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FACULTAD DE MEDICINA

CAMPUS POZA RICA – TUXPAN

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO


BIOQUÍMICA

ALUMNO:
ADRIAN RAFAEL CORNEJO GARCIA

CATEDRATICO:
JONATHAN GARCÍA ROMÁN

MATRÍCULA:
S18005588

SECCIÓN:
203

1
MISION
La facultad de medicina de la Universidad Veracruzana es una
institución comprometida a formar profesionistas para la
práctica de la medicina general a través de una educación
integral y armónica, en lo intelectual, social, humano y
profesional que les permita al desarrollo pleno de
conocimientos, habilidades, destrezas y valores para promover
y preservar la salud, prevenir, diagnosticar, tratar y rehabilitar
oportunamente entidades patológicas que afectan a la
población, con participación responsable en la conservación
del medio ambiente, en el contexto regional, estatal, nacional
e internacional.

VISIÓN
Ser un centro de excelencia con reconocimiento nacional e
internacional generador de médicos de vanguardia con sólidos
conocimientos científicos, habilidades, valores y actitudes que
les permite realizar atención médica integral con calidad y
calidez. Formando médicos generales con pensamiento lógico,
crítico y creativo, con actitud de aprendizaje permanente que
facilite la autoformación investigación y vinculación con la
sociedad. Con responsabilidad vocación del servicio,
honestidad, respeto por el individuo, sociedad y el medio
ambiente. Capacidad para convivir y trabajar en equipo, con
espíritu innovador de colaboración y de participación, sentido
ético universal con vocación para el bien común y en beneficio
de la sociedad.

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Contenido
PRACTICA 1PREPARACIÓN DE SOLUCIONES ................................................... 4
PRÁCTICA 2 EXTRACCIÓN DE SANGRE VENOSA ........................................... 10
PRACTICA 3 ......................................................................................................... 14
PRÁCTICA 2 DETERMINACION DE GLUCOSA BASAL .................................. 14
PRACTICA 9 - DETERMINACION DE TAMIZ DE GLUCOSA ........................... 18
(ADMINISTRACIÓN DE CARGA FIJA DE GLUCOSA ORAL). ......................... 18
PRÁCTICA 10 - CURVA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA (C.T.O.G.)22
PRACTICA 4. HEMOGLOBINA GLICOSILADA .................................................... 26
PRÁCTICA 5 ......................................................................................................... 31
PRÁTICA 3 DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL .............................. 31
PRÁCTICA 4 DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS .................................... 31
PRÁCTICA 5 DETERMINACIÓN DE COLESTEROL HDL ................................ 31
PRÁCTICA 6 ......................................................................................................... 36
PRÁCTICA 11 DETERMINACIÓN DE UREA .................................................... 36
PRÁCTICA 12 - DETERMINACIÓN DE CREATININA ...................................... 40
PRACTICA 13 - DETERMINACION DE ÁCIDO ÚRICO .................................... 45
PRÁCTICA 7 CITOMETRIA HEMATICA ............................................................... 51
PRÁCTICA 8 - EXAMEN GENERAL DE ORINA (E.G.O.) .................................... 56

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PRACTICA 1PREPARACIÓN DE SOLUCIONES

“El buen medico trata la enfermedad; el gran medico trata al paciente que tiene
la enfermedad” William Osler
OBJETIVO
o Preparar soluciones de diversas sustancias y acondicionarlas para su
posterior uso, poniendo en práctica las técnicas más comunes.
o Habituarse al manejo del material de laboratorio.
o Colaborar en la preparación de material para las restantes prácticas con el
fin de una participación activa en la tarea común.
o Practicar cálculos que involucren cantidades de soluto, solvente y solución,
relacionando entre sí dichas magnitudes.
o Determinar las concentraciones físicas y químicas de las soluciones.
o Preparar soluciones a partir de reactivos sólidos y líquidos
FUNDAMENTO
En la naturaleza encontramos dos clases de substancias puras: los elementos y los
compuestos; las demás son mezclas. Una mezcla consiste en dos o más
substancias puras, separables por medios físicos. Su composición es variable y sus
propiedades dependen de ésta y de las propiedades de las substancias que forman
parte de ella. Las mezclas son de dos tipos: heterogéneas y homogéneas. Una
mezcla heterogénea no es completamente uniforme y sus componentes son
distinguibles, en ocasiones a simple vista (ejemplo: una mezcla de azúcar y arena).
Una mezcla homogénea tiene apariencia uniforme; las llamadas soluciones son
ejemplos de mezclas homogéneas. De acuerdo a su estado físico las soluciones se
clasifican en gaseosas, líquidas y sólidas. Las soluciones líquidas son las más
comunes y, tal vez, las más importantes para el químico. Generalmente se llama
disolvente al componente de una solución que se encuentra en mayor cantidad; los
otros componentes se llaman solutos. Para la preparación de soluciones, son
necesarios hacer cálculos para saber su concentración, por lo cual es importante
saber sobre Molaridad y Normalidad. La Molaridad se define como los moles de
soluto disueltos en un litro de solución
En el laboratorio se utilizan los siguientes tipos de soluciones:
o Por ciento
o Molares
o Normales
o Os molares
o Isotónicas
SOLUCIONES POR CIENTO

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Las soluciones porcentuales son aquellas cuya medida es la cantidad de mililitros o
gramos referidos a 100 ml de solución (no de solvente). Ejemplos: Una solución al
10% (de lo que sea) contendrá 10 gramos o 10 ml y aforados a 100 ml de solución.
Para preparar una solución al 25%, entonces pesaremos 25 gramos de la sustancia
o mediremos 25 ml y se aforan hasta 100 ml.

SOLUCIONES MOLARES
Son aquellas que en 1 L de agua hay disuelto un mol de una sustancia que por
coincidencia es igual al peso molecular de la sustancia expresada en gramos
ejemplo una solución (M) molar de cloruro de sodio (peso molecular =58.5) tiene
58.5 gramos disueltos en un litro de agua. La Molaridad se define como el número
de moles diluidas en un volumen especifico. La siguiente ecuación expresa la
Molaridad
#𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎
𝑀= , 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑡𝑎𝑚𝑏𝑖𝑒𝑛, #𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 =
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑒𝑛 𝑙𝑖𝑡𝑟𝑜𝑠 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑀𝑜𝑙𝑒𝑐𝑢𝑙𝑎𝑟

SOLUCIONES OSMOLARES
Se define como osmolaridad a la medida que expresa el nivel de concentración
de solutos en una solución. En el caso del plasma sanguíneo la osmolaridad
plasmática es la concentración de solutos disueltos en el plasma. Esta está
relacionada directamente con los moles de los diferentes solutos y con el
número de partículas en las que se disuelve.
Un osmol es igual a un mol de partículas, sin importar el tamaño de estas. En el
caso de las moléculas dependerá del número de partículas en las que se
disuelva. Por lo que una solución de un mol de cloruro sódico en un litro de agua
tendrá por la disolución de las dos partículas, la de sodio y la de cloro, dos
osmoles por litro.
La osmolaridad es fundamental para la vida, pues son los osmolitos
activos los encargados de mantener el agua en los diferentes
compartimentos. La osmolaridad plasmática oscila entre 285-295 mOsm/L lo
que es aproximado a 0.3 Osm/L, estando estrechamente regulada, ya que sus
variaciones tienen efectos neurológicos importantes pudiendo llegar a la muerte.
Ejemplo: cuando una molécula al diluirse en agua se divide en 1 partícula, diluir
un mol de esa molécula en un litro tendrá una concentración de 1 Osm/l, pero si
una molécula al diluirse en agua se divide en 2 partículas (por ejemplo, dos
iones), entonces al diluir un mol de dicha molécula en agua, dicha solución
tendrá una concentración de 2 Osm/l.

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SOLUCIONES ISOTÓNICAS
Un medio o solución isotónico es aquel en el cual la concentración de soluto es igual
fuera y dentro de una célula. En hematología, se dice de las soluciones que tienen
la misma concentración de sales que los glóbulos rojos. Son isotónicas. Por tanto,
tienen la misma presión osmótica que la sangre y no producen la deformación de
los glóbulos rojos. Como se dijo arriba La osmolaridad plasmática oscila entre
285-295 mOsm/L lo que es aproximado a 0.3 Osm/L, una solución con dicha
osmolaridad será isotónica.
Las bebidas isotónicas son las que contienen una concentración de sales, minerales y
azúcares similares a las que se encuentran en la sangre, con una concentración de 300
mOsm/L. Su finalidad es hidratación y reposición de electrolitos.
SOLUCIONES NORMALES
La Normalidad es una concentración de las disoluciones utilizada en los procesos
de neutralización y titulación entre sustancias ácidas y básicas. Este tipo de
concentración relaciona los equivalentes gramo del soluto por los litros de solución.
PESO EQUIVALENTE
Peso equivalente, también conocido como equivalente gramo, es un término que se
ha utilizado en varios contextos en química. En la mayor parte de los usos, es la
masa de un equivalente, que es la masa de una sustancia dada que:
o Se deposita o se libera cuando circula 1 mol de electrones.
o Sustituye o reacciona con un mol de iones hidrógeno (H+) en una reacción
ácido-base.
o Sustituye o reacciona con un mol de electrones en una reacción redox.
El peso equivalente tiene dimensiones y unidades de masa, a diferencia del peso
atómico, que es una magnitud adimensional. Los pesos equivalentes fueron
determinados originalmente de forma experimental, pero (tal como se utilizan ahora)
se obtienen de las masas molares.
El peso equivalente también puede ser entendido como el peso molecular de la
sustancia a diluir dividido por el número de átomos de dicha molécula que
reaccionaran en la solución acuosa a preparar. Ejemplo: el H2SO4 al diluirse en agua
donará sus dos hidrógenos al medio, por lo tanto, ellos estarán disponibles para
reaccionar con cualquier sustancia que se encuentra en la solución, por lo tanto,
para saber el peso de un equivalente químico de H2SO4 se debe dividir el peso
molecular de dicho ácido entre 2 y con esa operación sabré cual es el peso de un
equivalente químico de H2SO4. La siguiente ecuación se utiliza para
calcular/preparar la normalidad de cualquier solución.

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𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎
𝑁=
(𝑒𝑙 𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 𝑢𝑛 𝐸𝑞)𝑥(𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑒𝑛 𝑙𝑖𝑡𝑟𝑜𝑠)

MATERIALES:
 Hoja
 Lapicero
SOLUCIONES PORCENTUALES:
1.
35 % de glucosa 100%= 150 ml.
Vf= 150 ml. 35%= X
X= (35 x 150 / 100) X = 52.5 ml.
2.
Solución de 48% de sacarosa 100%=230 ml.
Vf= 230 ml. 48%= X
X= (48 x 230 /100) X= 110.40 ml.
3.
Preparar solución de .01% de ampicilina 100%=10 ml.
Vf= 10 ml. .01%= X
X= (.01 x 10 / 100) X=.001 gr.
4.
.5% de azul de metileno en agua 100%=135ml.
Vf= 135 ml. .5%= X
X= (.5 x 135 / 100) X= .675 ml

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Diluciones:
1.Diluir una solución al 75% llevando al 29% con un volumen final
de 30 ml. ¿Cuál es el volumen inicial?
C1=75% V1=X

C2=29% Vf=30 ml.

X= (.29 x 30 / .75) X=11.6ml

2.Se tiene una solución de 81% y se tiene que diluir al 15%


llevándola a un vf=250 ml. ¿Cuántos ml. se le deben agregar al V1?

C1=81% V1=X

C2=15% Vf=250 ml.

X= (.15 x 250 / .81) =46.2 250-46.2 X=203.8

3.Medicamento X se debe administrar en adultos una


concentración de 0.1 gr. por ml., pero a un paciente con
insuficiencia renal se le debe dar el 20 % de la concentración para
el adulto, el vf que se le debe dar al paciente durante el día es de
10 gr. ¿Cuánto se le debe por hora?

10 x .20=2 gr

2 / 24=.083gr por hora

4.Concentración de ampicilina para un adulto de 5 mg. por kg. del


peso del paciente ¿Cuál es la cantidad que se le da al niño si solo
puede administrarse el 15% de la dosis del adulto?25 kg pesa el
niño

5 x .15=.75mg por kg en niños

.75 mg x 25kg= 18.75 mg.


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1.Tenemos una botella de cefaclor etiquetada 125 mg. Sobre 5 ml.,
deben administrarse 60 mg. ¿Cuántos ml. se necesitan?

X= ( 60 x 5 / 125) X=2.4 ml.

2. A un paciente se le administra mil ml. por día de suero glucosado


al 5% ¿Cuántos mg. de glucosa recibe al día?

X= (1000 x 5) = 50 g

3. A un paciente al que se realiza una paracentesis evacuadora: se


le prescribe Albumina 6g. por cada litro de líquido ascítico
obtenido, se obtiene 5 l de líquido ascítico. ¿Cuántos ml de
albumina deberán administrarse si disponemos de los siguientes
frascos de albumina?

Albumina humana al 20% cada frasco contiene 50 ml.

6 gr por litro x 5l = 30 g de albumina

X= (30 x 100 / 20) = 150 ml de albumina

4. A un paciente se le debe administrar 1.22% de NACL en una


bolsa de ½ litro de solución salina, si la solución salina está al 0.9%
¿Cuántas ampolletas de 17% se deben adicionar a la bolsa de
solución salina si cada ampolleta tiene 10 ml.?

1.22 % de ½ litro =6.1 ml. 6.1ml – 4.5 ml.=1.6 ml.

.9 % de ½ litro= 4.5 ml,

17% de cada ampolleta de 10 ml.=1.7 ml.

1.6 / 1.7 = .94

X= .94 ampolletas

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PRÁCTICA 2 EXTRACCIÓN DE SANGRE VENOSA
FUNDAMENTO
Es el espécimen más usado habitualmente para los estudios analíticos por la riqueza de datos que puede
aportar, por su funcionalidad y por ser relativamente fácil su obtención. Dependiendo del tipo de estudio
que se vaya a realizar, el tipo de muestra puede coincidir con el espécimen (sangre total) o ser una parte
del mismo (plasma, suero).
Las distintas formas de extracción de sangre, haciendo hincapié en aquellos pasos que puedan tener
especial trascendencia en el posterior proceso analítico.
Los métodos de extracción nos permiten recoger muestras sanguíneas para el análisis de sangre en el
laboratorio. Es decir, nos permite obtener una muestra de sangre adecuada para efectuar su análisis
hematológico, bioquímico o microbiológico.
Dentro de los métodos de extracción sanguínea encontramos la punción venosa. Se define como el arte
de introducir una aguja en una vena para así poder acceder al torrente sanguíneo. Mediante esta vía se
logra extraer sangre, y administrar vacunas o medicamentos, entre otros fines.
De la extracción de sangre se realizan análisis, los cuales pueden ser de rutina para apoyar el diagnóstico
de enfermedades o como control de salud.
La flebotomía es muy importante en el trabajo del Laboratorio Clínico, por lo que el personal que ha de
realizar la colección de la muestra sanguínea debe tratar de la manera correcta al paciente.
Punción capilar
La punción capilar consiste en pinchar el pulpejo del dedo o el lóbulo de la oreja con una lanceta. En
niños menores de 4 años se realiza en el talón del pie. Una vez realizada la punción se procede a
presionar suavemente para extraer la sangre capilar, cuya primera gota se desecha.
Extracción Venosa
Por norma general, el paciente debe acudir a la extracción en ayunas de 10-12 horas, sobre todo para
determinaciones bioquímicas. Las venas más utilizadas para la punción son la cubital, la cefálica y la
basílica. En los niños, especialmente en los lactantes, se recurre a las venas superficiales del cráneo o a
la yugular externa.
• El Torniquete: se realiza para facilitar la localización de una vena apropiada para realizar la punción.

Normas para la realización del torniquete:


1) Aplicar el compresor (ligadura) en el brazo a una distancia de unos 8–10 cm. de la zona de
punción.
2) El objetivo es suprimir completamente el flujo venoso sin interrumpir el flujo arterial: el pulso debe
ser palpable en la arteria radial y, desde luego, no se debe observar cianosis distal. Un torniquete
demasiado apretado puede ocasionar una falsa hiperpotasemia.
3) No mantener el torniquete durante mucho tiempo: tiempos de compresión prolongados (más de
2 minutos) pueden producir cambios significativos en la concentración de células y
macromoléculas en la sangre extraída, especialmente si se mantiene el torniquete durante la
extracción. Lo ideal es un tiempo de compresión no mayor de 1 minuto con liberación del
compresor cuando la sangre comienza a fluir.
Puntos de abordaje para la toma de muestras:
En región ante cubital: Vena basílica, cefálica y mediana
En cuero cabelludo: Venas superficiales del cráneo
En cuello: Vena yugular externa
En mano: Venas dorsales de la mano y caras laterales de las falanges distales de los dedos de la mano
En tobillo: Vena safena interna y externa
En pie: Venas dorsales del pie y zona lateral externa o interna del talón.

Nota: Recuerde que torniquetes demasiado apretados y prolongados pueden producir alteraciones de
determinadas magnitudes bioquímicas y hematológicas.

