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Hames 4a c02 AMINOACIDOS PDF
Hames 4a c02 AMINOACIDOS PDF
Ionización de los Los grupos amino α y carboxilo α de los aminoácidos actúan como grupos
aminoácidos acidobásicos, ya que donan o aceptan un protón conforme a la variación del
pH. A pH bajo, ambos grupos se hallan protonados, pero a medida que el pH
se incrementa pierden un ion hidrógeno, primero el grupo carboxilo y des-
pués el amino. El pK de los 20 aminoácidos estándar es de 1.8-2.9 para el
grupo carboxilo α y de 8.8-10.8 para el grupo amino α. Los aminoácidos con
una cadena lateral ionizable tienen un grupo acidobásico adicional con un pK
característico.
Plano
a) b)
COO– del espejo COO–
_
COO
+ α-Átomo de + +
H3N C H carbono H3N C H H C NH3
R R
Aminoácido L Aminoácido D
CH3 S
CH3
OH
de acuerdo con la naturaleza de sus cadenas laterales. de vista conformacional. La cadena lateral azufrada de
Algunos son ácidos y otros básicos. Algunos presentan la cisteína (Cys, C) (figura B1-2a) también es hidrófoba
pequeñas cadenas laterales mientras que las de otros pero es muy reactiva y proclive a reaccionar con otra
son grandes y voluminosas. Ciertos aminoácidos poseen cisteína para formar un enlace disulfuro (sección B2).
cadenas laterales hidrófobas (repelen el agua) en tanto
que otras son hidrófilas o polares (les atrae el agua).
Algunas confieren inflexibilidad conformacional y otras
Aminoácidos hidrófobos y aromáticos
pueden participar en enlaces de hidrógeno y enlaces La fenilalanina (Phe, F), tirosina (Tyr, Y) y triptófano
covalentes. Algunas presentan reactividad química. (Trp, W) (figura B1-2b) son hidrófobos a raíz de sus ani-
llos aromáticos.
Aminoácidos hidrófobos, alifáticos
La glicina (Gly, G) (figura B1-2a), el aminoácido más Aminoácidos polares, con carga
pequeño y con la estructura más simple, tiene un átomo Los restantes aminoácidos son todos polares, con cade-
de hidrógeno en la posición de la cadena lateral y por nas laterales hidrófilas, algunas de las cuales presentan
consiguiente no existe como par de estereoisómeros carga en un pH neutral. Los grupos amino de las cade-
puesto que tiene dos grupos idénticos (átomos de hidró- nas laterales de los aminoácidos básicos arginina (Arg,
geno) unidos al átomo Cα. Las cadenas laterales alifáti- R) y lisina (Lys, K) (figura B1-3a) están protonados y
cas de la alanina (Ala, A), valina (Val, V), leucina (Leu, por tanto tienen carga positiva en un pH neutral. La
L), isoleucina (Ile, I) y metionina (Met, M) (figura 2a) cadena lateral de la histidina (His, H) (figura B1-3a)
carecen de reactividad química y son hidrófobas por puede tener carga positiva o no presentar carga en un
naturaleza. La prolina (Pro, P) (figura B1-2a) también es pH neutral. En contraste, en un pH neutral, los grupos
hidrófoba, con su cadena lateral alifática unida otra vez carboxilo de las cadenas laterales de los aminoácidos
al grupo amino, lo que la vuelve rígida desde el punto ácido aspártico (aspartato; Asp, D) y ácido glutámico
B1.2cd 25 depth
a)
COO– COO– COO– COO– COO–
+ + + + +
H3N C H H3N C H H3N C H H3N C H H3N C H
CH2 CH2 CH2 CH2 CH2
CH2 CH2 C NH COO– CH2
CH2 CH2 CH COO–
HC N+
NH CH2 H
+ + +
C NH2+ NH 3
NH2
Arginina Lisina Histidina Aspartato Glutamato
(Arg, R) (Lys, K) (His, H) (Asp, D) (Glu, E)
b)
COO– COO– COO– COO–
+ + + +
H3N C H H3N C H H3N C H H3N C H
CH2OH H C OH CH2 CH2
CH3 C CH2
H2N O C
H2N O
Serina Treonina Asparagina Glutamina
(Ser, S) (Thr, T) (Asn, N) (Gln, Q)
Figura B1-3. Aminoácidos estándar: a) polar, grupos R con carga; b) polar, grupos R sin
carga. Los pesos moleculares de los aminoácidos se proporcionan en el cuadro B1-1.
1.0 pK±1
Equivalentes de −OH añadidos
pK = 4.8
0.5
0
0 3 4 5 6 7
pH
cual la Gly carece de carga neta se denomina su punto Lys tienen valores de pK de 12.5 y 10.5, respectivamente.
isoeléctrico, o pI. Los grupos carboxilo α de los 20 ami- Sólo la cadena lateral de la His, con un valor de pK de
noácidos estándar tienen valores de pK en el espectro 6.0, está ionizada dentro del espectro del pH fisiológico
de 1.8 a 2.5, en tanto que sus grupos amino α tienen (pH de 6 a 8). Debería recordarse que cuando los ami-
valores de pK en el espectro de 8.7 a 10.7 (cuadro B1-1). noácidos están unidos en las proteínas, sólo los grupos
Las cadenas laterales de los aminoácidos ácidos Asp y de las cadenas laterales y los grupos terminales amino α
Glu tienen valores de pK de 3.9 y 4.1, respectivamente, y carboxilo α de la cadena polipeptídica están libres para B1.3
en tanto que aquéllos de los aminoácidos básicos Arg y ionizarse (sección B2).
a) 2.0
3)
1.5
Equivalentes de –OH
2)
añadidos
1.0
0.5
1) pK1 pI pK2
0
0 2 4 6 8 10 12 14
pH
b) – –
OH OH
H H H
+ +
H3N C COOH H3N C COO– H2N C COO
–
H H H
1) 2) 3)
a) H H H O H
+ O + O + O
H3N C C + H3N C C H3N C C N C C + H2O
O– O– O–
R1 R2 R1 H R2
Enlace
peptídico
Cα H
O
N
C
C
φ Cα
Cα ψ
N
O
H
R
por tanto relativamente rígida y plana, no obstante lo por completo (toda-trans), los ángulos Φ y Ψ se defi-
cual puede tener lugar la rotación libre alrededor de los nen como de 180° y se incrementan para una rotación
enlaces Cα-N y Cα-C (los enlaces que se hallan a cada a favor de las agujas del reloj cuando se ven desde Cα
lado del enlace peptídico), lo que permite que unidades (figura B2-2). El espectro conformacional de los ángu-
peptídicas adyacentes se encuentren en ángulos dife- los de torsión, Φ y Ψ, de la columna vertebral de un
rentes (figura B2-1c). El hidrógeno del grupo amino está polipéptido está restringido por impedimentos estéri-
casi siempre en el lado opuesto (trans) del enlace doble cos. Desde el punto de vista estérico, el valor permitido
del oxígeno del carbonilo y no en el mismo lado (cis). de Φ y Ψ puede determinarse si se calcula la distancia
entre los átomos de un tripéptido a todos los valores
La columna vertebral de una proteína es una secuencia de Φ y Ψ para la unidad peptídica central. Estos valo-
unida de grupos peptídicos planos y rígidos. La con- res se visualizan en un diagrama de contorno estérico,
formación raquídea de un polipéptido depende de los conocido por otro lado como mapa de conformación o
ángulos de rotación o ángulos de torsión alrededor de gráfica de Ramachandran (figura B2-3). Si se observa la
los enlaces Cα-N (phi, f) y Cα-C (psi, Ψ) de cada uno de figura B2-3, puede verse que la mayor parte de las áreas
sus residuos de aminoácidos. Cuando la cadena poli- de la gráfica de Ramachandran (en su mayoría combi-
peptídica está en su conformación plana, extendida naciones de Φ y Ψ) son inaccesibles desde la perspectiva
180
β
C
β′
ψ (grados)
−180
−180 0 180
φ (grados)
conformacional a una cadena polipeptídica. Sólo tres tídica. Los dos tipos más comunes de pliegues de las
regiones pequeñas del mapa de conformación son físi- proteínas son la hélice α y la hoja plegada β. En la hélice
camente accesibles a una cadena polipeptídica y dentro α similar a un bastón, los aminoácidos se disponen en
de tales regiones se encuentran los valores Φ y Ψ que una conformación helicoidal regular (figura B2-5a). El
producen la lateralización a la derecha de la hélice α, las oxígeno del grupo carbonilo de cada enlace peptídico
hojas plegadas β paralelas y antiparalelas y la hélice de está unido al hidrógeno del grupo amino del cuarto ami-
la colágena (véase más adelante y la sección B4). noácido situado más allá del enlace (figura B2-5b), con
el enlace de hidrógeno dispuesto casi en paralelo al eje
La cadena polipeptídica se pliega para configurar la for-
de la hélice. En una hélice α hay 3.6 aminoácidos por
ma específica (conformación) de la proteína. Esta con-
vuelta de la hélice y cubren una distancia de 0.54 nm,
formación es la disposición tridimensional de los áto-
en tanto que cada residuo de aminoácido representa un
mos en la estructura y está determinada por la secuencia
avance de 0.15 nm a lo largo del eje de la hélice (figura
de los aminoácidos. La estructura de las proteínas tiene
B2-5a). Todos los aminoácidos de las cadenas laterales
cuatro niveles: primario, secundario, terciario y a veces,
se localizan a lo largo de la parte externa de la hélice
pero no siempre, cuaternario.
cilíndrica (figura B2-5c). Ciertos aminoácidos se hallan
con más frecuencia en unas hélices α que en otras. En
Estructura primaria esta situación se encuentra la Pro, que rara vez se reco-
El nivel primario de la estructura de una proteína es la noce en regiones helicoidales α debido a que no puede
secuencia lineal de aminoácidos como quedan unidos formar el patrón de enlace de hidrógeno correcto a raíz
por los enlaces peptídicos. Esta secuencia está determi- de que carece de un átomo de hidrógeno en su átomo de
nada a su vez por la secuencia de bases de los nucleó- nitrógeno. Por esta causa, la Pro se encuentra con más
tidos en la codificación genética de la proteína (sección frecuencia al final de una hélice α, donde altera la direc-
H1). También se incluye en la estructura primaria la ción de la cadena polipeptídica y hace concluir la hélice.
