Discusión de Resultados

I. Identificación de las proteínas

1. Reacción de Biuret

Un resultado negativo de esta reacción no necesariamente indica la ausencia

de proteínas, ya que pude ocurrir 3 casos:

 Que no existan proteínas o péptidos en la muestra

En el experimento se tenía conocimientos de la presencia de proteínas en la
muestra a analizar, la ovoalbúmina presente en la clara del huevo.
 Que existan una o más sustancias interferentes en la muestra que
impidan que se produzca la reacción (lo que daría a un resultado falso
negativo)
EL 𝑁𝑎𝑂𝐻 sirve como una sustancia no interferente, ya que proporciona un
medio alcalino que va a favorecer en la unión de los electrones no enlazados
del Nitrógeno del enlace peptídico y el 𝐶𝑢+2 del 𝐶𝑢𝑆𝑂4
 Que existan péptidos , pero a una concentración inferior al límite de
sensibilidad del método
Se utilizó una cantidad adecuada de muestra y reactivo para poder visualizar la
presencia de proteínas en el tubo de ensayo, esto es sumamente importante
porque este tipo de reacción es Cuantitativa por lo que importa
estequiometricamente cuanto se utiliza.
 Resultado Negativo → Significa la no presencia de al menos 2 enlaces
peptídicos en la muestra Coloración: Incoloro
 Resultado Positivo → Significa la presencia de 2 o más enlaces
peptídicos consecutivos unidos con el 𝐶𝑢+2 del 𝐶𝑢𝑆𝑂4 favorecido por el
medio alcalino de la base fuerte 𝑁𝑎𝑂𝐻 (como no hay presencia de
ácidos por eso no reacciona solo brinda el medio alcalino) y generando
el reactivo de biuret mediante la siguiente ecuación química :

𝐶𝑢𝑆𝑂4 +2 𝑁𝑎𝑂𝐻 → 𝑁𝑎2 𝑆𝑂4 +

Coloración Azul

Coloración Violeta

2. Reacción Xantoproteica

Se basa para detectar la presencia de proteínas solubles de la siguiente

manera:
Reacción (+): Formación de un compuesto teñido de color amarillo

Da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de

anillos aromáticos (Bencénicos) especialmente en presencia de tirosina, este
es importante porque estructuralmente favorece en la presencia de puntos de
unión molecular con el 𝐻𝑁𝑂3 mediante la sustitución electrofilica aromática, de
la siguiente manera:

El benceno reacciona con el 𝐻𝑁𝑂3 formando el nitrobenceno este se forma por

la presencia de tirosina en el anillo aromático, mediante la siguiente Rx
Química:

Se da por la nitración del anillo aromático de la tirosina de la ovoalbúmina del

huevo con el 𝑁𝑂2+ (ion nitronio) del 𝐻𝑁𝑂3 que luego al calentar en el baño
maria puede generar una reacción de explosión ya que el 𝐻𝑁𝑂3 concentrado y
caliente puede oxidar cualquier compuesto orgánico en este caso el benceno
mediante una reacción explosiva, esta unión ya calentado va a formar
compuestos dinitroderivados de color amarillo así indicando que es una
reacción positiva

Reacción (−): No se forma un compuesto teñido de color amarillo

En este caso no se encuentra la presencia de Tirosina en los aminoácidos de la

proteína por lo que la unión molecular no se daría con el 𝐻𝑁𝑂3 concentrado por
lo tanto no se establecería una sustitución electrofilica aromática, razón por la
cual no se generaría compuestos dinitroderivados de color amarillo.

3. Reacción con la Ninhidrina

Esta reacción sirve para identificar proteínas y aminoácidos en las muestras

experimentales

La ninhidrina reacciona con los 𝛼 − amino de los aminoácidos ya sean libres o

bien unidos por los enlaces peptídicos que lo conforman que dependerá de la
estructura que tiene la proteína

 Estructura primaria : Grupo carbonilo de la ninhidrina + Radical amina

primaria forma compuestos de color azul – violeta y la intensidad del
color varia con la muestra que se está utilizando en este caso (la
ovoalbúmina) se teñirá el tubo de ensayo en un color violeta intensa
  Estructura Secundaria : Grupo carbonilo de la ninhidrina + Radical
amina secundaria da una sal de iminio , que generalmente es de color
amarillo-anaranjado
 Estructura Terciaria : No es detectada por la Ninhidrina , por que la
amina esta adyacente a un carbono terciario

En este caso la ninhidrina a PH (entre 4 a 8 es un oxidante muy fuerte) siempre

reacciona con los grupos 𝛼 − amino liberando amonio , el cual se condensa
con la ninhidrina reducida formando una base Schiff y con otra molécula de
ninhidrina formando el complejo Ninhidrina-Dicetohidrindeno y un aldehído ,
que va a darle el color característico de violeta , como la clara del huevo tiene
un PH de 7.6 esto implica que la reacción de ninhidrina si sería viable además
de la amina primaria elegida para obtener la coloración violeta intensa.

