extensión.
 Suele tener un aspecto redondeado.
 Es la región más fina.
 En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes
(granulocitos y monocitos), y además. los hematíes están
deformados y presentan una tonalidad uniforme.
 En su porción terminal suelen ser más abundantes las plaquetas,
sobre todo si son grandes.
Imagen N°23
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3.2 COLORACIÓN DE WRITGH
Colorante de Romanowsky que tiñe con el Azul de metileno (sustancia básica)

las estructuras ácidas del núcleo, y con la eosina (ácida), las estructuras
básicas del citoplasma y especialmente la hemoglobina. Las preparaciones
óptimas permiten diferenciar gránulos, vacuolas, etc., y en consecuencia son
muy útiles en el reconocimiento de células hematopoyéticas y sus variaciones
patológicas. (Albor Químicos Wright, 2014)
1. Colocar la preparación en un soporte y se cubre con el colorante de

Wright, dejándolo por tiempo de 3 minutos
2. Posteriormente se añade agua destilada en partes iguales hasta obtener
un brillo metálico, dejando 2 minutos adicionales.
3. Finalmente se lava con agua corriente y se deja secar. Ahora que se ha
finalizado la preparación de la lámina, se coloca en el microscopio y con
el objetivo de 10 X se revisa la calidad de la coloración, la cantidad
aproximada de glóbulos blancos y se escoge el sitio para iniciar el
recuento
Imagen N°24
Nota: Tanto la eosina como el azul de metileno son muy sensibles a la

variación del pH de las diferentes estructuras celulares.
3.3. ANÁLISIS DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA
Eritrocitos o glóbulos rojos (Imagen N°25)

Son células sin núcleo, de forma bicóncava que obtienen su energía
principalmente de la glucólisis anaerobia. Su principal función es la de llevar el
oxígeno, desde los pulmones a los diferentes tejidos gracias a un transportador
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llamado hemoglobina (oxihemoglobina), y a su vez eliminar el CO2 producido

por el metabolismo de estas al pulmón.
Imagen N°25
Leucocitos o glóbulos blancos (Imagen N°26)

Conocidos también como glóbulos blancos. Su principal función es de defensa
contra agentes externos mediante dos tipos de respuesta: celular y humoral.
Normalmente hay entre 6000 y 10000 leucocitos por mm3 y se habla de
leucopenia cuando se encuentran disminuidos y de leucocitosis cuando están
aumentados.
De acuerdo a la presencia o ausencia de gránulos específicos, los leucocitos
pueden ser clasificados como granulocitos (neutrófilos, eosinófilos, y basófilos)
y a granulocitos (linfocitos y monocitos).
CELULA CARACTERÍSTICAS
Posee un núcleo multilobulado (3-5 lobulaciones)

 Gránulos azurofilos
 En su citoplasma es acidofilo y contiene
enzimas hidroliticas, lisozima y mieloperoxidasa
que le permiten actuar en la fase aguda de la
inflamación
 Tamaño de 12-14 micras
NEUTRÓFILO
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 Son células pequeñas que contienen un

núcleo circular oscuro y un escaso citoplasma
azul claro.
 Existen de pequeño tamaño con un
diámetro entre 6-8micras, núcleo y cromatina
condensada, citoplasma escaso, débilmente
basófilo.
 El de gran tamaño posee un diámetro 9-
15 micras, el núcleo con cromatina menos
condensada, el citoplasma más extenso de
LINFOCITO tonalidad débilmente basófila
 Núcleo bilobulado y posee granulaciones
acidofilas que contiene enzimas hidroliticas y
peroxidasa liberada en las vacuolas fagociticas.
 Limitados por una membrana fosfolipídica,
con una porción central cristaloide, rodeada por
una matriz (acidífera), rica en proteína catiónica
 Arginina, que tiene acción citotóxica
contra algunos parásitos.
EOSINOFILOS
 Núcleo bilobulado y grandes núcleos esféricos

basófilos y metacromaticos dados por
heparina e histamina.
 Tamaño entre 10-13 micras.
 Cromatina condensada.
BASOFILOS
 Núcleo central irregular con pliegues.

 Núcleo excéntrico en forma de “u”
 Citoplasma es abundante, levemente basófilo
y presenta granulaciones azurofilas.
MONOCITOS
Imagen N°26
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Plaquetas (Imagen N°27)

Son fragmentos citoplasmáticos anucleados de células gigantes llamadas
megacariocitos, originados en la médula ósea. Se observan en el frotis de
sangre periférica como agregados basofílicos. Su principal función es la
creación y propagación del coágulo.
Imagen N°27
4. HEMATOCRITO
El hematocrito (Hto) es la relación existente entre el volumen de eritrocitos y

el volumen total de sangre, expresado como porcentaje. Está directamente
relacionado con la concentración de hemoglobina, por lo que su determinación
constituye el procedimiento más simple para el diagnóstico de anemia.
Macrométodo (macro hematocrito) Procedimiento
1. Tomar muestra en tubo tapa lila con anticoagulante EDTA para 2,5 ml de
sangre total
2. Mezclar la muestra mínimo 10 veces
3. Con ayuda de una jeringa y una aguja de Wintrobe,
aspirar aproximadamente 1,5 ml de sangre.
4. En un tubo de Wintrobe dispensar la sangre de abajo hacia arriba,
teniendo cuidado de no dejar espacios de aire. Verifique que el tubo este
completamente lleno.
5. Colocar el tubo en la centrífuga por 10 minutos a 2500 rpm.
6. Realizar la lectura de abajo hacia arriba partiendo de cero.
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7. Informar en porcentaje.
8. Anotar lo resultados en el cuaderno de registro interno
Nota: Diariamente se deben realizar confirmaciones de mínimo tres (3)

hematocritos realizados en el equipo counter 19, de esta manera se evalúa el
procesamiento y la calidad de los cuadros hemáticos realizados de forma
automatizada.
5. VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR (VSG)
La vsg globular es un examen que nos permite conocer cuántos milímetros

sedimenta los glóbulos rojos en una hora, es una prueba que varía en diversas
situaciones patológicas, pues ayuda a determinar el estado agudo de una
enfermedad y es útil en el monitoreo de la evolución de una enfermedad
inflamatoria.
La VSG se representa en tres etapas:

1. Fase inicial de agregación: en ella comienza el apilamiento de los
eritrocitos y se produce una sedimentación lenta de los mismos. Dura
unos 10 minutos.
2. Fase de sedimentación rápida: en ella el apilamiento y la
sedimentación de los glóbulos rojos se produce a una velocidad alta y
constante. Dura unos 40 minutos.
3. Fase inicial de concentración: en ella la sedimentación se endentece.
Dura hasta el final de la segunda hora.
Un aumento de velocidad de sedimentación globular es signo de enfermedad,

excepto en variaciones fisiológicas como en el embarazo. Algo importante es el
aumento de esta prueba indica el grado de actividad de una enfermedad, por
lo consiguiente es útil el seguimiento de procesos inflamatorios crónicos como
artritis reumatoide, LES, en procesos infecciosos tales como tuberculosis,
apendicitis.
Procedimiento
1. Tomar muestra en tubo tapa lila con anticoagulante EDTA para 2,5 ml de
sangre total
3. Con ayuda de una jeringa y una aguja de Wintrobe, aspirar
aproximadamente 1,5 ml de sangre.
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4. En un tubo de Wintrobe dispensar la sangre de abajo hacia arriba,

teniendo cuidado de no dejar espacios de aire. Verifique que el tubo este
completamente lleno.
5. Llevar el tubo Wintrobe en el soporte de tubos de manera vertical
6. Contabilizar una (1) Hora a temperatura ambiente.
7. Realizar la lectura de arriba hacia abajo.
8. Anotar lo resultados en el cuaderno de registro interno
6. RECUENTO MANUAL DE PLAQUETAS
El recuento manual de las plaquetas es un procedimiento difícil a causa de su

pequeño tamaño, sus formas diversas y de su tendencia a la agregación.
El método de referencia es el descrito por Brecher y Cronkite en el cual se usa

microscopio de contraste de fase para realizar el recuento manual de
plaquetas. Se emplea sangre anticoagulada con EDTA. Con el objetivo de 100x
se realiza el recuento respectivo, ubicándose en el área más adecuada, donde
los glóbulos rojos apenas se toquen entre sí, con el fin de poder visualizar bien
plaquetas que se encuentren en 10 campos y sacar el promedio. Este se
multiplica por 15.000 y se informa en plaquetas/ml.
Procedimiento
1. Realizar coloración de Wright al extendido. Anteriormente descrito.
2. Contamos 10 campos consecutivos= PROMEDIO x 15.000= células
mm3//ml
FORMULA:
CONTEO DE PLAQUETAS EN 10 CAMPOS= SACAR PROMEDIO X 15.000
7. RECUENTO MANUAL DE LEUCOCITOS
El recuento de leucocitos es uno de los métodos de rutina. La condición previa

de todos los métodos de recuento es la dilución y preparación programadas de
una muestra de sangre. Se recuenta el tipo de célula deseado en un volumen
definido y se calcula el número de células en un micro litro de sangre.
Materiales
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 Cámara de Neubauer
 Reactivo de Turk
 Tubos de ensayo
 Micropipeta
 Puntas desechables
Fundamento
REACTIVO TURK: ácido acético, azul de Metileno=Colorea de color negro
En solución hipotónica de ácido acético, los glóbulos rojos se destruyen y el
colorante tiñe los glóbulos blancos permitiendo observarlos fácilmente. (Albor
Químicos Turk, 2014)
Procedimiento
1. La dilución se puede realizar en tubo colocando 0.380 ml (380μl) de
reactivo de Turk y se adiciona 0.02ml (20μl) de sangre.
2. Mezclar
3. Dejar en reposo de 5-10 min, para permitir la hemolisis.
4. Montar en la cámara de Neubauer.
5. Por capilaridad permitir el llenado, sin que inunde o queden burbujas.
6. Se puede colocar en una cámara de Neubauer húmeda por unos minutos
para que no se seque y permitir que las células se sedimenten.
7. Enfocar la cámara en aumento 10x y ubicar el cuadrante a contar,
Nota: Para iniciar el conteo de las células nucleadas, se debe contar los 4
cuadrantes, sumar todas las células contadas y hacer el cálculo con la
siguiente formula.
FORMULA:
Recuento total de leucocitos: N° de células nucleadas contadas x 50/ ml.
Recuento indirecto de blancos
1. Entre cuerpo y cola, se observan 3 campos microscópicos, en 10x.

