Más uno . 2013; 8 (6): e66092. Publicado en línea 2013 Jun 14. doi: 10.

1371 / PMCID: PMC3682949

journal.pone.0066092

Efectos de la glucosa disponibilidad sobre la expresión de los genes clave implicados en la síntesis de
grasa de la leche, lactosa y metabolismo de la glucosa en células bovinas Epiteliales Mamarias

*
Liu hongyun , Zhao Ke y Liu Jianxin

Shuhong Zhao, Editor

Instituto de Ciencias Lecheras, clave Laboratorio de Biología Molecular de la alimentación animal, Ministerio de Educación, la Universidad de Zhejiang, Hangzhou, China Universidad Agrícola de

Huazhong, China

* Email: hyliu@zju.edu.cn
Conflicto de intereses: Los autores han declarado que no existen conflictos de intereses.

Concebido y diseñado los experimentos: HL KZ. Realizado los experimentos: KZ HL. Contribuido reactivos / materiales / herramientas de análisis: KZ. Escribió el documento: HL.

Revisado y editado el manuscrito: JL HL. Recibido 2013 22 de Ene; Aceptado 2013 2 de mayo.

aviso de copyright

Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en

cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan.

Este artículo ha sido citado por Otros artículos en el PMC.

Resumen a: Ir a: Ir

Como el precursor principal para la síntesis de lactosa, grandes cantidades de glucosa son requeridos por vacas lecheras lactantes. La

producción de leche depende en gran medida de la síntesis de lactosa mamaria debido a su propiedad osmoregulatoria para la captación

mamaria de agua. Por lo tanto, la disponibilidad de glucosa en la glándula mamaria puede ser un regulador potencial de la producción de leche.

En el presente estudio, el efecto de la disponibilidad de glucosa en la expresión de los genes clave implicados en la síntesis de grasa de la leche,

la lactosa y el metabolismo de la glucosa in vitro fue investigado. células epiteliales mamarias bovinas (BMEC) se trataron durante 12 h con

diferentes concentraciones de glucosa (2,5, 5, 10 o 20 mmol / L). Las mayores concentraciones de glucosa (10-20 mmol / L) no afectó a la

expresión de mRNA de la acetil-CoA carboxilasa, la unión diacil glicerol acil transferasa, glicerol-3 fosfato acil transferasa y α-lactalbúmina,

mientras que la ácido graso sintasa, elemento regulador de esteroles proteína-1 y beta-1, 4-galactosil transferasa expresión de ARNm aumentó a

10 mmol / L y luego disminuyeron en 20 mmol / L. El contenido de la sintasa de lactosa aumentó al aumentar la concentración de la glucosa, con

la adición de más alto valor en 20 mmol / L de glucosa. Por otra parte, el aumento de la concentración de glucosa estimulado las actividades de

piruvato quinasa y la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, y eleva el estado de energía de la BMEC. Por lo tanto, se dedujo que después de

aumentar la disponibilidad de glucosa, el extra absorbe la glucosa se repartió de entrar en la síntesis de grasa de leche y lactosa por la

regulación de la expresión de ARNm de genes clave, la promoción del metabolismo de la glucosa por glucólisis y la pentosa fosfato vía así como

el estado de energía. Estos resultados indicaron que la disponibilidad suficiente de glucosa en las CEMB puede promover el metabolismo de la

glucosa, y afectar a la síntesis de leche

composición.

Introducción a: Ir a: Ir

Como el precursor principal para la síntesis de lactosa, grandes cantidades de glucosa son requeridos por vacas lecheras lactantes. En comparación con

las vacas no lactantes lácteos, los requisitos de glucosa son mayores de aproximadamente cuatro veces en vacas lactantes [ 1 ] . La producción de leche

depende en gran medida de la síntesis de lactosa mamaria debido a su propiedad osmoregulatoria para la captación mamaria de agua. Glándula mamaria

lactante puede consumir hasta el 85% de la glucosa circulante [ 2 ] . Por lo tanto, la disponibilidad de glucosa para la glándula mamaria podría ser un

regulador potencial de la producción de leche. Los productos metabólicos de la glucosa, tales como ATP y NADPH, son factores importantes en la síntesis

de leche de las vacas lecheras. Los efectos de las infusiones de diferentes niveles de glucosa en el rendimiento de la lactancia y los perfiles metabólicos se

