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Clasificación

bacteriana y
morfología

Adriana Correa B.
Bacterióloga MSc. PhD.
Clasificación bacteriana
◼ Clasificación microscópica: Pueden ser clasificadas
inicialmente por su habilidad para retener la tinción de
Gram y por la forma de cada bacteria. Posteriormente por
su morfología.

◼ Clasificación macroscópica: Otras características como


la apariencia macroscópica de las colonias, la capacidad
hemolítica, pueden también ayudar en la identificación.

◼ Clasificación por Biotipo: Adicional a esta clasificación


inicial, a partir de la capacidad bioquímica de la célula
utilizada para su crecimiento y desarrollo, se han
desarrollado diferentes pruebas bioquímicas como
fermentación de carbohidratos, presencia de enzimas para
la identificación de genero y especie.
Clasificación bacteriana
◼ Clasificación por serotipo: Me permite subdividir grupos
de organismos dentro de la especie utilizando para ello la
capacidad antigénica de las bacterias. También permite
identificar cepas que no pueden ser aisladas en el
laboratorio (Francisella causante de turulemia, Treponema
pallidum causante de sifilis).

◼ Perfil de sensibilidad: Otro método para clasificar las


bacterias incluye el análisis de el patrón de sensibilidad o
antibiograma. Sin embargo esta prueba sola no tiene
poder discriminatorio.
Clasificación macroscópica

◼ Crecimiento en medios de cultivo


◼ Medios no selectivos:
◼ Medios nutritivos: Crecimiento de bacterias no exigentes
◼ Medios enriquecidos: Poseen sustancias como sangre y factores
de crecimiento para bacterias exigentes.
◼ Medios selectivos: Incorporan sustancias que inhibe de
manera selectiva el crecimiento de las bacterias.
◼ MacConkey: Contiene bilis
◼ CNA: Colistina y Ac nalidixico
◼ Medios diferenciales: Permite seleccionar ciertas
características de las bacterias.
Clasificación macroscópica

Streptococcus
Β-hemolíticos
Clasificación macroscópica

Colonias color rosa Colonias sin color

Bacteria fermentadora Bacteria no


de lactosa fermentadora de lactosa
Biotipos
Biotipos

◼ Baterías o series bioquímicas


◼ Manual
Biotipos

◼ Semi-
automatizado

◼ Automatizado. =
BIOTIPOS
Clasificación macroscópica

• Se ha demostrado que existe una reacción cruzada entre los antígenos


comunes de Y. enterocolitica O:9 y Brucella spp, Francisella tularensis,
Salmonella O:30, Vibrio cholerae, Escherichia coli O:157 y Morganella
morganii
• Se debe a la presencia de determinantes antigénicos comunes,
situados en la cadena O del lipopolisacárido de ambas especies y puede
presentar reacciones falsas positivas en el diagnóstico diferencial por
métodos serológicos.
Prueba de susceptibilidad

◼ Técnica que permite apreciar, in vitro, la


sensibilidad de una cepa bacteriana dada,
surgida de un producto patológico, con
respecto a un cierto número de antibióticos
Prueba de susceptibilidad

“ Gold Estándar”
Prueba de dilución en caldo
Clinical microbiology procedures – handbook (ASM Press)
Prueba de difusión en agar

0,5
SS 0.85% + Mc Farland
BACTERIA

AGAR MH

COMERCIALES

PREPARADOS:
•Esterilidad
•pH
•Profundidad
•Contenido de cationes ( Ca2+ Mg2+)
1. K.B: Resultados en mm – no cuantitativa •Contenido de Timina
•CC
2. E-Test: Resultados cuantitativos
Dilución en caldo

0,5
SS 0,85% + Mc Farland
BACTERIA

http://www.eucast.org/eucast_presentations/eucast_at_eccmid_2010/
Dilución en caldo

• Concentración inhibitoria mínima (CIM):


Es la mínima concentración del agente antimicrobiano
que inhibe la multiplicación y producción de crecimiento
visible de una cepa bacteriana dada en el sistema de
prueba
http://www.eucast.org/eucast_presentations/eucast_at_eccmid_2010/
Interpretación de las pruebas de
susceptibilidad

CLSI EUCAST

Distribución de la MIC Características in vitro


Correlación de del ATB
desenlace Distribución de la MIC
Clínico/Bacteriológico Correlación de
desenlace Clínico
Bacterias patógenas en
seres humanos
I. Eubacterias gramnegativas con paredes celulares

Grupo 1: Espiroquetas
Treponema: Sífilis
Borrelia: borreliosis de Lyme
Manual de Bergey Leptospira: leptospirosis
de bacteriología
sistemática Grupo 2: Bacterias
aerobias/microaerófilas, móviles
helicoidales/vibroides gramnegativos
Campylobacter: Enfermedad diarreica
Helicobacter: Enfemedad gástrica y
cancer
Bacterias patógenas en
seres humanos
Grupo 4: Bacilos y cocos gramnegativos
aerobios/microaeófilos

