“PREVENCIÓN DEL RIESGO BIOLÓGICO EN

LABORATORIOS DE INVESTIGACIÓN”

INSTITUTO DE BIOLOGÍA Y GENÉTICA MOLECULAR

14 de abril de 2010

SERVICIO DE PREVENCION DE RIESGOS LABORALES DE MADRID

 • Agentes biológicos - RD 664 / 97

“Microorganismos, con inclusión de los genéticamente

modificados (OMG), cultivos celulares y endoparásitos
humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección,
alergia o toxicidad”
 CONTAMINANTES
BIOLÓGICOS
• ORGANISMOS VIVOS:
- Agentes biológicos (Virus, Bacterias,
Protozoos, Hongos, Endoparásitos, etc)
- organismos modificados genéticamente
- y cultivos celulares.

• SUBPRODUCTOS: Productos derivados de

estos organismos, p.ej. Esporas, escamas
de piel, pelo, heces, micotoxinas, etc.
 FUENTES DE CONTAMINACIÓN

Personas o animales infectados.

Catarro
„ Zoonosis (Hidatidosis)

„ Fluidos y muestras biológicas Muestras animales, Muestras de origen

clínico (sangre, orina, heces...)

contaminadas.
„ El suelo, agua, etc Tétanos Botulismo
(Manipuladores de alimentos) Brucelosis

„ Contaminantes de alimentos y derivados. Salmonella

„ Contaminación de desechos y residuos. Oportunistas

(Control plagas)

„ Contaminación de los climatizadores de

aire, etc.Legionella, ácaros del polvo, etc
 Tipos de exposición a
CONTAMINANTES
BIOLÓGICOS

„ Exposición con intención deliberada Investigación

„ Exposición incidental Gestión residuos

„ Exposición no derivada de la actividad

laboral Gripe, Legionelosis,
Ácaros del polvo, etc
“CALIDAD DE AMBIENTE”

Personal investigador, auxiliar, de limpieza, de mantenimiento, etc

VÍAS DE ENTRADA DEL MATERIAL INFECCIOSO
Control de la formación de aerosoles
-RESPIRATORIA
• Inhalación de aerosoles tuberculosis, gripe, etc -DÉRMICA
• Absorción a través de la piel o mucosas por: (PARENTERAL)
9salpicaduras o producción de aerosoles micoplasmas
9contacto con material contaminado y vísceras -DIGESTIVA
•Absorción a través de heridas preexistentes flora
gangrena
•Absorción a través de las heridas causadas por:
9abrasión
9Cortes Rabia
Utilización de EPI´s
9Arañazos Brucelosis

9Mordeduras
•Picaduras de insectos Fiebre Q (garrapata)

•Autoinoculación o pinchazos Sida, Hepatitis B y C

• Ingestión por:
Botulismo
9salpicaduras
9derrames Brucelosis
Hábitos higiénicas inadecuados, onicofagia, fumadores, etc
9pipeteo bucal Salmonella
Hepatits A
 RIESGOS DERIVADOS DE LA EXPOSICIÓN
A AGENTES BIOLÓGICOS

1. Inflamación (inflamaciones locales y crónicas). Paperas

2. Infección (infecciones agudas y enfermedades
crónicas). Hepatitis C y B; Tuberculosis

3. Sensibilización y posterior desarrollo de alergias. Acaros,

“cualquier cosa”

4. Portadores sanos. Estaphilococus aureus – gastroenteritis;

Salmonelosis

5. Intoxicaciones o envenenamientos. Tétanos, botulismo

6. Efectos sobre la reproducción. Toxoplasmosis, citomegalovirus

EFECTOS TERATOGÉNICOS

Paperas
 CONTAMINANTES
BIOLÓGICOS
Para que se produzca enfermedad han de
darse simultáneamente:
„ Presencia de Agente infeccioso

„ Vía de transmisión apropiada

„ Presencia de huésped susceptible

„ Concentración suficiente del agente

infeccioso
 OPERACIONES EN LABORATORIOS QUE
PRODUCEN AUMENTO DEL RIESGO BIOLÓGICO

TRANSPORTE DE MATERIAL BIOLÓGICO

INTERNO: Caída y rotura de contenedores, frascos, viales y jaulas
Vertidos Salpicaduras
Aerosoles Escape de animales

EXTERNO: Inexistencia de sistemas de contención.