localización de cualquier otro enlace covalente. De Diferentes proteínas muestran cantidades distintas de
manera primaria, éstos son enlaces disulfuro entre resi- cadenas polipeptídicas plegadas en hélices α. Por ejem-
duos de cisteína que se hallan adyacentes en el espacio, plo, la cadena polipeptídica única de la mioglobina pre-
pero no en la secuencia lineal de aminoácidos. Estos senta ocho hélices α (sección B3).
entrecruzamientos covalentes entre cadenas polipeptí- En la hoja plegada β, se forman enlaces de hidrógeno
dicas separadas o entre partes diferentes de la misma entre los enlaces peptídicos de diferentes cadenas poli-
cadena se forman por la oxidación de los grupos SH de peptídicas o de diferentes secciones de la misma cadena
los residuos de cisteína que se yuxtaponen en el espa- polipeptídica (figura B2-6a). El carácter plano de los
cio (figura B2-4). El disulfuro resultante se llama residuo enlaces peptídicos fuerza al polipéptido a ser plegado
de cisteína. Los enlaces disulfuro son frecuentes en las con las cadenas laterales de los aminoácidos haciendo
proteínas extracelulares, pero rara vez se encuentran protrusión hacia arriba y abajo de la hoja (figura B2-6b).
en proteínas intracelulares. Algunas proteínas como la En las hojas plegadas β, las cadenas polipeptídicas adya-
colágena presentan entrecruzamientos covalentes entre centes pueden ser paralelas o antiparalelas según si
cadenas laterales de residuos de Lys (sección B4). corren en la misma dirección o en la dirección opuesta,
B2.2
respectivamente (figura B2-6c). La cadena polipeptídica
Estructura secundaria que se halla dentro de una hoja plegada β está extendida
El nivel de estructura secundario de una proteína es por completo, de manera que existe una distancia de
el plegamiento regular de regiones de la cadena polipep- 0.35 nm desde un átomo de Cα al siguiente. Las cadenas
H H
+ +
H3N C COO– H3N C COO–
CH2 CH2
Oxidación
SH S +
+ 2H
SH Reducción S
CH2 CH2
+ +
H3N C COO– H3N C COO–
H H
Cisteína (x2) Cistina
a)
Átomos Cα de residuos de
aminoácidos consecutivos
Posición de la cadena
polipeptídica, consiste en
átomos Cα y los de los enlaces
peptídicos C – N
R
c) R R
b)
H H H O H H H O H
R
a)
N C C N C C N C C N C C N C C R
H R1 O R2 H R3 O R4 H R5 O
R R
Enlaces de
hidrógeno Enlaces de hidrógeno
R R
a)
Enlaces de
hidrógeno
b) c) Paralela
Antiparalela
cia la cadena polipeptídica invierte su dirección, para la mioglobina (sección B3), la principal fuerza directriz
lo cual hace una vuelta β (horquilla o vuelta invertida). que subyace al plegamiento de la cadena polipeptídica
En estas vueltas β, el oxígeno del grupo carbonilo de es el requerimiento energético para sepultar los amino-
un aminoácido se une al hidrógeno del grupo amino ácidos apolares en el interior hidrófobo, lejos del medio
del cuarto aminoácido (figura B2-7). Las vueltas β se acuoso e hidrófilo circundante. La cadena polipeptídica
encuentran con frecuencia donde se conectan los extre- se pliega de manera espontánea y la mayor parte de
mos de las hojas plegadas β antiparalelas. Se dice que las sus cadenas laterales hidrófobas resulta sepultada en el
regiones de la cadena polipeptídica que no están en una interior, en tanto que sus cadenas laterales polares, con
estructura secundaria regular tienen una conformación carga, permanecen en su superficie. Cuando está ple-
enrollada o en asa. Cerca de la mitad de las cadenas gada, la conformación tridimensional, la activa des-
polipeptídicas de una proteína globular típica se hallan de la perspectiva biológica (nativa), de la proteína se
en esta conformación. mantiene no sólo por interacciones hidrófobas sino
también por fuerzas electrostáticas, enlaces de hidró-
geno y, si están presentes, enlaces disulfuro. Las fuerzas
Estructura terciaria electrostáticas incluyen puentes salinos entre grupos
El tercer nivel estructural que se encuentra en las proteí- con cargas opuestas y las múltiples interacciones débi-
nas, la estructura terciaria, alude a la disposición espacial les de van der Waals entre las cadenas laterales alifáticas
de los aminoácidos que están lejos en la secuencia lineal estrechamente empacadas del interior de las proteínas.
así como a aquellos residuos que están adyacentes. Otra
vez, es la secuencia de los aminoácidos la que especi- En muchas proteínas grandes, la cadena polipeptídica
fica esta estructura tridimensional final (figuras B2-8 y se pliega en dos o más regiones compactas y globula-
B2-9). En proteínas globulares solubles en agua como res llamadas dominios. La mayoría de los dominios
Cadena
polipeptídica
Enlace de
hidrógeno
a) —Arg—Val—Glu—Lys—Met—Val—Lou—Ala—Gly—
b)
c) d)
a) b)
c) d)
consta de 30 a 400 aminoácidos y en ellos la cadena proteínas está el del pliegue de la inmunoglobulina que
polipeptídica se pliega en estructuras específicas, con se encuentra en anticuerpos y otras proteínas del sis-
regiones peptídicas que casi no se pliegan y que vincu- tema inmunitario (sección B6) y la hélice-giro-hélice,
lan a los dominios sin interrupciones. En consecuencia, dedos de cinc y los dominios básicos que se hallan en
muchos dominios son unidades independientes, si se las proteínas que se unen con el dna (sección G6).
los ve desde una perspectiva estructural, que tienen las
características de las proteínas globulares pequeñas.
En tanto, diversas proteínas pueden tener dominios Estructura cuaternaria
en común aunque sus estructuras terciarias completas Las proteínas que contienen más de una cadena poli-
sean diferentes. Entre los ejemplos de dominios en las peptídica, como la hemoglobina (sección B3), exhiben
B2 – ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LAS PROTEÍNAS 33
un cuarto nivel estructural de las proteínas que se deno- estructura de otras macromoléculas biológicas como
mina estructura cuaternaria (figura B2-8). Este nivel la hélice doble del dna (sección F1) y las bicapas lipí-
estructural alude a la disposición espacial de las subu- dicas (sección E1). Por último, los enlaces de hidró-
nidades polipeptídicas y a la naturaleza de las interac- geno son críticos para las propiedades del agua y para
ciones entre ellas. Tales interacciones pueden ser enla- su papel como solvente bioquímico.
ces covalentes (p. ej., enlaces disulfuro) o interacciones
zz Fuerzas hidrófobas: efecto hidrófobo es el nom-
no covalentes (fuerzas electrostáticas, enlaces de hidró-
bre que se les da a aquellas fuerzas que causan las
geno, interacciones hidrófobas).
moléculas apolares para minimizar su contacto con
el agua. Lo anterior se ve con toda claridad con las
Estabilidad de las proteínas moléculas anfipáticas como los lípidos y los deter-
gentes que forman micelas en una solución acuosa
Un conjunto de interacciones no covalentes (fuerzas
(sección E1). Asimismo, las proteínas encuentran
electrostáticas, enlaces de hidrógeno, fuerzas hidrófo-
una conformación en la que sus cadenas laterales
bas) y de interacciones covalentes (enlaces disulfuro)
apolares están en gran medida fuera del alcance del
mantiene la conformación tridimensional nativa de una
solvente acuoso y en consecuencia las fuerzas hidró-
proteína, además de los enlaces peptídicos entre los
fobas son un determinante de gran importancia en
aminoácidos.
la estructura, plegamiento y estabilidad de las pro-
zz Fuerzas electrostáticas: incluyen las interacciones teínas. En éstas, los efectos de las fuerzas hidrófobas
entre dos grupos iónicos de carga opuesta, como el suelen designarse enlazamiento hidrófobo, con lo
caso del grupo amonio de la Lys y el grupo carboxilo cual se pretende indicar la naturaleza específica del
del Asp, con frecuencia referido como par iónico o plegamiento de la proteína bajo la influencia del efec-
puente salino. Además, las asociaciones no covalen- to hidrófobo.
tes entre moléculas eléctricamente neutras, que en
zz Enlaces disulfuro: estos enlaces covalentes se for-
conjunto se conocen como fuerzas de van der Waals,
man entre residuos de Cys que están muy cercanos
originadas de interacciones electrostáticas entre
en la conformación final de la proteína (figura B2-4)
dipolos permanentes o inducidos, como el del grupo
y funcionan como estabilizadores de la estructura tri-
carbonilo de los enlaces peptídicos.
dimensional. En realidad, los enlaces disulfuro sólo
zz Enlaces de hidrógeno: son interacciones predomi- se forman en el ambiente oxidante del retículo endo-
nantemente electrostáticas entre un grupo donador plásmico (sección A2) y por tanto se encuentran en
débilmente ácido y un átomo aceptor que es porta- primer lugar en las proteínas extracelulares y secre-
dor de un par de electrones solitarios y que en conse- tadas.
cuencia presenta una carga parcial negativa que atrae
al átomo de hidrógeno. En los sistemas biológicos, el
grupo donador es un átomo de oxígeno o nitrógeno
Determinación de la estructura
que tiene un átomo de hidrógeno unido a él a través de las proteínas
de un enlace covalente y el aceptor es el oxígeno o Con frecuencia puede predecirse la presencia de héli-
el nitrógeno (figura B2-10). De manera habitual, los ces α y hojas plegadas β en las proteínas a partir de la
enlaces de hidrógeno están en el espectro de 0.27 secuencia de aminoácidos primaria. En cambio, no es
a 0.31 nm y son muy direccionales, es decir que el posible predecir la estructura tridimensional precisa de
hidrógeno donador y los átomos aceptores son coli- una proteína de sólo conocer su secuencia de aminoáci-
neales. Los enlaces de hidrógenos son más fuertes dos, a menos que su secuencia sea muy similar a una
que las fuerzas de van der Waals pero mucho más proteína cuya estructura tridimensional ya se conoce.
débiles que los enlaces covalentes. Los enlaces de Se requieren métodos físicos muy complejos y análisis
hidrógeno no sólo desempeñan un rol importante muy elaborados de los datos experimentales para deter-
en la estructura de las proteínas sino también en la minar la conformación de una proteína. La estructura
tridimensional de una proteína puede determinarse a proteínas, en particular de las proteínas con multi-
nivel atómico mediante técnicas como la cristalografía subunidades, las cuales son difíciles de cristalizar. En
de rayos X, la espectroscopia con resonancia magnética esta técnica, la muestra de la proteína se congela con
nuclear (nmr) y la microscopia crioelectrónica. rapidez en helio líquido para preservar su estructura.