2. Se cuentan los GB por campo, se cuentan por las manecillas del reloj.
3. Se suman los GB de los 3 campos contados y se saca el promedio.
4. El promedio se multiplica x 300.
5. Se obtiene un valor aproximado del número de GB.
EJEMPLO:
GB CONTADOS: 40+42+47= 129 / 3= 43 X 300 = 12900mm3

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Corrección de blancos
En el recuento de glóbulos blancos interfieren los normoblastos y los restos
nucleares. Se corrigen siempre y cuando se encuentren más del 10% de NB.
Forma de corrección de Blancos

1. Se realiza el recuento diferencial.
2. Conocer cuántos normoblastos o restos nucleares se obtuvieron en el
recuento diferencial.
3. Conocer el recuento total de blancos
FORMULA:
Leucócitos corregidos= Leucócitos x 100/ N° normoblastos + 100.
8. RETICULOCITOS
Los reticulocitos son células enucleados, con capacidad de síntesis de Hb,
proteínas y RNA, su tamaño es mayor al glóbulo rojo maduro, conserva un
grado de basofilia por los restos de RNA, que corresponden en el frotis
coloreado con Wright a la policromatofilia.
El recuento de reticulocitos es una prueba para clasificar anemias ya que su
número refleja la cantidad de eritrocitos producidos en medula ósea, el valor
del recuento de reticulocitos puede expresarse en valor relativo (%) o valor
absoluto (mm3) con respecto a la cifra total de hematíes.
Los reticulocitos deben contarse en las primeras 2 horas de la extracción de
sangre anti coagulada debido a que los reticulocitos siguen madurando in vitro.
Fundamento
El reticulocito es un glóbulo rojo joven que representa normalmente de 0.2 a 2
% de los glóbulos rojos circulantes. Estos contienen restos de RNA que se tiñen
con colorantes supravitales como el azul de cresar brillante. (Albor Químicos
Azul Cresil Brillante, 2014)
Procedimiento
1. En un tubo de ensayo agregar 2 gotas de sangre total y 2 gotas de Azul

de cresil brillante, si el hematocrito es muy bajo se debe agregar el
doble de sangre. (los volúmenes los pueden variar, siempre y cuando se
mantenga la proporción).
2. Se mezcla la suspensión sucesivamente y se deja a 37° por 15 minutos.
3. Se toma sangre del tubo y se realiza un extendido de sangre periférica
4. Dejar secar y proceder a observar en el microscopio en 100x.
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Nota: El sitio ideal es donde se encuentran 100 GR y se cuentan en 10

campos.
5. Se hace la relación luego de contar los 10 campos microscópicos de la
siguiente manera:
FORMULA:
RETICULOCITOS CONTADOSX100/100
Los reticulocitos de deben corregir en las anemias con el hematocrito o con la

Hb.
Valores de Referencia:
 Adultos: 0-2-%
 Niños: 2-6%
Forma de corrección de los reticulocitos en anemias
Se puede corregir con el HTO o con la Hb.
Formula: Hb del paciente x reticulocitos en % / Hb ideal
Formula: Reticulocitos x HTO paciente / HTO ideal (45%)
Hb ideal:
Hombres: 15g/dl
Mujeres. 14g/dl
Niños: 12g/dl
RETICULOCITOS ABSOLUTOS
Importante en anemias hemolíticas y en pacientes en tratamiento de las
anemias carenciales.
FORMULA:
N° Globulos Rojos mm3 x reticulocitos hallados / 1000 GR contados.
9. HEMOCLASIFICACIÓN
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Los glóbulos rojos utilizados en estos procedimientos poseen en la membrana

los antígenos que al unirse (enviro) con los anticuerpos específicos producen
reacciones que son fácilmente visibles, actuando como si fuesen los
indicadores del punto final de la hemoaglutinación.
La hemoaglutinación se considera la reacción de Ag-Ac de mayor utilidad en el

laboratorio de Inmunohematología, por lo cual se hace indispensable recordar
las características y las condiciones que modifican dicha reacción, para poder
determinar con claridad los requerimientos óptimos que permitan obtener la
mayor constante de equilibrio en cada prueba específica, y en esta forma se
asegure la confiabilidad y contribución exitosa de los procedimientos
empleados en el estudio de los grupos sanguíneos. También es necesario
conocer las características específicas de comportamiento de los aglutinógenos
y aglutininas del sistema ABH
Procedimiento
1. Toma de muestra en tubo tapa lila para 2,5ml de sangre total

(Anticoagulante EDTA)
3. Colocar en lámina 3 gotas de sangre total
4. Agregar suero hemoclasificador anti-A a la primera gota de sangre
5. Agregar suero hemoclasificador anti-B a la según la gota de sangre
6. Agregar suero hemoclasificador anti-D a la tercera gota de sangre
7. Mezclar y observar la presencia de aglutinación. Máximo 2 minutos
8. Analizar el resultado y determinar el grupo sanguíneo correspondiente
En neonatos:
 Si la sangre de cordón presenta gelatina de Barton, lavar los glóbulos

rojos con solución salina 4 veces y con el botón obtenido montar la
hemoclasificación con el proceso anterior.
 Si no se toma sangre de cordón se punciona con la lanceta el dedo
anular de la mano del recién nacido se colocan tres gotas en una lámina
y se sigue el procedimiento normal con los anti-sueros
 La confirmación para los Rh negativos se hace agregando a una gota de
sangre una gota de suero anti-CDE observando la presencia o ausencia
de aglutinación
 Anotar el resultado en el cuaderno de registro.
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Identificación de aglutinógenos. Prueba globular, directa o de beth-

vincent
Método en tubo
Materiales
Láminas porta-objeto.
Tubos de ensayo
Procedimiento
1. Marcar cuatro tubos de ensayo de vidrio con el No.de la muestra y

el nombre del antisuero correspondiente al antígeno que se va a
investigar y un tubo para el control con solución salina
2. Tomar 2 a 3 gotas de los glóbulos rojos en estudio y lavarlos una
vez con solución salina centrifugando a 3.400 r.p.m. x 2 minutos
o a 1.000 r.p.m. x 5 minutos.
3. Decantar completamente para eliminar el sobrenadante y preparar
una suspensión del 3-al 5% en SS de los hematíes previamente
lavados.
4. Seleccionar 4 tubos e identificarlos con marcador como A, B, AB,
Control, respectivamente.
5. Centrifugar a 3.400 r.p.m. x 15” o a 1.000 r.p.m. x 1 minuto.
6. Desprender el botón de células del fondo del tubo agitándolo
suavemente; inclinarlo hasta la posición horizontal para apreciar
completamente la aglutinación. Se debe usar siempre ayuda
visual.
7. Anotar inmediatamente, tubo en mano, los resultados obtenidos
de la aglutinación o hemólisis.
COAGULACIÓN
10. PRUEBA DE PROTROMBINA (PT)
La prueba de Tiempo de Protrombina o tiempo de Quik evalúa la vía extrínseca

de la coagulación, siendo sensible el factor II, VII, X.
Por lo tanto, la determinación se aplica en los casos de:
 Estudios de rutina en los análisis pre quirúrgico
 Detección de alteraciones de los factores involucrados en la vía
extrínseca.
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 Control o monitoreo de la terapéutica con anticoagulantes orales como

coumadin o warfarina.
Esta prueba se basa en la determinación del tiempo que demora en coagular el

plasma descalcificado, colocado a 37° y en presencia de un exceso de
tromboplastina tisular y calcio, este método no detecta deficiencias de factores
VIII, IX, XII.
En el laboratorio para el área de coagulación contamos con el equipo Humaclot
Junior (equipo de Human), muy sencillo de usar y que procesa PT y PTT.
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Procedimiento PT
Primero corra los controles de plasma. Luego de tener el dato de PT para el

plasma normal actualícelo en el equipo como se indicó anteriormente.
El PT tanto para controles como para pacientes se realiza de la siguiente
forma:
1. Estando en la pantalla principal de PT y con la luz verde encendida

ubique una copilla en uno de los canales de muestras
2. Precaliente por 3 minutos las copillas vacías.

3. Agregue 50 ul de la muestra de plasma o del control
4. En otra copilla agregue 100 ul del reactivo para PT y ubíquelo en otra de
las posiciones de muestra (No usamos las posiciones para reactivos ya que
son muy grandes para el volumen de reactivo que usamos)
5. Active el cronometro 6 minutos, tiempo en el que la muestra se incubara
y el reactivo de PT se precalentara
6. Cumplidos los 5 minutos pase la copilla que contiene la muestra al canal
óptico y presione la tecla de inicio óptico
7. Aparecerá un aviso que dice WAIT
8. Luego aparecerá otro aviso que dice ACTIVE, justo en ese momento
adicione los 100 uL de reactivo de PT
9. Empezaran a correr los segundos en la pantalla del equipo

10. Cuando el sistema detecta la presencia de coagulo aparecerá un valor en
segundos q corresponderá al PT del paciente con su respectivo INR
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11. TIEMPO PARCIAL TROMBOPLASTINA (PTT)
Es una prueba sensible para detectar deficiencia de factores pro coagulantes

del plasma factores VIII, IX, XI, Y XII, así como la presencia de ciertos
inhibidores de la coagulación y deficiencia severas de los factores II, V y I,
pero no a trastornos plaquetarios, ni los factores VII y XIII, ni problemas
vasculares.
La prueba se utiliza para monitorear la terapéutica con heparina.
Esta prueba se basa en la determinación del tiempo que demora en coagular

un plasma descalcificado, colocado 37°C y en presencia de un exceso de
cefalina, activador y calcio; este método no detecta deficiencias de factores de
la vía intrínseca factor VII.
Procedimiento PTT
Primero corra los controles de plasma. Luego de tener el dato de PT para el

plasma normal actualícelo en el equipo como se indicó anteriormente.
El PT tanto para controles como para pacientes se realiza de la siguiente
forma:
1. Estando en la pantalla principal de PTT y con la luz verde encendida

ubique una copilla en uno de los canales de muestras
2. recaliente por 3 minutos las copillas vacías.