Implicación de terceras personas y medioambiente

INFECCIÓN EXPERIMENTAL: Recogida de muestras clínicas,

sacrificio de animales, biopsias y necropsias

• Toma de muestras de fluídos, excretas y tejidos corporales.

• Operaciones que implican utilización de material cortante y punzante.
• Proximidad al individuo enfermo (exposición a aerosoles, contacto cutáneo
directo y con fluídos corporales y vísceras)
 OPERACIONES EN LAS QUE SE PRODUCE
AUMENTO DEL RIESGO BIOLÓGICO (Cont.)

TÉCNICAS DE SUBCULTIVO Y CARACTERIZACIÓN

Trasvase de medios de cultivo Derrames y salpicaduras

Mezclado y agitación Producción de aerosoles
Inoculaciones Autoinoculación
Pipeteos repetitivos y rápidos Corte y abrasión

TÉCNICAS DE FRACCIONAMIENTO

Trituración Derrames y salpicaduras

Homogenización Producción de aerosoles
Sonicación
Centrifugación
 OTROS FACTORES ADICIONALES QUE
MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO
Factores personales
- las condiciones del trabajador (sexo, edad, raza, peso,...)
- factores hereditarios
- enfermedades padecidas y crónicas
- inmunocomprometidos
- alergias a agentes y/o medicamentos
- tratamientos médicos, vacunaciones, estados especiales (embarazo, lactancia, etc).

TIPO DE LABORATORIO
TIPO OPERACIONES
Factores laborales
-la experiencia y conocimientos de los trabajadores
- Tipo de laboratorios / actividades (infraestructura y equipamiento)
- frecuencia de la exposición
- procedimientos de trabajo
- comodidad e impacto estético de los equipos de protección individual; ergonomía;
estado general de los equipos y máquinas, condiciones medioambientales, etc.
 FACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO

•Factores psicológicos y de la organización del trabajo

- penosidad o dificultad del trabajo
- condiciones del contrato de trabajo (precariedad, contratos basura, etc)
- carga de trabajo (nivel de exigencia, intensidad, monotonía)
- nivel de responsabilidad del trabajador sobre su propio puesto
- grado de motivación
- características de los lugares de trabajo, etc.

•Factores medioambientales
- humedad,
- temperatura,
- iluminación,
- renovaciones del aire (ventilación),
- sinergismo de contaminantes, etc
 CLASIFICACIÓN A.BIOLÓGICOS

z A.B. del Grupo de Riesgo 1 GR 1 Menor peligrosidad

z A.B. del Grupo de Riesgo 2 GR 2

z A.B. del Grupo de Riesgo 3 GR 3 Mayor peligrosidad
z A.B. del Grupo de Riesgo 4 GR 4

Anexo II del RD 664/97: Lista de agentes biológicos

(modificada por la Orden de 25 de marzo de 1998)
A: posibles efectos alérgicos,
D: conservar lista de personal más de 10 años después de la última Exposición,
T: producción de toxinas,
V: si existe vacuna eficaz disponible,
(*): normalmente no infeccioso a través del aire,
“spp”: otras especies del género, además de las indicadas, pueden constituir riesgo para la salud