A continuación, la proteína congelada e hidratada se
En la cristalografía de rayos X, el primer requerimiento
examina en un microscopio crioelectrónico que usa
son los cristales de proteínas muy purificadas. En el
una dosis baja de electrones para evitar cualquier daño
cristal, millones de moléculas de proteínas están pre-
inducido por la radiación en la estructura. Las imáge-
cisamente alineadas unas con otras en una disposi-
nes resultantes se analizan por medio de programas de
ción rígida característica de cada proteína. Entonces,
computadora complejos, que sirven para reconstruir la
los haces de rayos X se hacen pasar a través del cris-
estructura tridimensional de la proteína.
tal (figura B2-11). Las longitudes de onda de los rayos
X son de 0.1 a 0.2 nm, lo suficientemente cortos para
discriminar los átomos en el cristal de la proteína. Los Plegamiento de las proteínas
átomos del cristal desvían los rayos X y al hacerlo pro-
Bajo condiciones fisiológicas apropiadas, las proteínas
ducen un patrón de difracción de manchas discretas en
se pliegan de modo espontáneo en su conformación
la película fotográfica. Las intensidades de la difracción
nativa. Como no se necesitan plantillas externas, queda
máxima (la oscuridad de las manchas de la película) se
implícito que la estructura primaria de la proteína
usan entonces matemáticamente para construir la ima-
determina su estructura tridimensional. A partir de
gen tridimensional del cristal de proteína.
experimentos con la proteína rna-asa a, se ha observado
La espectroscopia con resonancia magnética nuclear que son en primer lugar los residuos internos de la pro-
(nmr) puede utilizarse para determinar las estructuras teína los que dirigen su plegamiento a la conformación
tridimensionales de proteínas pequeñas (hasta de alre- nativa. Es menos probable que la alteración de los resi-
dedor de 30 kDa) en solución acuosa. En esta técnica, duos superficiales por mutación afecte el plegamiento
una solución de proteína concentrada se coloca en un que los cambios en los residuos internos. Asimismo, ha
campo magnético y se miden los efectos de diferentes sido observado que el plegamiento de la proteína es diri-
frecuencias de radio en el giro de diferentes átomos de gido en primer lugar por las fuerzas hidrófobas. No ha
la proteína. El comportamiento de cualquier átomo es sido posible plegar proteínas en su conformación nativa
influido por los átomos cercanos de los residuos adya- a través de un conjunto de vías ordenadas en lugar de
centes, pero donde los residuos más cercanos causan recurrir a una exploración al azar de todas las conforma-
más perturbaciones que los alejados. Con base en la ciones posibles hasta encontrar la correcta.
magnitud del efecto, puede calcularse la distancia entre
Aunque las proteínas pueden plegarse in vitro (en el
los residuos y emplearse para generar la estructura tri-
laboratorio) sin la presencia de proteínas accesorias,
dimensional de la proteína.
este proceso puede tomar minutos a días. In vivo (en la
La microscopia crioelectrónica se usa con frecuencia célula), este proceso requiere sólo unos pocos minutos
para determinar la estructura tridimensional de las porque las células contienen proteínas accesorias, las
Fuente de rayos X
Haz de rayos X
Cristal de
proteína
Rayos difractados
cuales ayudan al polipéptido a plegarse en su confor- y calreticulina. Éstas evitan el plegamiento inapro-
mación nativa. Hay tres clases principales de proteínas piado y la agregación de las proteínas, que por lado
accesorias para el plegamiento de las proteínas: pueden ocurrir debido a que las regiones hidrófobas
internas se exponen a otras similares.
zz Las isomerasas de proteindisulfuro catalizan las
reacciones de intercambio de disulfuros y por consi- Algunas enfermedades son consecuencia del plega-
guiente facilitan la búsqueda de los enlaces disulfuro miento erróneo de las proteínas. Por ejemplo, en la
de una proteína hasta encontrar el par correcto. neurodegenerativa y fatal enfermedad de Alzheimer,
los pequeños pliegues erróneos del péptido amiloide β
zz Las cis-trans isomerasas de peptidilprolilo catalizan
y los agregados en el cerebro matan las neuronas circun-
por otro lado la lenta interconversión de los enlaces
dantes. Por su parte, en las enfermedades infecciosas
peptídicos X-Pro entre sus conformaciones cis y trans
por priones, como la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob
y de esta forma aceleran el plegamiento de los poli-
(cid) en los seres humanos y la encefalopatía espongi-
péptidos que contienen Pro. Una de las clases de cis-
forme bovina (bse o enfermedad de las vacas locas), la
trans isomerasas de peptidilprolilo es inhibida por el
forma celular normal de la proteína priónica, la cual
fármaco inmunosupresor ciclosporina A.
tiene sobre todo una estructura secundaria helicoidal
zz Chaperonas moleculares, las cuales incluyen pro- α, sufre una transición conformacional hacia la forma
teínas como las proteínas de choque por calor 70 infecciosa de la proteína, que presenta una estructura
(hsc 70), las chaperoninas y las lectinas calnexina predominante de hoja β.
SecCiÓn B – AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
B3 Mioglobina y hemoglobina
Notas clave
Proteínas que unen La hemoglobina y la mioglobina son las dos proteínas que unen oxígeno pre-
oxígeno sentes en los organismos multicelulares grandes. La hemoglobina transporta
oxígeno en la sangre y se localiza en los eritrocitos; por su parte, la mioglobina
almacena el oxígeno en los músculos.
Mioglobina La mioglobina, cuya estructura tridimensional fue resuelta mediante la cristalo-
grafía de rayos X, es una proteína globular elaborada con una sola cadena poli-
peptídica de 153 residuos de aminoácidos, que están plegados en ocho hélices
α. El grupo prostético hemo se localiza dentro de una hendidura hidrófoba de
la cadena polipeptídica plegada.
Hemoglobina La hemoglobina adulta (HbA) presenta estructura cuaternaria ya que está
formada por cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas α y dos cadenas α
(α2 y α2), cada una de ellas con un grupo prostético hemo. Cada polipéptido de la
hemoglobina presenta una estructura tridimensional casi idéntica a la de la ca-
dena polipeptídica de la mioglobina.
Unión del oxígeno al hemo El grupo prostético hemo consiste en un anillo de protoporfirina IX y un átomo
de Fe2+ central, el cual forma cuatro enlaces con el anillo de la porfirina. De
manera adicional, en un lado del anillo de la porfirina, el Fe2+ forma un enlace
con la histidina proximal (His F8), un residuo de ocho aminoácidos a lo largo
de la hélice F de la hemoglobina. El sexto enlace del Fe2+ es con una molécula de
O2. Cerca de donde se une el O2 está la histidina distal (His E7), la encargada
de evitar que el monóxido de carbono se una con más eficiencia.
Alosteria La hemoglobina es una proteína alostérica. La unión del O2 es cooperativa; la
unión del O2 a una subunidad aumenta la facilidad de unión de moléculas de
O2 adicionales a las otras subunidades. La curva de disociación del oxígeno
de la hemoglobina es sigmoidea, mientras que la de la mioglobina es hiperbó-
lica. La mioglobina tiene una afinidad mayor por el oxígeno que la hemoglo-
bina. La oxihemoglobina y la desoxihemoglobina tienen diferentes estructuras
cuaternarias. A medida que el O2 se une al Fe2+ distorsiona el grupo hemo y
mueve la histidina proximal. Esto a su vez mueve la hélice F y altera las interac-
ciones entre las cuatro subunidades. El H+, el CO2 y el 2,3-bisfosfoglicerato (bpg)
son efectores alostéricos que promueven la liberación de O2 de la hemoglobina.
El bpg se une en la cavidad central situada entre las cuatro subunidades.
Hemoglobina fetal La hemoglobina F (HbF), la cual consiste en dos cadenas α y dos cadenas γ (α2
y γ2), está presente en el feto. La HbF une bpg con menos firmeza que la HbA y
por consiguiente presenta una afinidad más alta por el O2, que promueve la
transferencia del O2 desde la circulación materna a la fetal.
Hemoglobinopatías Las hemoglobinopatías son enfermedades causadas por hemoglobinas anor-
males. La mejor caracterizada de éstas es la que reconoce un mecanismo de
transmisión genética, la enfermedad hemolítica anemia de células falciformes.
Es causada por la sustitución no conservadora de una Glu por una Val, lo que
resulta en la aparición de un parche pegajoso hidrófobo en la superficie de la
proteína. Esto permite que se formen largos agregados de fibras de molécu-
las de hemoglobina, los cuales distorsionan la forma de los glóbulos rojos. Los
heterocigotos que portan sólo una copia del gen de la célula falciforme son más
resistentes al paludismo que los homocigotos para el gen normal.
B3 – MIOGLOBINA Y HEMOGLOBINA 37
Proteínas que unen oxígeno reveló que la hemoglobina está elaborada de cuatro
La hemoglobina es una de las dos proteínas que unen cadenas polipeptídicas, cada una de las cuales presenta
oxígeno que se encuentran en los vertebrados. La fun- una estructura tridimensional similar a la de la cadena
ción de la hemoglobina es transportar oxígeno en la san- polipeptídica única de la mioglobina (figura B3-1b), pese
gre desde los pulmones hasta todos los tejidos restantes a que sus secuencias de aminoácidos difieren en 83% de
del cuerpo, con el propósito de aportarles a las células los residuos. Lo anterior destaca un tema relativamente
el O2 que necesitan para la fosforilación oxidativa de los común de la estructura de las proteínas: que secuencias
productos alimenticios (sección L2). La hemoglobina se primarias muy diferentes pueden especificar estructu-
encuentra en la sangre dentro de los eritrocitos (gló- ras tridimensionales muy similares. El tipo principal de
bulos rojos). La función esencial de estas células, ade- hemoglobina que se encuentra en adultos (HbA) está
más de otras, es fungir como un saco para transportar elaborado con dos cadenas polipeptídicas diferentes: la
hemoglobina, ya que los eritrocitos maduros carecen cadena α, que consta de 141 residuos de aminoácidos,
de cualquier organelo interno (núcleo, mitocondrias, y la cadena β, que consta de 146 residuos (α2β2; figura
etc.). La otra proteína que une O2 es la mioglobina, la B3-1b). Cada cadena, como en la mioglobina, consta de
que almacena el oxígeno en los tejidos del cuerpo donde ocho hélices α y cada una contiene un grupo prostético
lo mantiene listo para cuando las células lo necesiten. hemo (figura B3-1b). Por consiguiente, la hemoglobina
Las concentraciones más altas de mioglobina se hallan puede unir cuatro moléculas de O2. Las cuatro cadenas
en los músculos esquelético y cardiaco, que requieren polipeptídicas se hallan empacadas de manera muy
grandes cantidades de O2 debido a su gran necesidad de estrecha una junto a la otra en una disposición tetraé-
O2 durante la contracción (sección B5). drica para formar una molécula de forma casi esférica,
cuya forma se mantiene por múltiples interacciones no
covalentes (sección B2).