3. Agregue 50 ul de la muestra de plasma o del control más 50 ul de
reactivo de PTT
4. En otra copilla agregue 50 ul del reactivo CaCl2 y ubíquelo en otra de las
posiciones de muestra (No usamos las posiciones para reactivos ya que
son muy grandes para el volumen de reactivo que usamos)
5. Active el cronometro 6 minutos, tiempo en el que la muestra se incubara
y el reactivo de CaCl2 se precalentara
6. Cumplidos los 6 minutos pase la copilla que contiene la muestra y el
reactivo de PTT al canal óptico y presione la tecla de inicio óptico
7. Aparecerá un aviso que dice WAIT
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8. Luego aparecerá otro aviso que dice ACTIVE, justo en ese momento
adicione los 50 uL de CaCl2
9. Empezaran a correr los segundos en la pantalla del equipo

10. Cuando el sistema detecta la presencia de coagulo aparecerá un
valor en segundos q corresponderá al PTT (E). También se visualizará un
valor de INR ya que estamos en el canal de PT, pero en este caso este
valor se debe ignorar
INMUNOLOGIA
12. PRUEBA RÁPIDA TREPONÉMICA (FTA-ABS)
Las pruebas treponémicas usan al Treponema pallidum como antígeno y se

basan en la detección de anticuerpos contra componentes treponémicos. Se
consideran como pruebas estándar el FTA-ABS (fluorescent treponemal
antibody absorption test), MHA-TP (micro hemaglutinación), el TPHA y las
pruebas rápidas. Son utilizadas para confirmar o verificar la reactividad de las
pruebas no treponémicas.
Son un ensayo inmunocromatográfico en fase sólida para detección cualitativa
de anticuerpos tipo Ig G, Ig M e Ig A contra el Treponema pallidum (Imagen
N°28).
Pueden utilizarse para tamizaje o para confirmación. Los tipos de muestra con
que se ha estandarizado este método son sangre total, suero y plasma; otros
fluidos no son recomendados para realizar la prueba. Las muestras que son
obtenidas durante el período inicial de la infección, pueden tener niveles no
detectables de anticuerpos. Si se obtiene un resultado negativo y la clínica del
paciente es sospechosa, se debe repetir la prueba después de un tiempo según
criterio médico.
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Imagen N°28
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13. PRUEBA DE EMBARAZO
La gonadotropina Coriónica humana (hCG) es una hormona glucloproteica

producida por la placenta en desarrollo poco después de la fertilización. En el
embarazo humano hCG puede detectarse en orina como en el suero ya a los 7
días de la concepción.
Las muestras positivas reaccionan con el conjugado de color del anticuerpo

específico anti hCG para formar una línea de color en la región de la línea de
prueba de la membrana. La ausencia de esta línea de color sugiere un
resultado negativo. Para servir como control del procedimiento, siempre
aparecerá una línea de color en la región de la línea de control, si la prueba se
ha realizado correctamente (Imagen N°29).
Imagen N°29
Procedimiento
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1. Toma de muestra en tubo tapa roja de 3 a 5 ml para obtención de suero

2. Se centrifuga en la centrifuga 5 min a 3.500 rpm.
3. En la placa de gravindex debidamente identificada, la cual se almacena a
T° ambiente.
4. Se adiciona 3 gotas de suero en el pozo.
5. Se deja 5 minutos y se observa.
6. Si en el suero se encuentra la hormona hay reacción formándose así una
línea y en el control otra línea, por lo tanto la prueba es positiva cuando
aparecen dos líneas de reacción inmunológica.
7. En el caso que en el suero no se encuentre la hormona, solo se forma la
línea de reacción inmunológica del control, por lo tanto la prueba es
negativa cuando aparece una sola línea de reacción.
8. Se anota y se reporta en el cuaderno.
14. PROTEINA C REACTIVA - PCR

La PCR es un reactante de fase aguda y su nivel aumenta dramáticamente
durante los procesos inflamatorios que ocurren en el cuerpo. Este incremento
se debe a un aumento en la concentración plasmática de IL-6, que es
producida por macrófagos, células endoteliales y linfocitos T, como también lo
hacen los adipocitos. La PCR se liga a la fosforilcolina de los microbios.
Desempeña un papel importante en la inmunidad innata, como un sistema de
defensa temprano contra infecciones. Además se ha demostrado que sus
niveles se incrementan en los episodios agudos coronarios (síndromes
coronarios agudos), significando un mal pronóstico tanto a corto como a largo
plazo.
Procedimiento

3. Se toman 5 landas de suero y se colocan en una lámina de fondo oscuro
y se le adiciona 5 landas de reactivo.
4. Se mezcla con palillo.
5. Se pone en el agitador por 2 min a 100 rpm.
6. Se observa ausencia o presencia de aglutinación.
7. Si da positiva se procede a realizar diluciones.
8. Dichas diluciones se realizan al doble con solución salina.
9. Se le agrega el reactivo se mezcla y se pone en el agitador.
Nota: Se reporta según el último título multiplicado por la concentración
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10. Examinar macroscópicamente la presencia o

ausencia de aglutinación finalizado los 2 minutos
REPORTE:
POSITIVO: DILUCIÓN 1/6 : ENTONCES 6 X6 ( FACTOR DE DILUCION DE PCR)

RESULTADO: 36 mg/Dl
15. FACTOR REMATOIDEO- RA TEST
Los factores reumatoideos son un grupo heterogéneo de anticuerpos IgM

dirigidos contra determinantes antigénicas de la región Fc de las IgG. Son
importantes para el diagnóstico de artritis reumatoidea, pero también puede
encontrarse en otras enfermedades inflamatorias reumáticas y enfermedades
no reumáticas.
El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un
único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos del laboratorio. El
procedimiento para la cuantificación del factor reumatoides es por aglutinación
IgG sensibilizada. Existen para este propósito que son la turbidimetría y la
nefelometría.
Fundamento
Los factores reumatoideos séricos provocan una aglutinación de las partículas

de látex recubiertas con gamma-globulina humana. Preparadas para evitar
aglutinaciones inespecíficas. La sensibilidad del reactivo de látex RF ha sido
ajustada para detectar un mínimo de 8U/L de factor reumatoideo de acuerdo
con los estándares internacionales sin previa dilución.
Procedimiento
1. Toma de muestra en tubo tapa roja de 3 a 5 ml para obtención de
suero
3. Se toman 5 landas de suero y se colocan en una lámina de fondo
oscuro y se le adiciona 5 landas de reactivo.
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Nota: Se reporta según el último título multiplicado por la concentración.

10. Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de
aglutinación finalizado los 2 minutos
REPORTE:
POSITIVO: DILUCIÓN 1/2 ENTONCES 2X8 (FACTOR DE DILUCION DE

FACTOR RA)
RESULTADO: 16 Ul/ml.
16. ANTI - ESTREPTOLISINA O (ASTOS)

La Anti- estreptolisina O es el conjunto de anticuerpos específicos frente a la
estreptolisina O, una enzima extracelular producido por el Streptococos del
grupo A; B- hemolítico (Streptococcus pyogenes). La anti-estreptolisina puede
detectarse desde una semana a un mes después de la infección del
estreptococo. El Streptococcus pyogenes causa una amplia variedad de
infecciones en las vías respiratorias altas tales como la faringitis.
Fundamento
La Anti–estreptolisina O sérica con 200Ul/mL o valores mayores, provoca una

aglutinación de las partículas de látex recubiertas con estreptolisina O.
Procedimiento

3. Se toman 5 landas de suero y se colocan en una lámina de fondo oscuro
y se le adiciona 5 landas de reactivo.
10. Se reporta según el último título multiplicado por la concentración.
11. Examinar macroscópicamente la presencia o
ausencia de aglutinación finalizado los 2 minutos
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REPORTE:
POSITIVO: DILUCIÓN 1/8 ENTONCES 8X200 (FACTOR DE DILUCION DE FACTOR RA)

RESULTADO: 800 Ul/ml.
17. PRUEBA RÁPIDA DE VIH
La prueba de HIV1/2 es rápida, cualitativa para la detección de anticuerpos

para todos los tipos (IgG, IgM, IgA) especifico a HIV 1 incluyendo subtipo-0 y
HIV 2 simultáneamente en suero humano plasma o sangre total.
El antígeno HIV1/2 recombinante (gp41,p24 y gp36) con el conjugado coloidal

dorado y la muestra de suero se desplazan a lo largo de la membrana
cromatografíca hasta llegar a la región de prueba (T) y forman una línea visible
de complejo antígeno anticuerpo, complejo coloidal dorado con un alto grado
de sensibilidad y especificidad. Las líneas de prueba y la línea control en la
ventana de resultados han sido claramente etiquetadas: “1”para la línea de
prueba (HIV-1), “2” para la línea de prueba (HIV-2) y “C” para la “línea
control” tanto las líneas de prueba como la de control de la ventanilla de
resultados no son visibles antes de aplicar la muestra. La línea de control es
utilizada para el monitoreo de procedimientos (Imagen N°30)
Imagen
PáginaN°30
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Procedimiento:
1. Diligenciar el consentimiento informado, generar una asesoría para la

