Regulación de la expresión génica

en procariotas
 Flujo de la información

Dogma central (Francis Crick 1957):

ADN ARN proteínas

 Flujo de la información

TRANSCRIPCIÓN
ADN ARN proteínas
TRADUCCIÓN
Mecanismos de regulación de la
transcripción en procariotas
 Mecanismos de regulación

Sistemas inducibles: el sustrato sobre el que van a

actuar las enzimas induce la síntesis de las mismas.
Sustrato = Inductor. Procesos catabólicos.

Sistemas represibles: el producto final de una reacción

enzimática impide la síntesis de las enzimas
intervinientes. Prod. final = Correpresor. Procesos de
biosíntesis o anabólicos.
 Proteínas reguladoras

En ambos casos participan proteínas de unión al ADN

(DNA-binding proteins)
En respuesta a una señal ambiental, reconocen un sitio
específico en el ADN
Pueden reconocer:
- un promotor (activación)
- un operador (represión)
 Escherichia coli: modelo para estudios de
expresión en procariotas

- organismo procariota
- ciclo vital muy corto
- pueden estudiarse cultivos puros de cepas mutantes
- permite estudiar la respuesta a cambios ambientales
- control genético coordinado: organización de genes en
operones (procariotas)
 Operón

Los genes estructurales implicados en un proceso

metabólico particular se organizan en un grupo bajo
control coordinado. Se transcribe un ARNm policistrónico.
 Operón lactosa

- 1 región promotora
operón - 1 elemento regulador: operador
Lac - 3 genes estructurales: z (β-galactosidasa),
y (permeasa), a (transacetilasa)

Aguas arriba del operador, 1 gen estructural de expresión

constitutiva (proteína represora) + promotor.
 Operón lac

Secuencia consenso -35 Secuencia consenso -10 o caja de Pribnow-Schaller

Secuencias promotoras
Proteínas que codifica el operón Lac

- 3 enzimas: β-galactosidasa, permeasa, transacetilasa

 Enzimas
Función:
Permeasa (y): disponibilidad del disacárido en la célula
β-galactosidasa (z): conversión a alolactosa y obtención
de galactosa y glucosa, para obtención de energía
Transacetilasa (gen a): eliminación de subproductos de
la digestión de la lactosa
 Proteína reguladora

- 1 proteína represora alostérica= “I” capaz de unirse a O en

forma dimérica, y de interactuar con la lactosa de manera
reversible
 Regulación negativa inducible

La proteína I unida al O inhibe la acción de la

polimerasa
 Regulación negativa inducible

Cuando la proteína I cambia de conformación, se

altera el sitio de unión al O
Regulación negativa inducible
 Regulación negativa

Expresión de los genes estructurales del

Operón lactosa
Expresión de los genes estructurales del Operón lactosa

Ausencia de inductor (Sin lactosa) Presencia de inductor (Con lactosa)

Ausencia de inductor Presencia de inductor
Genotipo silvestre z+ (Sin ylactosa)
+
a+ z+ (Conylactosa)
+
a+
i+ P+ O+ z+y+a+ NO NO NO SI SI SI
Genotipo silvestre z+ y+ a+ z+ y+ a+

i+ P+ O+ z+y+a+ NO NO NO NO NO NO
 Mutaciones del operón lac

z-: ausencia de beta galact. funcional

y-: ausencia de permeasa funcional

a-: ausencia de transacet. funcional

oc: expresión constitutiva del operón

P-: falta de unión con la ARN polimerasa

 Mutaciones estructurales

Expresión de los genes estructurales del

Mutantes Operón lactosa
Expresión de los genes estructurales del Operón lactosa
Mutantes
constitutivos Ausencia de inductor (Sin lactosa) Presencia de inductor (Con lactosa)
estructurales
Ausencia de inductor Presencia de inductor
Genotipo z+ (Sinylactosa)
+
a+ z+ (Conylactosa)
+
a+
i+ P+ O+ z+y-a+ NO NO NO SI NO SI
i+ P+
O+  z-y+a+
Genotipo z+
NO y+
NO a+
NO z+
NO SIy+ SIa+

