Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente

Anexo – Protocolo para elaborar el experimento sobre la
influencia de los microorganismos en la disponibilidad de
nutrientes del suelo

Materiales
- 24 vasos de plástico pequeños (aquellos en los que se sirve café en
cualquier cafetería o panadería)
- Arena de rio (1 kilo)
- Residuos de café, aquellos que quedan después de hacer el café; se
pueden encontrar en cualquier cafetería, panadería o donde hagan café
con cafeteras industriales. También sirve los residuos de filtro del café
hecho en casa, mientras sean de la misma marca)
- Papel Vinipel
- Agua oxigenada
- 1 cuchara pequeña
- Semillas de un cultivo de ciclo corto (por ejemplo, C ilantro)

Procedimiento
Se recomienda hacer todos los tratamientos en un solo día. Debe
realizarse un video sobre el montaje del experimento y fotografías
semanales sobre cómo evoluciona el experimento. Se conformarán 8
tratamientos:

1. Arena sin nada añadido = A (3 vasos)

2. Arena + 1 cucharada de residuos de café = AC1 (3 vasos)
3. Arena + 2 cucharadas de residuos de café = AC2 (3 vasos)
4. Arena + 3 cucharadas de residuos de café = AC3 (3 vasso)
5. A + Un inhibidor de actividad microbiana = Ah (3 vasos)
6. AC1 + Un inhibidor de actividad microbiana = AhC1 (3 vasos)
7. AC2 + Un inhibidor de actividad microbiana = AhC2 (3 vasos)
8. AC3 + Un inhibidor de actividad microbiana = AhC3 (3 vasos)

Procedimiento para el tratamiento A: Se llena un vaso con arena hasta 1

cm del borde, luego se deposita todo el contenido del vaso en una bolsa
de plástico y se agita con fuerza para que se mezcle bien y se rompa
cualquier agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se
vuelve a llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material
sobrante. Se hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento).
Se adicionan 5 cucharadas de agua normal a cada vaso y luego todos
los vasos se tapan con Vinipel 1 semana.

Procedimiento para el tratamiento AC1: Se llena un vaso con arena hasta

la mitad, luego se adiciona 1 cucharada pequeña de residuos de café.
Luego se llena el vaso hasta 1 cm del borde. Luego, se deposita todo el
contenido del vaso en una bolsa de plástico y se agita con fuerza para
que se mezcle bien la arena y los residuos de café, y se rompa cualquier
agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se vuelve a
llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material sobrante. Se
hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento). Se adicionan
5 cucharadas de agua normal a cada vaso y luego todos los vasos se
tapan con Vinipel 1 semana.

Procedimiento para el tratamiento AC2: Se llena un vaso con arena hasta

la mitad, luego se adicionan 2 cucharadas pequeñas de residuos de café.
Luego se llena el vaso hasta 1 cm del borde. Luego, se deposita todo el
contenido del vaso en una bolsa de plástico y se agita con fuerza para
que se mezcle bien la arena y los residuos de café, y se rompa cualquier
agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se vuelve a
llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material sobrante. Se
hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento). Se adicionan
5 cucharadas de agua normal a cada vaso y luego todos los vasos se
tapan con Vinipel 1 semana.

Procedimiento para el tratamiento AC3: Se llena un vaso con arena hasta

la mitad, luego se adicionan 3 cucharadas pequeñas de residuos de café.
Luego se llena el vaso hasta 1 cm del bo rde. Luego, se deposita todo el
contenido del vaso en una bolsa de plástico y se agita con fuerza para
que se mezcle bien la arena y los residuos de café, y se rompa cualquier
agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se vuelve a
llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material sobrante. Se
hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento). Se adicionan
5 cucharadas de agua normal a cada vaso y luego todos los vasos se
tapan con Vinipel 1 semana.

Procedimiento para el tratamiento Ah: Se llena un vaso con arena hasta 1

cm del borde, luego se deposita todo el contenido del vaso en una bolsa
de plástico y se agita con fuerza para que se mezcle bien y se rompa
cualquier agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se
vuelve a llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material
sobrante. Se hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento).
Se adicionan 5 cucharadas de agua oxigenada (el inhibidor de actividad
microbiana) a cada vaso y luego todos los vasos se tapan con Vinipel 1
semana.

Procedimiento para el tratamiento AhC1: Se llena un vaso con arena hasta

la mitad, luego se adiciona 1 cucharada pequeña de residuos de café.
Luego se llena el vaso hasta 1 cm del borde. Luego, se deposita todo el
contenido del vaso en una bolsa de plástico y se agita con fuerza para
que se mezcle bien la arena y los residuos de café, y se rompa cualquier
agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se vuelve a
llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material sobrante. Se
hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento). Se adicionan
5 cucharadas de agua oxigenada a cada vaso y luego todos los vasos se
tapan con Vinipel 1 semana.

Procedimiento para el tratamiento AhC2: Se llena un vaso con arena hasta

la mitad, luego se adicionan 2 cucharadas pequeñas de residuos de café.
Luego se llena el vaso hasta 1 cm del borde. Luego, se deposita todo el
contenido del vaso en una bolsa de plástico y se agita con fuerza para
que se mezcle bien la arena y los residuos de café, y se rompa cualquier
agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se vuelve a
llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material sobrante. Se
hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento). Se adicionan
5 cucharadas de agua oxigenada a cada vaso y luego todos los vasos se
tapan con Vinipel 1 semana.