realización del examen y el paciente lo lleva firmado al laboratorio
clínico.
3. Se deja coagular la muestra.
4. Se centrifuga por minutos.
5. En la placa de VIH 1/2 debidamente identificada, la cual se almacena a
T° ambiente.
6. Se adiciona 10 µL de suero en el pozo y 4 gotas del diluyente
Nota: Es importante leer el manual de cada uno de los kits nuevos, ya
que nos siempre se utiliza de la misma casa comercial y por ende, no se
realizan la prueba de igual manera.
7. Se deja 15 minutos y se observa.
8. Si en el suero se encuentra anticuerpos para el HIV 1/2 hay reacción
antígeno anticuerpo formándose así una línea para HIV 1 y otra línea
para HIV 2, en el control otra línea, por lo tanto la prueba es positiva
cuando aparecen tres líneas de reacción inmunológica.
9. En el caso que en el suero no se encuentre los anticuerpos para HIV 1/2,
solo se forma la línea de reacción inmunológica del control, por lo tanto
la prueba es negativa cuando aparece una sola línea de reacción
(Imagen N°31)
10. Se anota y se reporta en el cuaderno.
Imagen N°31
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MICROSCOPIA
18. FROTIS DE FLUJO VAGINAL Y URETRAL
Las infecciones vaginales son una de las causas más frecuentes de consulta en
mujeres en edad fértil. Los síntomas incluyen flujo vaginal patológico, prurito
vulvar y olor vaginal; las enfermedades que con mayor frecuencia causan este
tipo de síntomas son: farinosas bacteriana, tricomoniasis vaginal y vaginitis
por cándida.
El frotis de flujo vaginal es un procedimiento no invasivo de técnica simple y
bajo costo que permite determinar la presencia de vaginitis y/o vaginosis;
consiste en la determinación del pH, test de aminas, examen fresco y Gram de
la muestra.
El objetivo es la identificación del agente causante de la irritación, secreción
abundante vaginal y el olor.
El frotis uretral por su parte, permite identificar la etiología de una infección en

la uretra y/o tracto genital masculino.
Coloración gram
Fundamento
 Cristal violeta Las bacterias Gram positivas poseen un elevado

contenido de glucopéptidos y poco contenido lipídico en sus paredes
celulares, a diferencia de las Gram negativas. Los alcoholes y otros
solventes orgánicos no penetran las paredes celulares deficientes en
lípidos de las bacterias Gram positivas, permitiendo que retengan el
complejo formado entre el fijador y el colorante primario. (Albor Químicos
Violeta Gram, 2014)
 Lugol: Las bacterias Gram positivas poseen un elevado contenido de
glucopéptidos y poco contenido lipídico en sus paredes celulares, a
diferencia de las Gram negativas. Los alcoholes y otros solventes
orgánicos no penetran las paredes celulares deficientes en lípidos de las
bacterias Gram positivas, permitiendo que retengan el complejo formado
entre el fijador y el colorante primario. (Albor Químicos Lugol Gram,
2014)
 Alcohol acetona: Las bacterias Gram negativas poseen un elevado
contenido lipídico en sus paredes celulares, a diferencia de las Gram
positivas. Los alcoholes y otros solventes orgánicos penetran las paredes
celulares de las bacterias Gram negativas, disolviendo su alto contenido
lipídico, permitiendo el escape del complejo formado entre el colorante
primario y el fijador. (Albor Químicos Etanol Cetona, 2014)
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 Fucsina de gram: Las bacterias Gram negativas poseen un elevado

contenido lipídico en sus paredes celulares, a diferencia de las Gram
positivas. Los alcoholes y otros solventes orgánicos penetran las paredes
celulares de las bacterias Gram negativas, disolviendo su alto contenido
lipídico, permitiendo el escape del complejo formado violeta-yodo y la
entrada del colorante de contraste. (Albor Químicos Fucsina Gram,
2014)
Procedimiento Frotis de Flujo Vaginal
1. Dirigirse al consultorio de toma de muestras citológicas con la

paciente.
2. Explicarle a la paciente en que consiste el examen que se le va a
realizar y aclarar sus dudas.
3. Solicitar a la paciente que se despoje de sus prendas de vestir de la
cintura para abajo.
4. Pedirle a la paciente que se ubique en posición ginecológica.
5. Introducir el especulo por la vagina, abrir, con el escobillón tomar
muestra del endocervix y realizar el frotis en la lamina
6. Con otro escobillón tomar una muestra de exocervis (en el caso de
mujeres en estado de gestación y de niñas únicamente tomas
muestra de exocervix, no se debe introducir especulo en estos casos)
y hacer el frotis de la muestra en la misma lámina.
7. Introducir el escobillón en la solución salina, una vez realizado el
frotis.
8. Retirar con suavidad el especulo y pedirle a la paciente que se vista
nuevamente.
9. Realizar un montaje de la solución salina y realizar el examen fresco
de la muestra describiendo las estructuras que se observa.
10. Fijar la lámina con los frotis y realizar la coloración de Gram.
11. Observar en el microscopio e informar los hallazgos hechos en el
examen fresco y en el Gram, reportar el resultado.
Nota: La lámina va dividida en 2 partes: 1- en la primera parte (distal)
marcar con el nombre de la paciente, y hacer un extendido de la
muestra tomada con el escobillón estéril de endocervix. 2-en la segunda
parte de la lámina (proximal), hacer un extendido de muestra tomada
con otro escobillón estéril de fondo de saco (exocervix) (Imagen N°32)
exo end
nombr o
e
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Procedimiento Frotis Uretral
1. El paciente no debe haber orinado antes de que se tome la muestra.

2. Limpiar el meato con un hisopo de algodón humedecido con solución
salina estéril.
3. Se le solicita al paciente que genere una ligera presión, de manera que
salga una gota de pus por el meato.
4. Tomar el pus con asa estéril y hacer un frotis en una lámina
portaobjetos, si no hay pus, introducir el asa estéril en el conducto
uretral aproximadamente 2.5 cm para obtener la muestra.
5. Tomar un tubo con 1 ml de solución salina y hacer una emulsión con el
asa y dejarlo allí a 37 °C.
6. Examen Fresco: En una lámina, colocar 1 gota de la emulsión y cubrirla
con una laminilla. Realizar el examen microscópico
7. Colorear el frotis con coloración de Gram.
8. Informar el fresco y el Gram.
FLUJO AISLAMENTO DE
CLASIFICACION VAGINAL O COLORACION MICROORGANISMO INFORME
SECRECION GRAM EN CULTIVO
URETRAL
Flora Vaginal Blanco Según edad BCP Lactobacillus sp Flora Vaginal
Normal opalescente Normal
Homogéneo Desequilibrio *Gardnerella Vaginosis
VAGINOSIS Gris, baja polimicrobiano: vaginalis Bacteriana
BACTERIANA viscosidad Cocobacilos *Bacteroides sp.
pH <4,5 Gram variables *Mobiluncus
Bacilos Gram
negativos
URETRITIS Secreción Diplococos Gram Diplococos
BACTERIANA abundante negativos intra Gram
HOMBRE HOMBRE y/o negativos intra
VAGINITIS MUJER extracelulares Neisseria y/o
BACTERIANA gonorrhoeae extracelulares.
MUJER Se debe solicitar
cultivo para
realizar pruebas
de identificación
de Neisseria
gonorrhoeae
VAGINITIS POR Blanco Blastoconidias y Candida sp Vaginitis por
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Candida sp grumoso ph Pseudomicelios Candida sp

<4.5
VAGINITIS BGP Vaginitis
INESPECIFICA Corynebacterium inespecífica
Reacción PMN
moderada o
abundante
Blatoconidias Candida sp
y/o Vaginitis por
Pseudomicelios Candida sp
Cocobacilos Gardnerella vaginalis y
Gram variables Bacteroides sp Vaginosis
INFECCIONES Bacilos curvos Mobiluncus sp bacteriana
MIXTAS Gram negativos
Cocobacilos Gardnerella vaginalis Vaginosis
Gram variables Bacteroides sp Bacteriana.
Bacilos curvos Mobiluncus sp Diplococos
Gram negativos Gram negativos
Diplococos Gram intra y/o
negativos intra Neisseria extracelulares.
y/o gonorrhoeae Se debe solicitar
extracelulares cultivo para
realizar pruebas
de identificación
de Neisseria
gonorrhoeae
Blastoconias y/o Cándida sp
Pseudomicelios Vaginistis por
Cocobacilos Gardnerella vaginalis Candida sp
Gram variables Bacteroides sp y
Bacilos curvos Mobiluncus sp Vaginosis
Gram negativos Bacteriana
Cocobacilos Vaginosis
Gram variables bacteriana
Bacilos curvos Gardnerella vaginalis
Gram negativos Bacteroides sp y vaginitis
Mobiluncus sp inespecífica
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19. UROANALISIS
El uroanálisis describe un grupo de pruebas tamiz con capacidad de detectar

enfermedad renal del tracto urinario. Dese el punto de vista de los
procedimientos médicos, la orina se ha descrito como una biopsia líquida.
El análisis de la orina comprende un examen fisicoquímico y otro microscópico;
en el primero se analiza color, olor, densidad, leucocitos, nitritos, proteínas,
glucosa, cetonas, urobilinogeno, bilirrubina y sangre; por medio del examen
microscópico se logra hacer un diagnóstico diferencial y una valoración de las
alteraciones del tracto urinario y de algunas enfermedades sistémicas. Se
pueden encontrar estructuras como cilindros, bacterias, células del epitelio,
cristales y moco.
Procedimiento
Verificar que la muestra cumple con las recomendaciones que deben tenerse
en cuenta para su recolección.
1. Mezcle la muestra, abra el frasco y sirva un poco en un tubo de ensayo.
2. Observar color y aspecto
3. Introduzca la tira en el tubo durante 3 segundos y realice la lectura
respetando los tiempos establecidos por cada casa comercial.
4. Coloque el tubo de orina en la centrifuga durante 10 minutos.
5. En caso de ser necesario confirmar la presencia de proteínas agregue en
un tubo de ensayo 1 ml de sobrenadante con 1 ml de ácido
sulfosalicilico, se considera que la reacción es positiva si aparece
turbidez.
6. Descarte el sobrenadante y re suspenda el sedimento.
7. Con la pipeta automática tome 10 uL de sedimento y colóquelo en la
lámina y ubique la laminilla.
8. Observe en el microscopio con el objetivo 40X.
9. Informar: células epiteliales, bacterias, leucocitos, hematíes, cilindros,
cristales, moco, levaduras, Piocitos.
10. Reporte los resultados y observaciones.
20. EXAMEN DIRECTO HONGOS
HIDRÓXIDO DE POTASIO 10%