Mioglobina
La mioglobina es una proteína relativamente pequeña
con una masa de 17.8 kDa elaborada con 153 aminoáci-
Unión del oxígeno al hemo
dos dispuestos en una cadena polipeptídica única. Fue El grupo prostético hemo de la mioglobina y la hemo-
la primera proteína en tener su estructura tridimensio- globina está hecho de un anillo de protoporfirina IX
nal determinada por cristalografía de rayos X (sección con un átomo de hierro en estado de oxidación ferroso
B2), logro llevado a cabo por John Kendrew en 1957. La (Fe2+) (sección M4; figura B3-2). Este Fe2+ se une con cua-
mioglobina es una típica proteína globular que tiene tro átomos de nitrógeno en el centro del anillo de proto-
una estructura compacta muy plegada, con la mayor porfirina y además forma dos uniones adicionales a
parte de los residuos de aminoácidos hidrófobos orde- cada lado del plano del anillo de protoporfirina. Una de
nados en el interior y muchos de los residuos polares éstas es con un residuo de histidina, el cual se halla ocho
dispuestos en la superficie. La cristalografía de rayos X residuos más allá a lo largo de la hélice F de la hemo-
reveló que la cadena polipeptídica única de la mioglo- globina, la histidina proximal (His F8) (figura B3-2). El
bina consiste por completo en una estructura secunda- sexto enlace es con uno de los átomos de oxígeno de
ria helicoidal α (sección B2). De hecho, hay ocho héli- la molécula de O2 (figura B3-2). Cerca de donde el O2
ces α en la mioglobina (designadas A-H) (figura B3-1a). se une con el grupo hemo, se encuentra otro residuo
Dentro de una hendidura hidrófoba formada por el de histidina, la histidina distal (His E7) (figura B3-2).
plegamiento de la cadena polipeptídica está el grupo Esto sirve para dos funciones de mucha importancia.
prostético hemo (figura B3-1a). Esta unidad no polipep- Primero, evita que los grupos hemo de las moléculas de
tídica está unida en forma no covalente a la mioglobina hemoglobina cercanas hagan contacto con otras y oxi-
y resulta esencial para la actividad biológica de la pro- den el hierro al estado Fe3+, en el cual no pueden unir
teína (es decir, la unión de O2). mucho O2. Segundo, evita que el monóxido de carbono
(co) se una con la configuración más favorable al Fe2+,
y disminuye de este modo la afinidad del hemo por el
Hemoglobina co. Este hecho es importante en virtud de que el co con-
La estructura tridimensional de la hemoglobina fue trae uniones irreversibles con el hemo y así la proteína
resuelta por medio de la cristalografía de rayos X (sec- no puede unir mucho O2 más. En consecuencia, aun-
ción B2), hecho que logró Max Perutz en 1959. Ésta que el sitio de unión del oxígeno en la hemoglobina y
38 SECCIÓN B – AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
a) b)
β2 β1
Cadena
polipeptídica Grupo
prostético
hemo α2 α1
c) d)
Hélice F
CONH CH CONH
C NH CH2
His
Proximal HC CH C NH
(His F8) N
HC CH
2+ O2 N
Fe
Fe2+
Vista lateral HN CH HN CH
del anillo de O
O2
protoporfirina IX HC N HC N
O C
C His Distal
(His E7)
CH2 CH2
Figura B3-2. Unión del O2 al hemo. El Fe2+ del anillo de la protoporfirina está enlazado
a la His F8 pero no a la His E7, que está muy cerca. A medida que el Fe2+ une O2, la
hélice F se mueve más cerca de la hélice E (véase el texto para mayores detalles).
B3 – MIOGLOBINA Y HEMOGLOBINA 39
la mioglobina es sólo una pequeña parte de la proteína que la histidina proximal también se mueva. Ésta, a su
total, la cadena polipeptídica modula la función del vez, cambia su posición en la hélice F y en regiones de
grupo prostético hemo. la cadena polipeptídica a cualquiera de los extremos de la
hélice. Por consiguiente, el movimiento en el centro de
la subunidad se transmite a las superficies, donde causa
Alosteria
que las interacciones iónicas que mantienen las cuatro
La hemoglobina es una proteína alostérica (consúltese subunidades juntas se rompan y restablezcan en una
la sección D5 para una descripción más completa de la posición diferente, que altera la estructura cuaternaria y
alosteria). Esto significa que la unión del O2 a una de conduce a la unión cooperativa del O2 a la hemoglobina.
las subunidades es afectada por sus interacciones con las
otras subunidades. De hecho, la unión del O2 a una
subunidad de la hemoglobina induce cambios confor- Efecto Bohr
macionales (véase más adelante y la figura B3-2) que se La concentración de iones H+ y CO2 en los tejidos cir-
retransmiten a las otras subunidades, lo que aumenta cundantes afecta la unión del O2 a la hemoglobina, o
su capacidad de unir O2 al incrementar su afinidad por efecto Bohr. En tejidos con alta actividad metabólica
esta molécula. Por ello, se dice que la unión del O2 a la como el músculo, la concentración de estas dos sustan-
hemoglobina es cooperativa. En contraste, la unión del cias es relativamente alta. Esto causa un cambio en la
O2 a la cadena polipeptídica única de la mioglobina es curva de disociación de O2 de la hemoglobina hacia
no cooperativa. Lo anterior se hace muy aparente en las la derecha, lo que promueve la liberación del O2. Lo
curvas de disociación del oxígeno de las dos proteínas: anterior sucede debido a que hay sitios de unión de H+,
la de la hemoglobina es sigmoidea, lo cual refleja que la en primer lugar el His146 en la cadena β, que tienen una
unión es cooperativa, en tanto que la de la mioglobina afinidad más alta de unión del H+ en la desoxihemo-
es hiperbólica (figura B3-3). A partir de la curva de diso- globina que en la oxihemoglobina. Un aumento del CO2
ciación de O2 también puede verse que para cualquier determina un incremento de H+ debido a la acción de
presión de oxígeno específica el grado de saturación de la enzima anhidrasa carbónica, encargada de catalizar la
la mioglobina es más alto que el de la hemoglobina. En reacción:
otras palabras, la mioglobina presenta una afinidad más
alta por el O2 que la hemoglobina. Lo anterior significa CO2 + H2O HCO3− + H+
que en la sangre de los capilares musculares, por ejem- De manera adicional, el CO2 puede reaccionar con los
plo, la hemoglobina habrá de liberar su O2 a la mioglo- grupos amino primarios de la cadena polipeptídica para
bina para que lo almacene allí. formar un carbamato con carga negativa. Otra vez, este
cambio de carga de positiva a negativa favorece la con-
Mecanismo del cambio alostérico formación de la desoxihemoglobina. En su regreso en
la sangre hacia los pulmones, las concentraciones de
La cristalografía de rayos X reveló que la oxihemoglo-
H+ y CO2 son relativamente más bajas y la del O2 más
bina, la forma que tiene cuatro moléculas de O2 uni-
alta, de manera que el proceso se invierte y el O2 se une
das, difiere mucho en su estructura cuaternaria de la
a la hemoglobina. De este modo, puede verse que la
desoxihemoglobina, la forma sin O2 unido. En ausencia
hemoglobina no sólo transporta O2 sino que también
de O2 unido, el Fe2+ yace ligeramente hacia un lado del
lo hace con el CO2 en su regreso a los pulmones, donde
anillo de porfirina, el cual es de por sí algo curvo (figura
es eliminado.
B3-2). A medida que la molécula de O2 se une al grupo
prostético hemo atrae al Fe2+ hacia dentro del plano del El 2,3-bisfosfoglicerato (bpg) es una molécula de fosfato
anillo de porfirina (figura B3-2), al mismo tiempo que orgánico muy aniónica (figura B3-4) que está presente
aplana dicho anillo. El movimiento del Fe2+ determina en los eritrocitos junto a la hemoglobina. Esta molécula
Mioglobina
1
Hemoglobina
Saturación (y)
0.5
0
0 20 40 60 80 100
Presión de O2 (pO2 en mmHg)
Sustitución
de Glu por Val
O2
Parche Sitio
hidrófobo pegagoso hidrófobo
xn
heterocigotos una copia normal y una anormal. Por lo de los heterocigotos. La frecuencia del gen falciforme es
regular, los homocigotos tienen una esperanza de vida relativamente alta en ciertas partes de África y correla-
reducida como resultado de infecciones, insuficiencia ciona con la incidencia de paludismo. La razón de esto
renal, insuficiencia cardiaca o trombosis, todas ellas es que los heterocigotos están protegidos contra la forma
debidas a que las células falciformes quedan atrapadas más letal del paludismo, mientras que los homocigo-
en los vasos sanguíneos pequeños, lo que condiciona tos normales son más vulnerables a esta enfermedad.
daño tisular. En contraste, los heterocigotos no suelen Ahora puede determinarse la herencia de la hemoglo-
padecer síntomas ya que sólo alrededor de 1% de sus bina anormal mediante técnicas con dna recombinante
eritrocitos es falciforme, comparado con cerca de 50% (sección I1).
SecCiÓn B – AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
B4 Colágena
Notas clave
Función y diversidad Colágena es el nombre asignado a una familia con relaciones estructurales
que forma fibras insolubles fuertes. Las colágenas consisten en tres cadenas
polipeptídicas, cuya identidad y distribución varía entre los tipos de colágena.
Los diferentes tipos de colágena se encuentran en distintas localizaciones del
cuerpo.