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TÉCNICA:
La Flebotomía: Los pasos imprescindibles para una buena extracción venosa son
1) Preparar el material necesario (aguja, porta tubos (holder), Ligadura, tubos al vacío necesarios,
desinfectante, etc.).

2) Posicionar al paciente (sentado o tendido).


Antes de iniciar las extracciones preguntar al paciente su nombre y apellidos, comprobando que
coinciden con los indicados en las hojas de petición.

3) Preguntar al paciente si ha realizado ayuno de 8-12 horas, así como el cumplimiento de la


preparación previa si es necesario.

4) Explicar el proceso de extracción.

5) Inspección y palpación de la vena: El brazo del paciente debe estar estirado. Examine el brazo y
seleccione una vena mientras el paciente aprieta el puño con fuerza.

6) La inspección debe realizarse con un orden predeterminado:


a. Fosa ante cubital de ambos brazos (venas medianas, venas basílicas, venas cefálicas)
b. Antebrazo (vena cefálica)
c. Dorso de las manos (venas del dorso de las manos).

7) Las venas son, en general, fácilmente palpables, un minucioso examen visual acompañado de
una palpación cuidadosa proporciona datos sobre la constitución y el tipo de vena, así como
sobre su localización y dirección. En caso de que las venas del antebrazo y fosa ante cubital no
sean bien visibles ni palpables, se recomiendan las siguientes medidas que dilatan las venas y
aseguran una mejor circulación sanguínea:
a. Abrir y cerrar el puño varias veces después de aplicar el torniquete.
b. Colocar el brazo del paciente hacia abajo y dar masaje desde la muñeca hasta la fosa
ante cubital.
c. Aplicar calor en el brazo.

8) Desinfectar el lugar de la flebotomía con alcohol del 70%, excepto en el caso de la determinación
de alcoholemia que se utilizará cualquier desinfectante que no contenga alcohol. Una vez
desinfectada la zona de punción ya no se debe palpar de nuevo la vena.

9) Aplicar el torniquete mientras canalizamos la vena. Retirarlo en el momento que la sangre


comienza a fluir en el primer tubo, pues se debe evitar la estasis venosa.

10) Punción Venosa: durante la punción el porta tubos debe estar colocado en un ángulo
aproximado de 15º con respecto al brazo. La aguja debe introducirse a lo largo del curso de la
vena hasta que su apertura esté totalmente en el interior de la vena. La punción en el dorso de
la mano debe realizarse con una aguja de tamaño y grosor adecuado; en caso de venas muy
finas, debe utilizarse una aguja fina de palomilla, en cuyo caso el sistema de extracción se
conecta a la palomilla por medio de un adaptador.

11) Extracción de Sangre: Se introduce el tubo en el porta tubos. Los dedos, índice y medio se
sitúan en las aletas del porta tubos y el pulgar presiona completamente el tubo dentro del porta
tubos. En venas normales, en cuanto la sangre comienza a fluir dentro del tubo, el torniquete
puede retirarse. Si la vena es muy fina, el torniquete debe mantenerse. Se pedirá al paciente que
abra el puño. Para extraer el tubo lleno del porta tubos, ejercer una presión contraria con el pulgar
sobre las aletas del porta tubos; esto evita que la aguja cambie de posición y facilita la extracción
del tubo.
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12) Mezclado: Asegurarse de que el sistema de vacío ha recogido el volumen de sangre adecuado:
una exacta proporción de sangre y anticoagulante es fundamental en el proceso analítico.
Mezclar los tubos recién extraídos varias veces por inversión para asegurar una perfecta mezcla
de la sangre con el anticoagulante o los activadores de la coagulación.

13) Prevención de hemorragia: mientras se retira la aguja se aplicará una gasa o algodón, haciendo
presión, sobre la zona de punción. A continuación, se aplicará un apósito y se indicará al paciente
que mantenga el brazo levantado durante unos minutos.

14) Eliminación de residuos peligrosos: La aguja se depositará en una unidad de recolección y


eliminación de residuos de seguridad.

15) Identificación de la muestra: bien con una etiqueta de código de barras, bien con el nombre y
apellidos del paciente, procedencia e identificación numérica se realizará en el mismo lugar de la
extracción. La persona que realice la extracción deberá firmar la solicitud, anotando cualquier
incidencia ocurrida en la extracción.

Orden de Extracción de los tubos: El orden de los tubos es importante para prevenir la
contaminación de las muestras por anticoagulantes no deseados.

Se ha de realizar de la siguiente manera:


1º.- Tubo para cultivo (Hemocultivos)
2º.- Tubo para análisis de suero: sin anticoagulante
3º.- Tubo para pruebas de coagulación: anticoagulante citrato
4º.- Tubos restantes con anticoagulantes: EDTA, Heparina de litio, tubo de velocidad de
sedimentación.
5°.- Jeringas de gasometría,

El tubo de citrato, destinado a pruebas de coagulación, debe extraerse siempre antes que los que llevan
otros anticoagulantes, de manera que no se contamine con EDTA o Heparina de litio, lo cual puede interferir
en el estudio de coagulación.

Si es el único tubo a extraer o tiene que ser el primero, antes se debería llenar un tubo de descarte con
unos 5 ml de sangre, con objeto de eliminar la posible contaminación de la muestra con tromboplastina tisular
proveniente del sitio de punción.

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MATERIAL
 Tubos al vacío con y sin aditivos.
o Tubo tapón lila con EDTA, de 3 ml y pediátricos.
o Tubo tapón azul con Citrato de Sodio, de 3ml.
o Tubo tapón Rojo, Amarillo, Rojo-Gris sin aditivos, de 6 ml y pediátricos.
 Agujas verdes y/o negras.
 Jeringas con aguja verde y/o negra, de 3 ml y 5 ml.
 Torundas con alcohol.
 Ligadura.

MATERIAL ADICIONAL
 Atomizador, con solución antiséptica (germicida). Franela y/o servitoallas desechables
 Toallitas desinfectantes (opcional)
 Jabón y/o gel antibacterial para manos.
 Almohada pequeña (para posar el brazo.
 Descartador cortopunzante

ESQUEMAS SIGUIENTE PAGINA

CONCLUSIÓN:
En esta práctica hemos aprendido a utilizar y aplicar las técnicas correctas para una
adecuada extracción de muestras de sangre, de manera que no tengamos que
repetir la obtención de las muestras.
Ya que si no es llevada de la manera adecuada podría resultar en un resultado
erróneo en un estudio solicitado o la infección de una enfermedad potencialmente
mortal.
Además, observamos que, en algunas personas, sus venas no eran fáciles de
encontrar y en otros sus venas eran muy gruesas y era difícil obtener la muestra
deseada.
Hay que tener en cuenta las diferentes técnicas de seguridad cuando se vaya a
realizar la toma de muestras y además observar que las jeringas que vayamos a
usar para la obtención de muestra de sangre se encuentren en un envase
herméticamente cerrado.

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PRACTICA 3
PRÁCTICA 2 DETERMINACION DE GLUCOSA BASAL
DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará la determinación en suero de Glucosa basal, mediante espectrofotometría. Al
final deberá correlacionar clínicamente los resultados obtenidos con los procesos fisiológicos y metabólicos
normales y las patologías descritas en clase.
El estudiante obtendrá la capacidad de sustentar decisiones médicas en una síntesis del conocimiento
teórico, científico y clínico acerca de la estructura y función del organismo humano en condiciones normales y
patológicas, considerando los niveles de organización molecular, celular, tisular, de órganos y por aparatos y
sistemas; valorando los procesos normales en las diferentes etapas y ciclos de la vida. (1)

FUNDAMENTO:
Los carbohidratos se definen como aldehídos y cetonas polihidroxílicos (aldosas y cetosas,
respectivamente). Los carbohidratos simples como la glucosa se denominan monosacáridos. Dos
monosacáridos ligados por un puente llamado glucosídico forman un disacárido. Más de dos monosacáridos
unidos por puentes glucosídicos se denomina polisacárido. Los carbohidratos de la dieta consisten de
monosacáridos tales como la glucosa, fructosa y galactosa; de disacáridos tales como la sacarosa, lactosa y
maltosa y de polisacáridos tales como el almidón. Las enzimas intestinales convierten a los disacáridos y
polisacáridos en monosacáridos.
La principal función bioquímica de la glucosa es la de proporcionar energía para los procesos de la
vida. El adenosín trifosfato ("ATP") es la fuente de energía universal para las reacciones biológicas. La oxidación
de la glucosa por las vías glucolítica y del ácido cítrico es la fuente principal de energía para la biosíntesis del
ATP.
Cuando se tiene un exceso de glucosa en la sangre por arriba del límite superior normal para una edad,
se presenta la hiperglucemia. Aunque los valores altos de glucosa sérica en ayunas se relacionan con suma
frecuencia con la presencia de diabetes sacarina, el número de enfermedades y trastornos fisiológicos que
pueden llevar a incrementos mayores es vasto. El aumento de la concentración de glucosa sérica se da en:
respuesta a la tensión, enfermedad de Cushing, diabetes mellitus, acromegalia, hipertiroidismo, pancreatitis
crónica, administración de algunos fármacos como diuréticos clorotiacídicos porque suprimen la secreción de
insulina, coma hiperosmolar no cetónico.
La hipoglucemia es un trastorno caracterizado por una concentración de glucosa en ayunas, menor al
límite inferior normal para el grupo de edad y esto sucede en: enfermedad hepática, desnutrición,
posgastrectomía, tolerancia deficiente a la glucosa, administración excesiva de insulina, hipoglucemia funcional
o espontánea, ingestión de alcohol en ayunas.
Debido a que la concentración de glucosa sérica por lo general se vuelve anormal sólo cuando hay un
trastorno grave de esta interacción, el verificar la glucosa sérica ayuda a evaluar la función e integridad del
sistema.
La prueba de glucosa en ayunas evalúa de modo aproximado la capacidad del cuerpo para regular la
glucosa y proporciona información acerca de la clase de anormalidad, si es que la hay. No se tomarán alimentos
ni bebidas, excepto agua, cuando menos por ocho horas antes de tomar la muestra.
Después de un ayuno de varias horas y en condiciones de reposo la concentración
de glucosa en sangre es de 65 a 100 mg por 100 ml. Después de la ingestión de alimentos, sobrevienen alzas
hasta de 120 a 140 mg por 100 ml y, unas horas después, regresan a los valores en ayunas.
Este es un ejemplo de ajuste fisiológico constante para conservar la concentración de glucosa en los líquidos
sin grandes cambios.
De la misma manera, las modificaciones producidas por las emociones violentas, el ejercicio intenso y la aún
inanición, son equilibradas para volver a lo normal.
Si la glucosa de la sangre se mantiene dentro de los limites estrechos, es porque la serie de fenómenos que
concurren a proporcionar glucosa a la sangre se equilibran con los mecanismos que la sustraen de ella.
En ayunas, la única fuente de glucosa sanguínea es el hígado.

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MATERIAL Y EQUIPO:
MATERIAL BIOLÓGICO MATERIAL DE LABORATORIO Y EQUIPO
REACTIVOS
Suero basal (ayuno) Tubos de Ensayo (4) 13x100 y (4)12x75 Espectrofotómetro
Gradilla Centrífuga
Pipetas Pasteur con bulbo Baño María
Celdillas para espectrofotómetro Pipetas automáticas de 1.0 ml
Puntillas para pipetas automáticas Pipetas automáticas de 10 µl
Tubos al vacío sin aditivos
Agujas para sistemas al vacío
Reactivo de Glucosa
Estándar de Glucosa
Agua destilada

TÉCNICA:
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo correspondiente para la
obtención de suero).
2. Una vez coagulada la sangre, centrifugar la muestra a 3000 r.p.m. durante 5 minutos. Retirar el tubo
de la centrifuga y separar el suero del paquete globular.
3. En tres tubos de ensayo pipetear los siguientes volúmenes (ml) y mezclar:
Blanco de reactivo Estándar Muestra
Reactivo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Estándar --- 0.005 ml ---
Muestra --- --- 0.005 ml

4. Incubar los tubos de ensayo a 37°C por 5 minutos o a Temperatura ambiente 15-30°C por 10 minutos.
**
5. Leer la absorbancia de Estándar y de Muestra contra el Blanco de Reactivo, trasvasando el contenido
de un tubo a una celdilla para espectrofotómetro. La lectura se realiza a 500 nm antes de 60 minutos.
**
**Consultar el inserto del reactivo.

CÁLCULOS.
Los valores derivan de la siguiente ecuación:
(AM)
Glucosa (mg/dl) = (AE)
× CE

Dónde: AM es el valor de la absorbancia


AE es la absorbancia del estándar
CE es Concentración del estándar en mg/dl.

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VALORES DE REFERENCIA

GLUCEMIA BASAL GLUCOSA POSPRANDIAL 2 hrs GLUCEMIA AL AZAR

Rango normal: 70 - 110 mg/dl Menor a 140 mg/dl ---


Glucemia basal alterada (GBA) 111 - 125 mg/dl --- ---

Intolerancia a la Glucosa (TAG) --- 140 - 199 mg/dl ---


Diabetes ≥ 126 mg/dl ≥ 200 mg/dl ≥ 200 mg/dl

Fuente: Resumen, clasificación y diagnóstico de la Diabetes Guía ADA 2016. Standards of Medical Care in Diabetes - American Diabetes Association. (ADA)
http://cnp.org.pe/wp-content/uploads/2016/12/GU%C3%8DA-ADA-2016_RESUMEN-CLASIFICACI%C3%93N-Y-DIAGN%C3%93STICO-DE-LA-DIABETES.pdf

REPORTE DE RESULTADOS
PRACTICA GLUCOSA BASAL

CASO 1 IMC 22.7


SEXO FEMENINO Ayuno 100 mg/dl
GLUCOSA
EDAD 18 2 horas 102 mg/dl
BASAL
3 horas 104 mg/dl
TALLA 1.67 m PESO 63.5 kg

NOTA: El paciente no ingirió la solución de dextrosa de 75 g.


Se observaron estos resultados debido a la ingesta excesiva de carbohidratos
después de la toma de muestra en ayuno.
Se puede determinar una mala absorción de glucosa, debido a la sobre ingesta de
carbohidratos.
16
Por lo cual debe mejorar su dieta diaria, para poder darle un revés a la situación
que presenta, y además de hacer ejercicio regularmente
ESQUEMAS:

CONCLUSIONES:
La prueba de glucosa basal es un punto de partida para el diagnóstico de
enfermedades metabólicas. Al ser una prueba en ayuno, durante este periodo el
organismo regula los niveles de glucosa e insulina en circulación lo cual nos da un
nivel de glucosa lo más estable posible.
Con esta prueba pudimos observar la facilidad con la que se puede diagnosticar
un problema en la regulación de la glicemia y lo importante que resulta en la
clínica en especial para pacientes con Diabetes Mellitus para llevar un control ya
que es una enfermedad incurable solo es controlable a través de sus niveles de
glucosa sanguínea.
El diagnóstico temprano de esta enfermedad es de suma importancia para
evitar problemas crónicos y efectos secundarios.

17
PRACTICA 9 - DETERMINACION DE TAMIZ DE GLUCOSA
(ADMINISTRACIÓN DE CARGA FIJA DE GLUCOSA ORAL).

DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará la determinación en suero de Glucosa basal y Glucosa sérica 2 horas después
de tomar una carga fija de glucosa, mediante espectrofotometría. Al final deberá correlacionar clínicamente los
resultados obtenidos con los procesos fisiológicos y metabólicos normales y las patologías descritas en clase.
Debe realizar un manejo clínico integral que permita preservar o restaurar la salud del paciente
considerando los aspectos biológicos, psicológicos y sociales; deberá establecer un diagnóstico, apoyando sus
decisiones en evidencias científicas.

FUNDAMENTO.
La glucemia de ayuno anormal y la tolerancia anormal a la glucosa se consideran etapas progresivas
del mismo proceso morboso, y se ha demostrado que el tratamiento (mediante dieta, ejercicio y cambios en el
modo de vida) en fase temprana impide la progresión. Como no todos los pacientes que presentan la tolerancia
anormal a la glucosa tienen glucosa de ayuno anormal, se consideran categorías separadas. Asimismo, las
consecuencias de ambos trastornos son ligeramente diferentes.
La glucemia de ayuno anormal es una situación en que la concentración de glucosa en la sangre (o
el plasma) es mayor de lo normal en ayunas, pero no llega a alcanzar los límites para considerarla diabetes.
La tolerancia anormal a la glucosa es una situación en que la concentración de glucosa en la sangre
(o el plasma) a las 2 horas de haber administrado una carga de 75 g de glucosa oral es mayor de lo normal,
pero no llega a alcanzar los límites para considerarla diabetes.
La velocidad de formación y degradación del glucógeno hepático es uno de los factores más
importantes en la regulación de la glicemia. Como la salida de glucosa del hígado depende, en gran parte, de
la concentración de glucosa en la sangre, cuando ésta se modifica, funciona el mecanismo glucogénico, o por
el contrario, el glucogenolítico, debido a las hormonas relacionadas:
La insulina, que favorece la utilización y captación de glucosa y es secretada al elevarse la glucemia,
el glucagón y la epinefrina, impulsores de la glucogenólisis, y son secretados por el páncreas y glándulas
suprarrenales cuando hay hipoglucemia.
La hormona insulina tiene gran importancia en la participación de la regulación de glucosa sanguínea,
se produce en las células Beta del páncreas en respuesta a la hiperglucemia, la administración de insulina
produce hipoglucemia inmediata. La adrenalina y la noradrenalina impiden la liberación de la insulina.
Por otro lado, el glucagón se opone a la acción de la insulina, es producido en las células A del
páncreas y es secretado cuando hay hipoglucemia llegando a través de vena porta al hígado para producir
glucogenólisis y gluconeogénesis.
Otras hormonas influyen en la hiperglucemia como la hormona del crecimiento que inhibe la utilización
de la glucosa y favorece la de ácidos grasos, los glucocorticoides que aumentan la gluconeogénesis, la
adrenalina secretada cuando hay estímulos estresantes causa glucogenólisis y las hormonas tiroideas.