El Hidróxido de Potasio 10 %, es un aclarante que sirve para destrucción de
estructuras como queratina de piel, permitiendo visualizar estructuras
micóticas presentes en muestras de piel. (Albor Químicos Hidroxido de Potasio
10%,2014)
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1. Marcar la lámina con el respectivo consecutivo interno

2. Ponerse los elementos de bioseguridad
3. Limpiar la zona con alcohol
4. Tomar muestra (piel, uñas etc.) utilizando como utensilio laminas
Nota: Es importarte obtener suficiente cantidad de muestra, de eso dependerá
la presencia de estructuras fúngicas.
5. Adicionar KOH al 10% y sobreponer una laminilla
6. Observar al microscopio en objetivo de 20x y 40x.
7. Informar la presencia o ausencia de estructuras fúngicas en la muestra
analizada.
8. Registrar en el cuaderno el resultado obtenido.
21. COPROLÓGICO
El coprológico tiene utilidad diagnostica en la identificación del agente

etiológico de las enfermedades diarreicas agudas, así como la mayoría de las
infecciones parasitarias intestinales del hombre, se basa rutinariamente en la
demostración de quistes, larvas o huevos de parásitos.
LUGOL PARASITOLÓGICO
Colorante que destaca las estructuras presentes en materia fecal, por ejemplo,
parásitos intestinales, almidón, etc. (Albor Químicos Lugol Parasitológico,
2014)
La masa de glucógeno y las estructuras nucleares de los trofozoítos, quistes y
huevos de parásitos en muestras de materia fecal son destacadas con la
solución de yodo que contiene el lugol. (Albor Químicos Lugol Parasitológico,
2014)

3. Colocar 1 gota de Solución salina y 1 gota de Lugol en la lamima.
4. Con un palillo, tomar la muestra de diferentes partes del bolo fecal.
5. Cubrir con una laminilla, cada una de las emulsiones realizadas.
6. Realizar el examen microscópico.
7. Reportar:
 Aspecto, color y consistencia.
 Flora bacteriana, almidón, levaduras, parásitos intestinales.
8. Anotar el reporte en cuaderno de registro.
22. TUBERCULOSIS
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La tuberculosis (TB), es una enfermedad bacteriana causada por el

Mycobacterium tuberculosis el cual afecta principalmente los pulmones, sin
embargo, se puede propagar a otros lugares como el corazón, huesos, sistema
genitourinario, entre otros. La forma de transmisión es de persona a persona
por medio goticulas de pflügler a través de estornudos o tos de un paciente
con enfermedad pulmonar activa. La TB suele estar acompañada de tos con
expectoración, que en algunos casos puede ser hemoptoica, dolor torácico,
debilidad, pérdida de peso, fiebre y sudoración nocturna.
Esta enfermedad es considerada un problema de salud pública a nivel mundial.
De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud (OMS), en el año 2009 se
presentaron 9.400.000 casos nuevos de TB para una incidencia de 137 casos
por 100.000 habitantes y una mortalidad de 1.4 millones a nivel mundial.
22.1. Captación de sintomáticos respiratorios:
El sintomático respiratorio se define como aquel paciente que presenta tos

productiva durante 15 o más días. En el Hospital San José de la Palma, la
captación inicia a través de dos estrategias. La primera, empieza cuando los
médicos reciben por consulta externa o por el servicio de urgencias los
pacientes que residen en la cabecera municipal, la segunda forma inicia a
través de los promotores de APS (Atención primaria en salud), quienes realizan
las visitas de campo, brindando acompañamiento en la recolección de la
muestra de esputo, además de la toma y supervisión de tratamiento para
pacientes positivos.
Después de haber realizado la captación de sintomáticos respiratorios, los
médicos generan órdenes de laboratorio para solicitar baciloscopias seriadas
junto con el cultivo ya sea para confirmar o descartar una TB, y piden al
paciente que se dirijan al laboratorio para recibir la información acerca de la
recolección de muestra.
22.2. Recolección de la muestra de esputo:
En el laboratorio se le da las siguientes recomendaciones:
1. El recipiente debe ser de plástico, boca ancha con cierre hermético, tapa
rosca, y debe estar marcado con nombres, apellidos, fecha y
enumeración de muestras.
2. Es importante explicar al paciente que la muestra debe ser un moco,
flema o gargajo de color verde, más no saliva y debe recolectarse
preferiblemente al momento en que el paciente se despierta durante
tres días consecutivos. Ejemplo:
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 Primer día se recoge la muestra al despertar.

 Segundo día el paciente recoge la segunda muestra al despertar y la
tercera al entregar la segunda muestra.
Nota: Si el paciente proviene de veredas alejadas al pueblo, se recogerán las

muestras como se indica a continuación:
 Primera muestra: Se recoge al despertar.
 Segunda muestra: Se recoge al momento de entregar la primera
muestra.
 Tercera muestra: Se recoge 1 hora después de haber recogido la
segunda muestra.
Nota: Los pacientes que viven en veredas pueden entregar las muestras a los
promotores de APS y estos la entregaran directamente al laboratorio.
22.3. Recepción de la muestra:

Al momento de recibir la(s) muestra (s) se evalúa la calidad de la muestra. A
cada paciente se le otorga un número de consecutivo nuevo para registrarlo en
el libro de baciloscopias y cultivos dado por el laboratorio departamental de
Salud Pública (LDSP) (Imagen N°33).
Imagen N°33
22.4. Preparación del extendido para la baciloscopia
Antes de iniciar con el procesamiento de la muestra usar todas las barreras de

protección e implementar las normas de bioseguridad (bata, guantes
desechables y tapabocas N95.
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1. Cubrir el área de trabajo con papel y mojarlo con hipoclorito de

sodio, usar el mechero ubicándolo entre la muestra y la persona que
está manipulando la muestra.
2. Antes de utilizar las láminas, procurar mantenerlas en un recipiente
con alcohol para eliminar la grasa.
3. Al momento de realizar baciloscopias, sacarlas del recipiente de
alcohol, secarlas con papel absorbente, y marcarlas con cinta de
enmascarar por detrás de la lámina y presionarla fuertemente para
que quede bien adherida y a la hora de colorear la lámina, no se filtre
el colorante y se borre la marcación.
4. Romper a la mitad un baja lenguas y con el extremo astillado tomar
la partícula útil de la muestra.
5. Tomar el envase correspondiente al número de la lámina y abrir
cuidadosamente el envase para evitar la producción de aerosoles
infectantes.
6. Realizar un círculos sobre el área central de la lámina con un
movimiento de rotación de forma que quede homogéneo, la
dimensión recomendada del extendido es de alrededor de 20 mm por
10 mm.
7. Dejar secar la muestra a temperatura ambiente.
Nota: En caso de que la muestra sea saliva se debe hacer el ovillo, dejar
secar la muestra y realizar nuevamente el ovillo sobre la misma lámina
varias veces.
8. Inactivar el exceso de muestra y el baja lenguas depositándolo en un
recipiente con hipoclorito de sodio, por diez minutos
aproximadamente.
9. Luego descartar en bolsa roja.
10. Una vez seco el extendido fijarlo con la llama del mechero.
11. Realizar la coloración de Ziehl Neelsen.
22.5. Fijación y coloración de Ziehl Neelsen (ZN)
1. Preparar todos los materiales a utilizar

2. Ubicar las láminas a colorear junto con el control positivo y negativo
en el soporte de coloración.
Tinción
3. Poner las láminas ya debidamente marcadas en el soporte y cubrirlas
con Fucsina fenicada de Ziehl Neelsen, filtrando directamente sobre
ellas al momento de colorear, de esta manera se retendrá la solución
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colorante y se evitarán los depósitos de cristales de fucsina sobre la

lámina.
Nota: Ubicar las láminas separadas 1 cm cada una, no deben tocarse.
Utilizar papel filtro para la filtración de Fuscina F, no olvidar registrar
la filtración en el formato de registro.
4. A través de un de mechero Bunsen calentar las láminas por debajo
hasta que se produzca la emisión de vapores, una vez estos sean
visibles dejar de calentar y cuando estos desaparezcan calentar
nuevamente hasta que vuelvan a aparecer, continuar con este
proceso hasta completar 5 minutos.
Nota: La solución colorante nunca debe hervir. No permitir que el
colorante se seque.
5. Dejar enfriar y enjuagar las láminas con un chorro suave de agua
para remover el exceso de colorante
Decoloración
6. Cubrir las láminas con alcohol ácido y dejar actuar durante 3
minutos. después de los cuales el color rojo deberá desaparecer casi
completamente, Si es necesario, repetir estas operaciones hasta que
el color rojo desaparezca, pero evitar un exceso de decoloración.
7. Lavar suavemente con agua la solución alcohol-ácida y el exceso de
colorante y remover el exceso de agua de enjuague de las láminas.
Contraste
1. Cubrir cada lámina con azul de metileno y dejar actuar durante un
minuto
2. Enjuagar cada lámina con agua
3. Remover el agua de las láminas y dejarlas secar al temperatura
ambiente
22. 6. Calidad del extendido y de la coloración
Una baciloscopia correctamente teñida debe mostrar un color azul claro,

debido al azul de metileno. Si el color es demasiado oscuro, es decir, cuando
es imposible leer un texto a través de la lámina, significa que el BK quedó muy
grueso, lo que perjudica la visión de los B.A.A.R.
22.7. Procedimiento para montaje de muestras
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1 2 3
. . .
4 5 6
. . .
7 8 9
. . .
1 1 1
0 1 2
. . .
Imagen N°34
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Nota: El control positivo para la coloración debe realizarle con extendidos de