Biosíntesis: descripción Los polipéptidos de la colágena son modificados después de su traducción por
hidroxilación y glucosilación durante su transporte a través del retículo endo-
plásmico rugoso y el aparato de Golgi. Los tres polipéptidos forman la proco-
lágena trihelicoidal, que se secreta fuera de la célula. La extensión peptídica es
removida para dar lugar a la tropocolágena, la cual se agrega en una microfibri-
lla y se entrecruza de modo covalente para formar la fibra de colágena madura.
Composición y Una tercera parte de los residuos de aminoácidos de la colágena son de
modificaciones Gly, mientras que una cuarta parte es de Pro. Los aminoácidos hidroxilados
postraducción 4-hidroxiprolina (Hyp) y 5-hidroxilisina (Hyl) se forman después de la traduc-
ción por la acción de la hidroxilasa de prolina y la hidroxilasa de lisina. Estas
enzimas que contienen Fe2+ requieren ácido ascórbico (vitamina C) para su
actividad. En el escorbuto, una enfermedad por deficiencia de vitamina C, la
colágena no se forma de manera correcta debido a la incapacidad para hidroxi-
lar a la Pro y la Lys. Los residuos Hyl suelen modificarse con carbohidratos luego
de su traducción.
Estructura La colágena contiene una secuencia tripeptídica repetida de Gly-X-Y, donde X
suele ser la Pro y Y suele ser la Hyp. Cada polipéptido de la colágena se pliega
en una hélice de 3.3 residuos por vuelta. Las tres cadenas polipeptídicas se jun-
tan para formar un cable helicoidal triple cuyas cadenas se mantienen juntas
gracias a los puentes de hidrógeno que se forman entre las cadenas. Cada tres
residuos, uno pasa a través del centro de la triple hélice, el cual está tan abarro-
tado que sólo la Gly es lo suficientemente pequeña para encajar.
Secreción y agregación Los péptidos de extensión en el N y C terminales de las cadenas polipeptídicas
dirigen la formación del cable helicoidal triple y evitan la agregación prematura
de las moléculas de procolágena dentro de la célula. Después de su secreción
fuera de la célula, los péptidos de extensión son separados por peptidasas y
las resultantes moléculas de tropocolágena se disponen juntas en un orden
alternado.
Enlaces cruzados Los enlaces cruzados covalentes entre y dentro de las moléculas de tropocolá-
gena confieren fuerza y rigidez a la fibra de colágena. Estos enlaces cruzados se
forman entre la Lys y su derivado aldehído alisina. Ésta deriva de la acción de
la oxidasa de lisilo sobre la Lys. Esta enzima contiene cobre y necesita fosfato
de piridoxal para actuar.
Formación de hueso La hidroxiapatita (fosfato de calcio) se deposita en sitios de nucleación entre
los extremos de las moléculas de tropocolágena, como el paso inicial en la for-
mación del hueso.
Temas relacionados (B1) Estructura de los aminoácidos (H4) Direccionamiento de las
(B2) Estructura y función de las proteínas
proteínas
B4 – COLÁGENA 43
Síntesis de polipéptidos
Modificaciones
postraducción
Dentro del RET y el aparato
de Golgi del fibroblasto
Cable helicoidal
triple de procolágena
Secreción
Remoción de los
péptidos de extensión
Tropocolágena
Dentro del espacio extracelular
del tejido conectivo
Agregación dentro
de la miofibrilla
Enlazamiento cruzado
Fibra de colágena
helicoidal triple conocida como procolágena. En ese estabilización de la estructura de la colágena mediante
momento, la procolágena es secretada al espacio extra- la formación de enlaces de hidrógeno (véase más ade-
celular del tejido conectivo, donde peptidasas remueven lante). En caso de deficiencia de vitamina C, la Hyp (y
cadenas de polipéptidos de extensión a nivel de los N y C la Hyl) no se sintetiza, lo que ocasiona el debilitamiento
terminales (péptidos de extensión) para formar tropo- de las fibras de colágena. Esto conduce a lesiones de la
colágena (figura B4-1). Las moléculas de tropocolágena piel, vasos sanguíneos frágiles y cicatrización deficiente
se agregan y forman numerosos enlaces entrecruzados de las heridas, que son las características del escorbuto.
para producir fibras de colágena madura (figura B4-1).
La otra modificación postraducción que le sucede a la
colágena es la glucosilación. En este caso, los residuos
Composición y modificaciones de azúcar, que por lo general se limitan a la glucosa,
galactosa y sus disacáridos, están fijos al grupo hidroxilo
postraducción
de los residuos Hyl de reciente formación, más que en
La composición de aminoácidos de la colágena es los residuos de Asn o de Ser/Thr, como ocurre con la
muy característica. Cerca de una tercera parte de sus glucosilación más extendida ligada a N u O (sección H5).
residuos son de Gly, mientras que otra cuarta parte es La cantidad de carbohidrato unido a la colágena varía
de Pro, que son proporciones significativamente más de 0.4% a 12% del peso, de acuerdo con el tejido en el
altas que las que se encuentran en otras proteínas. Los que se sintetice.
aminoácidos hidroxilados 4-hidroxiprolina (Hyp) y
5-hidroxilisina (Hyl) (figura B4-2) se encuentran sólo
en la colágena. Estos aminoácidos hidroxilados se for- Estructura
man por la acción de las enzimas hidroxilasa de pro- La estructura primaria de cada polipéptido de la colá-
lina e hidroxilasa de lisina, respectivamente, sobre los gena se caracteriza por una repetición de la secuencia
aminoácidos parentales (figura B4-2). Estas enzimas tripeptídica de Gly-X-Y, donde X suele ser, pero no de
cuentan con un ion Fe2+ en su sitio activo y requieren manera exclusiva, Pro y Y es con frecuencia Hyp. Cada
ácido ascórbico (vitamina C) para su actividad. El ácido una de las tres cadenas polipeptídicas de la colágena
ascórbico actúa como un antioxidante, lo que le permite tiene alrededor de 1 000 residuos de largo y las tres se
mantener al ion Fe2+ en su estado reducido. La hidroxilasa pliegan en una hélice que sólo tiene 3.3 residuos por
de prolina y la hidroxilasa de lisina son dioxigenasas que vuelta, en lugar de los 3.6 residuos por vuelta de la hélice
usan una molécula de O2. El cetoglutarato α, un interme- (sección B2). Esta estructura secundaria es exclusiva de
diario del ciclo del ácido cítrico (sección L1), es un sus- la colágena y con frecuencia se refiere como hélice de la
trato obligatorio que se convierte en succinato durante colágena. Las tres cadenas polipeptídicas yacen parale-
la reacción (figura B4-2). Ambas enzimas hidroxilan sólo las y se enrollan una alrededor de la otra con una ligera
los residuos de Pro y Lys que forman parte de la cadena inclinación a la derecha, retorcidas como una cuerda
polipeptídica, y por tanto sólo cuando el residuo está en para formar un cable helicoidal triple (figura B4-3).
el lado N terminal de la Gly. La Hyp es importante para la Cada tercer residuo de cada polipéptido pasa a través
COO– COO–
CH2 CH2
Hidroxilasa + CH2 + CO2
N CH CO + CH2 + O2 N 2
CH 1
CO
de prolina
5 3
H 2C CH2 C O H 2C CH2 C O
CH2 COO– 4
C O–
H OH
Prolina Cetoglutarato α HIdroxiprolina Succinato
2 1
NH CH CO NH CH CO
3
CH2 CH2
CH2 HIdroxilasa 4
CH2
+ Cetoglutarato α + O2 + Succinato + CO2
de lisina 5
CH2 H C OH
6
CH2 CH2
NH + 3 NH3+
Lisina HIdroxilisina
del centro de la hélice triple, el cual está tan atiborrado deformidades esqueléticas. Se conoce el espectro com-
que sólo una cadena lateral pequeña como la Gly puede pleto de tales mutaciones, que causan la producción
encajarse. Lo anterior explica la necesidad absoluta de de colágena defectuosa y resulta en una osteogénesis
Gly cada tres residuos. Los residuos de las posiciones X y imperfecta (huesos frágiles).
Y se localizan en el lado externo del cable helicoidal tri-
ple, donde hay espacio para las cadenas laterales abul- Secreción y agregación
tadas como la Pro y otros residuos. Las tres cadenas de
Cuando los polipéptidos de colágena se sintetizan, tie-
polipéptidos se hallan alternadas, de modo que el resi-
nen residuos de aminoácidos adicionales (100 a 300) en
duo Gly de una cadena se alinea con el residuo X de la
sus N y C terminales que no están en la fibra de colágena
segunda cadena y con el residuo Y de la tercera cadena.
madura (figura B4-4). Estos péptidos de extensión con-
La hélice triple se mantiene unida a raíz de una extensa
tienen con frecuencia residuos de Cys que por lo general
red de enlaces de hidrógeno (sección B2), en particular
no existen en la cadena polipeptídica restante. Los pép-
entre el grupo amino primario de la Gly de una hélice
tidos de extensión contribuyen a alinear correctamente
y el grupo carboxilo primario de la Pro en la posición X
los tres polipéptidos ya que están juntos en la hélice
de una de las otras hélices. Además, los grupos hidroxi-
triple, un proceso al que puede ayudar la formación de
lo de los residuos Hyp participan en la estabilización de
enlaces de disulfuro entre los péptidos de extensión y
la estructura. La relativamente inflexible Pro y la Hyp,
las vecinas cadenas de polipéptidos. Los péptidos de ex-
confieren también rigidez a la estructura de la colágena.
tensión también evitan la agregación prematura de las
La importancia de que la Gly se encuentre cada tercer hélices triples de la procolágena dentro de la célula.
residuo se confirma cuando una mutación en la codi- Cuando se secretan fuera del fibroblasto, la acción de
ficación del dna de la colágena tipo I lleva a incorporar las peptidasas extracelulares elimina los péptidos de ex-
un aminoácido diferente en una sola posición de una tensión (figura B4-4). Las moléculas de tropocolágena
cadena polipeptídica de 1 000 residuos. Por ejemplo, si resultantes se agregan entonces juntas en una disposi-
una mutación lleva a la incorporación de una Cys en ción alternada de cabeza a cola en la fibra de colágena
lugar de una Gly, la hélice triple es interrumpida ya que (figura B4-4).