i+ P+ O+ z+y-a+ NO NO NO SI NO SI

i+ P+ O+  z-y+a+ NO NO NO NO SI SI
 Mutaciones estructurales

Expresión de los genes estructurales del

Mutantes Operón lactosa
Expresión de los genes estructurales del Operón lactosa
Mutantes
constitutivos
estructurales Ausencia de inductor (Sin lactosa) Presencia de inductor (Con lactosa)
Ausencia de inductor Presencia de inductor
Genotipo z+ (Sinylactosa)
+
a+ z+ (Conylactosa)
+
a+
i+ P+ O+ z+y-a+ NO NO NO SI NO SI
Genotipo
i+ P+
O+  z-y+a+ z
NO
+
y
NO
+
a
NO
+
z
NO
+
SIy
+
SIa
+

i+ P+ O+ z+y-a+ NO NO NO SI NO SI

i+ P+ O+  z-y+a+ NO NO NO NO SI SI
 Mutaciones constitutivas

Expresión de los genes estructurales del

Operón lactosa
Mutantes
constitutivos Ausencia de
Presencia de inductor
inductor
Expresión de(Sin
los genes estructurales del Operón lactosa
Mutantes (Con lactosa)
constitutivos lactosa)
Ausencia de inductor (Sin lactosa) Presencia de inductor (Con lactosa)

Genotipo z+ y+ a+ z+ y+ a+
Genotipo z +
y +
a +
z +
y +
a+
i P O zya
+ + C + + +
SI SI SI SI SI SI
i- P+ O+  z+y+a+ SI SI SI SI SI SI
i+ P+ OC z+y+a+ SI SI SI SI SI SI

i- P+ O+  z+y+a+ SI SI SI SI SI SI

Concepto de cis y trans

 Mutaciones del gen represor y su
promotor

Mutantes del gen estructural i, y/o su promotor

i- =recesivo. Represor inactivo

iQ = promotor del gen i. Aumenta la transcripción.

i-d = recesivo, extremo NH2 terminal de I. Se une al

inductor pero no al operador.

iS = dominante, centro y extremo COOH terminal. Se une al

operador pero no reconoce al inductor. Superrepresión.
Utilización de diploides parciales
 Mutaciones en diploides parciales

Expresión de los genes estructurales del

Operón lactosa
Diploides parciales Ausencia de Presencia de
Expresión de los genes estructurales del Operón lactosa
Diploides parciales inductor
Ausencia (Sin
de inductor (Sin inductor
Presencia (Con
de inductor (Con
lactosa)
lactosa)
lactosa)
lactosa)
Genotipo z+ y+ a+ z+ y+ a+

i+ P+ O+ zGenotipo
y a / i P OC z+y+a-
+ + - + +
SIz+ SIy+ NOa+ SI z+ SI y+ NOa+
i+P+ O+ z+y+a+/ i- P+ O+ z+y+a+ NO NO NO SI SI SI
i+ P+ O+ z+y+a-/ i+ P+ OC
SI SI NO SI SI NO
z+y+a-

i+P+ O+ z+y+a+/ i- P+ O+
NO NO NO SI SI SI
z+y+a+
Si hay lactosa pero también hay glucosa
en el entorno celular…

¿se expresa el operón lac?

 Regulación del operón lac

Utilización de glucosa:
La glucosa ingresa a la glucólisis sin
modificaciones adicionales.
Requiere menor cantidad de energía
para metabolizarse, respecto de otros
azúcares.
 Regulación del operón lac

Mecanismo de represión por catabolito:

utilización de la glucosa en primer término
 Regulación del operón lac

Mecanismo de represión por catabolito:

Sitio de unión CAP
 Represión por catabolito

Proteína activadora por catabolito = CAP:

- proteína dimérica
- codificada en otra parte del cromosoma
se une al ADN (motivo hélice-giro-hélice) en
el extremo 5´ de la región promotora del
operón
 Represión por catabolito

Proteína activadora por catabolito = CAP:

el ADN se curva y la CAP interactúa con la

ARN polimerasa
facilita la unión de la ARN-polimerasa al
promotor
 Represión por catabolito

Proteína activadora por catabolito = CAP:

para unirse, requiere estar unida a AMPc
(también llamada CRP: prot. receptora de
cAMP)

a a

adenosina-3´, 5´-monofosfato cíclico

- pero la glucosa inhibe la adenilato ciclasa

que cataliza la conversión ATP - AMPc
 Regulación por catabolito

Lactosa presente en ausencia de glucosa

 Regulación por catabolito

Glucosa presente, con o sin lactosa

Baja concentración de AMPc

Escasa síntesis de ARNm
 Doble regulación del operón lac

2 mecanismos de regulación

Negativa: proteína represora / lactosa inductora

- Positiva: represión por catabolito