esputos de pacientes que son positivos y el control negativo debe hacerse con
extendidos de esputos negativos para TB. No se debe realizar con la vacuna
BCG.
Cada vez que se vaya a realizar la coloración de Ziehl Neelsen, se debe montar
un control positivo y negativo. Tener en cuenta que las muestras positivas
deben ser inactivadas con hipoclorito de sodio al 5%.
Falsos positivos:
 Precipitados de colorante
 Rasguños de láminas reutilizadas
 Transferencia de bacilos de un extendido a otro cuando no se limpia el
objetivo de inmersión.
 Fibras, polen, residuos de alimentos.
Falsos negativos:
 Recolección inadecuada de la muestra
 Extendidos delgados
 Errores en la coloración
 Observación microscópica inadecuada
22.8. Observación microscópica y lectura
1. Colocar la lámina teñida sobre la platina, con el condensador en su

posición más elevada y ajustar la fuente luminosa para obtener el
máximo de luz mirando por el ocular, utilizando el objetivo estándar de
100x.
2. Enfocar una zona que contenga más leucocitos que células epiteliales
antes de poner la goa de aceite de inmersión.
3. Bajando lentamente el objetivo de inmersión con el tornillo
macrométrico, se formará una fina película de aceite entre el objetivo y
la lámina.
4. Completar el enfoque utilizando el tornillo micrométrico.
5. Recorrer la lámina en línea recta de izquierda a derecha, bajar o subir y
regresar de derecha a izquierda y de izquierda a derecha. Se deben
revisar 100 campos o realizar la lectura de la lámina durante 10
minutos.
Nota: Los bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) aparecen en color rojo
o rosa sobre un fondo de contraste azul.
6. La lectura debe hacerse de manera sistemática y estandarizada. Puede
comenzar en el extremo izquierdo de la lámina.
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Nota: Se deben revisar 100 campos o realizar la lectura de la lámina

durante 10 minutos.
7. Registrar el número de bacilos acido alcohol resistentes que se observan
por campo microscópico, en una cuadricula de 10 x 10. Informar según
la escala semi-cuantitativa
22.9. Cultivo Odawa Kudoh
Antes de iniciar con el procesamiento de la muestra usar todas las barreras de

Protección e implementar las normas de bioseguridad.
1. Marcar en el respaldo del tubo del medio de cultivo con el número de

registro de la muestra, el nombre del paciente y la fecha de siembra. Se debe
sembrar la segunda muestra por duplicado.
2. Cubrir el área de trabajo con papel y mojarlo con hipoclorito de sodio,
usar el mechero ubicándolo entre la muestra y la persona que está
manipulando la muestra.
3. Impregnar la muestra en un escobillón estéril, e introducirlo en un tubo
que contenga 3ml de NaOH (estéril) al 4%, dejarlo actuar antes de 2 minutos.
4. Finalizado el tiempo se saca el escobillón, se introduce en el medio de
cultivo solido Ogawa Kudoh y se prosigue a realizar la siembra en forma de
zigzag con movimientos de rotación, cerrar el medio de cultivo y llevarlo a
incubar a 37°C.
Nota: Los medios de cultivo se siembran y se incuban en el Laboratorio del

Hospital San José La Palma de Lunes a Miércoles, los días jueves se envían al
LDSP.
5. Deje floja la tapa de cada tubo para que se evapore la parte líquida de la
siembra.
6. Finalmente se le agrega a la muestra hipoclorito de sodio para inactivar y
desechar los materiales que se utilizaron
22.9.1. Envío de láminas y baciloscopias al LDSP
Los cultivos de Ogawa Kudoh se envían al laboratorio departamental de salud

pública los días jueves, debidamente rotulados y con la siguiente información
anexa:
1. Fotocopia de la cédula
2. Fotocopia de carné de afiliación de la EPS
3. Formato único de vigilancia de Micobacterias
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4. Fotocopia de orden de baciloscopias seriadas

5. Resultado de baciloscopias
6. Formato de remisión de cultivos
7. Hoja de remisión de muestras
Nota: Los resultados de los cultivos, el LDSP los envía dentro de los 2 y 3
meses siguientes al envío.
Las láminas de las baciloscopias se envían al LDSP de manera trimestral,
según el calendario otorgado por los mismos. Se deben enviar todas las
baciloscopias positivas y negativas que se realizaron en el mes de la captación
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23. LEPRA
La lepra es una enfermedad endémica de curso crónico, que se transmite de

persona a persona por vía áerogena; se caracteriza porque su reservorio es
exclusivamente humano. Afecta los nervios periféricos y la piel de personas de
todas las edades y género. El agente causal es el Mycobacterium leprae
llamado también bacilo de Hansen, es un microorganismo intracelular obligado,
no cultivable y acido alcohol resistente. Sus células blanco son los macrófagos
y las de Schwann en el sistema nervioso periférico. Se divide en promedio cada
dos semanas.
El periodo de incubación de la enfermedad va de 9 meses a 10 años. Sin

embargo cerca del 90% de la población es resistente al M. leprae, son factores
de riesgo: desnutrición, hacinamiento, personas susceptibles, estar en contacto
con un paciente no tratado.
Es importante mencionar que las lesiones por lepra en la piel no duelen, no

pican, no rascan. Los criterios diagnósticos son principalmente clínicos y se
complementan con la baciloscopia y la biopsia.
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Sintomático de piel: persona con lesiones cutáneas de mucho tiempo de

evolución con alteración o pérdida de la sensibilidad que no rascan y no
producen dolor.
Sintomático de sistema nervioso periférico: persona que presenta áreas

corporales con disminución o pérdida de la sensibilidad, engrosamiento de uno
o más troncos nerviosos, dolor espontáneo o a la palpación de uno o más
troncos nerviosos, hipotrofias o atrofias musculares, mal posición de uno o
varios dedos
23. 1. Manifestaciones clínicas
 Lesiones cutáneas hipopigmentadas o eritemato-hipocrómicas de

tamaño y forma variables, con pérdida de la sensibilidad.
 Lesiones de los nervios periféricos, puestas de manifiesto por
engrosamiento neural, con pérdida de la sensibilidad y de la fuerza
en manos, pies o en la cara.
En sus etapas iniciales los síntomas y manifestaciones clínicas de la lepra
no son motivo de consulta
Si al examen clínico se detecta un caso sospechoso de lepra, se debe
realizar baciloscopia de linfa y moco, teniendo en cuenta su resultado se
clasifica el tipo de lepra así:
 Lepra paucibacilar: se produce cuando la inmunidad celular es

deficiente y en los frotis cutáneos se observan pocos bacilos. Las
lesiones granulomatosas en la dermis, que en ocasiones sanan
espontáneamente, se presentan en forma de manchas hipopigmentadas
e hipoestéticas o anestésicas. La afectación de nervios periféricos puede
limitarse a causar pérdidas localizadas y leves de la sensibilidad; sin
embargo, en los casos graves, la pérdida sensomotora es extensa y
provoca alteraciones tróficas, atrofia muscular y contracturas.
Comprende: lepra indeterminada y tuberculoide con frotis negativo
(clasificación de Madrid); lepra indeterminada, tuberculoide polar y
tuberculoide borderline con frotis negativos (clasificación de Ridley y
Jopling).
 Lepra multibacilar: se produce cuando la inmunidad celular es
deficiente en general. Las lesiones cutáneas rugosas y nodulares se
deben a la infiltración de la dermis por macrófagos deficientes cargados
de M.
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leprae. También son comunes las lesiones nerviosas que, si no se

tratan, pueden originar deformaciones incapacitantes. Estas lesiones se
perpetúan principalmente durante las exacerbaciones inflamatorias de
base inmunológica, que son de dos tipos:
• Tipo I (reacciones de inversión), debido a un proceso de

inmunidad celular y caracterizado por una exacerbación aguda de las
lesiones cutáneas y por crisis focales o más generalizadas de neuritis,
que a veces dan lugar a lesiones nervioas permanentes.
• Tipo II (eritema nudoso leproso), debido a una reacción de

complejos inmunitarios y caracterizado por una respuesta de
anticuerpos. En la piel se producen lesiones inflamatorias agudas
dispersas. Los síntomas generales, cuando aparecen, comprenden
fiebre, linfadenopatía, iridociclitis aguda y, con menos frecuencia,
neuritis, poliartritis y glomerulonefritis.
Comprende: lepra lepromatosa y borderline (clasificación de Madrid); lepra

lepromatosa polar, lepromatosa borderline y semiborderline (clasificación de
Ridley y Jopling); y los casos con frotis positivo en los demás tipos de lepra
23.2. Captación de pacientes con lepra:
El sintomático respiratorio se define como aquel paciente que presenta tos

productiva durante 15 o más días. En el Hospital San José de la Palma, la
captación inicia igual a la de los sintomáticos respiratorios. Es importante
recalcar que este municipio no se han reportado hasta la fecha pacientes con
lepra.
23.3. Toma de la muestra
 Explicar al paciente el procedimiento que se va a realizar para la toma

de las muestras.
 Usar las barreras de bioseguridad antes de tomar la muestra.
 Marcar la lámina con 6 círculos de tal forma que se pueda ubicar la
muestra y no se borre en el momento de realizar la coloración.
 Para obtener la muestra, con el dedo índice y pulgar hacer presión en el
lugar en que se va a tomar la muestra hasta que la zona quede libre de
sangre (isquemia), limpiar la zona con alcohol al 70% y con una
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lanceta desechable hacer varias punciones para obtener una buena

cantidad de muestra.
 Se deben tomar seis muestras: El lóbulo de oreja derecha e izquierda,
lesión 1 y 2, o codo izquierdo y derecho y lesión 4 y 5 (Imagen N°8)
 Nota: Si no existen lesiones tomar de los lóbulos de las orejas, codos,
rodillas o falanges proximales del dedo corazón. La muestra de moco
nasal se debe tomar usando un escobillón humedecido con solución
salina o agua estéril.
 Una vez tomada la linfa, distribuirla uniformemente en un área de 6 ó 7
mm de diámetro, mediante movimientos circulares suaves.
 La lanceta debe ser descartada en un recipiente con fenol al 5 % una
vez terminada la última toma del paciente.
 Quitarse los guantes y lavarse las manos con jabón antiséptico.
Lesión N°4 Lesión N°3
Lesión N°1 o Lesión N°2 o