Notificación de primer uso (art.10 RD 664/97) P1, P2, P3 y P4

 CLASIFICACIÓN (Art.3, RD 664/97)
Agente Riesgo Riesgo de Profilaxis o
biológico del infeccioso propagación a tratamiento
grupo de la colectividad eficaz
riesgo
- 1 Poco probable No Innecesario
2 Puede causar enf. Poco probable Posible
y constituir generalmente
peligro para
trabajadores
3 Puede causar enf. Probable Posible
Grave y generalmente
constituir serio
problema para
trabajadores
+ 4 Provocan
enf.grave grave y
Elevado No conocido en
Se establece en función de: la actualidad
Capacidad patógena del microorganismo
Modo de transmisión
constituir serio
Disponibilidad de medidas de prevención eficaces: ppeligro para
Profilaxis por administración de vacunas o sueros, lucha
trabajadores
contra los reservorios animales o artrópodos vectores…
Disponibilidad de tratamiento eficaz
 LABORATORIOS DE BIOSEGURIDAD EN EL IC:
• 1 LABORATORIOS P-2 / CSB II

Ejemplos A.B. nivel II:

VIRUS HUMANOS PARASITOS LINEAS CELULARES ESTABLECIDAS 2

Leishmania infantum 2 HeLa /HMy2-C1r (humanas)/ Daudi (humana)/
• Vaccinia virus 2 Leishmania major 2 143B (humana)/ Hibridomas /T2 (humana) HEK293
• Herpes simplex 2 (humana)/CV-1/Cos (simio)/U-937 (humana)/RMA y
• Virus Sindbis 2 RMA/s (ratón)/T2 (humana)Células COS7/ Jurkat
• Virus de la estomatitis vesicular 2 BACTERIAS (humana)
• Adenovirus 2 Legionella pneumophila 2
• Virus de la gripe 2 Salmonella ssp. 2
• Poliovirus 2 Pseudomonas aeruginosa 2 MUESTRAS HUMANAS 2
• Encefalovirus 2 Escherichia coli (EPEC) 2 Timo
• Citomegalovirus humano 2 Enterococcus faecium 2 Liquido cefaloraquideo (Corea Huntington)
• Retrovirus: anfotrópicos, ecotrópicos, Células endoteliales humanas de cordón umbilical
xenotrópicos 2 (HUVECs)
HONGOS Linfocitos humanos de sangre periférica (PBLs)
• Reovirus tipo 3 2
Saccharomyces cerevisiae 1
• Virus Epstein Barr 2
Saccharomyces pombe 1
• Baculovirus 1
Schizosaccharomyces pombe 1

¡¡ NUNCA SANGRE
PROPIA!!

Cultivos celulares de origen humano o simio

Muestras de origen humano (sangre, tejidos, líquido cefalorraquídeo, etc)
Tejidos de origen animal, procedentes de mataderos
 EL TERMINO CONTENCIÓN EN BIOSEGURIDAD
”Se utiliza para describir los métodos de seguridad necesarios para la
correcta gestión de la utilización y almacenamiento en los laboratorios de
agentes biológicos infecciosos y organismos modificados genéticamente”.

CONTENCIÓN PRIMARIA • Equipos de protección colectivo - CSB

ELIMINACIÓN
CONTENCIÓN SECUNDARIA • Diseño de la instalación
O REDUCCIÓN
DEL RIESGO

CONTENCIÓN TERCIARIA • Protección sobre el individuo

BARRERAS PRIMARIAS
ƒEquipos de protección colectiva
Cabinas de Seguridad Biológica (NTP 233)
Objetivo: confinamiento del agente biológico

Clase I Clase III

Clase II
Clase I Clase II
IIA, recircula el 70 %
Clase III
IIB, recircula el 30 %

Utilizarlas en aquellas operaciones que:

- puedan producir aerosoles,
- trituración,
- manipulación de material susceptible de estar contaminado
BARRERAS SECUNDARIAS
ƒ Objetivo: prevenir fallos en barreras primarias
ƒ Materiales de suelos y paredes
ƒ Puertas de cierre automático y exclusas
ƒ Tomas de aire y presiones negativas
ƒ Depuración del aire expulsado