Alcaligenes
Bordetella
Manual de Bergey Brucella
de bacteriología Francisella
sistemática Legionella
Moraxella
Neisseria
Pseudomonas
Rochalimaea
Bacteroides (algunas especies)
Bacterias patógenas en
seres humanos
Grupo 5: Bacilos gramnegativos anaerobios
facultativos
Escherichia (y bacterias
coliformes afines)
Klebsiella
Manual de Bergey Proteus Enterobacterias
de bacteriología Providencia
sistemática Salmonella
Shigella
Yersinia
Vibrio
Haemophilus
Pasteurella
Bacterias patógenas en
seres humanos
Grupo 9: Rickettsias y clamidias
Rickettsia
Coxiella
Chlamydia
Manual de Bergey
de bacteriología
sistemática
Bacterias patógenas en
seres humanos
II. Bacterias grampositivas con pared celular
Grupo 17: Cocos grampositivos
Enterococcus
Peptostreptococcus
Manual de Bergey Staphylococcus
de bacteriología Streptococcus
sistemática Grupo 18: Bacilos y cocos grampositivos
formadores de endosporas
Bacillus
Clostridium
Grupo 19: Bacilos grampositivos regulares no
formadores de esporas
Erysipelothrix
Listeria
Bacterias patógenas en
seres humanos
II. Bacterias grampositivas con pared celular
Grupo 21: Micobacterias
Mycobacterium
Manual de Bergey
de bacteriología
sistemática

III. Eubacterias sin pared celular: Micoplasmas o Mollicutes

Mycoplasma
Ureaplasma
Crecimiento bacteriano

◼ El crecimiento es el aumento ordenado en la


suma de todos los componentes de un
microorganismo.

◼ La multiplicación celular es consecuencia


del desarrollo; en los organismos
unicelulares, el desarrollo provoca
incremento en el número de individuos que
constituyen una población o cultivo.
Crecimiento bacteriano

◼ La curva típica de proliferación se puede


describir en términos de cuatro etapa.
Latencia: Fase de adaptación
al las condiciones del medio de
crecimiento.
Exponencial: Sintetizan
material celular nuevo a una
velocidad constante.
Estacionaria: Agotamiento de
nutrientes o la acumulación de
productos nocivos provoca que
la proliferación se detenga
Declinación: Las bacterias se
quedan sin nutrientes y mueren
Jawetz, Melnick y Adelberg 25 Ed.
Genética microbiana

Cromosoma bacteriano: Toda la


información genética esencial para la
vida de la bacteria está contenida en
una única molécula de ácido
desoxirribonucleico (ADN) de doble
cadena y circular, cerrado por
enlaces covalentes (en la gran
mayoría de las bacterias).
Cual es la
composición
del DNA?
Bases Nitrogenadas

Purinas
2 anillos

Adenina Guanina
(A) (G)

Pirimidinas
Un anillo

Uracilo Timina Citosina


Solo en RNA (U) (T) (C)
Nucleótido

Base Nitrogenada

Grupo fosfato

Nucleótido Pentosa

Nucleósido
Adenosina-Guanosina-
Citidina-Timidina
Pentosa

ARN

ADN
Como se encadenan?

Enlaces Fosfodiéster - Orientación 5´ a 3´


DNA

Orientación de las dos


cadenas es antiparalela Complementariedad
Cual es el
dogma central
de la biología
molecular?
Replicación

Proceso
discontinuo

Proceso continuo
Mutaciones

Las mutaciones son cambios en las


secuencias de DNA
Frecuencia de mutación en una
población derivada de una sola bacteria
10−6 a 10− 8
La inserción o deleción
de un solo nucleótido
Colocación podría alterar la fase de
inapropiada traducción y por tanto
de pares de
introduce una
bases
secuencia proteínica
completamente
diferente
Mutágenos