Diagnóstico
 Tolerancia anormal a la glucosa: glucosa plasmática en ayunas ≥6,1 mmol/L (110 mg/dl) y <7 mmol/L
(126 mg/dL), según los criterios de la OMS de 1999. (La Asociación Estadounidense contra la Diabetes
ha elegido un valor de corte más bajo, de 5,6 mmol/L o 100 mg/dl).
 Glucosa de ayuno anormal: glucosa plasmática en ayuno (si se puede practicar) <7,0 mmol/L (126
mg/dL) Y ADEMÁS glucosa plasmática a las 2 horas de haber bebido una solución con 75 g de glucosa
de ≥7,8 mmol/L (140 mg/dL) y <11,1 mmol/L (200 mg/dL). (7, 10, 19)

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MATERIAL Y EQUIPO:
MATERIAL BIOLÓGICO MATERIAL DE LABORATORIO Y REACTIVOS EQUIPO

Suero basal (ayuno) Tubos de Ensayo (4) 13x100 y (4)12x75 Espectrofotómetro


Gradilla Centrífuga
Suero de tamizaje 2 o 1 Pipetas Pasteur con bulbo Baño María
hora después de ingesta de Celdillas para espectrofotómetro Pipetas automáticas de 1.0 ml
75 gr, de dextrosa Puntillas para pipetas automáticas Pipetas automáticas de 10 µl
Tubos al vacío sin aditivos
Agujas para sistemas al vacío
Reactivo de Glucosa
Estándar de Glucosa
Agua destilada

TÉCNICA:
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo correspondiente para
la obtención de suero). Medir la Glucosa basal (paso 3 al 6).
2. Indicarle al paciente que consuma 75 gr de dextrosa (o algún carbohidrato) suspendido en 250 ml de
agua o en su defecto una solución comercial como Dextrosol o cualquier otra y realizar una segunda
flebotomía posterior a dos horas a la ingesta. Medir la Glucosa posterior a 2 horas de la ingesta
(paso 3 al 6).
3. Una vez coagulada la sangre, centrifugar la muestra a 3000 r.p.m. durante 5 minutos. Retirar el tubo
de la centrifuga y separar el suero del paquete globular.
4. En tres tubos de ensayo pipetear los siguientes volúmenes (ml) y mezclar:

Blanco de reactivo Estándar Muestra


Reactivo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Estándar --- 10 µl ---
Muestra --- --- 10 µl

5. Incubar los tubos de ensayo a 37°C por 5 minutos o a Temperatura ambiente 15-30°C por 10
minutos. **
6. Leer la absorbancia de Estándar y de Muestra contra el Blanco de Reactivo, trasvasando el
contenido de un tubo a una celdilla para espectrofotómetro. La lectura se realiza a 500 nm antes de
60 minutos. **
**Consultar el inserto del reactivo.

CÁLCULOS.
Los valores derivan de la siguiente ecuación:
(AM)
Glucosa (mg/dL) = (AE) × CE
Donde:
AM es el valor de la absorbancia,
AE es la absorbancia del estándar
CE es Concentración del estándar en mg/dL.

19
VALORES DE REFERENCIA

GLUCOSA
GLUCEMIA BASAL 2 horas después de la ingesta
de carga fija.
Rango normal: 70 - 110 mg/dl Menor a 140 mg/dl

Glucemia basal alterada (GBA) 111 - 125 mg/dl ---

Intolerancia a la Glucosa (TAG) --- 140 – 199 mg/dl

Diabetes ≥ 126 mg/Dl ≥ 200 mg/dl

Tomado de: http://cnp.org.pe/wp-content/uploads/2016/12/GU%C3%8DA-ADA-2016_RESUMEN-CLASIFICACI%C3%93N-Y-DIAGN%C3%93STICO-DE-LA-


DIABETES.pdf

REPORTE DE RESULTADOS
PRÁCTICA GLUCOSA BASAL/ GLUCOSA TAMIZAJE

20
CASO 2 IMC 30.39
SEXO MASCULINO Ayuno 96 mg/dl
30 minutos 177 mg/dl
EDAD 19 GLUCOSA BASAL
2 horas 116 mg/dl
3 horas 77 mg/dl
TALLA 1.74 m PESO 92 kg
NOTA: El paciente no ingirió la solución de dextrosa de 75 g.

La curva de la glucosa arrojó resultados algo elevados, pero esto puede deberse a
la sobre ingesta de alimentos, como las grasas.
Además, de que el paciente presenta antecedentes familiares de diabetes, y ya de
por sí, esto es un condicionante para tener la glucosa alto.
Pero, aun así, como todo padecimiento prevenible, se recomienda la actividad
física constante y una dieta balanceada.
ESQUEMAS:

CONCLUSIONES:
Ya que el procedimiento de la práctica no se hizo tal cual no podemos comparar
los resultados obtenidos con los valores de referencia de la prueba. Sin embargo,
pudimos observar cómo es que cambian los niveles de glucosa después de ingerir
alimentos.

21
PRÁCTICA 10 - CURVA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA
(C.T.O.G.)
DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará la determinación en suero de Glucosa basal, Glucosa a los 30, 60 y 90 minutos
mediante espectrofotometría. Al final deberá correlacionar clínicamente los resultados obtenidos con los
procesos fisiológicos y metabólicos normales y las patologías descritas en clase.
Debe realizar un manejo clínico integral que permita preservar o restaurar la salud del paciente
considerando los aspectos biológicos, psicológicos y sociales; deberá establecer un diagnóstico, apoyando sus
decisiones en evidencias científicas.

FUNDAMENTO:
Con la prueba de la tolerancia oral a la glucosa se realiza la comparación del valor basal de la glucosa
con el valor medido 2 horas después de ingerir una sobrecarga oral de glucosa (aproximadamente 75 g de
glucosa disueltos en un vaso de agua 250 ml aproximadamente, para personas de complexión normal). Esta
prueba resulta engorrosa para el laboratorio y molesta para el paciente y, por lo tanto, debe ser usada solo en
los casos dudosos. Está contraindicada en aquellos pacientes en los que se ha constatado, en más de una
ocasión, una hiperglicemia en ayunas.

*Pruebas diagnósticas de diabetes:


La diabetes puede ser diagnosticada con base en los niveles de glucosa en plasma, ya sea a través
de una prueba rápida de glucosa en plasma o de una prueba de glucosa en plasma 2 horas después de haber
recibido 75 gramos de glucosa vía oral o con una prueba de hemoglobina glicosilada (A1C). Los criterios se
muestran en la siguiente tabla:

*http://cnp.org.pe/wp-content/uploads/2016/12/GUÍA-ADA-2016_RESUMEN-CLASIFICACIÓN-Y-DIAGNÓSTICO-DE-LA-DIABETES.pdf

Las características de la curva de la glucosa sanguínea después de la administración de una cantidad


conocida de glucosa indica la tolerancia a esta.
La diabetes mellitus tipo I se caracteriza por la disminución de la tolerancia a la glucosa debido a la
disminución de secreción de insulina en respuesta a la carga de glucosa. Esto se manifiesta por la
hiperglucemia, glucosuria y metabolismo de grasas.
La tolerancia a la glucosa disminuye en la diabetes tipo I, en trastornos relacionados con lesión
hepática; en algunas infecciones; en la diabetes tipo II, que se acompaña de obesidad y aumentos de
concentraciones plasmáticas de ácidos grasos, disminuye la tolerancia bajo la influencia de algunos fármacos;
y algunas veces en la arterioesclerosis.
La insulina incrementa la tolerancia a la glucosa; su administración disminuye el contenido sanguíneo
de glucosa e incrementa la utilización y almacenamiento hepático de esta. Un exceso de insulina puede producir
hipoglucemia intensa y esta resultar en convulsiones y muerte, a menos que se administre glucosa de inmediato.
En las insuficiencias hipofisiaria y corticosuprarrenal se incrementa la tolerancia a la glucosa debido a
la disminución del antagonismo de la acción de la insulina a cargo de las hormonas secretadas por estas
glándulas.
22
MATERIAL Y EQUIPO:
MATERIAL BIOLÓGICO MATERIAL DE LABORATORIO Y EQUIPO
REACTIVOS
Suero basal (ayuno) Tubos de Ensayo (6) 13x100 y (6)12x75 Espectrofotómetro
Suero a los 30, 60 y 90 Gradilla Centrífuga
minutos de haber ingerido una Pipetas Pasteur con bulbo Baño María
carga de 75 gr. de Dextrosa, Celdillas para espectrofotómetro Pipetas automáticas de 1.0 ml
Glucosa u algún carbohidrato. Puntillas para pipetas automáticas Pipetas automáticas de 10 µl
Tubos al vacío sin aditivos
Agujas para sistemas al vacío
Reactivo de Glucosa
Estándar de Glucosa
Agua destilada

TÉCNICA:
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo correspondiente para la
obtención de suero).
2. Una vez obtenida la sangre, se administra una solución glucosada de 75 gramos de dextrosa al
paciente y se procede a realizar flebotomías a los 30, 60 y 90 minutos.
3. Marcar 4 tubos de ensayo como “BASAL”, “60 MIN.”, “90 MIN” y “120 MIN”, pipetear los siguientes
volúmenes y mezclar:

Blanco de Estándar Suero en ayuno Suero a los Suero a los Suero a los
reactivo BASAL 60 MIN. 90 MIN 120 MIN
Reactivo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Estándar --- 10 µl --- --- --- ---
Muestra --- --- 10 µl 10 µl 10 µl 10 µl

4. Incubar los tubos de ensayo a 37°C por 5 minutos o a Temperatura ambiente 15-30°C por 10 minutos.
**
5. Leer la absorbancia de Estándar y de Muestra contra el Blanco de Reactivo, trasvasando el contenido
de un tubo a una celdilla para espectrofotómetro.
6. Realizar la lectura a 500 nm antes de 60 minutos. **

CÁLCULOS:
(AM)
Los valores derivan de la siguiente ecuación: Glucosa (mg/dl) = (AE)
× CE

Donde;
“AM” es el valor de la absorbancia de la muestra,
“AE” es la absorbancia del estándar
“CE” es la concentración del estándar en mg/dl. **
**Consultar el inserto del reactivo.

23
VALORES DE REFERENCIA

GLUCEMIA BASAL GLUCOSA POSPRANDIAL A LAS 2 HRS.


O PTOG A LOS 120 MIN
Rango normal 70 - 100 mg/dl > 140 mg/dl
Intolerancia a la Glucosa 101 - 125 mg/dl 141 - 199 mg/dl

Diabetes ≥ 126 mg/dl ≥ 200 mg/dl

TOMADO DE: http://cnp.org.pe/wp-content/uploads/2016/12/GUÍA-ADA-2016_RESUMEN-CLASIFICACIÓN-Y-DIAGNÓSTICO-DE-LA-DIABETES.pdf


http://www1.paho.org/hq/dmdocuments/2010/Guias_ALAD_2009.pdf

REPORTE DE RESULTADOS
PRÁCTICA CURVA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA

CASO 3 IMC 31.14


SEXO MASCULINO Ayuno 108 mg/dl
30 minutos 60 mg/dl
EDAD 20 GLUCOSA BASAL
2 horas 83 mg/dl
3 horas 80 mg/dl
TALLA 1.70 m PESO 90 kg

NOTA: El paciente no ingirió la solución de dextrosa de 75 g.

24
En este caso se observan resultados irregulares en la curva de la glucosa, lo cual
puede ser indicador de un problema clínico, como hiperinsulinismo.
Otra posibilidad de que se dieran estos resultados es la dieta diaria que lleva el
paciente sea rica en grasas y/o la baja actividad física.
Y como en los anteriores casos para revertir esta situación, se recomienda una
dieta balanceada y ejercicio regular.
ESQUEMAS:

CONCLUSIONES:
En materia de análisis no es una prueba fidedigna ya que no se cumplieron con
los protocolos que indica la prueba, por lo cual los resultados obtenidos no se
pueden comparar con los valores de referencia. Cabe recalcar que no se les
administraron a los pacientes la solución de dextrosa y además la alimentación
para las tomas posteriores a la toma en ayuno fue rica en lípidos, por lo cual no
podemos obtener resultados confiables.
Pero sin embargo podemos sugerir a cada uno de los pacientes una dieta
balanceada y actividad física regular.

25
PRACTICA 4. HEMOGLOBINA GLICOSILADA
DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará el análisis de la hemoglobina glicosilada en diferentes
pacientes con patologías previas. Al final deberá correlacionar los resultados con
los procesos fitopatológicos vistos en clase.
El estudiante analizará los datos de los pacientes con sus diferentes resultados
obtenidos, correlacionando así los diferentes procesos moleculares, fisiológicos y
patológicos que se podrán encontrar en su práctica clínica.
FUNDAMENTO
La hemoglobina es una hemoproteína de la sangre, de masa molecular de 64 000
g/mol (64 kDa), de color rojo característico, que transporta el O2, desde los
órganos respiratorios hasta los tejidos, el dióxido de carbono, CO2, desde los
tejidos hasta los pulmones que lo eliminan y también participa en la regulación de
pH de la sangre, en vertebrados y algunos invertebrados.
La hemoglobina es una proteína de estructura cuaternaria, que consta de cuatro
subunidades. Esta proteína forma parte de la familia de las hemoproteínas, ya que
posee 1 grupo hemo en cada subunidad.
La prueba de hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un examen de sangre para la
diabetes tipo 2 y prediabetes. Mide el nivel promedio de glucosa o azúcar en la
sangre durante los últimos tres meses. Los médicos pueden usar la prueba HbA1c
sola o en combinación con otras pruebas de diabetes para hacer un diagnóstico.
También utilizan la HbA1c para ver lo bien que está manejando su diabetes. Esta
prueba es diferente a los controles de azúcar en la sangre que las personas con
diabetes se hacen todos los días.
El resultado de su prueba HbA1c se entrega en porcentajes. Mientras más alto
sea el porcentaje, mayor es su nivel de azúcar en la sangre:
Un nivel de HbA1c normal es menor al 5,7 por ciento
La prediabetes se ubica entre 5,7 a 6,4 por ciento. Tener prediabetes es un factor
de riesgo para desarrollar diabetes tipo 2. Las personas con prediabetes pueden
necesitar repetir las pruebas cada año
La diabetes tipo 2 se ubica por encima del 6,5 por ciento
Si usted tiene diabetes, debe someterse a la prueba HbA1c por lo menos dos
veces al año. Para muchas personas con diabetes, la meta de HbA1c es un
porcentaje inferior a siete. Puede ser diferente para usted. Consulte cuál debería
ser su meta. Si el resultado de HbA1c es demasiado alto, es posible que tenga
que cambiar su plan de cuidado de la diabetes.
26
¿Para qué sirve el examen de hemoglobina glucosilada?
Se diagnostica la enfermedad o la prediabetes.
Logra llevar un control adecuado de la Diabetes.
Previene complicaciones de la Diabetes (pie diabético, cardiopatías, fallas en la
circulación, accidentes cerebrovasculares, problemas de vista o pérdida de visión,
afecciones renales, riesgo de infecciones e impotencia, entre otras).
El Médico verifica si el tratamiento sugerido (dieta, ejercicio, medicamentos orales,
inyecciones de insulina) es el más indicado o se debe cambiar.
Determina un promedio global de la glucosa en sangre en un lapso de tres meses.
La prueba de hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un examen de sangre para la
diabetes tipo 2 y prediabetes. Los médicos pueden usar la prueba HbA1c sola o
en combinación con otras pruebas de diabetes para hacer un diagnóstico.
También utilizan la HbA1c para ver lo bien que está manejando su diabetes. Esta
prueba es diferente a los controles de azúcar en la sangre que las personas con
diabetes se hacen todos los días.
VALORES DE REFERENCIA:
%HbA1c Glucemia Media Estimada(mg/dl)
5 97
6 126
7 154
8 183
9 212
10 240
11 269
12 298

27
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Se analizaron los resultados de tres pacientes de diferentes edades, sexo, tiempo
de evolución de enfermedad, así como diferentes tratamientos de cada uno. Se
obtuvieron los siguientes resultados:
PACIENTE 1
SEXO FEMENINO
PESO 56 kg.
EDAD 67 años
TALLA 1.50 m.
IMC 24.89
GESTA (PARTOS, CESARÉA) 3
EVOLUCIÓN 18 años
GLUCOSA (mg/dl) 130
BUN 12
UREA 24
CREAT 0.8
HBG % 7.4
TRATAMIENTO Metformina y Clorpropamida
NOTA: Se trataba con Glibenclamida, y su médico tratante decidió cambiar su
tratamiento por no haber mejoría con dicho medicamento. Dos meses atrás
presentaba una HBG de 9.9%
PACIENTE 2
SEXO MASCULINO
PESO 104 kg.
EDAD 56 años
TALLA 1.74
IMC 34.35
GESTA 0
EVOLUCIÓN 23 años

28
GLUCOSA (mg/dl) 152
BUN 22
UREA 44
CREAT 0.6
HBG % 10
TRATAMIENTO Se inyectaba insulina de efecto
intermedio (no todos los días).
Actualmente ingiere metformina (2
veces al día) desde hace 1 mes.

