Modulo bacterias

GENERALIDADES

Son microorganismos procariotas.

Pared celular de los G+: compuesta 50% peptidoglucanos, 40-45% de polímero acido (hace que la
superficie celular sea muy polar y que tenga carga negativa, favorece la penetración de compuestos
cargados positivamente como la ESTREPTOMICINA al interior de la celula), 5-10% proteínas y
polisacáridos.

Pared celular de los G-: está compuesta desde la membrana plasmática hacia el exterior consta de:

 Espacio periplasmico que contine enzimas y otros compuestos

 Capa de peptidoglucano de 2 nm que constituye el 5 % de de la masa de la pared celular
 Membrana externa formada por una bicapa lipídica que tienen proteínas
transmembranales denominados porinas, a través de las cuales los antibióticos hidrófilos
se pueden mover sin restricciones.
 Polisacáridos complejos, (ejem: Endotoxinas, que desencadenan varios aspecos de la
reccion inflamatoria, activan el complemento, producen fiebre)

Esporas= forma de resistencia de la bacteria (le permite resistir altas temperaturas, presión
osmótica grande, radiación ultravioleta). A partir de esta se obtiene la forma vegetativa, que
corresponde a la forma activa de la bacteria.

Esporulación= proceso de la formación de la espora.li

Feto es estéril al nacimiento, luego se coloniza con bacterias, conformando la microbiota. puede ser

 transitoria: hay bacterias potencialmente patógenas, pero no tenemos síntomas. Si les

cambio de hábitat si se convierten en patógenos, produciendo enfermedad.
 Definitiva

Las bacterias producen sustancias antibióticas para inhibir el crecimiento de otras bacterias
patógenas. También inhiben el crecimiento de muchos hongos y nos ayudan a realizar ciertos
procesos metabólicos que nuestro organismo no es capaz de realizar.

Hay un equilibrio entre las bacterias y la respuesta inmune (las lisozimas se activan contra las
bacterias Gram+)

La micriobiota es muy exótica, tengo diferentes bacterias en la encía, boca, diente. Es muy estable
en el tiempo. la mayor parte esta colonizada por bacterias Gram (+) o Gram (-).

Se observan:

 muestra en fresco no son útiles, se usan para ver reacción leucocitaria o movimiento, pero
no me logra identificar cual bacteria es.
 Tinciones generales: cristal violeta, azul de metileno.
 Tejidos teñidos con colorantes: ofrecen contraste, si es acido muestra una afinidad por el
componente básico de la célula, y si es básico al revés.
  Tinción negativa: me permite teñir todo menos lo que quiero ver: ej: capsulas
 Lo mejor es hacer tinciones específicas: Gram o Ziehl-Neelsen
 No se usa tanto la tinta china.

Las preparaciones deben fijarse al vidrio ya sea con calor(mejor) o con alcohol(metanol).

Tinción de GRAM: para saber si es Gram+ o Gram –

1. Se utiliza cristal violeta(liquido).

2. Se le añade solución con yodo, que sería lugol (fija el cristal violeta a las bacterias).
3. Se le echa alcohol acetona: si la bacteria es Gram – le quita el color; si la bacteria es gram+
no le quita el color.
4. Se usa una tinción de contraste: safranina (pinta morado) o fucsina (pinta rosado) para
finalmente obtener el contraste.

Recordar que en cada paso se hace un lavado de la placa.

Tinción de Ziehl-Neelsen: me permite saber si la bacteria es acido alcohol resistente.

1. Se le adiciona fucsina, se calienta la muestra directamente.

2. Se le agrega alcohol acido, se calienta lateralmente. Todo lo que sea sensible al alcohol
pierde su color. (quedan entonces los bacilos acido alcohol resistente). Sirve para ver
tuberculosis.
3. Agrego azul de metileno, para dar contraste y todo lo que perdió el color, se tiñe de azul
claro.

Los bacilos acido alcohol resistente se van a ver rosados por que estos no pierden su color.

Forma (anatomía de las bacterias)

 Esféricas: cocos
 Bastoncillos: Bacilos
 Espirales: Espiroquetas

 Cocobacilos (pared rígida, forma definida)

 Gram + y Gram –: Gram variables.

Bacilos curvos, ligeramente curvos (forma de coma) = vibriones; muy curvos= espirilos. Se replican
por fisión binaria, replicación asexual. Los bacilos en un solo eje, bandadas, empalizadas (cuando
están cruzadas y forman letras chinas). Puede que se separen o no. Los diplobacilos, no se separan
del todo. Estrepto(estreptobacilos) están en cadena, 3 o más y el estafilo no está en fila.

Cocos se replican en un solo eje, no se separan completamentediplococos(pares)que pueden

ser arriñonados o alargados. Y pueden formar cadenas(estreptococos) o agruparse en racimos
(como en forma de uva) que sería estafilococos (por que se multiplican en varios ejes).