BARRERAS TERCIARIAS
ƒ Objetivo: actuar directamente sobre el trabajador
ƒ EPI´s
ƒ Vigilancia médica, inmunización
ƒ Higiene personal
ƒ Buenas prácticas de laboratorio - BPL (NTP 376)
Buenas prácticas de laboratorio BPL (NTP 376)
Procedimientos de trabajo seguros

ƒ Prohibir comer, beber y fumar (almacenar alimentos)

ƒ Orden y limpieza escrupuloso en el lugar de trabajo
ƒ Cuartos de aseo apropiados que dispongan de
productos antisépticos para ojos y piel (10 min)
ƒ Almacenamiento y mantenimiento de EPI´s
ƒ Utilizar ropa de protección adecuada y evitar ir con
ella a zonas comunes u otros servicios
ƒDespués del trabajo lavar escrupulosamente las manos
ƒ Prohibir la limpieza de ropa de trabajo
en el domicilio particular
ƒ Evitar materiales punzantes,
¡no reencapsular agujas!
CONTROL DE CONTAMINANTES
Protección individual (EPI´s)
- Marcado CE, certificados según legislación vigente
BATA
- Instrucciones de uso y mantenimiento

Protección respiratoria - Caducidad

P1 P2 P3

MANTENIMIENTO EPI´s DE ACUERDO A ¡ Sustitución periódica !

¡ Desechables ! ¡Látex!
LAS INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE
No tocar cara, ojos, etc
¡¡ Lavado de manos !!
 NORMAS ESCRITAS DE ACTUACIÓN
ANTE UNA EMERGENCIA

• Tener previsto un Plan de emergencia para cada AB

• Organización de recursos humanos (identificados) y sus
responsabilidades
• Localización de zonas de riesgo elevado. Señalización.
• Vigilancia médica de las personas expuestas
• Lista de las instalaciones donde puedan recibir asistencia
las personas expuestas
• Transporte de personas expuestas
 ACTUACIÓN ANTE UNA
EMERGENCIA
• Tratamiento médico de emergencia para las personas
expuestas y lesionadas
• Lista de depositarios de suero inmune, vacunas,
medicamentos necesarios, material y suministros
especiales
• Provisión y ubicación del material de emergencia: ropa
de protección, desinfectantes, equipos de
desinfección…
• Normas y procedimientos de descontaminación
¿alguna pregunta?
 LABORATORIOS DE NIVEL 1

9Riesgo biológico prácticamente nulo

9Características de diseño básicas
9Los sistemas especiales de contención no
son necesarios
9Aplicación de las buenas prácticas del
laboratorio
 LABORATORIOS DE NIVEL 2

AB GR2
Sangre, tejidos y cultivos
de origen humano
OMG en ACT2

9Riesgo biológico moderado para el personal expuesto

9Riesgo biológico muy bajo para el público y el medio
ambiente

“Es necesario establecer barreras entre el material biológico y el personal

expuesto, manteniendo ciertas medidas de contención que impidan escapes
significativos de material biológico al medio ambiente externo”
LABORATORIOS DE NIVEL 2

Aspectos a tener en cuanta en la CONCEPCIÓN GENERAL

•Confinar el riesgo biológico
•Control de acceso
•Cambio de ropa de trabajo
•Gestión de residuos biosanitarios
•Procedimientos de trabajo seguros

9Sectorización del laboratorio

9Esclusa de acceso
9Cabinas de bioseguridad
9Autoclave
 LABORATORIOS DE NIVEL 2

CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS:

•Construcción:
9uniones suelo-pared en escocia
9ventanas herméticas
9control de acceso, enclavamiento
•Tratamiento de aire:
9unidad de tratamiento independiente
9sin recirculación o con ésta y filtración HEPA
9depresión en determinados casos
•Aparataje de seguridad:
9cabinas de bioseguridad clase II
9autoclave de bioseguridad
9SAS
•Descontaminación:
9pila, ducha y lavaojos de emergencia en zona
•Sistema contraincendios:
9detección, telefonía y extintores