la cadena lateral -ch2-sh de la Cys es demasiado grande
para encajar en el interior de la hélice triple. Lo anterior
conduce a una estructura desplegada en forma parcial
Enlaces cruzados covalentes
que es susceptible a hidroxilación y glucosilación exce- Entre y dentro de las moléculas de tropocolágena, los
siva y a que los fibroblastos no la secreten con eficien- enlaces cruzados covalentes imparten fuerza y rigidez
cia. Esto, a su vez, resulta en una estructura de colá- a las fibras de colágena. Como casi no hay residuos de
gena defectuosa que puede originar huesos frágiles y Cys en la colágena madura final, estos enlaces cruzados
Polipéptido
Péptidos de
Péptidos de extensión
extensión
Dirección del
plegamiento
Cable helicoidal
Peptidasas de triple de procolágena
secreción
Tropocolágena
Sitios de nucleación
para la formación de hueso
Enlaces cruzados
Fibra de
colágena
Tropocolágena 67 nm 35 nm
covalentes no son enlaces de disulfuro, como sucede por inhibe en forma irreversible a la lisiloxidasa y así evita
lo regular en las proteínas, sino que son enlaces cruza- los enlaces cruzados de las moléculas de tropocolágena,
dos singulares que se forman entre la Lys y su derivado de lo cual resultan anormalidades serias de los huesos,
aldehído alisina. Los residuos de alisina se forman por articulaciones y grandes vasos sanguíneos debidas a la
la acción de la monooxigenasa lisiloxidasa sobre la Lys colágena frágil. Otra enfermedad por deficiencia de
(figura B4-5). Para su actividad, esta enzima que con- la colágena, el síndrome de Ehlers-Danlos tipo V, se
tiene cobre requiere la coenzima fosfato de piridoxal, debe a la deficiencia de lisiloxidasa y se manifiesta por
que es un derivado de la vitamina B6 (sección M2). A articulaciones hipermóviles e hiperextensibilidad de
continuación, el grupo aldehído de la alisina reacciona la piel.
de manera espontánea con el grupo amino de la cadena
lateral de la Lys o con otro residuo de alisina de otra Formación de hueso
cadena polipeptídica para formar enlaces covalentes
La disposición alternada regular de los espacios entre
entre las cadenas.
los extremos de las moléculas de tropocolágena en una
La importancia de los enlaces cruzados en el funciona- fibra de colágena (figura B4-4) corresponde a los sitios
miento normal de la colágena lo demuestra la enferme- de nucleación para el depósito de una forma del fosfa-
dad latirismo. Esta enfermedad se presenta en seres to de calcio, la hidroxiapatita, en la formación del hue-
humanos y animales que ingieren semillas de chícharos so. Se añade más hidroxiapatita hasta que los sitios de
dulces (Lathyrus odoratus), las cuales contienen la sus- nucleación crecen y se articulan con otros para formar
tancia química aminopropionitrilo β. Este compuesto la estructura ósea madura.
NH CH CO NH CH CO
Lisilo +
(CH2)4 + O2 (CH2)3 + NH4 + H2O
+ oxidasa
NH2 C
Lisina O O
Alisina
B5 Motores moleculares
Notas clave
Motores moleculares Los motores moleculares o proteínas motoras se unen a los filamentos del
citoesqueleto y usan energía derivada de la hidrólisis del atp para moverse a lo
largo de ellos. La región de la cabeza o dominio motor hidroliza el atp y se une
a los filamentos, en tanto que la región de la cola se une a la carga. Los tipos
principales de proteínas motoras son las miosinas, las cinesinas y las dineínas.
Estructura del músculo Cada célula de los músculos estriados de los vertebrados contiene dentro de su
sarcoplasma muchas miofibrillas paralelas, las cuales están elaboradas de
unidades de sarcómeros repetidos. Dentro de cada sarcómero, en forma alter-
nante, están las bandas oscuras A y las bandas claras I, en medio de las cuales
están la zona H y la línea Z, respectivamente. Una miofibrilla contiene dos tipos
de filamentos: los gruesos, que son de miosina y los delgados, que son de actina,
tropomiosina y troponina. Cuando el músculo se contrae, los filamentos grue-
sos y delgados se deslizan unos sobre otros y acortan la longitud del sarcómero.
Miosina La proteína miosina consiste en dos cadenas de polipéptidos pesadas y en dos
pares de cadenas livianas ordenadas como una región globular de cabeza doble
fija a una espiral enrollada helicoidal αde hebra doble. Las moléculas de miosina
se ensamblan en filamentos, hidrolizan el atp y unen actina.
Actina El constituyente principal de los filamentos delgados es la actina, que puede
existir como un monómero globular de actina G o como un polímero fibroso
de actina F. Los filamentos de actina están conectados a los filamentos gruesos
mediante puentes cruzados formados por las cabezas S1 de la miosina.
Generación de la fuerza La formación y disociación cíclicas de complejos entre los filamentos de actina
en el músculo y las cabezas S1 de la miosina lleva a la contracción del músculo. Al unirse a la
actina, la miosina libera sus enlaces Pi y adp. Esto provoca un cambio conforma-
cional en la proteína, que mueve el filamento de actina a lo largo del filamento
grueso. En ese momento, el atp se une a la miosina y desplaza a la actina. La
hidrólisis del atp hace regresar la cabeza S1 a su conformación original.
Troponina y tropomiosina La tropomiosina yace a lo largo del filamento delgado y evita la asociación de
la miosina con la actina en el estado de reposo. En respuesta a la estimulación
nerviosa, desde el retículo sarcoplásmico, se liberan iones de Ca2+ que se unen a
la subunidad TnC de la troponina y causan un cambio de conformación en esta
proteína. Mediante un mecanismo alostérico, este movimiento se transmite a
través de las subunidades TnI y TnT de la troponina a la tropomiosina, lo que
determina que esta última se mueva de su sitio y permita la asociación de la
actina con la miosina.
Cinesinas Las cinesinas se mueven a lo largo de los microtúbulos y participan en el movi-
miento de las vesículas y organelos alrededor de la célula en la segregación
de los cromosomas. Una molécula de cinesina tiene dos cabezas, ambas con
actividad de atp-asa, las cuales se unen de manera alternativa al microtúbulo y
mueven de ese modo a la cinesina y su carga a lo largo de éste.
48 SECCIÓN B – AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
Zona H Zona H
Z Z Z
Sarcómero
Filamentos delgados Filamentos gruesos
b)
Sarcómero
La miosina consiste en una región globular de doble potencia iónica, existe como un monómero de 42 kDa
cabeza unida a un largo bastón. El bastón es una espi- denominado actina G debido a su forma globular. A
ral enrollada helicoidal α de doble hebra formada por medida que la potencia iónica de la solución aumenta
las dos cadenas pesadas, en tanto que las cabezas son hasta alcanzar la del nivel fisiológico, la actina G se poli-
también parte de cada cadena pesada con las cadenas meriza en una forma fibrosa, la actina F, que recuerda a
livianas unidas (figura B5-2a). La proteólisis limitada de los filamentos delgados que se encuentran en el múscu-
la miosina con la proteasa tripsina produce su disec- lo. Aunque la actina, como la miosina, es una atp-asa,
ción en dos fragmentos: meromiosina ligera (lmm) y la hidrólisis del atp no forma parte del ciclo de contrac-
meromiosina pesada (hmm) (figura B5-2b). Estudios ción-relajación del músculo sino en el del ensamble y
funcionales de estos dos fragmentos revelan que la lmm desensamble del filamento de actina.
puede todavía formar filamentos pero pierde su activi-
En los filamentos gruesos emergen puentes cruzados
dad de atp-asa, mientras que la hmm es incapaz de for-
desde el eje del filamento en una disposición helicoidal
mar filamentos pero conserva su actividad de atp-asa y
regular hacia cualquier extremo, donde hay una región
puede unirse a la actina. De manera adicional, la pro-
desnuda en el medio que carece de puentes cruzados
teasa papaína (figura B5-2b) puede dividir la hmm en dos
(figura B5-3). En el músculo sin atp, los puentes cruza-
subfragmentos globulares idénticos (S1) y un subfrag-
dos de la miosina interactúan con los filamentos de actina
mento en forma de bastón (S2). El subfragmento S1,
circundantes. La dirección absoluta de las moléculas de
cuya estructura se determinó mediante cristalografía
actina y miosina invierte la mitad entre las líneas Z. Por
de rayos X, contiene un sitio atp-asa, un sitio de unión de
tanto, a medida que los dos filamentos delgados que se
actina y dos sitios de unión de cadenas ligeras. La esci-
unen a los puentes cruzados en cualquier extremo de
sión proteolítica de la miosina tiene lugar en regiones
un filamento grueso se mueven uno hacia el otro desli-
bisagra flexibles de la proteína que separan el dominio
zándose sobre el filamento grueso, la distancia entre las
globular S1 de los dominios tipo bastón S2 y lmm (figura
líneas Z se acorta y el músculo se contrae (figura B5-3).
B5-2c). Estas regiones bisagra juegan un papel crucial en
la contracción del músculo.
Generación de fuerza en el músculo
Actina La formación y disociación cíclicas de puentes cruzados
La actina, el constituyente principal de los filamentos entre la actina y las cabezas S1 de la miosina hace con-
delgados, existe en dos formas. En soluciones de baja traer el músculo por los cambios conformacionales que
50 SECCIÓN B – AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
a) Cadena pesada
Cadenas livianas
COO–
COO–
b)
c) S1
COO–
S1 S2
Tripsina
Bisagras LMM
COO–
HMM LMM
Papaína
S1
S2
S1
Figura B5-2. Estructura de la miosina donde se puede ver a) la asociación de
las dos cadenas pesadas y los dos pares de cadenas ligeras; b) la fragmentación
proteolítica de la miosina, y c) las regiones bisagra entre los dominios.