PACIENTE 3
SEXO MASCULINO
PESO 115.5 kg.
EDAD 46 años
TALLA 1.72 m.
IMC 39.04
EVOLUCIÓN 17 años
GLUCOSA (mg/dl) 282
UREA 46
CREAT 0.8
HBG % 12.3
GESTAS 0
TRATAMIENTO No tratado, pero inició por 1 semana
un tratamiento (4 de marzo a 11 de
marzo) (no insulina)
Presenta frecuentemente neuropatías,
perdida de dientes.
Reporta en E.G.O
Glucosa:500 mg/dl.
Proteínas 100 mg/dl

29
NOTA: *Fuma *Alcohol *Droga
ESQUEMAS:

Conclusiones:
La HbA1c, es un examen de gran valor en el monitoreo del control glucémico de
los últimos 3 meses en personas diabéticas y prediabéticas. Además, constituye
una herramienta más a tener en cuenta dentro de las pruebas que se utilizan para
realizar el diagnóstico de personas con diabetes mellitus y a identificar individuos
con alto riesgo de padecer esta enfermedad.
Esta práctica nos ayudará a entender la relación de estos resultados con la
diabetes tipo II, ya que estos pacientes ya tienen una evolución de al menos 15
años de esta enfermedad.
Como puede afectar si lleva o no su tratamiento, o si lleva al pie de la letra este
tratamiento. Y ya que la diabetes es una enfermedad del estilo de vida, también se
necesita llevar una dieta balanceada y ejercicio regularmente.
Además, nos llevará a comprender que no tenemos que llegar a este punto, y es
mejor prevenir antes que lamentar.
30
PRÁCTICA 5
PRÁTICA 3 DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL
PRÁCTICA 4 DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
PRÁCTICA 5 DETERMINACIÓN DE COLESTEROL HDL
DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará una determinación de Triglicéridos para cuantificar la concentración en
suero, mediante espectrofotometría. Aprenderá a correlacionar clínicamente los resultados
obtenidos, con los procesos fisiológicos, metabólicos y las patologías propias de este metabolito,
también obtendrá la capacidad de sustentar decisiones médicas en una síntesis del conocimiento
teórico, científico y clínico acerca de la estructura y función del organismo humano en condiciones
normales y patológicas, considerando los niveles de organización molecular, celular, tisular, de
órganos y por aparatos y sistemas; valorando los procesos normales en las diferentes etapas y ciclos
de la vida.

FUNDAMENTO
El colesterol es una sustancia grasa presente en todas las células del organismo. El hígado
produce naturalmente todo el colesterol que necesita para formar las membranas celulares y producir
ciertas hormonas, aunque todas las células del organismo tienen capacidad para sintetizar
colesterol, la mayor parte de la síntesis de éste, que da lugar a lo que se conoce como colesterol
endógeno, se realiza en el hígado. El hepatocito tiene además capacidad de captar colesterol de
las lipoproteínas circulantes, y a la vez de excretarlo formando parte de nuevas lipoproteínas de
origen hepático o transformado en ácidos biliares.
El colesterol de origen extrahepático procede principalmente de la mucosa intestinal. Aquí
se realiza la absorción del colesterol de la dieta (colesterol exógeno), la biosíntesis de nuevo
colesterol y la esterificación para ser almacenado en la célula o secretado a sangre en las
lipoproteínas de origen intestinal. A nivel celular, la importancia del colesterol radica en que forma
parte de la mayoría de las estructuras membranosas de todas las células del organismo.
La determinación del colesterol es una de las herramientas más importantes para el
diagnóstico y clasificación de las lipemias. El aumento del nivel de colesterol es uno de los principales
factores de riesgo cardiovascular. Varias cosas pueden aumentar su riesgo de colesterol alto: la
edad, historia familiar, raza, peso
El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado según la reacción
siguiente:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de colesterol presente en la muestra


ensayada.
Los triglicéridos pertenecen a los acilgliceroles y están constituidos por una molécula de
glicerol esterificada con ácidos grasos, en número de uno (monoglicéridos) a tres
(triglicéridos. Figura 2) son esteres de glicerol y ácidos grasos que provienen de la dieta o
son sintetizados en el hígado principalmente, Estos forman parte de las 5 clases de
lipoproteínas que transportan a los lípidos en el plasma: quilomicrones, constituidos casi
31
totalmente por triglicéridos dietéticos; lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL);
lipoproteínas de densidad intermedia (IDL); lipoproteínas de baja densidad (LDL),
conocidas también como lipoproteínas beta y lipoproteínas de alta densidad (HDL), también
conocidas como lipoproteínas alfa.
Son utilizadas por el tejido adiposo, musculo entre otros sitios anatómicos. Su principal
función es suministrar energía a la célula. Aproximadamente del 40% del consumo de
calorías en la dieta consta de lípidos y alrededor del 35% provienen de lípidos animales y
el 5% de lípidos vegetales polinsaturados. Los triglicéridos constituyen una porción
importante del (98 a 99%) de los lípidos animales y el resto son colesterol y otros lípidos.

Concentraciones elevadas de triglicéridos en suero pueden ser debidas a alteraciones


hepatobiliares, diabetes mellitus, nefrosis, hipotiroidismo, alcoholismo, hiperlipoproteinemia
familiar entre otras. Los padecimientos en los cuales predominan los triglicéridos son:
xantoma eruptivo, lipemia retiniana, organomegalia, pancreatitis, intolerancia a la glucosa,
hiperuricemia, aterosclerosis prematura, diabetes
mellitus insulinopénica, disglobulinemia, lupus
eritematoso, embarazo, uso de hormonas,
enfermedad por almacenamiento de glucógeno,
alcoholismo, enfermedad de Gaucher, mieloma.
Los incrementos en los valores de triglicéridos en el
infarto miocárdico pueden durar un periodo tan
prolongado como de un año. Las concentraciones de
triglicéridos en sí, tienen poco valor de predicción y
aumentan después de la ingestión de grasa.
Figura 2.- Estructura de los
triacilglicéridos.
Las lipoproteínas son moléculas esenciales para el transporte de lípidos en forma de triacilglicéridos,
fosfolípidos, ésteres de colesterol y colesterol libre, así como vitaminas liposolubles, utilizados como
fuentes de energía, síntesis de lípidos para depósito, síntesis de hormonas y sales biliares.
Existe una gran variedad de lipoproteínas entre las cuales se encuentran las VLDL (Lipoproteínas
de muy baja densidad), IDL (Lipoproteínas de densidad intermedia), HDL (Lipoproteínas de alta
densidad), LDL (Lipoproteínas de baja densidad) y la Lp(a). En ocasiones se le llama colesterol
"bueno" al colesterol HDL porque transporta el colesterol de otras partes de su cuerpo de vuelta al
hígado. Su hígado luego elimina el colesterol de su cuerpo. A veces se le llama colesterol "malo" al
colesterol LDL porque un nivel alto de LDL lleva a una acumulación de placa en las arterias
Algunos también la califican como colesterol "malo" al colesterol VLDL porque contribuye a la
acumulación de placa en las arterias. Pero la lipoproteína de muy baja densidad y el LDL son
diferentes; la lipoproteína de muy baja densidad transporta triglicéridos y el LDL principalmente lleva
colesterol El término dislipidemia hace referencia a cualquier alteración en la síntesis, transporte o
metabolismo de las lipoproteínas que altere la concentración plasmática de colesterol total o sus
diferentes fracciones transportadoras, así como los niveles plasmáticos de triacilglicéridos (TAGs).
El estudio de estas anomalías es de importancia, debido a que su alteración cuantitativa o cualitativa
en lo que respecta a su composición representan factores de riesgo para el desarrollo de
enfermedades cardiovasculares debido a su participación en la génesis de partículas altamente
aterogénicos como las LDL oxidadas, LDL pequeñas y densas o remanentes de VLDL y quilomi-
crones. Por otro lado, un nivel de HDL-colesterol inferior a 40 mg/dL se asocia a mayor riesgo de
enfermedades cardiovasculares y la elevación de TAGs se ha señalado como causante de
pancreatitis. Estudios han demostrado que la disminución en un 10% del colesterol total es capaz de
disminuir el riesgo de mortalidad cardiaca en un 15%.
Las lipoproteínas de muy baja de muy baja densidad (VLDL) y de baja densidad (LDL) presentes en
la muestra, precipitan en presencia de fosfotungstato y iones magnesio. El sobrenadante contiene
las lipoproteínas de elevada densidad (HDL), cuyo colesterol se cuantifica espectrofotométricamente
mediante las reacciones acopladas descritas a continuación:
32
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de colesterol HDL presente en la muestra
ensayada. (4)

MATERIAL BIOLOBICO MATERIAL DE LABORATORIO Y REACTIVOS EQUIPO


Suero basal (ayuno) Tubos de Ensayo (4) 13x100 y (4)12x75 Espectrofotómetro
Gradilla Celdillas para espectrofotómetro
Pipetas Pasteur con bulbo Centrífuga
Puntillas para pipetas automáticas Baño María
Tubos al vacío sin aditivos Pipetas automáticas de 1.0 ml
Agujas para sistemas al vacío Pipetas automáticas de 10 µl
Reactivo de Triglicéridos
Estándar de Triglicéridos
Agua destilada

TÉCNICA
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo correspondiente para
la obtención de suero).
2. Una vez coagulada la sangre, centrifugar la muestra a 3000 r.p.m. durante 5 minutos. Retirar el tubo
de la centrifuga y separar el suero del paquete globular.
3. Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.
4. Para medir la concentración sérica de triglicéridos, pipetear en tres tubos de ensayo los siguientes
volúmenes (ml) y mezclar:
Blanco de reactivo Estándar Muestra
Reactivo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Estándar --- 0.01 ml ---
Muestra --- --- 0.01 l

5. Incubar los tubos de ensayo a 37°C por 5 minutos o a Temperatura ambiente 16-25°C por 15
minutos.
6. Leer la absorbancia de Estándar y de Muestra contra el Blanco de Reactivo, trasvasando el contenido
de un tubo a una celdilla para espectrofotómetro. La lectura se realiza a 500 nm el color es estable
durante al menos 2 horas.
**Consultar el inserto del reactivo.

33
CÁLCULOS.
Los valores derivan de la siguiente ecuación:
(𝐀𝐌)
Triglicéridos (mg/dl) = (𝐀𝐄)
× 𝐂𝐄
Dónde: AM es el valor de la absorbancia
AE es la absorbancia del estándar
CE es Concentración del estándar en mg/dl.
VALORES DE REFERENCIA

COLESTEROL
NORMAL < 200 mg/dl
MODERADO 200 - 239 mg/dl
ALTO >240 mg/dl

TRIGLICÉRIDOS mg/dl TRIGLICERIDOS mmol/L


BAJO Hasta 150 Hasta 1.7
INTERMEDIO 151 – 199 1.71 - 2.25
ALTO 200 – 499 2.26 - 5.64
MUY ALTO ≥ 500 > 5.65

Fuente: Furgione A., Sánchez.D. y cols. ”Dislipidemias primarias como factor de riesgo para la enfermedad coronaria”. (2009). Revista
Latinoamericana de Hipertensión. Vol. 4 Nº 1.

VALORES DE REFERENCIA *
COLESTEROL Hombres: > 45 mg/dl
HDL Mujeres: > 55 mg/dl

COLESTEROL HDL**
Riesgo elevado Hasta 35 mg/dl = 0.91 mmol/L
Riesgo bajo > 60 mg/dl = > 1.58 mmol/L

REPORTE DE RESULTADOS
CASO 1 IMC 25.35
SEXO MASCULIN
EDAD 22 TRIGLICERIDOS 156 TRIGLICERIDOS 156 mg/dl
O
TALLA 1.72 m PESO 75 kg COLESTEROL 206 VALORES DE REFRENCIA Hasta 150 mg/dl

CASO 2 IMC 24.35


SEXO MASCULINO EDAD 19 TRIGLICERIDOS 52 TRIGLICERIDOS 52 mg/dl
TALLA 1.71 m 71.6 VALORES DE REFRENCIA Hasta 150 mg/dl
PESO COLESTEROL 145
kg

34
ESQUEMAS:

CONCLUSIONES
Se establece que un rango entre 50 y 150 mg/dl de sangre de estas grasas son
valores normales, por lo tanto, no son preocupantes. Tanto por encima como por
debajo de estos límites, se habla de niveles ligeramente peligrosos.
Así, valores entre 150 y 200 mg/dl de sangre son niveles ligeramente altos, y una
concentración entre 50-35 mg/dl es un nivel ligeramente bajo. En ambos casos se
trata de situaciones que se pueden controlar, principalmente con hábitos dietéticos
más saludables y equilibrados.
Si los índices de triglicéridos son excesivamente bajos, lo primero que se debe
hacer es visitar a un especialista médico y atender sus indicaciones. No obstante,
en el segundo caso la hipotrigliceridemia solo es ligera, una buena dinámica para
recuperar los niveles normales de estas grasas es cuidar la alimentación.
Lo importante en los casos de los que se diagnostican triglicéridos bajos o por
debajo del rango de la normalidad, es hacer una evaluación más completa, para
ver de dónde proviene ese desajuste, ya que hay que tener en cuenta que son
necesarios para el funcionamiento de nuestro organismo y para mantenernos
saludables.

35
PRÁCTICA 6
PRÁCTICA 11 DETERMINACIÓN DE UREA
FUNDAMENTO:
La urea es el producto final del metabolismo de las proteínas; se forma en el hígado a partir de su
destrucción. Puede aparecer la urea elevada en sangre (uremia) en dietas con exceso de proteínas,
enfermedades renales, insuficiencia cardiaca, hemorragias gástricas, hipovolemia y obstrucciones
renales.
La urea presente en la muestra reacciona con el o-ftalaldehído en medio ácido originando un
complejo coloreado que puede cuantificarse espectrofotométricamente:
La reacción enzimática utilizada en esta prueba es la siguiente:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de Urea en la muestra ensayada.

La urea se forma en el hígado, es filtrada y absorbida por los riñones.

Constituye la fracción de nitrógeno no proteico más importante en la mayoría de los líquidos


biológicos.

En el hombre, es el principal producto final del metabolismo proteico.

Representa el 85% del nitrógeno urinario, por lo que no resulta sorprendente el papel fundamental
que juega el riñón en la regulación sistémica de los niveles de urea.

Un aumento de la concentración sérica de urea se interpreta como una posible disfunción renal, la
urea sirve para evaluar la función renal .

La reabsorción renal de urea es mayor cuando el flujo es lento y menor cuando aumenta la diuresis.

Los niveles séricos de urea están relacionados con la dieta y el metabolismo proteico.

Variables por enfermedad

Aumentado: En la insuficiencia cuando el valor del filtrado glomerular se ha reducido 1/5 del normal,
por destrucción del parénquima renal; nefroesclerosis, tuberculosis renal, necrosis cortical, gota
crónica, malignidad, hiperparatiroidismo, síndrome de Reye.