han estudiado ampliamente [ 3 ] , [ 4 ] . Algunos estudios han confirmado que curvilínea producción de leche aumenta y proteína de la leche de concentración

lineal aumentó con el aumento los niveles de glucosa [ 4 ] , [ 5 ] , Mientras que otros ensayos han mostrado resultados inconsistentes. Con la infusión de

glucosa, Lemosquet et al. [ 6 ] y Al-Trad et al. [ 7 ] demostrado ningún efecto sobre la producción de leche, mientras que Oldick et al. [ 8 ] observado una

disminución en la producción de leche. Estos resultados contradictorios pueden atribuirse a la inhibición o reducción de la gluconeogénesis durante la

infusión de glucosa [ 9 ] , O la diferencia de las dietas que proporciona suministro posruminal de almidón [ 3 ] , [ 5 ] .

Sin embargo, hay poca información disponible sobre los efectos y no está claro qué mecanismos serían disponibilidad de la glucosa en las células

epiteliales mamarias bovinas (CEMB) in vitro. Xiao y Cant encontrado que a concentraciones de glucosa fisiológicos, la fosforilación por la

hexoquinasa (HK) ejerce 80% del control de metabolismo de la glucosa a la lactosa y CO, y el transporte ejerce el 20% restante [ 10 ] . Nuestro estudio

anterior reveló además que la concentración de glucosa afecta

2 a la captación de glucosa en parte por la alteración de la actividad de HKS y HK2
puede desempeñar un papel importante en la regulación de la absorción de glucosa en las CEMB [ 11 ] . En el presente estudio, CEMB se utiliza para

investigar el efecto de la disponibilidad de glucosa en la expresión de los genes clave implicados en la síntesis de grasa de la leche, la lactosa y el

metabolismo de la glucosa in vitro. Estos resultados podrían ayudar a complementar las teorías de manipulación nutricionales de la glucosa en la

glándula mamaria de vacas lecheras en producción.

Materiales y métodos a: Ir a: Ir

Declaración de Ética

En el estudio, los experimentos con animales fue aprobado por el Comité de Cuidado y Uso de Animales institucional y llevó a cabo de conformidad

con las directrices para el cuidado y uso de animales de laboratorio en la Universidad de Zhejiang.

Cultura y Tratamiento de células bovinas Epiteliales Mamarias

tejidos mamarios se obtuvieron a partir de dos vacas lecheras Holstein saludables en la etapa media de la lactancia. Los tejidos se
3
desmenuzaron en trozos de 1 mm y se incubaron a 37 ° C en una atmósfera saturada de agua de 95% de aire y 5% de CO. Los procedimientos

de purificación y la cultura
2 de BMEC fueron descritas anteriormente [ 12 ] . Brevemente, BMEC y células de fibroblastos se separaron con 0,25% de

tripsina y 0,15% de tripsina más 0,02% de EDTA. Las células dispersadas se sembraron a la densidad de 5 x 10 células / ml en placas de cultivo
4
de seis pocillos en medio DMEM / F12 (Gibco, Grand Island, NY, EE.UU.). El medio basal se suplementó con 1 mg / ml de hidrocortisona, 5 g / ml

de prolactina, 5 g / ml de insulina, 5 mg / ml de transferrina, 10 ng / ml de factor de crecimiento epidérmico (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), 1 % de

estreptomicina, 1% penicilina, 1% de glutamina, y

10% de suero de ternera fetal (Sangon, Shanghai). Las células se incubaron a 37 ° C en una atmósfera saturada de agua que contiene 5% de

CO. Después de BMEC cubierto 80% de la2 superficie, el medio de cultivo basal se cambió a DMEM sin glucosa (Gibco, Grand Island, NY,

EE.UU.) durante 1 h, y luego el medio se suplementó con diferentes niveles de D-glucosa (2,5, 5 , 10 o 20 mmol / L, Sigma, St Louis, MO,

EE.UU.) durante otras 12 h para evaluar sus efectos sobre la expresión de genes clave implicados en la síntesis de grasa de la leche, lactosa

y metabolismo de la glucosa in vitro.

