FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA I
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

1. PRÁCTICA: 3

2. UNIDAD CURRICULAR: UNIDAD 1

3. TÍTULO: Reacciones de reconocimiento de disacáridos

4. OBJETIVOS:

 Evaluar reacciones e identificar el tipo de disacárido que se presenta en la

muestra.
 Comprender la hidrólisis que se produce en la sacarosa al descomponerse en
fructosa y glucosa.
 Analizar el comportamiento de la maltosa y lactosa como disacáridos reductores.

5. MÉTODOS Y FUNDAMENTOS:

Los métodos a seguir para el reconocimiento de los disacáridos son a través de reacciones
químicas realizadas en el laboratorio como son: Reacciones de reconocimiento de la
sacarosa, Hidrolisis ácida de la sacarosa, hidrolisis enzimática de la sacarosa.
Los carbohidratos, hidratos de carbono o sacáridos son moléculas orgánicas compuestas
por carbono, hidrógeno y oxígeno. (Delgado, 2011). Los más importantes son la lactosa
(presente en la leche), la sacarosa (presente en el azúcar común) y la maltosa. Los
disacáridos como la sacarosa, que no poseen grupos aldehídos libres, no son reductores,
la lactosa al poseer un carbono anomérico libre en disolución, puede abrirse y poner de
manifiesto la naturaleza reductora de este disacárido; por su parte la sacarosa, no posee
carbono anomérico libre, los dos están formando parte del enlace glucosídico, ninguno de
los anillos puede abrirse y pierde su capacidad reductora. Por esta razón se dice que la
lactosa es un azúcar reductor y la sacarosa no (Guzmán, 2013).

Reacción de reconocimiento de la sacarosa

La sacarosa es un disacárido no reductor y durante la hidrólisis (ácida o enzimática) su
molécula se descompone en glucosa y fructosa:
β
α
β
H H OH
C CH2OH C CH 2OH
O
H C OH C H C OH HO C
HO C H HO C H HO C H HO C H
H C OH O H C OH O +HOH H C OH O + H C OH O
H C H C H C H C
CH2OH CH2OH CH2OH CH2OH

Sacarosa -D- glucosa -D-fructosa

1,2- -D-glucosido- -D-fructósido

La sacarosa da con el sulfato de cobalto en un medio alcalino un complejo de color violeta.

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Hidrólisis ácida de la sacarosa

La sacarosa puede ser hidrolizada por un ácido mediante la siguiente reacción:

Hidrólisis enzimática de la sacarosa

La sacarosa puede ser hidrolizada por su enzima sacarasa mediante la siguiente reacción:

Reacciones de reconocimiento de la maltosa y lactosa

La maltosa y lactosa son disacáridos reductores:
α
β
H OH
H C H OH H
C H C OH C C
H C OH OH C H H C OH H C OH
HO C H HO C H HO C H
H C OH O O H C O H C O O HO C H O

H C H C H C H C
CH2OH CH2OH CH2OH CH2OH

Maltosa Lactosa
(1,4- -D-glucosido- -D-glucosa) (1.4- -D-galactosido- -D-glucosa)

6. PARTE EXPERIMENTAL

6.1 Instrucciones previas

Es obligatorio el uso de prendas de seguridad: mandil, guantes de nitrilo o látex,

mascarilla en el caso de que los reactivos o las reacciones desprendan gases, y gafas
protectoras.
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6.2 Equipos, materiales y reactivos

Materiales y equipos Reactivos

 Baño maría  Ácido clorhídrico
 Soporte de tubos de concentrado
ensayo  Fehling A
 Fehling B
 Hidróxido Sódico 10%
 Lactosa 1%
 Maltosa 1%
 Sacarasa 10%
 Sacarosa 1%
 Sacarosa 2%
 Sulfato de cobalto 2%

6.3 Procedimiento

 Reacción de reconocimiento de la sacarosa

En un tubo de ensayo se vierten de 2 mL de disolución de sacarosa 1%, se añaden
gotas de disolución de sulfato de cobalto2%. Añadir 10 gotas de hidróxido sódico en
exceso al 10% hasta conseguir medio básico (1 mL), el líquido adquiere un color
morado.

 Hidrólisis ácida de la sacarosa

A 2 mL de disolución de sacarosa al 2 %, añadir 3 gotas de HCl concentrado. Calentar
a ebullición durante 5 minutos en Baño María, colocar 1ml de NaOH al 10 %. Realizar
la reacción de Fehling A (1 o 2ml) Fehling B (1 o 2ml), observar la aparición de un
precipitado rojo ladrillo debido a la presencia de azúcares reductores (glucosa y
fructosa).

 Hidrólisis enzimática de la sacarosa

En un tubo de ensayo se vierten 2 a 3 mL de sacarosa 1% y se añaden de 2 mL de
sacarasa. El contenido del tubo se mezcla y se lleva a incubación durante 10 min en el
baño de agua a 37ºC. Colocar al tubo (1ml) Fehling A: (1ml) Fehling B y se calienta a
ebullición en Baño María. Observar la aparición de un precipitado rojo ladrillo debido a
la presencia de azúcares reductores (glucosa y fructosa).

7. CUESTIONARIO

1. ¿De que están conformados los Oligosacáridos?

2. ¿Cómo se denomina el enlace de los disacáridos?. Justifique su respuesta
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3. ¿Cómo se reconoce si un disacárido es reductor?

4. ¿Cuáles son los monómeros de la trehalosa y celobiosa y sus respectivas uniones?
(graficar)

8. BIBLIOGRAFÍA

Delgado, D. (2011). Bioquímica Estuctural y metabólica. Recuperado el 26 de noviembre

de 2016, de http://ocw.unican.es/ciencias-de-la-salud/bioquimica-estructural-y-
metabolica/materiales-de-clase/Tema%206.%20Glucidos.pdf

Guzmán, J. (2013). Disacáridos y polisacáridos. Recuperado el 26 de noviembre de 2016,

de https://quimicamedusac.files.wordpress.com/2013/07/semana-26-20113-clase.pdf