ocurren en la cabeza S1 de la miosina. En el músculo en la región en bisagra situada entre los dominios S1 y S2
reposo, las cabezas S1 son incapaces de interactuar con que modifica su orientación relativa con la molécula de
la actina en los filamentos delgados debido a la interfe- actina en el filamento delgado (figura B5-4c). Éste cons-
rencia estérica de la proteína reguladora tropomiosina tituye el golpe de poder de la contracción muscular y
(figura B5-4a). La miosina tiene enlaces con el adp y el Pi. resulta en el movimiento del filamento delgado en una
Cuando el músculo recibe un estímulo, la tropomiosina distancia de alrededor de 10 nm en relación con el fila-
se mueve hacia fuera y permite que las cabezas S1 se mento grueso, hacia el centro del sarcómero. Entonces
proyecten fuera del filamento grueso para fijarse en la el atp se une a la cabeza S1, lo que provoca la rápida
actina en el filamento delgado (figura B5-4b). Cuando liberación de la actina [es decir, la disociación de los
se produce la unión de la miosina-adp-Pi a la actina, pri- ligamentos delgado y grueso (figura B5-4d)]. Luego el
mero se libera el Pi y después el adp. Ni bien el adp se atp sufre una hidrólisis parcial por la cabeza S1 libre
libera, la cabeza S1 sufre un cambio conformacional en que lo convierte en adp y Pi y la cabeza S1 recupera su
conformación original lista para otra ronda de fijación citoplásmica del catión con respecto a la que muestra en
(figura B5-4e), cambio conformacional y liberación. reposo, que es menor de 1 µM a casi 10 µM. El Ca2+ se
une a sitios del TnC, lo que provoca un cambio confor-
macional de este polipéptido que se transmite a través
Troponina y tropomiosina de los otros componentes del complejo de la troponina
La troponina y la tropomiosina median la regulación de a la tropomiosina. A consecuencia de lo anterior, la tro-
la contracción muscular en respuesta al Ca2+. Estas dos pomiosina se mueve hacia fuera, lo que permite que la
proteínas están presentes en el filamento delgado, junto cabeza S1 de la miosina interactúe con la actina e ini-
a la actina y constituyen alrededor de una tercera parte cie un ciclo de contracción. Por consiguiente, el Ca2+
de la masa de éste. La tropomiosina es una proteína controla la contracción muscular por un mecanismo
elongada de 70 kDa que forma un bastón helicoidal αde alostérico (sección D5) que implica a la troponina, la
dos hebras, el cual yace casi paralelo al eje mayor del tropomiosina, la actina y la miosina.
filamento delgado. La troponina es un complejo de tres
cadenas de polipéptidos: TnC (18 kDa), el cual se une
al Ca2+; TnI (24 kDa), el que se une a la actina y TnT
Cinesinas
(37 kDa), el cual se une a la tropomiosina. Cuando un Las cinesinas se mueven a lo largo de los microtúbu-
estímulo nervioso estimula el músculo, el retículo sar- los formados por la proteína tubulina (sección A2) y
coplásmico libera iones Ca2+ (una forma especializada están relacionadas con el movimiento de las vesículas
de ER que se encuentra en las células musculares; sec- y organelos alrededor de la célula y en la segregación
ción A2) en el citoplasma, lo que eleva la concentración de los cromosomas. Una molécula de cinesina tiene
Filamento delgado
a)
Pi
S1
S2 Miosina
ADP
Filamento grueso
La fijación
libera Pi
b)
Actina
Miosina
ADP
El golpe de poder
libera ADP
10 nm
c)
Miosina–actina
Miosina–ATP
e)
Pi
Miosina
ADP
dos cabezas, las cuales operan en tándem: una se une impulsados por cilios o un flagelo (sección A1). En las
al microtúbulo y luego lo hace la otra. De este modo, la células eucariotas, los cilios difieren de los flagelos sólo
molécula de cinesina “camina” a lo largo del microtú- en que son mucho más largos. Todos los cilios y flage-
bulo de una manera muy procesual. En contraste con la los eucarióticos presentan el mismo diseño básico: un
miosina, en que la unión con el atp promueve la diso- haz de fibras denominado axonema rodeado por una
ciación de la actina, la adición de atp incrementa con membrana que es continua con la membrana plasmá-
fuerza la afinidad de la cinesina por los microtúbulos. El tica (figura B5-5). En un axonema, las fibras de microtú-
ciclo comienza con ambas cabezas de una molécula de bulos están en una disposición característica de 9 + 2,
cinesina en la forma enlazada al adp. Una de las cabezas con un grupo periférico de nueve pares de microtúbulos
se une al microtúbulo y libera su adp, que es rempla- rodeando dos microtúbulos simples (figura B5-5). Cada
zado por atp. La unión del atp provoca un cambio con- una de las nueve parejas externas adquiere un aspecto
formacional que bloquea la cabeza en el microtúbulo parecido a un “8”, cuyo círculo más pequeño se llama
y atrae el enlazador de las dos cabezas hacia adelante subfibra A y el círculo mayor, subfibra B. La subfibra A
y de esa manera lanza la segunda cabeza a lo largo del se une a una vaina central por medio de rayos radiales,
microtúbulo. La hidrólisis del atp tiene lugar en la pri- mientras las parejas de microtúbulos vecinas se mantie-
mera cabeza mientras la segunda cabeza interactúa nen juntas por enlaces de nexina. Dos brazos de dineína
con el microtúbulo. El intercambio de atp por adp en la emergen de cada subfibra A, con todos los brazos de un
segunda cabeza atrae la primera cabeza de la molécula cilio apuntando en la misma dirección (figura B5-5).
de cinesina hacia adelante, lo que la hace mover a lo
La dineína es una proteína muy grande (1 000 a 2 000
largo del microtúbulo en una forma escalonada. Luego
kDa) que consiste en una, dos o tres cabezas según cuál
el ciclo se repite para mover la molécula de cinesina y
sea la fuente. Las cabezas de la dineína forman puen-
su carga enlazada a lo largo del microtúbulo.
tes cruzados con las subfibras B y poseen actividad de
atp-asa. La unión del atp a la dineína determina que se
Dineína disocie de la subfibra B. Durante la hidrólisis del atp y
Las proyecciones similares a cabellos, o cilios, de la su conversión en adp y Pi, la dineína vuelve a unirse con
superficie de ciertas células eucariotas, como las que la subfibra B con la consecuente liberación de Pi y adp.
revisten las vías respiratorias, consisten sobre todo en Este ciclo de la atp-asa produce el movimiento del cilio
microtúbulos (sección A2). Los cilios intervienen en el conforme las parejas externas del axonema se deslizan
movimiento de las corrientes de líquidos sobre la super- una sobre la otra. Los puentes cruzados de la dineína
ficie de las células. Células libres como los protozoarios generan la fuerza entre las parejas adyacentes. Por con-
y los espermatozoides de varias especies pueden ser siguiente, los brazos de la dineína sobre la subfibra A de
Membrana
plasmática
Subfibra A
Subfibra B Rayo
radial
Vaina
Nexina central
Brazo de
dineína
externo
Brazo de
dineína
interno
Pareja Microtúbulo
externa de solitario central
microtúbulos
una pareja recorren a lo largo la subfibra B de la pareja inmóviles, el llamado síndrome de cilios inmóviles.
adyacente. A diferencia del músculo, donde los filamen- Los pacientes que sufren esta enfermedad tienen tras-
tos de actina y miosina se deslizan unos sobre otros, tornos pulmonares crónicos debido a que los cilios de
en un cilio, los rayos radiales resisten el movimiento las vías respiratorias son incapaces de barrer las bacte-
deslizante, el cual es convertido en una flexión local. rias y otras partículas extrañas. De manera adicional, los
La muy extensible proteína nexina mantiene las parejas varones con este defecto genético son infértiles ya que
adyacentes juntas durante este proceso. sus espermatozoides son incapaces de moverse debido
a la inactividad de los flagelos.
Un defecto o ausencia de cualquiera de las proteínas
del axonema (p. ej., dineína, nexina) condiciona cilios
SecCiÓn B – AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
B6 Anticuerpos
Notas clave
Sistema inmunitario: El sistema inmunitario tiene dos funciones principales: reconocer los agentes
descripción patógenos invasores y desencadenar respuestas que los destruyan. El sistema
inmunitario humoral recae en los linfocitos B, que producen anticuerpos que se
unen a los antígenos extraños. El sistema inmunitario celular utiliza linfocitos
T asesinos que reconocen y destruyen a las células invasoras de modo directo.
La respuesta inmunitaria primaria se produce durante el contacto inicial con
un antígeno extraño y resulta en la producción de inmunoglobulina M (IgM) y,
a continuación, de inmunoglobulina G (IgG). Si se vuelve a encontrar el mismo
antígeno, la memoria inmunológica conduce a respuestas inmunitarias secun-
darias que producen un incremento mucho más rápido y grande de la produc-
ción de IgG específica.
Estructura del anticuerpo Cada molécula de IgG consiste en cuatro cadenas de polipéptidos (dos cadenas
ligeras idénticas y dos cadenas pesadas idénticas unidas por enlaces disulfuro) y
tiene dos sitios de unión de antígenos (es decir que es divalente). Cada cadena
ligera y cada cadena pesada consta de una región variable y una región cons-
tante. Cada cadena ligera se pliega en dos dominios, uno para la región varia-
ble y otro para la región constante. Cada cadena pesada de la IgG se pliega en
cuatro dominios, uno para la región variable y tres para la región constante. La
papaína digiere a la IgG y la convierte en dos fragmentos Fab (cada uno de los
cuales tiene un sitio de unión de antígeno, lo que significa que es monovalente)
y un fragmento Fc. La pepsina digiere a la IgG y libera un fragmento F(ab¢)2 que
cuenta con dos sitios de unión de antígeno.
Cinco clases de Las inmunoglobulinas humanas existentes son las clases IgA, IgD, IgE, IgG
inmunoglobulinas e IgM, las cuales contienen cadenas pesadas α, δ, ε, γ y µ, respectivamente. La
IgM es un pentámero que se une a los microorganismos invasores y activa el
complemento para matar las células y fagocitarlas. La IgG es el principal anti-
cuerpo que se encuentra en la sangre después de la estimulación antigénica
y también encierra la capacidad de cruzar la placenta. La IgA actúa en par-
ticular en las secreciones corporales. La IgE provee inmunidad contra algunos
parásitos, pero es asimismo la causa de los síntomas clínicos de las reacciones
alérgicas. La función exacta de la IgD se desconoce.
Anticuerpos policonales Una preparación de moléculas de anticuerpos que se originan de numerosas
clonas de células diferentes se llama anticuerpo policlonal. Consiste en una
mezcla de moléculas de anticuerpos que se unen a diferentes partes (epítopos)
del antígeno con diferentes afinidades de unión.
Anticuerpos El anticuerpo monoclonal es el anticuerpo producido por una sola clona de
monoconales células; todas las moléculas de anticuerpos son idénticas y se unen al mismo
sitio antigénico con idénticas afinidades de unión.
Síntesis de anticuerpos No existe un gen de anticuerpos completo en las células de la línea germinal.