La abundancia de ARNm

El ARN total se extrajo mediante el reactivo Trizol (Invitrogen, Carlsbad, EE.UU.), y la primera hebra de cDNA se transcribió utilizando un

kit de transcripción inversa (Takara, Tokio, Japón). La abundancia de ARNm se detectó por PCR en tiempo real cuantitativa (ABI 7500,

Applied Biosystems, Singapur) usando el kit de reactivo SYBR PrimeScript ™ (Takara Biotecnología, China) en un volumen de reacción de

20! L. Para amplificaciones por PCR, los pares de cebadores se diseñaron y sintetizaron (Takara Biotecnología, China) como en

tabla 1 . La amplificación programas eran como sigue: 10 s de pre-desnaturalización a 94 ° C, seguido de 40 ciclos de 5 s de

-ΔΔCT
desnaturalización a 95 ° C, y 34 s de hibridación y extensión a 60 ° C. El 2 (ciclo
umbral, se utilizó el método CT) para calcular los cambios relativos [ 13 ] .

tabla 1
Los cebadores de los genes clave implicados en la síntesis de grasa de leche y lactosa

para la reacción en cadena de polimerasa en tiempo real.

Lactosa Synthase contenido y las actividades de piruvato quinasa y la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa

El contenido de la sintasa de lactosa (LS) se estimó usando un kit de ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (Huijia Biotecnología, Shanghai,

China). La intensidad del producto a 450 nm era directamente proporcional a la concentración de LS presentes en las muestras. Actividades de

piruvato total de quinasa (PK) y deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato (G6PD) se ensayaron mediante los cambios de absorbancia a una longitud de

onda de 340 nm con el kit de PK de ensayo (Jiancheng Instituto de Bioingeniería, Nanjing, China) y el kit de ensayo de G6PD (Genmed, Arlington ,

ESTADOS UNIDOS).

Estado de energía

los ΔΨ se determinó por JC-1 (5, 5 ', 6, 6' - tetracloro - 1, 1 ', 3, 3' -
tetraethylbenzimidazolcarbocyanine yoduro) método (Kaiji, Nanjing, China). Las células con un mayor ΔΨ
puede absorber más de JC-1 en la mitocondria para formar polímeros, que pueden ser visualizadas por microscopía de fluorescencia
a 550-620 nm (Nikon, Tokio, Japón). El contenido de ATP se midió por el método luciferinluciferase [ 14 ] . Las células se lisaron y se
aclararon por centrifugación a 4 ° C (12.000 g, 5 min), seguido de la medición de la luminiscencia en un luminómetro (Molecular
Devices, California, EE.UU.).

Análisis estadístico

Los experimentos se realizaron con cuatro repeticiones, y cada experimento se repitió tres veces. Todos los datos se analizaron estadísticamente

por ANOVA, y pruebas de rangos múltiples de Duncan usando el sistema de software de SAS. P < 0,05 fue considerado como una diferencia

significativa.

Resultados y discusión a: Ir a: Ir
Efectos de la glucosa en la disponibilidad de mRNA expresión de los genes clave involucrados en la síntesis de grasa de la leche

La modificación de la producción de grasa de la leche por la glucosa es un aspecto principal de la nutrición de la vaca lechera. Sin embargo, hay poca

información disponible sobre cómo la disponibilidad de glucosa afecta a la síntesis de grasa de leche en las vacas lecheras. La síntesis de la grasa de

leche puede ser regulada en múltiples niveles, incluyendo la transcripción, traducción y recambio de proteínas [ 15 ] , [ dieciséis ] . Acetil-CoA carboxilasa

(ACC), ácido graso sintasa (FAS), diacil glicerol acil transferasa (DGAT) y glicerol-3 fosfato acil transferasa (GPAT) son los pasos limitante de la

velocidad de la síntesis de grasa de la leche [ 17 ] , [ 18 ] . Los genes que especifican estas enzimas, implicados en los procesos clave de la lipogénesis

dentro de la glándula mamaria, son genes candidatos cuya regulación se ha estudiado primero [ dieciséis ] , [ 19 ] . En el estudio actual, se encontró que,

en comparación con 5 mmol / l de glucosa, concentraciones mayores de glucosa (10-20 mmol / L) no afectó a la abundancia de ARNm de ACC, DGAT

y GPAT (p> 0,05; Figura 1 ), Mientras que 20 mmlol / L de glucosa resultó en marcadamente menor expresión de FAS mRNA ( p < 0,05; Figura 1 ). El

elemento regulador de esteroles proteína de unión-1 (SREBP-1) es el factor clave de transcripción que controla la expresión de los genes que

codifican las enzimas para la síntesis de grasa de la leche

[ 20 ] , [ 21 ] . En relación al control (5 mmol / L), SREBP-1 mRNA expresión aumentó a 10 mmol / L y luego disminuyó a 20 mmol / L ( p < 0,05; Figura