II. Identificación de lípidos

1. Prueba de Sudan III
 Reacción(+)

Esto se debe a que el Sudan III, por su baja polaridad, es más soluble en los
lípidos que en el solvente utilizado para su disolución (etanol). Esto es gracias
a la interacción tipo puente de H y de London entre los lípidos y el Sudan III,
este tiene un solvente orgánico (Naftaleno 2-ol) que permite solubilizar grasas
en este caso el aceite, generando así la coloración rojo – naranja en el tubo de
ensayo formando una sola capa o reacción homogénea.

 Reacción (−)

Se puedo apreciar por el simple visualización de 2 capas, el colorante se dirige

hacia el fondo y el aceite se va hacia la superficie

2. Prueba de solubilidad
Se producen 2 casos:
 Miscibilidad : Cloroformo y acetona
En este caso la miscibilidad, que es la capacidad de mezclarse un
líquido o solido en otro liquido , si se presenta por la estructura que
tienen ya que el aceite es soluble en disolventes orgánicos , como
se cumple en estos casos, y sustancias apolares .
 Inmiscibilidad :
 Agua Destilada : En nuestro experimento se determinó que
no se mezclan por estas 2 principales razones
a. Por tener una estructura molecular diferente
b. Por la Tensión Superficial

Por estos 2 motivos fundamentales no se mezclan y se visualizan en el tubo

formando 2 fases de la cual el aceite flota y el agua se dirige hacia el fondo por
𝑔 𝑔
la diferencia de Densidades entre sí (𝐷𝐴𝐺𝑈𝐴 ∶ 1 𝑚𝑙 𝑦 𝐷𝐴𝐶𝐸𝐼𝑇𝐸 : 0.92 𝑚𝑙)
  Alcohol : no se mezclan por las mismas razones que el
aceite no es miscible con el agua

El alcohol se dirige hacia la superficie por tener menor densidad en cambio el

aceite se va hacia el fondo por ser más denso
𝑔 𝑔
𝐷𝐴𝐿𝐶𝑂𝐻𝑂𝐿 ∶ 0,79 𝑚𝑙 𝑦 𝐷𝐴𝐶𝐸𝐼𝑇𝐸 : 0.92 𝑚𝑙)

3. Emulsión de lípidos

En el experimento al agregar el 𝑁𝑎𝑂𝐻 en la insmiscibilidad entre el aceite y el

agua destilada se observó que paulatinamente empezó a unirse partículas de
aceite y agua de la siguiente manera

Aceite Jabón Glicerina

El aceite reacciona en caliente con el 𝑁𝑎𝑂𝐻 formando: La glicerina y ácidos

grasos, estos ácidos grasos se van a unir con el 𝑁𝑎 + para formar al jabón que
es la sustancia emulsificante, la distribución en el tubo de ensayo será en 3
fases:

 Parte Superior : Una solución lipídica de aceite inalterado → Fase

dispersa
 Parte intermedia : Una solución intermedia semisólida que es el jabón
formado que se observó cómo pequeños gránulos de color blanquecinos
como burbujas
 Parte inferior : La glicerina formada + sosa (Agua destilada y alcali) →
Fase continua

El resultado de la mezcla agua – Aceite es que el emulsificante disuelve parte

de si en el aceite y la otra parte en el agua , como el aceite es sacudido en
exceso de agua forma pequeñas gotas , esto es debido a que se forma un
extremo no polarizado(miscible en aceite) y el otro extremo polarizado
(miscible en agua)

http://qpr2014.blogspot.com/2014/06/informe.html

http://quimicadesexto2012.blogspot.com/2012/06/informe-de-la-
experiencia.html
https://limapecoy.blogspot.com/p/practico-1.html

http://blog.pucp.edu.pe/blog/quimicaalimentos/2017/10/31/reacciones-de-
reconocimiento-de-proteinas/

http://quepasasi.info/se-mezcla-agua-y-aceite

http://www.edu.xunta.gal/centros/iesquiroga/system/files/inicio/depart/bioloxia/m
aterialbio/labbio2bac/lipidos.pdf

https://www.industriaalimenticia.com/articles/83029-entre-el-agua-y-el-aceite