Determinación fotométrica de

hierro en agua natural

El catión de hierro (II) forma un complejo con el ligando 1,10-fenantrolina color
rojo-anaranjado, muy útil en la determinación de hierro en aguas naturales. Este
ligando es una base débil que reacciona en medio ácido formando el ión
fenantrolinio, FenH+. Este ión reacciona con hierro(II) según la siguiente
reacción:

Fe2+ + 3 FenH+ ↔ Fe(Fen)32+ + 3 H+

La constante de formación de este complejo es 2.5 x 10 6 a 25ºC. Esta reacción

ocurre cuantitativamente a pH entre 3 y 9. Por lo general se utiliza un pH de 3.5
para evitar que precipiten sales de hierro ya que el agua puede contener fosfatos
y otros aniones. Para asegurar que el hierro no se oxide a hierro(III), se añade
un exceso de agente reductor (hidroxilamina o hidroquinona).

El que una sustancia tenga color significa que transmiten luz de ciertos largos de
onda en la región visible del espectro, mientras que absorben luz de otros largos
de onda en dicha región. A la fracción de luz absorbida por una solución medida
a un largo de onda dado se le conoce como por absorbencia. La absorbencia
está dada por la Ley de Beer:

A = bc:
donde:
A = absorbencia
 = absortividad molar en unidades de L/(mol x cm)
(es una propiedad inherente de la sustancia y depende del largo
de onda al cual se mide la absorbencia.)
b = la longitud del paso de luz (equivale al ancho de la cubeta)
c = concentración molar del analito

La absorbencia se relaciona al porcentaje de transmitancia de la solución a ese

largo de onda mediante:

A= 2 - Log10 % T

Donde: A = absorbencia de la solución a un largo de onda dado

% T = porcentaje de transmitancia de la solución a un largo de onda
 dado.

La absorbencia puede medirse con un espectrofotómetro de luz ultravioleta /

visible. Experimentalmente se demuestra que a medida que el color de la
solución es más intenso el % T disminuye y la absorbencia aumenta. Para
poder determinar la concentración de una especie mediante esta técnica, se
necesita preparar una curva de calibración con soluciones cuyas
concentraciones sean conocidas. La muestra conteniendo el analito debe
producir una absorbencia entre el máximo y el mínimo de la curva de calibración.
Las soluciones utilizadas para la curva de calibración en esta experiencia
deberán caer en un rango de absorbencia entre 0.1 y 1.0 (la región lineal de la
curva de calibración para este complejo).

El complejo de hierro absorbe a 508 nm.

Materiales, reactivos y equipo:

Espectrofotómetro Soluciones:
Celdas de vidrio o acrílico Solución estándar de Fe(NH4)2(SO4)2 :
2 matraces volumétricos de 100 mL (0.0100 mg/mL) – preparar 100 mL*
Matraz de 50 mL Solución de hidrocloruro de
Matraz de 25 mL hidroxilamina (5.0 g de H2NOH.HCl en
Matraz de 10 mL 50 mL de agua destilada)
Solución de 1,10-fenantrolina: 0.250 g
en 250 mL
Solución de acetato de sodio, 1.2 M
(250 mL)

 Añadir 0.20 mL de H2SO4 concentrado al matraz donde se preparará la

solución.

Procedimiento:

A. Construcción de curva de calibración:

1. Transfiera 25.00 mL de la solución estándar de hierro (II) a un matraz

volumétrico de 100 mL.
2. A otro matraz volumétrico de 100 mL añada 25 mL de agua destilada.
3. A ambos matraces añada: 1 mL de hidroxilamina, 10 mL de acetato de
sodio, y 10 mL de 1,10-fenantrolina. Deje descansar las mezclas por 5
minutos, luego diluya hasta la marca con agua destilada y mezcle bien.
4. Lave dos celdas y enjuague tres veces con la solución a la que vaya a
medir su absorbencia. Mida la absorbencia de la solución estándar y la
de la solución blanco (la solución que contiene todos los reactivos
 excepto la solución estándar de hierro) con respecto a agua destilada.
Anote los datos.
5. Repita los pasos del 2 al 4 variando la alícuota de solución estándar de
hierro como sigue:
a. 20 mL de la solución estándar de hierro
b. 15 mL de la solución estándar de hierro
c. 10 mL de la solución estándar de hierro

Prepare un blanco adecuado para cada una de estas soluciones.

B. Determinación de hierro (II) en una muestra de agua natural.

1. Transfiera 25.00 mL de la muestra de agua a un matraz de 100 mL. Lleve

a cabo el mismo procedimiento que con la solución estándar de hierro y
mida la absorbencia.
2. Repita el procedimiento con 15.00 mL de la muestra.

ANOTE LOS DATOS DE TODOS LOS GRUPOS PARA LLEVAR A CABO LOS
CÓMPUTOS.

Cómputos:

1. Calcule la molaridad de Fe(NH4)2(SO4)2 si contiene 0.0100 mg/mL.

2. Calcule la molaridad de cada solución preparada para la curva de
calibración a partir de la estándar original. (M 1V1 = M2V2)
3. Prepare la gráfica con la curva de calibración llevando a cabo los
siguientes cómputos:
a. Calcule el promedio y la desviación estándar de la absorbencia
para cada solución preparada para la curva de calibración
b. Calcule el promedio y la desviación estándar de la absorbencia de
todos los blancos preparados para la curva de calibración (todos
juntos).
c. Construya una gráfica de absorbencia (eje de y) vs. Concentración
molar (eje de x). Obtenga la mejor línea con Excel (Add Trendline)
e incluya la ecuación de la línea.
4. Determine las concentraciones molares de las muestras analizadas como
sigue:
a. Localice la absorbencia de cada solución analizada en el eje de
y de la curva de calibración.
b. Trace una línea horizontal desde cada punto localizado hasta la
línea de la curva de calibración.
c. Trace una línea vertical desde ese punto hasta el eje de x.
d. Determine la concentración de cada solución analizada.
5. Informe el contenido de hierro en partes por millón (ppm) (Convierta de
molaridad a ppm).
6. Calcule, para cada concentración promediada de las soluciones de la
curva de calibración la sensibilidad analítica. Obtenga un promedio.
7. Calcule el límite de detección de instrumento para este analito.