1 ). El aumento de SREBP-1 mRNA en 10 mmol / L se cree que es una respuesta de salvamento, lo que aumentará la expresión y actividad de las

proteínas necesarias para la adquisición de nutrientes [ 22 ] , Y están aún por estudiarse los mecanismos específicos de esta respuesta. La alta

concentración de glucosa disminuyó la expresión de genes en relación implicada en la síntesis de grasa de leche acompañado con los resultados

anteriores que las infusiones de glucosa duodenales redujo la producción de grasa de la leche debido a una disminución de la actividad de la

lipoproteína lipasa y una disminución del proceso de esterificación intramamaria [ 5 ] ,

[ 23 ] . La transcripción de los genes para las enzimas lipogénicos también está regulada por la glucosa en el tejido adiposo, el hígado y las células ß

pancreáticas [ 24 ] . Por lo tanto, el aumento de la disponibilidad de glucosa puede reducir la síntesis de grasa de la leche en parte por afectar a la

transcripción de los genes de la lipogénesis en la glándula mamaria.

Figura 1
La expresión de mRNA de los genes clave implicados en la síntesis de grasa de la

leche en las CEMB.

Efectos de la glucosa en la disponibilidad de mRNA expresión de los genes clave involucrados en la síntesis de
lactosa y el contenido de lactosa sintasa

La glucosa es el precursor principal de lactosa, y su disponibilidad está fuertemente ligada a la síntesis de la lactosa. Sin embargo, el

mecanismo por el cual aumentó la disponibilidad de glucosa afecta a la síntesis de lactosa en las CEMB es todavía poco clara. Farrell et al.

demostró que la enzima unida a membrana, beta-1, 4-galactosil transferasa (B4GALT) y la proteína de la leche α-lactalbúmina (LA) se unen

para formar LS, que sintetiza la lactosa en el aparato de Golgi de las células epiteliales mamarias [ 25 ] . B4GALT es la única enzima conocida a

galactosa transferencia de uridina 5 'difosfo-galactosa al terminal N-acetylglucoseamine a la forma lactosa [ 26 ] . En comparación con el grupo

de tratamiento glucosa 2,5 mmol / L, B4GALT mRNA fue mayor en los tratamientos de glucosa 5 y 10 mmol / l, pero no en el tratamiento 20

mmol / L ( p < 0,05; Figura 2 ). En contraste con B4GALT mRNA, no se encontraron cambios obvios de nivel LA mRNA entre las células

cultivadas con el diferente nivel de glucosa (2,5-20 mmol / L) ( p> 0,05; Figura 2 ). Además de la expresión de B4GALT y Los Ángeles, también

se evaluó el contenido de LS. El contenido LS fue mayor en las CEMB incubó con 10 y 20 mmol / L de glucosa que los que se incubaron con

2,5 y 5 mmol / L de glucosa ( P < 0.05, figura 3 ). El aumento de contenido LS fue más estrechamente correlacionado con el aumento de la

biosíntesis de lactosa [ 27 ] , Que se cree que participan en la producción de leche mejorada [ 28 ] . Sobre la base de la literatura actual y nuestros

resultados, aumentando
la disponibilidad de glucosa puede estimular la síntesis de la lactosa en parte mediante la alteración de la expresión de B4GALT a niveles

transcripcionales y post-transcripcional y luego aumentar la producción de leche.

Figura 2
La expresión de mRNA de los genes clave implicados en la síntesis de la lactosa

en las CEMB.

figura 3
contenido sintasa lactosa en las células epiteliales mamarias bovinas.

Efectos de la glucosa en la disponibilidad metabolismo de la glucosa

La glucosa en las CEMB se utiliza principalmente para la síntesis de lactosa [ 29 ] . Sin embargo, el metabolismo a través de la glucólisis y la

pentosa fosfato vía también juega un papel importante en la acción de la glucosa [ 30 ] . La glucólisis es parte de una ruta metabólica universal para

la conversión catabólica de la glucosa en energía. La fosfofructoquinasa, la hexoquinasa, y PK son sitios potenciales de control en la vía

metabólica. PK cataliza el último paso de la glucólisis, en la que se forman piruvato y ATP. En el presente estudio, la actividad PK se incrementó

significativamente en presencia de 10 mmol / l de glucosa en comparación con 2,5 mmol / l de glucosa ( P < 0.05,