Disminuido: Acromegalia, fibrosis quística, cirrosis hepática, falla hepática, hepatitis tóxica,
preeclampsia, eclampsia, síndrome nefrótico, enfermedad celíaca

36
MATERIAL Y EQUIPO:

MATERIAL MATERIAL DE LABORATORIO Y EQUIPO


BIOLÓGICO REACTIVOS
Suero basal Tubos de Ensayo 13x100 y 12x75 Espectrofotómetro
(ayuno) Gradilla Celdillas para
Pipetas Pasteur con bulbo espectrofotómetro
Puntillas para pipetas automáticas Centrífuga
Agujas para sistema al vacío Baño María
Tubos al vacío sin aditivos Pipetas automáticas de
Reactivo de Urea 1.0 ml
Estándar de Urea Pipetas automáticas de
Agua destilada 10 µl

TÉCNICA:
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo
correspondiente para la obtención de suero).
2. Una vez coagulada la sangre, centrifugar la muestra a 3000 r.p.m. durante 5
minutos. Retirar el tubo de la centrifuga y separar el suero del paquete
globular.
3. Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.
4. Pipetear en tres tubos ensayo rotulados como: “BLANCO”, “ESTANDAR” y
“MUESTRA”, las siguientes cantidades de reactivo y muestra:

Blanco Estándar Muestra


Reactivo 1 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Estándar --- 25 µl ---
Muestra --- --- 25 µl
Mezclar y añadir :

37
Reactivo 2 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml

5. Mezclar e incubar los tubos a 37°C por 15 minutos.


6. Leer la absorbancia de Estándar y de Muestra contra el Blanco de Reactivo,
trasvasando el contenido de un tubo a una celdilla para espectrofotómetro.
La lectura se realiza a 510 nm.
CÁLCULOS.
No se realizan cálculos debido a que la muestra se procesa en un equipo automatizado y el da el
valor del analito.
VALORES DE REFERENCIA
VALORES DE
PARÁMETROS
REFERENCIA
Adultos 10 -20 mg/dl
Niños 5 -18 mg/dl
Lactantes 5 -18 mg/dl
Recién nacidos 3 -12 mg/dl
.
REPORTE DE RESULTADO
RESULTADOS:
UREA VALORES DE REFERENCIA
mg/dl 10 -20 mg/dl
PACIENTE 1 PACIENTE 2
EDAD:19 AÑOS EDAD: 46 AÑOS
ESTATURA: 1.71 m. ESTATURA:1.72 m.
PESO: 73 KG. PESO: 115.5 KG.
i.M.C.: 24.96 I.M.C.:39.04
UREA: 32 mg/dl UREA:46 mg/dl
BUN: 16 mg/dl BUN: 23.0 mg/dl
CREATININA: 1.0 mg/dl CREATININA 0.89 mg7dl
Ácido Úrico: 4.8 mg/dl Ácido Úrico: 6.6 mg/dl

38
ESQUEMAS:

CONCLUSIONES:
La urea es un residuo de la descomposición de las proteínas y por lo tanto está
directamente relacionada con la cantidad de proteínas que comemos.
Normalmente, los riñones filtran la urea de la sangre, pero cuando los riñones no
funcionan bien, la cantidad de Urea filtrada es menor y aumenta en la sangre. El
nivel normal en sangre es inferior 40 mg/dl.

El aumento de Urea puede producir malestar digestivo (náuseas y vómitos) y


cuando los niveles son muy altos, alteraciones en el nivel de conciencia (uremia).
Cuando hay Insuficiencia renal, se disminuye la cantidad de proteínas de la dieta
para tener menos síntomas de uremia.

En ambos pacientes se observa la urea se encuentra dentro de los valores


normales, esto indica a que hay una buena función renal.

39
PRÁCTICA 12 - DETERMINACIÓN DE CREATININA

DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará la determinación en suero de Creatinina mediante
espectrofotometría. Al final deberá correlacionar clínicamente los resultados
obtenidos con los procesos fisiológicos y metabólicos normales y las patologías
descritas en clase.
El estudiante obtendrá la capacidad de sustentar decisiones médicas en una
síntesis del conocimiento teórico, científico y clínico acerca de la estructura y función
del organismo humano en condiciones normales y patológicas, considerando los
niveles de organización molecular, celular, tisular, de órganos y por aparatos y
sistemas; valorando los procesos normales en las diferentes etapas y ciclos de la
vida. (1)

FUNDAMENTO:
La Creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente
de los músculos y puede ser transformado en ATP, fuente de energía para las
células.
La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular.
Varía poco y los niveles suelen ser muy estables. Su eliminación es a través del
riñón, en una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de Urea,
Creatinina y Ácido Úrico.
Niveles altos de creatinina es indicativo de patología renal. El diagnóstico clínico
debe hacerse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. (4,11)
Una prueba de creatinina revela información importante sobre los riñones.La
creatinina es un producto químico de desecho que lo produce tu metabolismo
muscular y, en una menor medida, el consumo de carne. Los riñones saludables
filtran la creatinina y otros productos de desecho de la sangre. Los productos de
desecho filtrados salen del cuerpo con la orina.

40
Si los riñones no funcionan adecuadamente, se podrá acumular un mayor nivel de
creatinina en la sangre. Una prueba de creatinina sérica mide el nivel de creatinina
en la sangre y proporciona una estimación de cuán bien los riñones realizan el
filtrado (tasa de filtración glomerular). La prueba de creatinina en la orina puede
medir la creatinina en la orina.

Una prueba de creatinina sérica, que mide el nivel de creatinina en la sangre, puede
indicar si los riñones funcionan correctamente. La frecuencia con la que necesites
realizar pruebas de creatinina depende de las enfermedades no diagnosticadas y el
riesgo de daño renal. Por ejemplo:

Si tienes diabetes tipo 1 o tipo 2, el médico podría recomendarte que realices una
prueba de creatinina al menos una vez al año.

Si tienes una enfermedad renal, el médico podría recomendarte pruebas de


creatinina a intervalos regulares para controlar tu enfermedad.

Si tienes una enfermedad que puede afectar los riñones, como presión arterial alta
o diabetes, o estás tomando medicamentos que pueden afectar los riñones, el
médico podría recomendarte pruebas de creatinina.

Los resultados de los análisis de creatinina en sangre se miden en miligramos por


decilitro o en micromoles por litro. El intervalo normal para la creatinina en sangre
puede ser de 0,84 a 1,21 miligramos por decilitro (74,3 a 107 micromoles por litro),
si bien esto puede variar de un laboratorio a otro, entre hombres y mujeres, y según
la edad. Considerando que la cantidad de creatinina en sangre aumenta con la masa
muscular, los hombres usualmente tienen niveles de creatinina superiores a las
mujeres.

Por lo general, un alto nivel de creatinina sérica significa que los riñones no
funcionan bien. Tu nivel de creatinina puede aumentar de manera temporal si estás
deshidratado, tienes un bajo volumen de sangre, comes mucha carne o tomas
determinados medicamentos. El suplemento dietario creatina puede tener el mismo
efecto.

41
Si el nivel de creatinina sérica es superior al normal, es posible que el médico
recomiende confirmar los resultados con otra prueba de orina o análisis de sangre.
Si el daño renal es una inquietud, es importante controlar cualquier trastorno que
pueda contribuir al daño. Es especialmente importante controlar la presión arterial,
lo que a menudo requiere tomar medicamentos. No puedes revertir el daño renal
permanente, pero con un tratamiento adecuado puedes prevenir daños mayores.

MATERIAL Y EQUIPO:
MATERIAL MATERIAL DE LABORATORIO Y EQUIPO
BIOLÓGICO REACTIVOS
Suero basal Tubos de Ensayo 13x100 y 12x75 Espectrofotómetro
(ayuno) Gradilla Celdillas para
Pipetas Pasteur con bulbo espectrofotómetro
Puntillas para pipetas automáticas Centrífuga
Agujas para sistema al vacío Baño María
Tubos al vacío sin aditivos Pipetas automáticas de
Reactivo 1 de Creatinina: Ácido 1.0 ml
pícrico Pipetas automáticas de
Reactivo 2 de Creatinina: Hidróxido 10 µl
sódico
Estándar de Creatinina
Agua destilada

TÉCNICA:
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo
correspondiente para la obtención de suero).
2. Una vez coagulada la sangre, centrifugar la muestra a 3000 r.p.m. durante 5
minutos. Retirar el tubo de la centrifuga y separar el suero del paquete
globular.
3. Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.

42
4. Preparar el “Reactivo de trabajo” mezclando partes iguales del Reactivo 1
(R1) y Reactivo 2 (R2).
5. Pipetear en tres tubos ensayo rotulados como: “BLANCO”, “ESTANDAR” y
“MUESTRA”, las siguientes cantidades de reactivo y muestra.

Blanco Estándar Muestra


Reactivo de Trabajo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Estándar --- 100 µl ---
Muestra --- --- 100 µl

6. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.


7. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y al cabo de 90 segundos
(A2) de agregar la muestra.
8. Calcular la Diferencia de absorbancia (ΔA): ΔA= A2 – A1; del Estándar y de
Muestra contra el Blanco de Reactivo. La lectura se realiza a 492 nm (490 –
510 nm). El color es estable como mínimo 30 minutos
CÁLCULOS.
No se realizan cálculos debido a que la muestra se procesa en un equipo
automatizado y el da el valor del analito.

VALORES DE REFERENCIA

VALORES DE
PARÁMETROS
REFERENCIA
Adultos Hombres 0.6 – 1.2 mg/dL
Adultos Mujeres 0.5 – 1.1 mg/dL

Fuente: Pagana K., Pagana T. “Laboratorio clínico. Indicaciones e interpretación de


resultados”. 1ª. Edición. Trad. M.C. Maria Elena Buschbeck Alvarado. Ed. Manual
moderno. 2015.

43
RESULTADOS:
Creatinina sérica del paciente VALORES DE REFERENCIA
Hombres 0.6 – 1.2 mg/dL
mg/dl
Mujeres 0.5 – 1.1 mg/dL

PACIENTE 1 PACIENTE 2
EDAD:19 AÑOS EDAD: 46 AÑOS
ESTATURA: 1.71 m. ESTATURA:1.72 m.
PESO: 73 KG. PESO: 115.5 KG.
i.M.C.: 24.96 I.M.C.:39.04
UREA: 32 mg/dl UREA:46 mg/dl
BUN: 16 mg/dl BUN: 23.0 mg/dl
CREATININA: 1.0 mg/dl CREATININA 0.89 mg7dl
Ácido Úrico: 4.8 mg/dl Ácido Úrico: 6.6 mg/dl

CONCLUSIONES:
La creatinina sérica es un residuo de la masa y actividad muscular. Su nivel en
sangre es el dato más objetivo y fiable para conocer cómo funcionan los riñones.
De este dato y en base a unas fórmulas en la que se tiene en cuenta la edad, el
sexo y el peso, podemos calcular, lo que podríamos decir, el porcentaje de función
renal (filtrado glomerular). A medida que la creatinina sube en sangre vemos que el
porcentaje de función renal o filtrado baja.
En este caso ambos pacientes tienen la creatinina en niveles normales esto es
indicativo de una buena función renal

44
PRACTICA 13 - DETERMINACION DE ÁCIDO ÚRICO

DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante realizará la determinación en suero de Ácido úrico, mediante
espectrofotometría. Al final deberá correlacionar clínicamente los resultados
obtenidos con los procesos fisiológicos y metabólicos normales y las patologías
descritas en clase.
El estudiante obtendrá la capacidad de sustentar decisiones médicas en una
síntesis del conocimiento teórico, científico y clínico acerca de la estructura y función
del organismo humano en condiciones normales y patológicas, considerando los
niveles de organización molecular, celular, tisular, de órganos y por aparatos y
sistemas; valorando los procesos normales en las diferentes etapas y ciclos de la
vida.
FUNDAMENTO:
El ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas. Casi la
mitad del total del ácido úrico se elimina y se reemplaza diariamente por la excreción
en la orina y por la degradación bacteriana en el tracto gastrointestinal.
La formación de ácido úrico requiere dos pasos, ambos catalizados por la enzima
xantina oxidasa :
a. Oxidación de hipoxantina a xantina
b. Oxidación de xantina a ácido úrico.
La xantina oxidasa es la enzima fundamental en la degradación de las purinas. Es
excepcional, porque se trata de una flavoproteína que contiene hierro y molibdeno,
y utiliza oxígeno como sustancia oxidante.
En las personas, el ácido úrico formado se excreta por la orina. El ácido úrico
es insoluble. El pH ácido de la orina favorece su precipitación cuando las
concentraciones son altas en forma de urato sódico. La hiperuricemia, es decir, una
concentración sérica de ácido úrico elevada, puede producir gota.
Los niveles elevados de ácido úrico están asociados comúnmente con
retención de nitrógeno y de urea, de creatinina y de otros constituyentes no
proteicos. La cuantificación del ácido úrico es un auxiliar en el diagnóstico para la
45
gota, insuficiencia renal, desordenes mieloproliferativos y otras condiciones en las
que la causa de hiperuricemia no está bien determinada. (4, 10, 11)
El ácido úrico se determina comúnmente por el método de fosfotungstato y
por el método de reducción de hierro. Debido a interferencias del suero, se ha usado
ampliamente la enzima uricasa. La uricasa es más específica ya que actúa solo
sobre el ácido úrico. La reacción enzimática utilizada en esta prueba es la siguiente:

El ácido úrico se convierte en alantoina y peróxido de hidrogeno por la acción de la


uricasa. El peróxido de hidrogeno inicia la unión de 4-aminoantipirina al acido 3,5-
dicloro-2-hidroxibencensulfónico (DHBS) para formar el cromógeno que se mide a
520 nm y el cual es proporcional a la cantidad de peróxido de hidrogeno generado
a partir del ácido úrico. (4)
Un alto nivel de ácido úrico, o hiperuricemia, es un exceso de ácido úrico en la
sangre. El ácido úrico se forma durante la descomposición de purinas, que se
encuentran en ciertos alimentos y también las produce el cuerpo.
Una vez producido, la sangre transporta el ácido úrico y este pasa por los riñones,
donde la mayor parte se filtra y se convierte en orina.
Aproximadamente una de cada cinco personas tiene un nivel de ácido úrico alto.
Esto puede estar relacionado con crisis de gota o el desarrollo de cálculos renales.
La mayoría de las personas con niveles de ácido úrico altos no tienen ningún
síntoma ni problemas relacionados.
La mayoría de las veces, hay un alto nivel de ácido úrico cuando los riñones no
eliminan el ácido úrico de manera eficaz. Los motivos que pueden causar esta
disminución en la eliminación del ácido úrico incluyen consumir alimentos pesados,
tener sobrepeso, padecer diabetes, tomar determinados diuréticos (a veces
llamados «píldoras de agua») y beber demasiado alcohol. Otras causas menos
frecuentes son una dieta rica en elementos que contienen purinas o el hecho de que
el cuerpo produzca demasiado ácido úrico.

46
Algunos de los factores que pueden aumentar el nivel de ácido úrico en la sangre
son los siguientes:

 Diuréticos (diuréticos)
 Tomar demasiado alcohol
 Genética (tendencias heredadas)
 Hipotiroidismo (tiroides hipoactiva)
 Medicamentos inmunodepresores
 Niacina o vitamina B3
 Obesidad
 Psoriasis
 Dieta rica en purinas: hígado, carne picada, anchoas, sardinas, salsa espesa,
frijoles secos y guisantes, champiñones y otros alimentos
 Insuficiencia renal (incapacidad de los riñones de filtrar desechos)
 Síndrome de lisis tumoral (una liberación rápida de células en la sangre que
provocan ciertos tipos de cáncer o la quimioterapia que se utiliza para
tratarlos)
Además, pueden controlar tus niveles de ácido úrico cuando te sometas a
quimioterapia o a un tratamiento con radiación contra el cáncer.
El exceso de ácido úrico en sangre puede producir gota y puede favorecer el
desarrollo de cálculos de ácido úrico en el riñón. La gota es una enfermedad
producida por el exceso de ácido úrico, que se puede presentar de forma aguda y
de forma crónica.
La forma aguda es lo que se llama un ataque agudo de gota y que se caracteriza
por un dolor intenso que aparece bruscamente y con signos inflamatorios, es
decir, con enrojecimiento y calor y cuya localización más frecuente (60%) de los
casos es en la articulación del dedo gordo del pie y entonces se llama podagra.
También puede afectar a otras articulaciones como el tobillo 15%, rodilla 10%
otras articulaciones del pie 2%, codo 2% etc.

47
MATERIAL Y EQUIPO:
MATERIAL MATERIAL DE LABORATORIO Y EQUIPO
BIOLÓGICO REACTIVOS
Suero basal Tubos de Ensayo 13x100 y 12x75 Espectrofotómetro
(ayuno) Gradilla Celdillas para
Pipetas Pasteur con bulbo espectrofotómetro
Puntillas para pipetas automáticas Centrífuga
Agujas y tubos al vacío sin aditivos Baño María
Reactivo de ácido úrico Pipetas automáticas de
Estándar de ácido úrico 1.0 ml
Agua destilada Pipetas automáticas de
10 µl

TÉCNICA:
1. Realizar una extracción de sangre venosa a un paciente en ayuno (en el tubo
correspondiente para la obtención de suero).
2. Una vez coagulada la sangre, centrifugar la muestra a 3000 r.p.m. durante 5
minutos. Retirar el tubo de la centrifuga y separar el suero del paquete
globular.
3. Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.
4. Pipetear en tres tubos ensayo rotulados como: “BLANCO”, “ESTANDAR” y
“MUESTRA”, 1 ml de Reactivo de trabajo.
5. Preincube los tubos a 37°C por 3 minutos.
6. Agregar 0.025 ml (25 µl) de muestra y/o estándar en los tubos
correspondientes y mezcle.
7. Incubar los tubos de ensayo a 37°C por 10 minutos.
8. Leer la absorbancia de Estándar y de Muestra contra el Blanco de Reactivo,
trasvasando el contenido de un tubo a una celdilla para espectrofotómetro.
La lectura se realiza a 520 nm.

