TEMA DE INVESTIGACION: SEMEN (PAJILLA) SEXADO EN BOVINOS

INSTRUCTOR: NELSON ANDRES SIACHOQUE

INTEGRANTE: ANDRES FELIPE MESA SABOGAL

TECNOLOGO EN GESTION DE EMPRESAS AGROPECUARIAS

FICHA: 1692260

DUITAMA-BOYACA

2019
El sexado de semen consiste en la separación de los espermatozoides con
cromosoma X de los espermatozoides portadores del cromosoma Y. Esta
separación es posible porque en los bovinos los espermatozoides con
cromosoma X tienen cerca de 4 % más de ADN (material genético) que
los espermatozoides con Y.

Esa diferencia puede variar entre las razas bovinas, siendo mayor en toros de
raza europea (Bos taurus) y menor en las razas originarias de Asia (Bos
indicus). Actualmente el método más utilizado y seguro es la citometria de flujo,
que hace la separación a través de una corriente eléctrica y luz ultravioleta.

La ganadería bovina presenta gran interés en la pre-determinación del sexo,

donde la productividad de los sistemas es favorecida por la progenie de uno de
los sexos. La selección del sexo tiene valor económico significativo, trayendo
numerosos beneficios como:

 Definir los rumbos del agro negocio.

 Aumento de la intensidad de selección
 Facilitar el manejo.

Proceso de sexado del espermatozoide

El semen de toros en su mayoría puede ser eficientemente procesado para

producir pajillas sexadas. Los toros donadores deben ser correctamente
preparados mediante una limpieza externa. Después el semen es colectado
con la ayuda de vagina artificial o electro eyaculador. La cantidad de eyaculado
colectado varía entre reproductores, generalmente son colectados dos
eyaculados, 2 a 3 veces por semana.

Diferencia en el contenido de ADN entre algunas razas de toros Fuente:

Garner, DL., 2006.
La frecuencia de la eyaculación es muy importante, para liberar los epidídimos
de espermatozoides degenerados y envejecidos, descartando así
algunos espermatozoides inapropiados para el proceso. Después de la colecta
del semen, éste debe ser enviado al laboratorio de sexado. El semen tiene un
intervalo de tiempo de 8 a 12 horas entre la colecta y su procesamiento antes
de que su sexado sea inviable. La probabilidad de éxito en el proceso
disminuye progresivamente después de la colecta del semen. Ese intervalo de
tiempo puede variar de acuerdo a cada toro, pero el límite es 18 horas entre la
colecta de semen, el final del proceso y la crio preservación del semen, para
que el proceso de sexado sea eficiente.

CLASIFICACIÓN DEL ESPERMATOZOIDE

La muestra se ubica en el citómetro de flujo dentro de una pared cilíndrica de la

suspensión líquida, que guía el flujo del líquido por un separador. El eyaculado
pasa a través de un tubo inyector que vibra en alta frecuencia generando
aproximadamente 70.000 gotas por segundo, dentro de las cuales se
encuentran los espermatozoides coloreados.

Proceso de sexado del semen Fuente: Osvaldo Teobaldo, 2007.

En la Figura 3 se muestra el proceso de sexado del semen, así, conforme

cada espermatozoide pasa, un par de detectores de luz láser causa la
fluorescencia del colorante. Cada gota iluminada por el láser es analizada por
foto-detectores. El valor obtenido por los detectores es procesado por el
computador y devuelto al inyector para proceder con la separación, que es
realizada a través de la aplicación de una carga eléctrica en cada gota, la cual
es sometida a un campo eléctrico. De esta forma las gotas cargadas positiva
y/o negativamente pasan entre un par de placas continuamente cargadas, las
cuales atraen partículas opuestamente cargadas, desviando el flujo en la
dirección de un receptor para el tipo apropiado del espermatozoide deseado.
Las gotas no cargadas y las gotas que fallen, pasan directamente para el
recipiente de desechos.

Este proceso aprovecha cerca del 40% de los espermatozoides que atraviesan
el clasificador a una velocidad de 100 km/h aproximadamente. Así, se tiene un
total de 20.000 espermatozoides por segundo; cerca de
4000 espermatozoides por segundo de cada sexo podrían ser clasificados
simultáneamente.

Tabla 1. Presentación comercial pajillas de semen sexado.

El proceso de clasificación diluye extremadamente el semen, de modo que la

re-concentración por la centrifugación es necesaria para preparar el semen
sexado antes de ser empacado. De acuerdo con la concentración final deseada
(2,1 x 10⁶ o 5 x 10⁶), adicionar el volumen de la fracción A (sin glicerol) y el de
la fracción B (con glicerol) del diluyente (Sexing Technologies Brasil, 2007).
Después de ajustada la concentración, se envasa el semen en pajillas de 0,25
mL, de acuerdo a lo indicado en la Tabla 1.

La práctica actual utiliza 2 x 10⁶ espermatozoides sexados por pajilla de 0.25

mL, en comparación a las pajillas convencionales que son llenadas con 10 a 20
x 10⁶ espermatozoides. Aproximadamente el 60% de los espermatozoides de
la muestra son excluidos o perdidos durante el proceso, por eso el uso
del semen sexado requiere prácticas de manejo precisas.

Todos los lotes producidos son sometidos a controles virológicos y

bacteriológicos, que deben tener un resultado negativo. El examen de motilidad
pos- descongelamiento (cero horas), debe ser mayor del 50%, el vigor mayor
que 3, los acrosomas intactos (0 a 3 horas) deben ser superiores al 50%, la
concentración espermática debe ser mínima de 2 x 10⁶ espermatozoides por
dosis. La pureza se logra a través de una prueba que consiste en descongelar
una pajilla sexada y pasarla nuevamente por el citómetro. De esta manera, se
observa la existencia o no de espermatozoides con el cromosoma deseado.
Las purezas menores a 87% son descartadas.

Supervivencia y limitaciones del semen sexado crio preservado

Tabla 2. Resultados comparativos de la utilización de semen sexado (S) y

convencional (SC).

El semen sexado es crio preservado del mismo modo que el semen

convencional, con la excepción de que el número de espermatozoides/dosis es
reducido. Debido a la menor cantidad de espermatozoides/dosis su
supervivencia se torna progresivamente más importante, no solamente debido
a la menor concentración, sino también por el tiempo considerable y por el
dinero invertido en la clasificación de estos gametos.

La Tabla 2 muestra los resultados de algunas investigaciones realizadas en

cinco estados brasileros (Mato Grosso do Sul MS, Mato Grosso MG, Acre AC y
Rondonia RO), utilizando pajillas de semen sexado y semen convencional para
inseminación artificial, en cada novilla Nelore fue utilizada apenas una dosis
de semen.

El porcentaje de preñez (%P) utilizando semen sexado fue de 51% y

con semen convencional 59%, no se presentó diferencia estadísticamente
significativa entre la utilización de ambos, siendo el porcentaje de preñez del
sexo femenino (%F) de 92.4% para semen sexado y de 48% para el semen
convencional.