◼ Mutágeno físicos: Luz ultravioleta que


daña el DNA, generando dímeros de timina.
◼ Mutágenos químicos: Como el ácido
nitroso, cambia los OH por aminoácidos.
◼ Colorantes: Como acridina o bromuro de
etidio que se intercala entre los nucleótidos
favoreciendo la introducción o eliminación
de bases.
Transcripción
◼ ADN-ARN
◼ Iniciación: RNA Pol +
Promotor
◼ Elongación: RNA Pol lee
3’ – 5’, pero la formación
de la cadena de ARNm
complementaria se forma
en dirección 5’ - 3’ .
◼ Terminación: Señal de
terminación –sec
palindromica (se lee igual
en ambas direcciones), se
forma un bucle y deja de
transcribir.
Traducción
◼ Se realiza en el ribosoma e
intervienen el RNAm y
RNAt.
◼ La traducción se inicia con
la unión del RNAm al
ribosoma (30S) a partir del
codón o tripleta de
iniciación (AUG –
METIONINA). El RNAt se
une al RNAm por el
anticodón
◼ Elongación: Este proceso
se repite y se van formando
una cadena de aminoácidos
hasta que llega al codón de
terminación. En este punto
el RNAm se libera y la
cadena de aa se libera.
Regulación de la expresión
génica de las bacterias
◼ Las bacterias tienen mecanismos para
controlar la expresión de sus genes.
◼ Logran sintetizar sustancias cuando es
necesario y en la cantidad óptima.
◼ Esto les confiere capacidad de adaptación
frente a cambios en el medio que habitan.
Ejm operón.
Regulación de la expresión
génica de las bacterias
◼ Operón: Es una forma de organización
genética que permite la activación o
desactivación de la transcripción de un
grupo de genes cuyos productos tienen
funciones relacionadas.
Regulación de la expresión
génica de las bacterias
El operón lac es un operón requerido para el transporte
y metabolismo de la lactosa en E. coli
Cuando no hay lactosa en el medio, la proteína
represora se encuentra unida al operador
impidiendo la transcripción de los genes para las
enzimas que metabolizan la lactosa
Controla el tiempo y
velocidad de transcripcion genes adyacentes
de otros genes

Donde la Controla el
ARN acceso de la
polimerasa ARN
reconoce el polimerasa al
sitio de inicio promotor lac Z: β-galactosidasa: cataliza la reacción de
de la hidrólisis de la lactosa en glucosa más galactosa
transcripcion
lac Y: Lactosa Permeasa: facilitar el transporte de la
lactosa al interior de la bacteria
lac A: Tiogalactosido Transacetilasa: Este gen no está
relacionado con el metabolismo de la lactosa.
RECOMBINACIÓN
GENÉTICA EN BACTERIAS
◼ La recombinación genética es el proceso
mediante el cual los elementos genéticos
contenidos en el genoma de diferentes
individuos se combinan.
◼ En procariotas → 3 procesos
◼ Transformación.
◼ Transducción.
◼ Conjugación.
Transformación
Alteración genética de una
célula resultante de la absorción
directa, incorporación y
expresión del material genético
exógeno

1928 Frederick
Griffith genetista
Ingles.
Posteriormente
1944 Avery, MacLeod,
y McCarty, pudieron cultivar
e identificar la transferencia
de virulencia (capsula) a las
rugosas.
Transducción
◼ La transducción es un
proceso mediante el cual
el ADN es transferido
desde una bacteria a otra
mediante la acción de
un fago.
◼ Puede ser mediante un
ciclo lítico o lisogénico.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bookres.fcgi/iga/ch7f26.gif
Conjugación

Transferencia génica implica contacto célula – célula y la


presencia de un plásmido conjugativo en la célula
donadora.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bookres.fcgi/iga/ch7f5.gif
¿Qué es un plásmido?

◼ Elemento genético
extracromosómico, no
esencial para el
crecimiento de la célula y
que no tiene forma
extracelular.

http://www.biologie.uni-hamburg.de/b-online/library/onlinebio/14_1.jpg
Características
➢ DNA bicateriano autoreplicativo.
✓ Mayoría circulares.
✓ Tamaño 1- 1000 Kpb.
✓ 1 o más copias por célula.
✓ 3 conformaciones básicas
✓ in vitro:
▫ Super-enrrollada.
▫ Circular.
▫ Lineal doble.
Estructura de un plásmido
◼ Región constante
◼ Replicación
◼ Mantenimiento
◼ Transferencia

◼ Región variable
◼ Aumentar
supervivencia en
condiciones
hostiles http://www.rpgroup.caltech.edu/courses/PBL/images_dnascience/pZ%20Plasmid.gif
Tipos de plásmidos

Conjugativos Plásmidos R
◼ Gobiernan su propia ◼ confieren resistencia a
transferencia de célula a antibióticos, a otros
célula por contacto. inhibidores de crecimiento y
metales pesados como Hg,
Cd, Ni, Co, Zn, As.

http://www.biologie.uni-hamburg.de/b-online/library/onlinebio/71241jwa.jpg
http://www.medem.com/MEDEM/images/jamaarchives/JAMA_InfectiousDisease_Antibiotics_Lev20_Antibiotics_JPP_01.gif
Transposon

◼ Inicialmente conocidos como genes


saltarines.
◼ Es una secuencia de ADN que puede
moverse autosuficientemente a diferentes
partes del genoma de una célula.
Transposon
Los transposones pueden saltar de un plásmido al
cromosoma bacteriano o de un plásmido a otros
plásmidos. De esta manera se generan múltiples
plásmidos resistentes.