Los genes de las cadenas livianas y pesadas se ensamblan por recombinación
somática durante la maduración del linfocito B. Un linfocito B puede cambiar
la clase de anticuerpo que expresa mientras mantiene la misma secuencia de
genes que codifica para la región variable de la cadena pesada pero si la une a
un nuevo segmento del gen C. La nueva cadena pesada tiene una región cons-
tante diferente, pero la misma especificidad de unión de antígeno de la cadena
pesada previa.
B6 – ANTICUERPOS 55
lgM
0 1 2 3 4 5 6 7
Semanas después de la inyección inicial de antígeno
a)
b)
Sitio de unión Sitio de unión Sitio de unión Sitio de unión
de antígeno de antígeno de antígeno de antígeno
N Cadena N
pesada
VH
N N
VL CH
SS Variable SS
S
S
CL
S
S
S
S
S
SS SS
Cadena C C
ligera Constante
Regiones
hipervariables
C C
(así llamado porque cristaliza en seguida). Los fragmen- Las diferentes cadenas pesadas confieren distintas pro-
tos Fc son los portadores del sitio efector que produce piedades y funciones a cada una de las clases de inmu-
la destrucción del antígeno, por ejemplo, al activar el noglobulinas.
sistema del complemento e inducir la fagocitosis de los
zz La IgM tiene cadenas pesadas µ y existe como un
agentes patógenos por otros glóbulos blancos. En con-
pentámero en combinación con otro polipéptido lla-
traste con la papaína, la pepsina (otra proteasa) corta la
mado cadena J, el cual se encarga de iniciar la polime-
molécula de IgG para liberar los dos brazos de ésta que
rización para formar la estructura pentamérica. Con
todavía se mantienen juntos y en consecuencia es un
su gran número de sitios de unión de antígeno, cada
fragmento que posee dos sitios de unión de antígeno
molécula de IgM se une de manera muy estrecha a
(es decir que es divalente) y todavía puede formar enla-
cualquier agente patógeno que tiene múltiples copias
ces cruzados con los antígenos. Este fragmento se llama
del mismo antígeno en su superficie. La unión induce
F(ab¢)2 (figura B6-3).
a la región Fc a activar la vía del complemento, el cual
acaba por causar la muerte del agente patógeno. La
Cinco clases de inmunoglobulinas IgM también activa a los macrófagos para que fago-
citen a los agentes patógenos. No es de sorprender
Los seres humanos tienen cinco clases diferentes de
en virtud de sus funciones, que la IgM sea el primer
moléculas de anticuerpos que difieren tanto en su
anticuerpo producido cuando un animal responde a
estructura como en su función. Tales moléculas se deno-
un nuevo antígeno (figura B6-1).
minan inmunoglobulina A (IgA), IgD, IgE, IgG e IgM y
cada una tiene su propio tipo de cadena pesada: α, δ, ε, � La IgG es la principal inmunoglobulina en la corriente
γ y m, respectivamente. Por consiguiente, las moléculas sanguínea al final de la respuesta inmunitaria prima-
de IgA tienen dos cadenas pesadas α idénticas, las molé- ria y en particular durante la respuesta inmunitaria
culas de IgD tienen dos cadenas pesadas idénticas y secundaria (figura B6-1). Como la IgM, puede activar
así sucesivamente. La clase de anticuerpos humanos IgG el complemento y desencadenar la respuesta de los
se subdivide en cuatro subclases de IgG: IgG1, IgG2, IgG3 macrófagos, pero es el único anticuerpo que puede D2.2
e IgG4, cuyas cadenas pesadas son γ1, γ2, γ3 y γ4, respec- atravesar la placenta y de ese modo proporcionar
tivamente. protección inmunitaria al feto. También se secreta en
Papaína
SS
S
S
S
S
SS
Pepsina Pepsina
Papaína Pepsina
Dos
fragmentos de Fab
Fragmento
F(ab )2
SS SS SS
S
S
S
S
SS
SS Fragmentos
SS de Fc
digeridos
Un fragmento Fc
la leche materna y es asimilada por el intestino del moléculas de anticuerpos en una preparación de anti-
animal recién nacido para enviarla a la circulación cuerpo monoclonal se unirán al mismo epítopo del
sanguínea, con lo que provee protección continua antígeno.
después del nacimiento.
El problema radica en que si se aísla una célula indivi-
zz La IgA es la principal clase de anticuerpos en secre- dual productora de anticuerpo y crece en cultivo, sus
ciones como las lágrimas, saliva y en secreciones de descendientes tienen una esperanza de vida acotada,
los pulmones y el intestino. Representa la primera lí- que limita en gran medida su uso en las preparacio-
nea de defensa inmunitaria contra la infección en nes de rutina de anticuerpos monoclonales. En 1975,
tales sitios. Milstein y Köhler descubrieron de qué forma pueden
zz La IgE se produce en tejidos donde, después de producirse de manera indefinida y en grandes canti-
enlazarse al antígeno, estimula a las células cebadas dades los anticuerpos monoclonales de casi cualquier
(mastocitos) para que liberen una serie de factores. especificidad deseada. Su método consistió en fusionar
A su vez, algunos de éstos activan glóbulos blancos un linfocito B productor de anticuerpos de la especi-
(llamados eosinófilos) para que maten varios tipos de ficidad deseada con una célula derivada de un tumor
parásitos. No obstante, las células cebadas también linfocítico canceroso, llamada célula de mieloma y que
pueden liberar aminas con actividad biológica, como es inmortal. La fusión de células se llama hibridoma,
la histamina, que causan dilatación e incrementan la que es inmortal y secreta el mismo anticuerpo especí-
permeabilidad de los vasos sanguíneos, que son los fico original codificado por el linfocito B.
causantes de los síntomas que se observan en reac-
Los anticuerpos monoclonales que se producen por
ciones alérgicas como la fiebre del heno y el asma.
intermedio de esta tecnología son herramientas comu-
zz La IgD se halla en la superficie de los linfocitos B nes de la investigación contemporánea debido a su
maduros y en indicios en varios líquidos corporales, muy alta especificidad. Por ejemplo, tales anticuerpos
no obstante su función exacta se desconoce. pueden usarse para localizar determinadas moléculas
intracelulares (sección A4) o secuencias de aminoácidos
También existen dos formas de cadenas ligeras. Las
particulares de las proteínas (sección C4). Si primero
moléculas de anticuerpos en cualquiera de las clases
se unen a una matriz insoluble, también resultan de
o subclases de anticuerpos pueden tener dos cadenas
extrema utilidad para unirse y por tanto purificar una
ligeras κ o dos cadenas ligeras λ. Contra lo que sucede
molécula particular contenida en extractos o fracciones
con las diferentes cadenas pesadas antes descritas, no
celulares (sección C1). Asimismo, se ha incrementado
se conocen diferencias de función biológica entre las
su uso en la medicina, tanto como herramienta diag-
cadenas ligeras κ y λ.
nóstica como terapéutica, por ejemplo para inactivar
toxinas bacterianas y tratar ciertas formas de cáncer.
Anticuerpos policlonales
Si un antígeno se inyecta en un animal, varias células Síntesis de anticuerpos
productoras de anticuerpos unirán ese antígeno, aun- Se cree que el genoma humano contiene tan pocos
que con diferentes grados de afinidad y de ese modo el como 105 genes y sin embargo un ser humano puede
anticuerpo que aparezca en la corriente sanguínea dará producir cuando menos 1015 diferentes tipos de anti-
origen a numerosos clones de células, es decir que será cuerpos, en términos de especificidad de unión a un
un anticuerpo policlonal. En una preparación de anti- antígeno. Para dar cuenta de la mayor parte de esta
cuerpo policlonal, diferentes moléculas de anticuerpos diversidad de anticuerpos, los genes existen en seccio-
se unirán a diferentes partes de un antígeno macromo- nes de codificación separadas y se ensamblan durante la
lecular, con diferentes afinidades de unión. La región maduración del linfocito B por un proceso denominado
de unión reconocida por cualquier molécula de anti- recombinación somática. Este proceso de ensamble
cuerpo se llama epítopo. La mayoría de los anticuerpos tiene lugar en cada linfocito B. Mediante el ensamble de
reconoce estructuras superficiales específicas de una diferentes fragmentos de dna, pueden crearse genes de in-
proteína más que secuencias de aminoácidos determi- munoglobulinas completamente nuevos y de este modo
nadas (los epítopos se definen por la conformación del se cuenta con un reservorio potencial enorme de diver-
antígeno proteínico). Una preparación de anticuerpos sidad de anticuerpos.
policlonales se unirá a muchos epítopos del antígeno
proteínico. No existen genes de anticuerpos completos en las células
de la línea germinal. Los genes para las cadenas ligeras
y pesadas se ensamblan por recombinación somática
Anticuerpos monoclonales durante la maduración de los linfocitos B. En la línea
Si puede aislarse un clon simple de células produc- germinal, cada gen de cadena ligera existe como múlti-
toras de anticuerpos, todos los anticuerpos que pro- ples segmentos de los genes V y J corriente arriba de un
duzca dicho clon serán idénticos; asimismo, todas las solo segmento del gen C. Durante la diferenciación del
B6 – ANTICUERPOS 59
linfocito B, un segmento del gen V se une con un seg- y después la unión dj se une a un segmento del gen v
mento del gen J (unión VJ) para ensamblar el gen com- (unión vdJ); la secuencia génica vdJ codifica la región
pleto de la cadena ligera, lo que suele ocurrir por dele- variable del polipéptido de la cadena pesada (figura
ción del dna participante. Las secuencias de los genes v y B6-4).
j codifican la región variable, mientras que el segmento
Un linfocito b puede cambiar la clase de anticuerpo
del gen C codifica la región constante del polipéptido de
que se está expresando al mover un nuevo segmento
la cadena ligera (figura B6-4).
del gen c a la posición que ocupaba el segmento vdjre-
Las cadenas pesadas son codificadas por múltiples seg- combinado y para ello elimina el dna que intervino. La
mentos de los genes v, j y d, los cuales yacen corriente nueva cadena pesada presenta una región constante
arriba de una copia simple de segmentos del gen c para diferente, pero conserva la misma región variable y de
cada una de las regiones constantes de las cadenas m, esta manera, cuando se produce el cambio de clase y el
δ, γ, ε y α. Durante la diferenciación del linfocito b, un linfocito pasa a producir IgA en lugar de IgM, la especi-
segmento del gen d se une a un segmento j (unión dj), ficidad del anticuerpo por el antígeno se mantiene.
CADENA LIGERA
Variable Constante
V J C
CADENA PESADA
Variable Constante
V D J C