Procedimiento para el tratamiento AhC3: Se llena un vaso con arena hasta

la mitad, luego se adicionan 3 cucharadas pequeñas de residuos de café.
Luego se llena el vaso hasta 1 cm del borde. Luego, se deposita todo el
contenido del vaso en una bolsa de plástico y se agita con fuerza para
que se mezcle bien la arena y los residuos de café, y se rompa cualquier
agregado de partículas presente. Luego de la agitación, se vuelve a
llenar el vaso hasta 1 cm del borde, eliminando el material sobrante. Se
hacen en total 3 réplicas (3 vasos, mismo procedimiento). Se adicionan
5 cucharadas de agua oxigenada a cada vaso y luego todos los vasos se
tapan con Vinipel 1 semana.

En total se requieren 24 vasos.

Luego, se retirará el vinipel, se dejará secar al aire libre el suelo por 1

semana. Luego se sembrarán 5 semillas de cultivos de ciclo corto (por
ejemplo, Cilantro). Se entierra la semilla a 1 cm de profundidad. Sí
luego de 1 o 2 semanas, se observa que no hay emergencia de
plantas, se debe cambiar de cultivo. Solo se requiere un cultivo de
ciclo corto, como por ejemplo la lechuga. Sí en los 3 vasos de un
tratamiento, se observa que no en todos los vasos emergiero n plantas,
se puede trasplantar de un vaso a otro, siempre que se haga dentro de
un mismo tratamiento. Si no se logra obtener al menos una planta de
un solo cultivo en cada vaso del experimento, se pueden plantar
semillas de 1 o 2 cultivos diferentes. Al final se escoge solo uno de estos
cultivos, el más exitoso, hasta obtener una planta de un solo cultivo en
cada vaso del experimento.

Luego de la siembra, se adicionan 5 cucharadas pequeñas de agua

normal a todos los tratamientos, pero con una regularidad que depende
del tipo de clima en donde se ubique el estudiante:

- Clima cálido: Adicionar 5 cucharadas de agua hervida fría a cada uno de

los 24 vasos, cada día. Dejar los vasos a la sombra sí los días son muy
cálidos. Sí se observa encharcamiento, se pue den hacer orificios
pequeños en el fondo del vaso para el drenaje.
- Clima te mplado: Adicionar las 5 cucharadas de agua hervida fría a cada
uno de los 24 vasos, cada 3 días. Dejar los vasos a la sombra sí los días
son muy cálidos. Sí se observa encharcamie nto, se pueden hacer
orificios pequeños en el fondo del vaso para el drenaje.
- Clima frio: Adicionar las 5 cucharas de agua hervida fría a cada uno de
los 24 vasos, cada semana. Dejar los vasos a la sombra sí los días son
muy cálidos. Sí se observa encharcamiento, se pueden hacer orificios
pequeños en el fondo del vaso para el drenaje.

Todo el experimento debe desarro llarse durante 8 semanas (1 semana

los vasos estarán tapados con vinipel y 1 semana los vasos se secarán
al aire libre, como se explicó anteriormente en cada tratamiento), con
una duración de 6 semanas luego de la siembra, procurando siempre
que todos los vasos tengan la misma cantidad de luz y al aire libre de
ser posible. Se debe llevar un registro sobre cuantos días tardó cada
planta en emerger, desde el día de la siembra. Luego de la emergencia
de las plantas, se debe dejar solo 3 plantas por vaso. Si en un vaso
emergen menos de 3 plantas, puede trasplantarse retoños de un vaso a
otro, siempre que sean del mismo tratamiento.

Una vez hayan transcurrido las 6 semanas desde la siembra, el

estudiante deberá:

1. Escoger 1 planta por cada vaso, la que haya crecido a una mayor
altura,
2. Tomar unas tijeras, cortar el vaso y sacar en bloque la arena con las
plantas. Depositar este bloque sobre un platón.
3. Lavar con agua en abundancia cada bloque y extraer la planta
escogida, con la mayor cantidad de raíces posible (es posible que las
raíces de diferentes plantas se enreden entre sí).

Luego de las 6 semanas, para cada planta, se debe haber determinado

(medido) la siguiente información:

1. Días requeridos para la germinación de las 3 plantas escogidas de

cada vaso. Se hace un promedio de estos 3 valores y se llama a este
parámetro (Gp),
2. Longitud de raíces (parte subterránea de la planta) final, de la planta
escogida en cada vaso (Lr).
3. Longitud aérea (parte aérea de la planta) final, de la planta escogida
en cada vaso (La).
4. Longitud total de la planta (longitud aérea + longitud de raíces) final,
de la planta escogida en cada vaso (Lt).
5. Relación longitud aérea/longitud raíces (dividir la longitud aérea por
la longitud de raíces) (Rar).
6. Número de hojas final, de la planta escogida en cada vaso (Nh).
7. En total, se deben obtener datos de 6 propiedades: Gp, Lr, La, Lt,
Rar, Nh.