Figura 4 ). Renner et al. informó de que la concentración de glucosa influenciada vías metabólicas de glucosa y el flujo relativo a través de allí

vías en las células de hepatoma de rata [ 31 ] . A niveles bajos (5 a 50 μ METRO), glucosa fue utilizado por las células para la síntesis

macromolecular y los procesos oxidativos. Con concentraciones más altas que 1 mmol / L, la glucólisis eliminado todo el exceso de glucosa y

convertido a lactato

[ 31 ] . La vía del fosfato de pentosa, que es un proceso que genera NADPH y pentosas, es una alternativa a la glucólisis. G6PD es la

enzima que controla la velocidad de esta vía. En nuestros resultados, la actividad de G6PD mostró una tendencia similar con PK. Se fue

mayor a 10 mmol / l de glucosa que aquella a 2,5 mmol / L de glucosa ( P < 0.05, Figura 4 ), Que fue consistente con los hallazgos de Rigout

et al. [ 5 ] . Este resultado indica que los aumentos en la actividad de G6PD PK y pueden aumentar el metabolismo de la glucosa por

glucólisis y la pentosa fosfato vía cuando BMEC están expuestos a concentraciones elevadas de glucosa.

Figura 4
La actividad de piruvato quinasa y deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato

en las CEMB.

También se evaluó el estado energético de las CEMB. Es bien conocido que la síntesis de la leche es la parte principal de la biosíntesis celular, que

basa en el suministro de energía [ 32 ] . Celular ΔΨ, un marcador del estado de energía de la célula, es un componente dominante de las mitocondrias que

respiran y directamente relacionada con ATP potencial de producción [ 33 ] . mayor ΔΨ y los niveles de ATP se observaron en las CEMB incubaron con 10

mmol / l de glucosa que los que se incubaron con 2,5 mmol / l de glucosa ( P <0,05, las figuras 5 y 6 ), Lo que sugiere que el aumento del suministro de

energía explica en parte para la síntesis de leche mejorada en las células. Se demostró que los niveles altos de glucosa aumentaron célula ΔΨ, y la

proliferación celular dependiente de la energía afectada de timocitos de pollo y células de cáncer pancreático [ 34 ] , [ 35 ] . Por lo tanto, los niveles de

glucosa regulados el estado de energía de las CEMB, lo que indica que los cambios en la disponibilidad de glucosa o el metabolismo de la glucosa

puede afectar a los procesos energydependent, como la proliferación BMEC y síntesis de leche.

Figura 5
 potencial mitocondrial en las células epiteliales mamarias bovinas.

Figura 6
contenido de ATP en las células epiteliales mamarias bovinas.

conclusiones

En comparación con las concentraciones fisiológicas de glucosa (2-5 mmol / L) [ 36 ] , Elevado nivel de glucosa puede afectar a la síntesis de grasa de

leche y lactosa mediante la regulación de la expresión de ARNm de genes clave (ACC, FAS, SREBP-1 y B4GALT), promueven el metabolismo de

glucosa a través de la glucólisis y la pentosa fosfato vía y alteran el estado energético de las células . En conclusión, este estudio reveló que después

de aumentar la disponibilidad de glucosa, el exceso de glucosa absorbida puede promover el metabolismo de la glucosa, y afectan a la síntesis de la

composición de la leche.

Expresiones de gratitud a: Ir a: Ir

Los autores agradecen a la doctora Martha Stipanuk en la Universidad de Cornell para la revisión de la lengua y sugerencias que mejoraron

sustancialmente el manuscrito Inglés.

Declaración de financiación a: Ir a: Ir

Este estudio fue apoyado por becas del Programa Nacional de Investigación Básica del Ministerio de Ciencia y Tecnología de China

(Nº 2011CB100801), el fondo destinado a Sistema de Investigación Agrícola de China (CARS-37) y la Fundación Nacional de Ciencias

Naturales de China (Nº 30901034). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a

publicar, o la preparación del manuscrito.

referencias a: Ir a: Ir

1. Campana AW, Bauman DE (1997) Las adaptaciones del metabolismo de la glucosa durante el embarazo y la lactancia. J Glándula Mamaria

Biol Neoplasia 2: 265-278 [ PubMed ]

2. Annison EF, Linzell JL (1964) La oxidación y la utilización de la glucosa y acetato por la glándula mamaria de la cabra en relación con

su sobre-todo el metabolismo y a la formación de la leche. J Physiol 175: 372-385 [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]