48
CÁLCULOS.
No se realizan cálculos debido a que la muestra se procesa en un equipo
automatizado y el da el valor del analito.
VALORES DE REFERENCIA

VALORES DE
PARÁMETROS
REFERENCIA
Hombres: 4.0 - 8.5 mg/dl
Ácido úrico
Mujeres: 2.7 - 7.3 mg/dl

Fuente: Pagana K., Pagana T. “Laboratorio clínico. Indicaciones e interpretación de


resultados”. 1ª. Edición. Trad. M.C. Maria Elena Buschbeck Alvarado. Ed. Manual
moderno. 2015.
RESULTADOS:
VALORES DE
ÁCIDO ÚRICO REFERENCIA
Hombres: 4.0 - 8.5 mg/dl
mg/dl
Mujeres: 2.7 - 7.3 mg/dl

PACIENTE 1 PACIENTE 2
EDAD:19 AÑOS EDAD: 46 AÑOS
ESTATURA: 1.71 m. ESTATURA:1.72 m.
PESO: 73 KG. PESO: 115.5 KG.
i.M.C.: 24.96 I.M.C.:39.04
UREA: 32 mg/dl UREA:46 mg/dl
BUN: 16 mg/dl BUN: 23.0 mg/dl
CREATININA: 1.0 mg/dl CREATININA 0.89 mg7dl
Ácido Úrico: 4.8 mg/dl Ácido Úrico: 6.6 mg/dl

49
ESQUEMAS:

CONCLUSIONES:
El ácido úrico, es enzima y compuesto orgánico que se genera a través de la
digestión de las proteínas. Es, además, un desecho del cuerpo que se encuentra en
la sangre y protege al organismo, esto lo hace eliminando las purinas. Viaja desde
la sangre a los riñones, y luego se elimina a través de la orina.
Cuando se elevan los niveles, lo hace para cuidar las articulaciones y al sistema
sanguíneo. Dicho aumento indica que los riñones no han sido capaces de eliminar
lo innecesario de la sustancia, esto ocurre cuando existen daños en los riñones.
En ambos pacientes los niveles de ácido úrico son normales lo cual es indicativo de
una buena función renal

50
PRÁCTICA 7 CITOMETRIA HEMATICA
DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante analizará e interpretará los resultados de una citometría hemática y al final deberá
correlacionar clínicamente los resultados obtenidos con los procesos fisiológicos y metabólicos
normales y las patologías descritas en clase.
El estudiante obtendrá la capacidad de sustentar decisiones médicas en una síntesis del
conocimiento teórico, científico y clínico acerca de la estructura y función del organismo humano
en condiciones normales y patológicas, considerando los niveles de organización molecular, celular,
tisular, de órganos y por aparatos y sistemas; valorando los procesos normales en las diferentes
etapas y ciclos de la vida.

FUNDAMENTO
La citometría hemática comprende el análisis detallado de cada uno de los datos que la conforman,
los cuales se dividen en tres partes: datos de la serie roja, datos de la serie blanca, y de la serie
trombocitíca. De manera correcta, la medición de estos parámetros e índices eritrocitarios debe
hacerse empleando contadores de partículas por Citometría de flujo.

SERIE ROJA
Eritrocitos: número de eritrocitos en el volumen especificado de sangre total. Medido directamente
en su baño. Expresado como millones de eritrocitos por microlitro de sangre total.

Hemoglobina: Es un parámetro medido directamente en el baño de leucocitos; la hemoglobina


liberada por la lisis de los eritrocitos se transforma en un pigmento estable cuyo contenido de
cianuro es medido fotométricamente a 525 nm, y la absorbancia es comparada a una lectura del
blanco de diluyente y un factor de calibración, expresándose en gr/dl.

Hematócrito: Se mide en porcentaje (%) y representa la proporción de eritrocitos en la sangre total.


Este parámetro eritrocítico no es medido directamente en los citómetros de flujo sino a partir de la
medición del número de eritrocitos y del volumen globular medio entre diez, por lo que es un
parámetro eritrocítico con menor precisición y exactitud que la hemoglobina y glóbulos rojos.

Volumen globular medio: (VGM) se mide en fentolitros (fL). Este parámetro es medido
directamente con citometría de flujo, ya que cada eritrocito pasa a través de un orificio por donde
fluye una corriente eléctrica, produciendo la célula un pulso de voltaje cuya magnitud es
proporcional al volumen celular.

Hemoglobina corpuscular media: (CHM) se expresa en picogramos (Pg). Indica el peso promedio
de hemoglobina en cada eritrocito. Los citómetros de flujo determinan este índice dividiendo la
hemoglobina entre la cuenta de glóbulos rojos, multiplicando el resultado
por diez. A partir de que este índice es calculado a través de dos datos obtenidos directamente de
la citometría de flujo, es un índice confiable.

Concentración media de hemoglobina corpuscular: (CMCH) es una expresión de la concentración


promedio de la hemoglobina en los eritrocitos. Este índice eritrocítico se determina midiendo la
hemoglobina multiplicada por 100 entre el hematócrito. Como el hematócrito es un parámetro

51
calculado a partir del número de eritrocitos y del VGM en los citómetros de flujo, CHCM es un dato
inexacto.

SERIE BLANCA
Leucocitos: Número de leucocitos en el volumen determinado de sangre total. Medido
directamente en su propio baño expresado en miles de leucocitos por microlitro de sangre total.
Ante todo, es necesario recordar los valores de referencia de la leucograma normal (recuento global
y diferencial).
Algunos autores plantean que el término leucocitosis se refiere al aumento del recuento global de
leucocitos por encima de 11 x 109/L.
Otros lo definen como un aumento del recuento global de leucocitos mayor de 2 desviaciones
estándar por encima de la media, que en la mayoría de los laboratorios es mayor de 20 x 109/L;
puede incluir uno o más de los subtipos de leucocitos circulantes, los cuales deben valorarse siempre
teniendo en cuenta sus recuentos absolutos.
La fórmula para calcular el recuento absoluto (CAL) de un tipo determinado de leucocito es:
CAL = % de la célula x recuento global de leucocitos x 0,01.

Fuente: Suardíaz J., Cruz C., Colina A. “Laboratorio Clínico”. (2010). Ed. Ciencias Médicas. La Habana, Cuba.

SERIE TROMBOCITICA
Plaquetas: Número de trombocitos en el volumen especificado de sangre total. Medido
directamente en el baño de eritrocitos, expresado en miles de trombocitos por microlitro de sangre
total.
Las plaquetas son células anucleadas pequeñas que se originan de la segmentación del citoplasma
de los megacariocitos maduros. Los megacariocitos son las células hematopoyéticas mayores de la
médula ósea, constituyen células poliploides que se desarrollan mediante un proceso de
endomitosis donde sufren de 3 a 5 ciclos de duplicación cromosómica sin división citoplasmática.

El proceso de liberación de las plaquetas o fragmentación aparece en los sinusoides de la médula


ósea y en los capilares de la circulación pulmonar. Las plaquetas circulan de 7 a 11 días. El
compartimento plaquetario periférico está formado por 2/3 de plaquetas que permanece
circulando y 1/3 en el bazo.
Solo una pequeña fracción de la masa de plaquetas es consumida en condiciones normales en la
hemostasia; el resto, es removida al término de su vida por el sistema fagocítico mononuclear.

52
La concentración de plaquetas en la sangre oscila entre 140 y 450 x 109/L. La disminución del
número de plaquetas estimula la trombogénesis. Este proceso es regulado por la trombopoyetina
(TPO)

NOTA: Los contadores de flujo pueden dar datos equivocados cuando se encuentran con
plaquetas gigantes o cuando se forman grumos de plaquetas, ya que el volumen de un grumo de
plaquetas es alto, el citómetro lo registra como una célula de mayor tamaño o diferente, lo que
origina un número de plaquetas falsamente disminuido; en los padecimientos en donde se
produce fragmentación eritrocítica, presencia de blastos en Leucemias, todas las porciones
menores de 20 fL son clasificados por el citómetro de flujo como plaquetas, produciendose asi un
número de plaquetas falsamente elevado.

53
REPORTE DE RESULTADOS:
PACIENTE FEMENINO
EDAD 25 AÑOS
PESO 61.5 KG.
TALLA 1.66 M.
I.M.C 22.3
WBC(LEUCOCITOS) 6.2
WRC(ERITROCITOS) 3.05
HB 10.3
HETO 29.6
VCM 97
HCM 33.7
CCHM 34.8
PLT 234
VPM 8.4

PACIENTE FEMENINO
EDAD 29 AÑOS
PESO 59 KG.
TALLA 1.53 M.
IMC 25.2
WBC(LEUCOCITOS) 8.3
WRC(ERITROCITOS) 4.70
HB 12.2
HETO 37.3
VCM 78
HCM 25.4
CCHM 32.6

54
PLT 327
VCM 8.2

ESQUEMAS:

CONCLUSIÓN:
El primer paciente presento valores normales en casi todos los parámetros porque
salió un poco bajo en hemoglobina, eritrocitos y hematocrito, lo cual puede sugerir
una leve anemia.
El segundo paciente en cambio presento valores un poco bajos en VCM, HCM Y
CCHM lo cual sugiere una anemia microcítica.
Este examen es muy importante ya que puede detectar la presencia de muchas
enfermedades habituales y frecuentes como pueden ser la anemia, infecciones y
orientar sobre la presencia de procesos inflamatorios crónicos, y ya a cierta edad
como después de cumplidos los 40 años es recomendable que nos la hagamos
para poder descartar cualquier anomalía.

55
PRÁCTICA 8 - EXAMEN GENERAL DE ORINA (E.G.O.)
DESARROLLO DE COMPETENCIAS
El estudiante aprenderá a realizar de manera correcta el Examen General de Orina, cumpliendo con
los requisitos de calidad. Aprenderá a utilizar criterios estandarizados para la interpretación y reporte de
resultados del examen físico y químico, así como la interpretación de los hallazgos en el examen al microscopio
y la correlación clínica con las diferentes patologías descritas en clase.
El estudiante obtendrá la capacidad de sustentar decisiones médicas en una síntesis del conocimiento
teórico, científico y clínico acerca de la estructura y función del organismo humano en condiciones normales y
patológicas, considerando los niveles de organización molecular, celular, tisular, de órganos y por aparatos y
sistemas; valorando los procesos normales en las diferentes etapas y ciclos de la vida. (1)
.
FUNDAMENTO
La orina es producida por los riñones, los cuales filtran productos de desecho eliminándolos de la
sangre, a la vez que ayudan a regular la cantidad de agua del organismo, conservando al mismo tiempo
proteínas, electrolitos y otros compuestos que el organismo puede reutilizar.
Los análisis de orina realizados en el laboratorio clínico, puede proporcionar una información amplia,
variada y útil del riñón de un individuo y de las enfermedades sistémicas que pueden afectar este órgano
excretor. Por medio de este análisis, es posible elucidar tanto desórdenes estructurales (anatómicos) como
desórdenes funcionales (fisiológicos) del riñón y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronóstico. La
realización cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnóstico diferencial de
numerosas enfermedades del sistema urinario. permite evaluar distintos órganos y sistemas tales como la
sangre, el páncreas endocrino, el hígado y el sistema inmunológico, así como algunas enfermedades
neoplásicas y musculares La composición normal de la orina es de un 95% de agua, un 2% de sales (orgánicas
e inorgánicas), un 2,5% de productos del metabolismo de las proteínas(urea, ácido úrico, creatinina) y pigmentos
que le confieren su color amarillento característico (urocromo, urobilinógeno, protoporfirina). Usualmente, los
datos de laboratorio obtenidos por medio de este análisis se logran sin dolor, daño o tensión para el paciente.
Esta es la razón por la cual, la realización e interpretación correcta del análisis de orina, por parte del laboratorio
permanecerá siempre como una herramienta esencial de la práctica clínica. (2,11)
En la actualidad, se practican tres tipos de exámenes de orina: análisis de orina por tira húmeda,
empleado generalmente por los médicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de
análisis húmedo de la orina, comúnmente llamado análisis básico o rutinario de orina; y citodiagnóstico de la
orina, que es una evaluación citológica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los análisis
realizados por medio de la tira reactiva. El análisis de orina realizado con la tira húmeda es un ensayo de
primera etapa para la detección y monitoreo de pacientes con anormalidades químicas. Los pacientes diabéticos
a menudo monitorean permanentemente su propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e
infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa. (11, 15)
El análisis de orina rutinario proporciona, a costos razonables, un tamizaje adecuado para la detección
de anormalidades químicas y morfológicas presentes en la orina. Este procedimiento se compone de dos partes:
1. Un análisis macroscópico; en el cual se determinan las características fisicoquímicas (apariencia,
gravedad específica y la medición de los constituyentes químicos por medio de la tira reactiva como
proteínas, glucosa, cetonas, pH)
2. Un examen microscópico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria,
piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos.

Por medio de este simple examen de orina, se puede detectar y monitorear muchas entidades que
afectan al riñón y al tracto urinario inferior. (15)

EXAMEN FÍSICO DE LA ORINA


Volumen.
El volumen urinario está influenciado por la ingesta de líquidos; por los solutos excretados, principalmente, sodio
y urea; por la pérdida de fluidos en la transpiración y la respiración; y por el estado de los sistemas cardiovascular
y renal. Normalmente un adulto excreta de 750 a 2000 ml de orina en 24 horas. Aunque el volumen de orina de
un espécimen recolectado al azar no tiene importancia clínica, el volumen del espécimen recibido debe ser
anotado para efectos de documentación y estandarización. (16, 17)

56
Olor.
Una orina normal fresca no tiene mal olor. Un olor desagradable, puede indicar que el espécimen es demasiado
viejo para obtener un análisis preciso. Un olor fétido en un espécimen recolectado desde hace más de dos horas
(y no preservado o refrigerado) indica que el espécimen es inadecuado. El olor puede también dar señales de
ciertas anormalidades de la orina. Un olor parecido al amoniaco, es sugestivo de presencia de bacterias
degradadoras de la urea, un olor a frutas indica la presencia de acetona (cetonas), un olor dulce es sugestivo
de la presencia de glucosa u otros azúcares, un olor fétido es sugestivo de pus o inflamación. El olor es
importante en la detección clínica de la enfermedad llamada orina de miel de maple (un defecto metabólico
congénito). (15, 16, 17)

Apariencia (color y turbidez).


El color de la orina está determinado, en gran medida, por su grado de concentración. Las orinas
normales varían ampliamente de colores, desde incoloras hasta amarillo oscuro. La interpretación del color es
subjetiva y varía según el laboratorio que la examine. Para que el analista describa adecuadamente el color de
la orina, puede emplear como puntos de referencia una escala estandarizada de colores, evitando el uso de
términos ambiguos como pajizo o sangriento.
La orina roja es, tal vez, la coloración de mayor importancia clínica. Este color puede ser producido por
hemoglobina urinaria o mioglobina, eritrocitos intactos, eritrocitos hemolisados, o hemoglobina libre (hemólisis).
En la glomerulonefritis aguda el color característico de la orina es pardo rojizo. Normalmente una orina fresca
es clara. Cuando la orina se deja reposar, se precipitan cristales amorfos, generalmente uratos, produciendo
turbidez. La turbidez de la orina debe ser registrada y explicada mediante la evaluación microscópica. (16, 17)

Gravedad específica.
La gravedad específica de la orina es una medida parcial de la capacidad del riñón para concentrar
orina. Su rango normal es de 1.003 a 1.035 g/ml. Los valores iguales o superiores a 1.020 indican una buena
función renal y la excreción de una cantidad aumentada de solutos disueltos excretados por los riñones.
Valores de densidad específica iguales o superiores a 1.035 indican la presencia de solutos extraños,
lo cual debe ser investigado. Una disminución de la gravedad específica se observa en pacientes quienes usan
diuréticos.
Las sustancias de alto peso molecular afectan la gravedad específica en un grado mayor que la
producida por simples cristaloides. Esto es importante cuando la orina contiene moléculas grandes como
glucosa, proteínas o medios de contraste radiográficos. Cuando se presentan niveles elevados de glucosuria o
proteinuria, es necesario aplicar factores de corrección para ajustar la gravedad específica a un valor más
representativo; se debe restar 0.004 por cada 10 g/l glucosa y 0.003 por cada 10 g/l de proteína. Valores de
1.040 o superiores están asociados con la presencia de medios de contraste radiográficos o preservativos.
Las tiras reactivas disponen de un método colorimétrico indirecto para medir la gravedad específica.
Este método usa una tira que contiene un electrolito pretratado que muestra un cambio de pH de acuerdo a la
concentración iónica de la orina. Este ensayo es rápido, sencillo y no requiere equipos adicionales. (15, 16)

EXAMEN QUÍMICO DE LA ORINA


Análisis por tira reactiva.
Los análisis por tira reactiva han permitido a los laboratorios de uroanálisis producir resultados
químicos semicuantitativos de una manera rápida, exacta y eficiente. En general, los análisis de orina
adecuadamente realizados por medio de tiras reactivas, son sensibles, específicos y económicos.
Los análisis realizados por medio de tiras reactivas deben efectuarse en orinas bien mezcladas y
equilibradas a la temperatura ambiente. Cada parámetro químico debe ser evaluado en un intervalo de tiempo
específico, de acuerdo a lo indicado en las instrucciones del fabricante. Deben tomarse del envase, solamente
el número de tiras requerido para los análisis inmediatos y el envase debe taparse nuevamente asegurando
que la tapa quede bien ajustada. Las tiras reactivas deben ser almacenadas en un lugar fresco (no refrigeradas).
El medio ambiente debe estar libre de humedad. Nunca se deben usar tiras para orina caducadas o expuestas
al aire.
Después de sumergir la tira reactiva en la orina, se debe remover el exceso de orina golpeando la tira
suavemente en el borde del recipiente que contiene el especimen. Se debe comparar individualmente la
reacción de cada zona reactiva con su correspondiente en la carta de colores, bajo una iluminación adecuada.
Los resultados positivos de las tiras reactivas pueden requerir confirmaciones por métodos químicos y
microscópicos. La información proporcionada por los fabricantes debe ser revisada para identificar fuentes de
inhibidores y resultados falsos positivos y negativos. (15, 16)