codo izquierdo codo derecho
Lóbulo de oreja Lóbulo de oreja

izquierda derecha
Identificación
Imagen N°8
23.4. Fijación y coloración de Ziehl Neelsen (ZN)
La coloración se realiza de la misma forma para baciloscopias de tuberculosis.
1. más elevada y ajustar la fuente luminosa para obtener el máximo de luz

mirando por el ocular, utilizando el objetivo estándar de 100x.
2. Enfocar una zona que contenga más leucocitos que células epiteliales
antes de poner la gota de aceite de inmersión
3. Bajando lentamente el objetivo de inmersión con el tornillo
macrométrico, se formará una fina película de aceite entre el objetivo y
la lámina.
4. Completar el enfoque utilizando el tornillo micrométrico.
5. Recorrer la lámina en línea recta de izquierda a derecha, bajar o subir y
regresar de derecha a izquierda y de izquierda a derecha. Se deben
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revisar 100 campos o realizar la lectura de la lámina durante 10

minutos.
Nota: Los bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) aparecen en color
rojo o rosa sobre un fondo de contraste azul.
6. La lectura debe hacerse de manera sistemática y estandarizada. Puede
comenzar en el extremo izquierdo de la lámina.
Nota: Se deben revisar 100 campos o realizar la lectura de la lámina
durante 10 minutos
7. Registrar el número de bacilos acido alcohol resistentes que se observan
por campo microscópico, en una cuadricula de 10 x 10. Informar según
la escala semi-cuantitativa (Imagen N°9)
8. Realizar el cálculo del índice bacilar (Imagen N°10)
ESCALA SEMICUANTITATIVA
Imagen N°9
Procedimiento para el cálculo del índice bacilar (IB):
Lesión N°4 ++ ++ Lesión N°3
Lesión N°1 o Lesión N°2 o

codo izquierdo +++ +++ codo derecho
Lóbulo de oreja ++ + Lóbulo de oreja

izquierda derecha
Identificación
Para cada muestra se registrará el número de cruces, de acuerdo con la escala
anterior.
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Índice bacilar (IB): Es el promedio aritmético de las cruces encontradas en

cada una de las muestras leídas. Totalizar el número de cruces del punto
anterior y dividir por el número de muestras leídas. Ejemplo:
Lóbulo de oreja derecha 1+

Lóbulo de oreja 2+
izquierda
Lesión 1 3+ IB:13/6=2.1
Lesión 2 3+
Lesión 3 2+
Lesión 4 2+
Sumatoria 13
Nota: El índice bacilar es un indicador objetivo para acompañar el diagnostico,

clasificación, control de pacientes multibacilares y evaluar los resultados del
tratamiento.
 Multibacilar (MB): >0
 Paucibacilar (PB: =0
Informe de resultados: el resultado debe informarse positivo o negativo,

indicando además el número de cruces por muestra y el índice bacilar.
23.5. Envío de láminas de baciloscopias al LDSP
Las láminas de las baciloscopias se envían al LDSP de manera trimestral,

según el calendario otorgado por los mismos. Se deben enviar todas las
baciloscopias positivas y negativas que se realizaron en el mes de la captación.
Nota: Si se capta un paciente con lepra y el laboratorio no se encuentra dentro
del mes de envío correspondiente, de igual manera se guardan las láminas y
se envía el jueves próximo según calendario.
24. LEISHMANIA
Es una enfermedad zoonotica que afecta la piel, mucosas y las viceras, el

agente etiológico es un protozoario del género Leishmania, que se transmite
por la picadura del vector flebotomíneo que en el nuevo continente pertenece
al género Lutzomyia.
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Los reservorios de este parasito son animales silvestres como el perezoso, oso
hormiguero, chuchas y el perro.
 Leishmaniasis cutánea: Las lesiones se inician como pápulas que se

convierten gradualmente en pequeños nódulos firmes que se van
ulcerando gradualmente. Las manifestaciones clínicas varían de acuerdo
con la respuesta inmune del hospedero, la especie del parásito y el
tiempo de evolución de la infección.
Las lesiones típicas se caracterizan por ser redondeadas, con un fondo limpio
de aspecto granular y bordes elevados y eritematosos, que usualmente son
indoloras.
La leishmaniasis cutánea difusa se presenta en pacientes que tienen un defecto
específico de la inmunidad celular y es causada por Leishmania amazonesis y
Leishmania mexicana; se presenta con pápulas, placas y nódulos
generalizados.
 Leishmaniasis mucocutanea: El paciente presenta lesiones en mucosa

nasal, faringe, laringe, paladar o labio. Al examen físico se puede
encontrar eritema y edema y en estados más avanzados, ulceración,
perforación y destrucción de tabique y mutilaciones.
Los síntomas principales son sensación de congestión y obstrucción
nasal, prurito nasal, rinorrea serohemática o purulenta y epistaxis.
 Leishmaniasis visceral: El parásito invade las células del sistema

retículo – histiocitario, se reproduce y se disemina por vía linfática o
sanguínea hasta los macrófagos de médula ósea, hígado y bazo.
Los síntomas predominantes son fiebre intermitente, malestar general,
astenia, anorexia, palidez, pérdida de peso y hemorragias. Los signos
clínicos son hepatoesplenomegalia, micropoliadenopatías, anemia y
signos de desnutrición.
24.1 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO CLÍNICO
Para Leishmaniasis cutánea, el examen directo puede realizarse de dos

maneras haciendo un raspado del borde interno de la úlcera ó haciendo una
incisión y raspando el borde activo de la lesión. Si existen dos o más lesiones,
debe escogerse para el examen directo la que tenga un menor tiempo de
evolución. Se deben tomar tres muestras de la misma forma para realizar dos
láminas por paciente.
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Materiales
1. Guantes
2. Gasas estériles
3. Alcohol al 70%
4. Lancetas nuevas
5. Laminas nuevas y desengrasadas
6. Guardian
24.2. Toma de muestra

3. Lave la lesión con gasa estéril y alcohol al 70%
4. Si la lesión tiene costra quitarla cuidadosamente, si no se logra,
remover el borde de la costra
5. Seleccione el borde que presenta menos sangrado
6. Proceda a realizar la incisión en el borde de la lesión, y realizar el
raspado con el lado romo de la lanceta
Nota: La hemostasia se debe lograr haciendo presión en pinza con los
dedos.
limpie la sangre que emana de la incisión y con la misma gasa presione
el borde de la lesión para hacer hemostasia y evitar el sangrado
7. Extender el material recogido en una lámina realizando 3 estrías por
lamina.
Nota: Se debe hacer por duplicado, es decir, en total realizar 6 estrías
en dos laminas. Si no se recoge suficiente material, se realiza otro
raspado del borde o en el fondo de la lesión
8. Dejar secar las láminas a temperatura ambiente
9. Cubrir lamina con el colorante de Wright previamente filtrado, dejar
tres minutos.
10. Adicionar agua destilada sin lavar el colorante, soplar la lámina hasta la
aparición de color metalizado y dejarlo aprox. dos minutos.
11. Quitar el exceso de agua
12. Dejar secar a temperatura ambiente.
13. Realizar el examen microscópico en objetivo de 100x.
14. Anotar el reporte en cuaderno de registro.
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24.3. INTERPRETACIÓN:
 Positivo: Cuando se observan uno ó más Amastigotes al recorrer toda

la lámina.
 Negativo: No se observan amastigotes al recorrer la lámina. Este
resultado no descarta el diagnostico de leishmaniasis.
REPORTE
Se observan Amastigotes compatibles con el género Leishmania
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25. MALARIA
La malaria es una enfermedad que se transmite a los humanos por mosquitos

hembra del género Anopheles, que estando infectados inoculan al picar, los
esporozoitos, que son la forma infectante del parásito. La transmisión también
se puede dar por transfusiones sanguíneas, congénita y por pinchazos con
agujas contaminadas. Es un grave problema de salud pública a nivel mundial
por la elevada carga de la enfermedad en 40% de la población mundial. Se
producen anualmente entre 300 a 500 millones de casos clínicos, y mueren
más de 1 millón de personas.
Los agentes causales en humanos son cuatro especies de protozoos que
pertenecen al género Plasmodium falciparum, Plamodium vivax, Plasmodios
Ovale y Plasmodium malariae. En Colombia, las especies más frecuentes en
zonas endémicas son P. vivax y P. falciparum; las infecciones por P. malariae
se dan en focos dispersos de la costa Pacífica mientras que de P. ovale no hay
transmisión.
El diagnóstico de malaria se confirma con la identificación de la especie de

Plasmodium presente en la sangre mediante examen microscópico de gota
gruesa. La toma de la muestra se debe realizar en el menor tiempo posible y
en cualquier momento del día una vez el paciente inicia la triada clásica que
abarca: La fiebre, escalofrío y sudoración.
Materiales
 Guantes
 Gasas estériles
 Alcohol al 70%
 Lancetas nuevas
 Laminas nuevas y desengrasadas
 Guardián
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25.1 Procedimiento Gota gruesa
1. Saludar al paciente y explicar el procedimiento que se llevará acabo