3. Hurtaud C, Lemosquet S, Rulquin H (2000) Efecto de las infusiones duodenales graduadas de la glucosa en el rendimiento y la composición de la leche

de las vacas lecheras. 2. Las dietas a base de ensilaje de hierba. J Dairy Sci 83: 2952-2962 [ PubMed ]

4. Rulquin H, Rigout S, Lemosquet S, Bach A (2004) La infusión de glucosa dirige circulante aminoácidos a la glándula mamaria en

vacas lecheras bien alimentados. J Dairy Sci 87: 340-349 [ PubMed ]

5. Rigout S, Lemosquet S, Van Eys JE, Blum JW, Rulquin H (2002) duodenales aumentos de glucosa en glucosa flujos y la síntesis de la lactosa en las

vacas lecheras de ensilado alimentados con hierba. J Dairy Sci 85: 595-606 [ PubMed ]

6. Lemosquet S, Rideau N, Rulquin H, Faverdin P, Simon J, et al. (1997) Efectos de una glucosa duodenal
infusión sobre la relación entre las concentraciones plasmáticas de glucosa e insulina en las vacas lecheras. J Dairy Sci 80:

2854-2865 [ PubMed ]

7. Al-Trad B, Reisberg K, Wittek T, Penner GB, Alkaassem A, et al. (2009) El aumento de infusiones intravenosas de glucosa en mejorar la

condición del cuerpo, pero no el rendimiento de lactancia en vacas lecheras midlactation. J Dairy Sci 92: 5645 a 5.658 [ PubMed ]

8. Oldick BS, Staples CR, Thatcher WW (1997) abomaso infusión de glucosa y la grasa de efecto sobre la digestión, la producción, y

funciones de ovario y de útero de vacas. J Dairy Sci 80: 1315-1328 [ PubMed ]

9. Judson GJ, Leng RA (1973) Estudios sobre el control de la gluconeogénesis en ovejas: efecto de la infusión de glucosa. Brit J Nutr

29: 175-195 [ PubMed ]

10. Xiao CT, Cant JP (2005) Relación entre el transporte de glucosa y el metabolismo en las células epiteliales mamarias bovinas

aislados. J Dairy Sci 88: 2794-2805 [ PubMed ]

11. Zhao K, Liu HY, Wang HF, Zhou MM, Liu JX (2012) Efecto de la disponibilidad de la glucosa en el transporte de glucosa en las células

epiteliales mamarias bovinas. Animal 6: 488-493 [ PubMed ]

12. Zhao K, Liu H, Zhou M, Liu J (2010) Establecimiento y caracterización de un modelo de célula epitelial mamaria lactante
bovina para el estudio de la síntesis de leche. Cell Biol Int 34: 717-721 [ PubMed ]

13. Livak KJ, Schmittgen TD (2001) Análisis de relativos datos de expresión génica utilizando PCR en tiempo real

cuantitativo y el método 2-ΔΔCT. Métodos 25: 402-408 [ PubMed ]

14. Kimmich GA, Randles J, marca JS (1975) Ensayo de cantidades picomoles de ATP, ADP, AMP y usando el sistema de la
enzima luciferasa. Anal Biochem 69: 187-206 [ PubMed ]

15. Harvatine KJ, Boisclair YR, Bauman DE (2009) Los recientes avances en la regulación de la síntesis de grasa de la leche. Animal 3:

40-54 [ PubMed ]

16. Vaulont S, Vasseur-Cognet M, Kahn A (2000) la regulación de la glucosa de la transcripción génica. J Biol Chem 275: 31555 a

315558 [ PubMed ]

17. Bionaz M, Loor JJ (2008) Gene redes de conducción síntesis de grasa de la leche bovina durante el ciclo de lactancia. BMC Genomics

9: 366-387 [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]

18. Bernard L, Leroux C, Chilliard Y (2008) Expresión y regulación nutricional de genes lipogénicos en la glándula mamaria
lactante reminant. Adv Exp Med Biol 606: 67-108 [ PubMed ]

19. Towle HC, Kaytor EN, Shih HM (1997) Regulación de la expresión de genes de enzimas lipogénicos por hidratos de carbono.