Los procariotas se diferencian de los eucariotas por:

 No tienen membrana nuclear ni es compartimentalizada.

  Carece de organelas (mitocondria, retículo endoplásmico, aparato de Golgi, Fagosomas y
lisosomas).
 Tienen un prenúcleo o pronúcleo.
 DNA doble cadena circular haploide, no tiene histonas, nucleosomas.
 Muchos ribosomas lo que le da al citoplasma aspecto de granular.
 Membrana celular no tiene esteroles.

La membrana celular es rígida, no come, no se mueve a no ser que tenga flagelos. Su respiración la
hacen por la membrana celular por medio de los repliegues ya que no tienen mitocondrias.

La membrana celular de las bacterias Gram + está compuesta de peptidoglicanos (N-acetil

glucosamina(NAG) y acido N-acetil murámico(NAM)), tiene muchas capas de peptidoglicanos, estos
se unen mediante puentes péptidos, por eso tienen una pared gruesa. estos se unen mediante
puentes peptídicos. También tienen ácido teicóico mural y lipoteicoico.

Las bacterias Gram – tienen 2 membranas separadas por un espacio periplasmico, la externa es
medio atípica y la interna. Tienen trasporte activo y pasivo. Su pared se compone de
lipopolisacaridos el cual es responsable de los síntomas en el paciente, produce fiebre y activa a los
linfocitos B, induce respuesta inmunológica, es muy resistente al calor.

El lipopolisacaridos se compone de:

 Lípido A: capacidad endotoxina, causa fiebre cuando es liberada a la circulación.

 Polisacárido central: polisacárido unido al lípido A y al antígeno o.
 Antígeno o: confiere especidad serológica, induce respuesta de anticuerpos.myc

La explicación de por qué son Gram + o – es porque el alcohol acetona no daña a los peptidoglicanos,
y las Gram + tienen una pared más gruesa, y los Gram – tiene una pared delgada.

Ribosomas son proteínas con RNA = 70s

Bacterias mycoplasma no tienen pared celular (la cual es blanco importante de antibióticos), por
esto no son susceptibles a antibióticos. Presentan esteroles en su membrana celular. Su pared
celular es acido alcohol resistente. Tiene un alto contenido de lípidos 60%, ácidos micolicos
conformados por ácidos grasos largos y ramificados, lo cual hace difícil su cultivo y los hace
resistentes al tratamiento con alcohol acetona, es por eso que no se pierde su color rosado. Esta
característica la presentan las micobacterias.

Adentro de la pared

 Mesosomas: son repliegues, invaginaciones de la membrana citoplasmática, que sostienen

el ácido nucleico. Intervienen en la división celular, repartiendo de manera equitativa el
material genético, separan las células hijas,
 Transporte: Pasivo, a favor de gradiente.
 Citoplasma: se compone en un 80% de agua y el resto de diferentes solutos como proteínas,
lípidos, carbohidratos, pigmentos.
 Procarion: zona nuclear o nucleoide unido al mesosoma.
  Ribosomas son más pequeños, 70s con subunidades de 30s y 50s, tiene proteínas y RNA
ribosomal.
 Las bacterias no tienen citoesqueleto.
 Cuerpos de inclusión: son gránulos de almacenamiento de enzimas, lípidos, polisacáridos
(glucógeno, almidón), gránulos de azufre. Tienen enzimas como coagulasas y perosidasas.se
forman cuando estos nutrientes están en exceso en el ambiente y los utilizan cuando estos
se encuentran limitados.
 Los bacilos (del genero clostidium, bacillus) Gram + tienen endosporas, se induce su
formación en condiciones agresivas: disminución de agua, nutrientes, nitrógeno. Estas se
utilizan como métodos de esterilización, porque son muy resistentes.

Flagelos:

Le confieren movimiento, adhesión, el sistema inmune los reconoce. Están conformados por
flagelina (proteína) y fibrina (proteína tubular).

 Atrica: sin flagelos.

 Monotricas: un solo flagelo
 Lofotricas: flagelo a un solo lado; si son múltiples: politricas.
 Anfitrica: flagelos a ambos lados.
 Peritricas: flagelos en toda la supercie.

Tiene 3 partes:

 cuerpo basal: se pega a la pared.

 Gancho: unido al filamento más ancho. (unión filamento (sobresale la porción más larga,
más antigénica) con el cuerpo basal.
 Filamento axial: se encuentra recubierto por una vaina, es externo, tiene curvas, dan
movimiento a los espirilos, no sobresale de la bacteria. Ej: treponema, borelia.

El filamento organiza a dónde quiere ir, quimiotropismo, fototropismo.