3. Identificar el dedo a puncionar, y con una gasa estéril, limpiar con
alcohol al 70%
Nota: Las posibles zonas para la punción capilar son el dedo índice o
corazón de la mano no dominante, y en los niños en el lóbulo de la
oreja, alón o grueso del pie. Este procedimiento también puede
realizarse con sangre anti coagulada con EDTA.
4. Realizar la punción con una lanceta, de manera firme y segura
5. Hacer presión y limpiar la primera gota de sangre, seguir haciendo
presión para obtener más gotas de sangre.
6. Dejar que las gotas de sangre caigan en la lámina con una distancia
aprox. de 2 cms.
Nota: Es importante obtener 2 láminas con 4 muestras por cada
paciente.
7. Con la ayuda de otra lamina se procede a extender las gotas de
sangre. Mover la lámina de arriba hacia abajo formando una Z para
formar dos cuadros de aproximadamente 1 cm2.
8. Dejar secar las láminas a temperatura ambiente
9. Finalmente, se le pide al paciente que se realice presión con un
algodón o gasa estéril impregnada con alcohol al 70%
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25.2. Procedimiento del Extendido de sangre periférica
También puede realizarse la lectura en un extendido de sangre periférica, de

esta forma se puede apreciar los parásitos y su relación con los eritrocitos,
permite la determinación de la especie de Plasmodium más fácilmente. Se
debe tener en cuenta que en parasitemias bajas puede salir negativo mientras
la gota gruesa es positiva.
Coloración de Field
1. Tomar 10 μL del tubo tapa lila con anticoagulante EDTA en una

lámina nueva
2. Realizar el extendido utilizando otra lamina
3. Dejar secar a temperatura ambiente
4. Introducir la lámina en un frasco con azul de metileno fosfatado
de 3 a 4 minutos.
5. Quitar el exceso de colorante
6. Preparar el colorante con 3 ml de sales amortiguadoras + una
gota (50 µl) de Solución A + una gota (50 µl) de Solución B por
cada lámina.
7. En una caja de Petri colocar la lámina boca abajo con ayuda de un
palillo y agregar el colorante preparado.
8. Dejar por tiempo aprox. de 9 minutos
9. Sacar la lámina y dejar secar a temperatura ambiente
10. Realizar la lectura en el microscopio con el objetivo de 100x
Nota: En caso de no tener en el laboratorio los colorantes para
realizar la coloración de Field, se puede realizar la coloración de
la gota gruesa con Wright.
25.3 Lectura de Gota gruesa
La fórmula empleada para realizar el recuento parasitológico es la

siguiente:
100 O 200
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A: Numero de parásitos observados en 100 o 200 leucocitos

B: Recuento leucocitario promedio de una población normal (8000
Leucocitos/μL).Idealmente recuento leucocitario del paciente
25.4 REPORTE
 Malaria con etiología por Plasmodium vivax: Se reporta el número

de parásitos/μL de sangre.
 Malaria de etiología por Plasmodium falciparum: se reportan las
formas asexuadas y sexuadas/ μL de sangre
 Malaria de etiología mixta: Se reporta de la manera anteriormente
descrita cada agente etiológico, colocando en primer lugar la especia
dominante
 Casos especiales en gota gruesa
 Si se han contado ≥ 500 parásitos sin llegar a 100 leucocitos, se detiene

el recuento después de la lectura del último campo. En este caso la
fórmula que se emplearía seria:
RECUENTO: N° DE PARASITOS CONTADOS X 8.000 LEUCOCITOS/μl
N° DE LEUCOCITOS
 Si el conteo de parásitos es menor de 10 parásitos en 100 leucocitos,

se debe llevar a 200 leucocitos el recuento.
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26. REPORTE AL SISTEMA CITISALUD
El ingreso de los resultados al sistema por parte del profesional se realiza

teniendo en cuenta los siguientes pasos:
1. Ir al escritorio y buscar el icono de citisalud
2. Dar doble clic e ingresar al sistema con el usuario y la contraseña que

previamente fue dada por el área de sistemas
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3. Ir a “Procedimientos”, ubicado en la parte superior izquierda de la

pantalla, luego hacer clic en “Consulta y cargue de resultados”
4. Desplegar la pestaña de “Lugar” y de “Vía de ingreso” según el servicio

que corresponda
5. Verificar la existencia del paciente en el sistema y proceder a dar doble

clic izquierdo para el ingreso del respectivo resultado. Se da clic en
“Definir resultado”
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6. Se realiza el reporte respectivo del resultado y luego hacer clic en

“Archivo” allí se da clic en “Guardar”
7. Para el reporte de exámenes de segundo nivel se verifica la existencia

del paciente en el sistema y proceder a dar doble clic izquierdo para el
ingreso del respectivo resultado. Se da clic en “Definir resultado” y en
observaciones se deja escrito el día de envío al laboratorio externo.
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Control de Cambios al Documento

Indique la
Nombre y
Parte del Nombre y
Cargo de
Fecha Justificación Documento Cambio que se le Cargo de
Versión Versión quien
del del Cambio donde se realiza al quien
actual Nueva elaboro el
cambio Cambio requiere documento Aprobó el
Cambio:
el Cambio Cambio:
30/07/2019 1 Adicionar y Punto 10 Se agregan el 2 Bacteriologa Bacteriologa
especificar Punto 11 procedimiento del equipo Alexandra Nancy Martinez
procedimientos Punto 12 Villarreal
27. BIBLIOGRAFIA
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http://www.quimicosalbor.com/di_prod_info.php?id=7&nmbr=Alcohol
Ácido ZN, Consultado 18 Abril 2014.
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 Albor Químicos Violeta Gram Pagina Web

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 Malashkevich VN, Chan DC, Chutkowski CT, Kim PS.Crystal structure of

the simian immunodeficiency virus (SIV) gp41 core: conserved helical
interactions underlie the broad inhibitory activity of gp41 peptides. Proc
Natl Acad Sci U S A. 1998 Aug 4;95(16):9134-9.
 Manaceros Gómez, Aura Rosa; Reporte grafico del cuadro hemático

automatizado: relación con frotis de sangre periférica; 2º Edición;
Editorial Pontificia Universidad Javeriana; 2010.
 Mejía, Gilberto Ángel; Ramelli, Mauricio Ángel; Interpretación Clínica del

Laboratorio; Editorial Medica Panamericana; 7ª Edición; 2006.
 Rojas Montoya, William; Inmunología; Corporación para Investigaciones

Biológicas (CIB) Colombia; 13ª Edición; 2004.
Página 84 de 85
E.S.E
AD-M30
SAN JOSÉ CLINICO
DE LA Versión
YACOPÍ V02-2019
Página 85 de 85

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MANUAL DE PROCESOS Y Código

MANUAL DE PROCESOS Y PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO

Elaboró Revisó Aprobó

Cargo: Bacterióloga Cargo: Líder Cargo: Gerente

Este documento reúne todos los procedimientos que se realizan en el

Este manual ha sido diseñado para personal de Bacteriología que se encuentre

MANUAL DE USO DE EQUIPOSBIOSYSTEM A-15

La toma de muestra en el Hospital San José La Palma inicia cuando los

Finalizada la jordana de toma de muestras, llevamos las muestras a

1.1 ENCENDIDO Y PREPARACIÓN DE EQUIPO BIOSYSTEM A-15

1. Encender el computador Samsung y la CPU

REACTIVO PROPORCIONES PARA LA PREPARACIÓN

1.2. INGRESO Y POSICIONAMIENTO DE MUESTRAS

Para el ingreso de nuevas muestras se realiza teniendo en cuenta los

1. Ir a la pestaña de “Sesión de trabajo”, ubicado en la parte superior

3. se ingresa el consecutivo nuevo interno, y se procede a llenar los datos

calidad, blancos y/o calibradores se posicionaran en los respectivos

1.3. PROCEDIMIENTO PARA INGRESO Y POSICIONAMIENTO DE

Imagen N°2 Imagen N°3

Nota: Las muestras representadas con un círculo de color azul indicaran

1.4. INGRESO DE NUEVOS LOTES DE CONTROLES DE CALIDAD

1. Se debe iniciar sesión de trabajo

otra para el patológico o nivel II) por lo tanto, se escoge el nombre o

1.5 SEGUIMIENTO A CONTROLES DE CALIDAD

Para llevar a cabo el control de calidad de las diferentes pruebas, se

1.6 PROGRAMACIÓN DE TÉCNICAS

Para programar una técnica debe realizar los siguientes pasos:

lectura, los volúmenes de muestra y reactivo, tiempos y factor de

1.7. BUSQUEDA DE RESULTADOS ANTIGUOS

Para buscar un resultado antiguo, hacer lo siguiente:

pacientes ingresados, y puede proceder a buscar el paciente de acuerdo al

 Volumen de muestra insuficiente: Se debe detener el

 Volumen de reactivo insuficiente: Se debe detener el

 Movimiento anormal de la punta dosificadora: A la hora de

alarma, sólo debe destapar el reactivo con el que la punta chocó

 Finalización del rotor: El Analizador del Laboratorio clínico

1.9. CAMBIO DE LAMPARA

Para poder acceder a esta utilidad debe:

1. Iniciar sesión de trabajo

1.10. DESMONTE DE PUNTA DOSIFICADORA

Para poder acceder a esta utilidad debe:

1.11. LAVADO DE SISTEMA DOSIFICADOR

Para poder acceder a esta utilidad debe:

El laboratorio del Hospital san José La Palma cuenta con el equipo

1. Finalizan los reactivos como el Lisante, Diluyente o Rinse necesarios

Nota: Para realizar cuadros hemáticos a través del equipo automatizado,

MANUAL DE USO DE EQUIPO COUNTER 19

2.1. ENCENDIDO Y PREPARACIÓN DE EQUIPO BIOSYSTEM A-15

Antes de iniciar con el procesamiento de muestras, se debe realizar los

2.2. BORRAR CONTROLES DE CALIDAD ANTIGUOS

Para llevar borrar los controles de calidad antiguos se realiza lo siguiente:

1. Ir a “Menú”, “Control de calidad” , “Tabla L-J” y luego “Archivo 1 o

2.3. INGRESO DE NUEVOS CONTROLES DE CALIDAD

1. Ir a “Menú”, “Control de calidad” , “Análisis L-J” y luego “Edición L-J”

Utilizar los valores de referencia de “instrumen MINDRAY BC-3200”

2.4. SEGUIMIENTO A CONTROLES DE CALIDAD

1. Ir a “Menú”, “Control de calidad” , “Análisis L-J” y luego “Gráfica L-J”

2.5. INGRESO Y PROCESAMIENTO DE MUESTRAS

1. Antes del procesamiento colocarse los elementos de bioseguridad

2.6. CALIBRACION DE PUEBRAS

1. Ir a “Menú”, “Configuración” y “Contraseña”

2.7. OTRAS MODIFICACIONES

olvidar registrar estos cambios en el CARDEX, carpeta ubicada en el