57
pH Urinario.
Aunque el método estándar para la medición del pH emplea electrodos de vidrio, el pH urinario,
usualmente, es medido con indicador de papel, debido al hecho de que pequeños cambios en el pH son de
poca importancia clínica. La mayoría de los laboratorios de uroanálisis emplean tiras reactivas multitest con dos
indicadores, rojo de metilo y azul de bromotimol. Estos indicadores proporcionan un rango de pH de 5.0 a 9.0,
el cual se manifiesta por un cambio de color de naranja (ácido) a verde y azul (alcalino). El rango de pH urinario
es 4.7 a 7.8. Las muestras de orina extremadamente ácidas o alcalinas, usualmente indican especímenes mal
recolectados. El pH es importante para el manejo clínico de las piedras o cristales. (15, 17)

Proteínas.
Las personas sanas pueden tener una excreción diaria de proteínas de 100 mg/día, una fracción muy
pequeña del contenido de proteínas plasmáticas. La mayoría de la proteína en la orina es albúmina que pasa
la membrana glomerular, pero también pueden estar presentes proteínas de peso molecular pequeño como las
globulinas. Una vez filtradas las proteínas son casi completamente reabsorbidas en el túbulo proximal. La
proteinuria, por lo tanto, puede ser el resultado tanto de un incremento en la filtración como de una disminución
en la reabsorción (función tubular).
Las tiras reactivas son un procedimiento de tamizaje para la proteinuria. Como la especificidad de las
tiras reactivas está limitada a la detección de albúmina, es altamente recomendable que el laboratorio procese
simultáneamente una prueba por tira reactiva y una prueba de precipitación por ácido para la detección de todos
los tipos de proteínas. Las tiras reactivas son sensibles al pH y dependen de la presencia de proteínas para la
generación de color. La presencia de la proteína en la tira cambia el pH del medio de contraste impregnado en
la zona reactiva,produciéndose el cambio de color

Un resultado positivo o débilmente positivo debe ser confirmado por otros métodos más específicos
como el ácido tricloroacético o el ácido sulfosalicílico. Un resultado débilmente positivo y uno fuertemente
positivo puede indicar la presencia de fármacos o proteínas de Bence Jones. (15, 16, 17)

Azúcares (glucosa).
El valor de referencia en orina es negativo, en orina la glucosa aparece cuando el nivel de glucemia
supera los 180 mg/dl. Cuando esto sucede los túbulos renales no pueden reabsorber toda la glucosa filtrada y
se produce glucosuria. Las causas de glucosuria son:
 Diabetes mellitus*
 Embarazo (disminución de umbral renal)
 Síndrome de Cushing
 Enfermedad pancreática
 Enfermedades hepáticas
 Síndrome de Falconi

*La ausencia de Glucosuria no excluye el diagnóstico de Diabetes mellitus

1. Ensayos enzimáticos.
El ensayo de la tira reactiva es un excelente análisis específico para glucosa.
Detecta la oxidación de la glucosa a ácido glucónico:

58
Una clase de tira reactiva emplea o-toluidina como el cromógeno indicador de la reacción.

2. Reducción del Cobre.

La tableta Clinitest (Ames Division) brinda la posibilidad de detectar otros azúcares. Este es un ensayo
basado en la reducción del cobre que mide el total de sustancias reductoras presentes en la orina. Además de
glucosa, el Clinitest puede detectar azúcares como galactosa, lactosa y pentosa. (15, 17)

Cetonas.
Los cuerpos cetónicos son productos intermediarios del metabolismo de los lípidos que se forman en
el hígado. Son metabolizados casi todos y aparecen en la orina en cantidades despreciables. El término cuerpos
cetónicos incluye tres componentes químicos diferentes pero muy relacionados: ácido acetoacético, ácido beta
hidroxibutírico y acetona.
Su presencia en la orina se conoce con el nombre de cetonuria. Cuando existe algún trastorno en el
metabolismo de los carbohidratos, como ocurre en la diabetes mellitus, la formación de cetonas aumenta de
manera considerable, debido a que la glucosa no puede ser utilizada, y entonces los lípidos y las proteínas se
convierten en el combustible de primer orden para que el organismo obtenga la energía necesaria. El uso de
esta vía metabólica deja libres los fragmentos carbonados provenientes de las grasas y de las proteínas, los
cuales pasan a formar grandes cantidades de cuerpos cetónicos, que agotan las reservas alcalinas del medio
interno, y dan lugar a la aparición de acidosis. La determinación de la presencia de cetonuria tiene su principal
indicación en los pacientes diabéticos no controlados y en especial en los diabéticos tipo 1.
Los ensayos realizados por medio de tiras reactivas emplean la reacción de nitroprusiato de sodio que
detecta acetona y ácido acetoacético pero no beta hidroxibutírico, el cuerpo cetónico primario. Es importante
saber que el reactivo de nitroprusiato de sodio reacciona principalmente con el ácido acetoacético; la acetona
tiene solo un 20% de reactividad comparada con el ácido acetoacético:

La determinación de cetonas es importante en el monitoreo de la diabetes y de la cetoacidosis y debe


realizarse siempre que se determinen azúcares. (2, 16)

Sangre y mioglobina.
Una orina roja indica usualmente la presencia de eritrocitos, hemoglobina o mioglobina. La hematuria,
a menudo, representa una combinación de eritrocitos intactos (más de 5 por campo de alto poder), eritrocitos
fragmentados y hemoglobina libre. La hematuria gruesa o macroscópica implica hemorragia o sangrado fresco,
lo que en un medio de orina ácida, da como resultado una apariencia de roja a parda, turbia, o ahumada.
La hematuria siempre tiene significación clínica en cualquiera de sus 2 variantes: macroscópica y
microscópica, y puede aparecer en múltiples enfermedades del tracto genitourinario. Según el color de la orina,
que puede variar del rojo intenso a tonalidades marrón, se puede inferir en qué zona del aparato genitourinario
se produjo el sangrado. Los tonos carmelitas (chocolate, pardo, castaño) se presentan cuando el sangrado por
lo general es alto: parénquima y pelvis renal o tercio superior del uréter. Si el color no es intenso y la sangre
permanece mezclada con la orina (vejiga) varias horas antes de eliminarse, los eritrocitos se destruyen y la
hematuria no será detectada con ayuda del microscopio. Entonces será necesaria la presencia de hemoglobina
en la orina, lo que permitirá el diagnóstico. Ante la sospecha de una hematuria, deben estudiarse ambas
posibilidades: hematuria y hemoglobinuria. La primera se determina por la observación del color y el examen

59
microscópico, y la segunda, con las tiras reactivas, las cuales son capaces de detectar la presencia de eritrocitos
intactos y la hemoglobina libre.
La hemoglobina en la orina puede ser una manifestación de enfermedades extrarrenales. Tal es el
caso de las anemias hemolíticas, la hemoglobinuria paroxística nocturna, las reacciones ante transfusiones por
administración de sangre incompatible y en las quemaduras extensas.
El método empleado por la tira reactiva para determinar hemoglobina o mioglobina se fundamenta en
una actividad semejante a la de las peroxidasas:

Un ensayo positivo indica la presencia de hematuria, hemoglobinuria o mioglobinuria, siendo necesario


un análisis microscópico para confirmar la presencia de eritrocitos. La presencia en la orina de agentes
oxidantes como los yoduros y bromuros, puede causar resultados falsos positivos; grandes cantidades de ácido
ascórbico (usado en algunos antibióticos) pueden producir resultados falsos positivos en algunas tiras reactivas.
La mioglobina es una porfirina ferrosa similar a la hemoglobina; se encuentra, comúnmente, en la orina
en pacientes con traumas severos que involucran destrucción muscular. Cuando la mioglobina es liberada a la
circulación, es rápidamente excretada por el riñón. Al igual que la hemoglobina, su presencia producirá orinas
de apariencia rosada a roja. (2, 16)

Bilirrubina.
La excreción de bilirrubina con la orina (bilirrubinuria) se produce cuando los niveles en sangre de la
bilirrubina conjugada se elevan. El análisis que se realiza para su detección se conoce con el nombre de
pigmentos biliares. Esta prueba es de uso habitual y tiene su principal indicación en el diagnóstico de las
enfermedades hepatocelulares agudas (hepatitis) y en la obstrucción biliar intrahepática y extrahepática. La
bilirrubina puede aparecer en la orina antes que otros signos de disfunción hepática, como la ictericia, y
adelantarse a la instauración del cortejo sintomático que acompaña a estas enfermedades. (2, 4)
Orinas espumosas, de color amarillo a pardo, u oscuras son sugestivas de la presencia de bilirrubina
conjugada. La orina normal no contiene bilirrubina. Los pacientes ictéricos con enfermedad hepatocelular como
hepatitis o enfermedad obstructiva como cirrosis biliar pueden tener bilirrubina conjugada en la orina. El método
empleado por las tiras reactivas para determinar bilirrubina se basa en la reacción de diazoación.

Los resultados negativos de orinas sospechosas y los resultados positivos cuestionables provenientes
de orinas coloreadas, deben ser confirmados empleando tabletas de Ictotest (Ames Division, Miles
Laboratories). El Ictotest emplea la misma reacción de diazoación que las tiras reactivas. Se pueden encontrar
resultados falsos negativos, en orinas no frescas porque la bilirrubina urinaria puede hidrolizarse u oxidarse por
acción de la luz. (16)

Urobilinógeno.
El urobilinógeno aparece como parte del metabolismo incompleto de los ácidos grasos, es un
compuesto coloreado, resultado de la reducción de la bilirrubina por acción de las bacterias en el intestino. Las
orinas normales contienen pequeñas cantidades de urobilinógeno.
El urobilinógeno se encuentra disminuido en niños deficientes en bacterias intestinales; en pacientes
después de la administración de antibióticos que reducen la flora intestinal, y en pacientes con enfermedades
obstructivas parciales o completas de los conductos biliares. Se encuentra un aumento del urobilinógeno en
pacientes con anemias hemolíticas (aumento de formación de bilirrubina) y disfunción hepática.
El método empleado por las tiras reactivas para la determinación del urobilinógeno varía según el
fabricante. Algunos emplean la reacción de Erlich, usando p-dimetilaminobenzaldehído en una reacción simple
de color con el profobilinógeno. Esta reacción no es específica para urobilinógeno, pudiéndose encontrar
resultados falsos positivos con otros compuestos que también reaccionan con el reactivo de Ehrlich. Otros
emplean una reacción específica para el urobilinógeno: el urobilinógeno reacciona con un compuesto de
diazonio produciéndose un color rojo. (2, 16,17)

60
Nitritos.
El ensayo de nitritos es empleado en los laboratorios de uroanálisis para detectar bacteriuria. El método
empleado en las tiras reactivas para determinar nitritos se basa en la reducción de nitratos a nitritos por la acción
enzimática de ciertas bacterias presentes en la orina. En un pH ácido los nitritos reaccionan con el ácido p-
arsanílico formando un compuesto de diazonio, el cual a su vez reacciona con N-(1- naftil) etiléndiamina
produciendo un color rojo. El ensayo de nitritos debe ser realizado en especímenes recolectados en la primera
orina de la mañana o en una muestra de orina que haya sido recolectada después de 4 horas o más, a partir
de la última evacuación de la vejiga, con el fin de permitir que durante este tiempo los microorganismos
metabolicen el nitrato dentro de la vejiga.
En orinas pasadas o viejas, el ensayo de nitritos puede ser positivo como resultado de la contaminación
con bacterias después de la micción. La prueba de nitritos es específica para organismos gram negativos, sin
embargo, se pueden obtener resultados falsos negativos si están presentes microorganismos como
enterococos, estreptococos o estafilococos. (16)

Esterasa leucocitaria.
La presencia de leucocitos (piuria) es un indicador de inflamación clínicamente importante. El método
empleado para la determinación de leucocitos intactos y lisados en las tiras de orina está basado en la presencia
de esterasas intracelulares. Estas enzimas catalizan la hidrólisis de los ésteres, liberando componentes que son
luego empleados en una reacción de color. La intensidad de la reacción de color es directamente proporcional
a la cantidad de leucocitos presentes en el espécimen. La presencia de tricomonas y agentes oxidantes pueden
producir falsos positivos. (16)

EXAMEN MICROSCÓPICO DE ORINA


Una identificación microscópica precisa del sedimento urinario es importante para el reconocimiento
temprano de infecciones, procesos inflamatorios, y neoplasias que pueden afectar el tracto urinario. Se
recomienda el uso de la microscopía de contraste de fases para una mejor detección de los elementos formados
más translúcidos del sedimento urinario. Los cilindros hialinos, moco, y bacterias pueden escapar a la detección
empleando la microscopía convencional, no teñida, bajo campo claro. La microscopía de contraste de fases
tiene la ventaja de endurecer los contornos inclusive de los elementos más efímeros, haciendo más sencilla su
detección. Siempre se logra un detalle morfológico mejor de los elementos formados (notablemente en cilindros
y células) con el uso de un microscopio de contraste de interferencias. (18)

Cristales.
La cristaluria se considera un hallazgo sin significación clínica en las orinas normales. Usualmente los
cristales no están presentes en orinas frescas recién obtenidas y en general, la formación de los cristales es
considerada como un artefacto del sistema de recolección. Los cristales se forman cuando varios constituyentes
químicos llegan a saturarse o sufren un cambio en su solubilidad, cuando la orina es almacenada a temperaturas
más bajas. Ciertas sustancias químicas, como la albúmina, previenen la cristalización. Cuando la orina se
calienta a 37 °C, la mayoría de los cristales desaparecen. Aquellos cristales que todavía permanecen, tienen
importancia diagnóstica, cuando se correlacionan con síntomas clínicos.
Los tipos de cristales urinarios dependen del pH de la orina fresca. En las orinas ácidas aparecen los
uratos amorfos, el ácido úrico y el oxalato de calcio; y en las alcalinas, los fosfatos amorfos, el fosfato de calcio,
el fosfato triple y el carbonato de calcio. Se considera como anormal la presencia en la orina de cristales de
cistina, leucina o tirosina, colesterina y los medicamentosos: sulfonamidas y ampicillina. (2,18)

Organismos.
En un espécimen de orina bien recolectado y procesado, la presencia de organismos es importante
desde el punto de vista clínico. Se reportan, frecuentemente, bacterias, hongos, parásitos, y células infectadas.
Los organismos vistos en un espécimen de orina son microscópicamente reconocibles como estructuras intra o
extracelulares. Con la microscopía de campo claro se detectan fácilmente bacterias, hongos y parásitos.
La detección de bacterias intracelulares fagocitadas y hongos, organismos de Toxoplasma, y cuerpos
de inclusión viral, usualmente requieren procedimientos citológicos.
La identificación exacta de los organismos ayuda en el diagnóstico clínico diferencial de infecciones
del sistema urinario. Las preparaciones coloreadas son importantes en la evaluación de organismos,
identificación de células inflamatorias asociadas, en la valoración de la exfoliación epitelial, y en la formación de
cilindros renales con el fin de identificar su localización. Se deben emplear técnicas microbiológicas para
confirmar y clasificar completamente algunos organismos urinarios. (17, 18)

Bacterias.