Fimbrias o Pili:

Son estructuras externas en forma de pelo, muy delgadas, están en la superficie de las Gram –. son
más cortos y rígidos que los flagelos, se componen de pilinas (proteínas). Son proteínas tubulares
conformados de pilina, participan en la conjugación. Pueden ser largos, en las Gram – son cortos,
tiene un mecanismo de adhesión a diferentes superficies.

Glucocalix (también conocida como capsula)

Sustancia superficial, polímero viscoso y gelatinoso, proteínas, polisacáridos.

 Si se adhiere firmemente: tienen capsula

 Si no se adhiere: tienen una capa mucilaginosa (de una manera laxa).

La presencia de capsula previene, evade la fagocitosis, la respuesta inmune, adherencia a los tejidos,
protege de la desecación, inhibe la fijación del complemento.

Tinciones especiales: para observar Endosporas, flagelos, capsulas

Tinción negativa: tinta china, NIGROSINA, SAFRANINA

Gram no atraviesa las paredes de la endospora.

Tinción de Schaeffer-fulton  verde malaquita, se le aplica calor, safranina (rosada) que le da

contraste. Esto me permite visualizar la endospora verde, resto rosado.

Flagelos se visualizan con carbolfucsina, son muy delgados.

Genética bacteriana

Estructura del ADN, almacenamiento, no muy enrollado, la expresión génica es muy eficiente.

Secuencia lineal: información real, estructura complementaria.

1000 pares de bases x segundo en E. coli, su ciclo celular dura 20min.

No hay intrones, todo se traduce, son genes de expresión constitutiva, se da constantemente,

siempre que lo necesite. Tambien hay genes inducibles y represibles estos dependerán de las
condiciones del medio.

Presencia de operones: participan en la misma ruta metabólica, tienen permeasa, galactosidasa,

transatesilasa.

 Operon de la lactosa: se inducen cuando hay aumento de AMPc o la glucosa esta disminuida.
 Operon del triptófano: se encuentra reprimido cuando hay en el medio triptófano, si no hay
se produce.

transformación bacteriana

internaliza el ADN de otra bacteria para que haga parte de su genoma, para esto se requiere que
sea una célula competente. (las células se pueden volver competentes con calor). Hablamos de una
trasferencia horizontal, que son cambios en las bacterias, les transfiere mutaciones de forma
externa, pueden compartir genoma con otra bacteriatransformación bacteriana.

Conjugación: Pili participa no tiene plásmido

Plásmidos: DNA extra cromosómico, se multiplican de manera autónoma o independiente a la

replicación del genoma de la bacteria. Son pequeños y no son esenciales para el crecimiento de la
bacteria. Tiene genes que lo hacen resistente a antibióticos: ej: bombas de expulsión. Ellos se
replican y mandan copia a la célula receptora, obteniendo dos células con plásmido, estos pueden
permanecer mucho tiempo o lo pueden perder.pi

Transducción: intercambio de ADN por una bacteriófaga introducción de material genético (es el
virus de la bacteria) que puede ser lítico o lisogenico.

 Fase lítica: se destruye el genoma de la bacteria, el bacteriófago se multiplica y luego sale el

genoma del bacteriófago quedando pedazos del de la bacteria y del bacteriófago.
 Fase lisogenica: el bacteriófago inyecta el genoma en la bacteria y ese genoma se inserta en
la célula hospedera y se forma un profago.

Los transposones son elementos móviles del genoma.

Crecimiento bacteriano:

Son anaerobias facultativas, son mesofilas, pH neutro (6,5 a 7,5), presión osmótica. Hay unas que
son anaerobias estrictas (oxigeno toxico para ellas).

solutos del medio como agua, carbono (glucosa, proteínas, fosforo, nitrógeno) que son para cultivo.

Se pueden cultivar en

 Medios líquidos (pero es más para enriquecimiento de la bacteria, para que se multipliquen
y así aumentar su cantidad) Se usan extractos de carne, cerebro y corazón de
bovino(nutrientes), como Medio de transporte, para el laboratorio y sembrarlo.
Químicamente no definidos, no se conoce su concentración
 Medios solidos: el medio solificante es el AGAR, obtenido de algas marinas, permiten su
aislamiento.
 Medios semisólidos: almacenamiento de bacterias, 4°c.

Cultivo de enriquecimiento: solido:

 Agar en sangre (base tripticosa de soya, BHI)

 Agar chocolate: mejor
 Agar mueller hinton: (sensibilidad), medio transparente.

Liquido: BHI, extracto de levadura: caldio de ...

Medio de cultivo selectivo y diferenciales

Agar macconkey: sales biliares, lactosa, se usa para los Gram – bacilos, si la fermentan cambia el
color del medio, esto se da porque hay un cambio de PH.

Agar sal manitol: estafilococos, manitol (s. aureus).

MEDIO DE LOWESTEIN JENSEN (JD): Se usa para mycobacterias, es con malaquita para inhibir las
Gram +. No se utiliza agar. Se usan huevos para solidificar el medio.