Annu Rev Nutr 17: 405-433 [ PubMed ]

20. Edwards PA, Tabor D, Kast HR, Venkateswaran A (2000) Regulación de la expresión génica por SREBP y SCAP. Bioch Bioph
et Acta 1529: 103-113 [ PubMed ]

21. Bauman DE, Perfield JW, Harvatine KJ, Baumgard LH (2008) La regulación de la síntesis de grasa por el ácido linoleico

conjugado: la lactancia y el modelo de los rumiantes. J Nutr 138: 403-409 [ PubMed ]

22. Hammerman PS, Fox CCJ, Thompson CB (2004) Inicios de una vía de transducción de señales para el control bioenergético de la

supervivencia celular. Trends Biochem Sci 29: 586-592 [ PubMed ]

23. Hurtaud C, Rulquin H, Verite R (1998) Efecto de las infusiones duodenales graduadas de la glucosa en el rendimiento y la composición de la leche de

las vacas lecheras. 1. dietas a base de ensilaje de maíz. J Dairy Sci 81: 3239-3247
[ PubMed ]

24. Girard J, Ferré P, Foufelle F (1997) Los mecanismos por los que los hidratos de carbono regulan la expresión de genes de enzimas

glicolíticas y lipogénicas. Annu Rev Nutr 17: 325-352 [ PubMed ]

25. Farrell Jr HM, Jimenez-Flores R, Bleck GT, Brown EM, Butler JE, et al. (2004) Nomenclatura de las proteínas de la leche de
revisión sexto de vaca. J Dairy Sci 87: 1641-1674 [ PubMed ]

26. Ramakrishnan B, Qasba PK (2001) Estructura cristalina de la sintasa de lactosa revela un gran cambio conformacional en su
componente catalítico, la β 1, 4-galactosiltransferasa-I. J Mol Biol 310: 205-218 [ PubMed ]

27. Mellenberger RW, Bauman DE (1974) la síntesis de la lactosa en el tejido mamario de conejo durante el embarazo y la

lactancia. Biochem J 142: 659-665 [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]

28. Lemosquet S, Rigout S, Bach A, Rulquin H, Blum JW metabolismo (2004) Glucosa en vacas en respuesta a infusiones
isoenergéticas de ácido propiónico o glucosa duodenal. J Dairy Sci 87: 1767- 1777 [ PubMed ]

29. Kleiber M, Negro AL, Brown MA, Baxter CF, Luick JR, et al. (1955) La glucosa como un precursor de constituyentes de la leche en

la vaca lechera intacto. Bioch Bioph et Acta 17: 252-260 [ PubMed ]

30. Abraham S, Hirsch PF, Chaikoff IL (1954) La importancia cuantitativa del carácter glucólisis y nonglycolysis en la utilización de

glucosa por la glándula mamaria de rata. J Biol Chem 211: 31-38 [ PubMed ]

31. Renner ED, Plagemann PGW, Bernlohr RW (1972) de permeación de glucosa por simple y difusión facilitada por las células de

hepatoma de rata Novikoff en cultivo en suspensión y su relación con el metabolismo de la glucosa. J Biol Chem 247: 5765.-5776 [ PubMed ]

32. Möbius K, Arias-Cartin R, Breckau D, Hannig A, Riedmann K, et al. (2010) la biosíntesis de Heme está acoplado a las cadenas de transporte de

electrones para la generación de energía. Proc Natl Acad Sci EE.UU. 107: 10436-10441 [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]

33. Rathmell JC, Heiden MGV, Harris MH, Frauwirth KA, Thompson CB (2000) En ausencia de señales extrínsecas, la utilización de

nutrientes por los linfocitos es insuficiente para mantener o bien el tamaño celular o viabilidad. Cell Mol 6: 683-692 [ PubMed ]

34. Humphrey BD, Rudrappa SG (2008) Aumento de la disponibilidad de glucosa activa el metabolismo de timocitos de pollo y la

supervivencia. J Nutr 138: 1153-1157 [ PubMed ]

35. Han L, Ma Q, Li J, Liu H, Li W, et al. (2011) de alta glucosa promueve la proliferación de células de cáncer pancreático a través de la

inducción de la expresión de EGF y de transactivación de EGFR. PLoS One 6 (11): e27074. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]

36. Kahn CM (2005) Manual Merck veterinaria. 9ª Ed. Merck & Co., Inc., Whitehouse Station, NJ 2586 P.

Se proporcionan artículos de PLoS ONE aquí por cortesía de Biblioteca Pública de la Ciencia