61
La orina de individuos normales es estéril y no contiene bacterias. Algunas bacterias pueden estar
presentes por contaminación durante la recolección o por almacenamiento prolongado. Se puede determinar
una concentración de menos de 103 bacterias/ml, cuando se han visto bacterias en un espécimen de orina
centrifugado pero no en el espécimen sin centrifugar. La presencia de bacterias en un espécimen sin centrifugar
indica que hay una concentración mayor de 103 bacterias/ml. La presencia de 105 bacterias/ml o más sugiere
una infección de tracto urinario. Este número corresponde a 10 o más bacterias por campo de alto poder. La
identificación de bacterias, cocos o bacilos puede hacerse por microscopía de campo claro o por contraste de
fases. Ocasionalmente hay dificultad en diferenciar bacterias de cristales amorfos. (18)

Hongos.
Las infecciones del tracto urinario (ITU) producidas por hongos son comunes en pacientes diabéticos,
en aquellos que toman medicamentos desde el nacimiento, o en aquellos que han recibido terapia intensiva con
antibióticos o terapia inmunosupresora. En la mayoría de las ITUs de pacientes no inmunocomprometidos, se
ha observado un patrón inflamatorio asociado.
Candida albicans es el hongo más común, identificándose como levadura o micelio. En general, la
apariencia de gemación de levadura indica que el hongo ha coexistido con el huésped, mientras que la forma
micelar aparece durante la invasión al tejido. Las levaduras de Candida albicans son altamente retractiles y
miden de 3 a 5 μm. Suelen ser confundidas con eritrocitos. A diferencia de los eritrocitos, las levaduras no son
lisadas por ácidos. (17,18)

Parásitos.
La presencia de parásitos en la orina indica contaminación fecal o vaginal. La Trichomona vaginalis,
un flagelado, es el parásito que más comúnmente se observa en la orina. La incidencia de este tipo de parásito
en mujeres es muy alta pudiendo producir vaginitis severa. En el hombre, el parásito causa una uretritis
asintomática. Debido a la motilidad de este organismo oval, la microscopía de campo claro es empleada como
la forma más sencilla y rápida de identificación. Los tricomónidos inmóviles pueden ser confundidos con
leucocitos o células epiteliales.
Se han encontrado huevos de helmintos (Enterovius vermicularis) en la orina de niños por
contaminación fecal. Morfológicamente un huevo de helminto está rodeado por una cápsula con dos capas,
transparente y delgada, pudiéndose ver, enrollado dentro de ella, un embrión. En la orina, también pueden
encontrarse huevos de trematodos. (18)

Eritrocitos.
Una orina normal, examinada con objetivo de alto aumento, no debe contener más de unos cuantos
eritrocitos. Estas células aparecen en la orina después de lesiones vasculares o trastornos del riñón o del tracto
urinario inferior. La presencia de eritrocitos acompañada de cilindros hemáticos o eritrocitos dismórficos es
sugestiva de sangrado del parénquima renal o del glomérulo. La detección urinaria de eritrocitos dismórficos,
especialmente acantocitos, es un marcador morfológico importante de sangrado glomerular o tubular. Su
cuantificación ayuda en el diagnóstico y manejo del paciente. Cuando se examinen orinas de mujeres, es
importante evitar la contaminación con sangre menstrual.
Los eritrocitos miden, aproximadamente, 7 μm de diámetro, tienen forma de discos biconcavos los
cuales aparecen de un color amarillo pálido cuando se examinan bajo microscopía de campo claro. En
ocasiones, las tiras reactivas pueden detectar hemoglobina en ausencia de eritrocitos en el examen
microscópico. Una posible explicación de esta discrepancia es la presencia de orinas alcalinas o hipotónicas,
ambas pueden causar lisis de los eritrocitos. En ausencia de estas condiciones, es muy sugestivo que el
pigmento que aparece en la orina (puede ser hemoglobina o mioglobina) se origine por filtración desde la sangre.
(15, 17, 18)

Leucocitos.
La velocidad de excreción normal de eritrocitos en la orina es de 1 leucocito por cada 3 campos con
objetivo de alto aumento, 3000 células/ml, o más de 200,000 células/hora. Un elevado número de leucocitos
(piuria) está asociado a numerosos procesos inflamatorios e infecciosos del tracto urinario. La mayoría de los
leucocitos vistos por microscopía de campo claro son neutrófilos segmentados.
La identificación de linfocitos, células plasmáticas, y eosinófilos requiere de coloraciones especiales.
Se ha mostrado que una velocidad de excreción en exceso de 400,000 células/hora siempre indica
una infección del tracto urinario. Esta velocidad corresponde a más de 10 neutrófilos por campo de alto poder.
Los pacientes con infecciones activas del tracto urinario superior tienen, frecuentemente, más de 50 neutrófilos
por campo de alto poder o una velocidad de excreción de leucocitos que excede 2 o aún 3 millones/hora. (17,
18)

62
Células del epitelio tubular renal.
En el nefrón están alineados varios tipos de células del epitelio tubular renal y las células enfermas o
viejas están constantemente siendo arrojadas a la orina. Aunque ellas representan la exfoliación renal real, la
presencia de más de dos células del epitelio tubular renal por campo de alto aumento indican daño o lesión
activa de los túbulos renales.
Hay grandes dificultades en la identificación precisa de las células de los túbulos renales,
especialmente, para diferenciarlas de las células mononucleares comúnmente encontradas en la orina. Por
microscopía de campo claro, las células tubulares renales son poligonales y de tamaño ligeramente menor que
los leucocitos. (18)

Cuerpos grasos ovales.


Los cuerpos grasos ovales son células del epitelio tubular renal que están llenas de lípidos absorbidos
o que han sufrido cambios degenerativos celulares. A menudo los cuerpos grasos ovales son asociados con
proteinuria y lipiduria y son característicos del síndrome nefrótico y diabetes mellitus. (18)

Células epiteliales de transición.


En la orina normal se pueden encontrar unas pocas células de transición (uroteliales). Un gran número
de células transicionales puede indicar procesos inflamatorios de la vejiga, cateterización o estados patológicos
malignos.
Por microscopía de campo claro, las células transicionales aparecen redondas u ovaladas, miden de
40 a 60 μm, y tienen un núcleo localizado centralmente. Los bordes citoplásmicos de esas células aparecen
engrosados y rígidos. Cuando los núcleos de las células transicionales llegan a agrandarse o a tornarse
irregulares, se recomienda emplear técnicas citológicas con el fin de detectar enfermedades malignas del
sistema urinario. (18)

Células epiteliales escamosas.


Las células epiteliales escamosas se alinean en la porción distal del tracto urinario inferior y en el tracto
genital femenino. Las células escamosas son las células más grandes encontradas en la orina. Tienen un
citoplasma grande y plano con un núcleo pequeño. Frecuentemente, una o más hileras de esas células pueden
plegarse. La presencia de células escamosas en la orina usualmente indica contaminación (vaginal, en mujeres
y uretral en hombres no circuncidados) o metaplasia escamosa de la vejiga, y representan el tipo menos
importante de células epiteliales encontradas en la orina. (18)

Espermatozoides.
Los espermatozoides pueden ser fácilmente reconocidos en la orina de un hombre después de la
eyaculación o en la orina de una mujer por contaminación vaginal después del coito. Su identificación es de
limitada importancia clínica y la presencia de espermatozoides, generalmente, no es reportada. (18)

Cilindros renales.
Los cilindros renales (urinarios) son estructuras cilíndricas que se organizan en el nefrón y su
importancia proviene de su localización. Están formados por uromucoide (mucoproteína de Tamm-Horsfall),
que está siempre presente en la orina, usualmente en suspensión. Este uromucoide es producido por las células
del epitelio tubular renal de la sección ascendente del asa de Henle. Los cilindros se forman como consecuencia
del estancamiento de la orina y de la precipitación del uromucoide. El incremento en la concentración de
proteínas, sales, y un pH urinario bajo son algunos de los factores que contribuyen a su formación. Debido a
que la precipitación de esta proteína depende de la concentración y composición de la orina, los cilindros se
forman más fácilmente en la porción distal del nefrón y en los ductos colectores del riñón, donde la orina es más
concentrada. En pacientes con proteína de Bence Jones (mieloma múltiple), los cilindros pueden formarse en
los túbulos convolucionados proximales.
Estas formaciones cilíndricas presentes en la orina reflejan las formas (largas o cortas) y diámetros
(delgados y gruesos) de los lúmenes de los túbulos renales en donde se formaron. Su número y propiedades
cuantificables aportan valiosos indicios sobre la naturaleza de la enfermedad del parénquima renal.
Microscópicamente, los cilindros se caracterizan por la apariencia de su matriz (hialina, granular,
cérea), por los constituyentes celulares (eritrocitos, leucocitos, o células del epitelio tubular renal) o por el tipo
de material particulado embebido en la matriz (gránulos finos, gruesos o fibrina).
La identificación exacta de los cilindros, especialmente de los tipos celulares, es difícil cuando se hace
en preparaciones húmedas no coloreadas visualizadas en microscopios bajo la luz directa o campo claro. Se
necesita un microscopista hábil para evitar las interpretaciones erróneas. La visualización de los cilindros mejora
con el empleo de microscopios con contraste de fases, de filtros de contraste o coloraciones especiales.
Para propósitos diagnósticos de enfermedad renal, los cilindros se han clasificado como fisiológicos o
patológicos. (15, 17, 18)
63
Grasas.
Las grasas se encuentran en la orina de pacientes quienes han presentado embolismo graso después
de lesiones severas con aplastamiento óseo, degeneración grasa del riñón o síndrome nefrótico. La grasa
aparecerá en la superficie de la orina recolectada en la última parte de la micción. En el sedimento urinario se
pueden encontrar células epiteliales vacuoladas. La identificación de las gotas de grasa se facilita empleando
coloraciones especiales para grasa como Oil Red O o Sudán III.

TINCIÓN DE STERNHEIMER MALBIN. Para sedimento urinario.


Facilita la identificación de las células, se vuelve a suspender el sedimento en el tubo de centrifuga y se añade una
gota del colorante; se espera tres minutos. Luego se pone una gota sobre un portaobjetos, se cubre y se examina al
microscopio.

Interpretación
Hematíes: Color rosado
Leucocitos: Púrpura oscuro con núcleo rojo oscuro
Granulaciones: Citoplasmáticas violetas.
Células brillantes: Son leucocitos neutrófilos incoloros o de color azul claro. Son característicos de
polinefritis.
Células renales: Núcleo púrpura oscuro, con un estrecho citoplasma de color púrpura-
anaranjado.
Células vesicales: Núcleo azul oscuro y citoplasma azul claro.
Células epiteliales de descamación: Núcleo púrpura, citoplasma rosado o violeta.
Cilindros hialinos: Rosado o púrpura claro.
Cilindros finamente granulosos: Cilindros rosados, con granulaciones de color púrpura.
Cilindros grasos: Color rosado, gotas de grasa incoloras.
Cilindros hemáticos: Cilindro rosado, hematíes incoloros o lila claro.
Cilindros céreos: Púrpura claro u oscuro.

MATERIAL Y EQUIPO:
MATERIAL BIOLÓGICO MATERIAL DE LABORATORIO Y REACTIVOS EQUIPO
Orina 4 Tubos cónicos o tubos de ensaye 13 x 100. Microscopio óptico
Debe ser la primera orina Gradilla. Centrifuga
de la mañana, en Puntillas para pipetas automáticas (azules). Pipetas automáticas de 1.0 ml
recipiente estéril de boca Portaobjetos.
ancha. Cubreobjetos.
(Seguir las instrucciones Tiras reactivas comerciales.
del apartado de Toma de Colorante para tinción de Stenheimer-Malbin
Muestra.) 2 pipetas serológicas graduadas de 10 ml.
2 pipetas Pasteur.
2 bulbos de goma.
Toallas desechables.
Envase desechable para orina.

TOMA DE MUESTRA
El cuidado en la recolección de la orina y su entrega rápida en el laboratorio, son cruciales para obtener
una información óptima. La orina debe ser colectada en un recipiente limpio, estéril, que tenga un cierre seguro
para prevenir posibles derramamientos, evaporación o contaminación.
Estos recipientes deben rotularse con el nombre del paciente, fecha y hora de recolección. Para que
los datos del uroanálisis sean precisos, es esencial que la orina sea examinada dentro de las dos horas
siguientes a su recolección o preservada de alguna manera, usualmente por refrigeración (2° a 8°C).
La primera orina de la mañana es usualmente la mejor para el análisis porque es la orina más
concentrada. Las muestras deben estar libres de secreciones vaginales u otra clase de partículas extrañas.
64
Este procedimiento puede modificarse si no es necesario el examen bacteriológico de la muestra. La recolección
del chorro medio sin el lavado previo y sin usar un envase estéril, proporciona una muestra satisfactoria para el
examen de rutina. (17, 18)

TECNICA.
La orina debe examinarse mientras esté fresca, algunas células y cilindros pueden desintegrarse en
un lapso de una a tres horas. La refrigeración de 2° a 8° C por 48 horas, usualmente previene la desintegración
de las células y entidades patológicas. Con propósitos de estandarización, cada espécimen de orina debe
concentrarse de diez a veinte veces. El examen se realiza de la siguiente manera:

1. Homogeneizar la muestra invirtiendo el frasco de orina 3 a 5 veces con movimientos suaves.


2. Destapar el frasco y verter la orina en un tubo cónico o en su defecto en un tubo de ensaye con
capacidad de 10 a 12 ml.
3. Sumergir la tira reactiva en la orina por no más de 3 segundos procurando que los cojinetes de la tira
queden impregnados de orina para que se lleve a cabo la reacción. Retirar el excedente de orina con
un papel secante colocando la tira de manera horizontal sobre el papel secante.
4. Leer los resultados de la tira reactiva comparando la reacción de la tira reactiva con los resultados que
se encuentran en el recipiente de tiras. Anotar los resultados.
5. En tubos cónicos volumétricos se deben medir 12 ml de orina o ponga un volumen fijo de 10 ml de
orina (se puede utilizar en caso de no contar con tubos cónicos graduados un tubo patrón con 10 o 12
ml de agua exactamente medidos, colocar una marca sobre el menisco, aforar los tubos problema igual
que este tubo patrón)
6. Contra un fondo blanco evalué el color de la orina (tonalidades en amarillo, rojo, ámbar) y contra un
fondo negro evalúe el aspecto de la orina invirtiendo varias veces el tubo, observando cualquier indicio
de turbidez (este parámetro se reporta como: transparente, ligeramente turbio o turbio). Anotar los
resultados.
7. Centrifugar la orina de 1500 a 2000 r.p.m. por 5 minutos.
8. Una vez centrifugada la orina retirar 1 ml del sobrenadante con una pipeta automática y resguardarlo
momentáneamente. Desechar en un movimiento rápido el sobrenadante restante en la tarjea,
procurando no desechar el sedimento. Agregar el mililitro retirado previamente al sedimento y
mezclarlo.*
9. A esta suspensión del sedimento se le agregan dos gotas de tinción de Stenheimer-Malbin y agitar
para homogeneizar, esperar 5 minutos luego de agregar el colorante, antes de ver al microscopio.
10. Con una pipeta Pasteur colocar una gota del sedimento teñido en un portaobjetos y colocar un
cubreobjetos, evitando que no entre aire a la preparación y que no forme burbujas, de ser así se debe
repetir la operación.
11. Observar al microscopio enfocando primero con objetivo de 10X y posteriormente pasar a objetivo de
40X con luz atenuada. Ajuste el enfoque fino permanentemente mientras se explora a todo lo largo de
la preparación de izquierda a derecha o de arriba abajo en zig-zag. Durante la revisión evalúe el
espécimen en busca de células epiteliales, transicionales y escamosas, cristales, moco, bacterias,
levaduras, artefactos, etc. Elabore el r
12. eporte anotando todos los hallazgos encontrados en el sedimento urinario con base a los criterios
explicados previamente.

*Nota: Se extrae 1 ml cuando se tiene un volumen de 12 ml en caso de medir 10 ml se extrae 0.5 ml. Otro
método es extraer el sobrenadante poco a poco hasta llegar a la cantidad de 1 ml o 0.5 ml y resuspender el
sedimento.

ESQUEMAS EN LA SIGUIENTE PÁGINA

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PRESENTACION DE RESULTADOS:
DATOS DEL PACIENTE

SEXO MASCULINO

EDAD 18 AÑOS

PESO 105 KG.

TALLA 1.76 M.

I.M.C. 33.9

EXAMEN FISICO
CRITERIO RESULTADO VAL. DE REF.
COLOR: Amarillento Amarillo
ASPECTO: Turbio Transparente

EXAMEN QUIMICO
CRITERIO RESULTADO VAL. DE REF.
Densidad 1.030 1.005 - 1.030
Ph 6.0 5.5 - 7.5
Proteínas/ albumina Indicios 40 – 80 mg/L
Glucosa Negativo Menor de 20 mg/dl
Cetonas Negativo Negativo
Urobilinógeno 1.0 EV/dl 0 – 4 mg
Sangre/ hemoglobina Negativo Negativo
Leucocitos/ esterasa Negativo Negativo
Nitritos Negativo Negativo

EXAMEN MICROSCOPICO
CRITERIO RESULTADO VAL. DE REF.
LEUCOCITOS /campo Negativo <5 por campo
Piocitos/ campo Ausentes Ausentes
ERITROCITOS/ campo Negativo <3 por campo
Morfología eritrocitaria Normal

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CELULARIDAD/ campo Escasas 0 -100 por campo
Epitelio plano Escasas Escasas
Urotelio Escasas Escasas
Células renales Ausentes Ausentes
CILINDROS Negativo < 5 por campo
CRISTALES Urato Amorfo Ausentes
BACTERIAS Negativo Negativo
OBSERVACIONES La presencia de urato amorfo no tiene importancia diagnostica,
solo significa que el pH de la orina es ácido.

Conclusiones:
El examen general de orina no es más que una serie de exámenes efectuados sobre
la orina (físico, químico y microscópico), donde podemos identificar el color,
aspecto, densidad, pH, leucocitos, nitritos, entre muchos otros tipos de sustancias,
Además de que con este tipo de exámenes podemos determinar si el paciente tiene
tal vez alguna infección o alguna enfermedad al respecto en el sistema urinario.
Todo esto lleva un procedimiento el cual debe efectuarse con cuidado, sobre todo
con limpieza y responsabilidad.

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