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Santiago- Chile
2012
“Hay que hacer de la vida un sueño
Pierre Curie.
ayuda otorgada.
compañía.
A Ricardo, por ser tan especial, por estar ahí en un periodo importante de
mi vida.
Yasser, Alejandro, Pablito, Renzo, Pancha y Pelao por ser más que
compañeros de parranda.
esfuerzo y dedicación, por ser siempre mi pilar, por construir una familia
gigante que me apoyó en cada decisión que tomé. A mis hermanas; Maca,
Moni y Pola por aguantar los altibajos de esta etapa y por ser compañeras
el más difícil, por aguantar todas las reacciones producto de esta tesis.
i
Índice
Índice. ....................................................................................................... ii
Índice de Figuras. ................................................................................... iv
Índice de Tabla. ...................................................................................... vii
Abreviaciones. ...................................................................................... viii
Resumen. ................................................................................................. ix
Summary ................................................................................................. xi
1. Introducción. ............................................................................................... 1
1.1. Oxígeno molecular singulete................................................................... 2
1.2. Flavonoides. ........................................................................................... 9
1.2.1. Actividad antioxidante. ................................................................... 13
1.2.2. Capacidad quelante de flavonoides. ............................................... 14
1.2.3. Actividad pro-oxidante. ................................................................... 15
1.2.4. Reacción de flavonoles con oxígeno molecular singulete. .............. 16
1.3. Relaciones lineales de energía libre de solvatación. ............................. 18
1.4. Objetivo. ............................................................................................... 20
2. Materiales. ................................................................................................. 21
3. Instrumentación. ....................................................................................... 22
3.1. Espectroscopia de absorción UV-vis..................................................... 22
3.2. Detección de la luminiscencia infrarroja del O2(1g). ............................ 22
4. Metodología. .............................................................................................. 24
4.1. Evaluación de la constante de velocidad de reacción química entre
oxígeno molecular singulete y flavonoles. ...................................................... 24
4.2. Estudio espectroscópico y reactividad con oxígeno molecular singulete
de la reacción entre flavonoles y cationes divalentes. .................................... 25
4.3. Determinación de la constante de velocidad de desactivación total de
O2(1g) por 9,10-DMA. .................................................................................... 26
4.4. Tratamiento estadístico de las constantes de velocidad de reacción
química en mezclas acuosas. ......................................................................... 27
ii
5. Resultados y discusión. ........................................................................... 29
5.1. Evaluación de la constante de velocidad de desactivación total de
O2(1g) por 9,10-DMA en mezclas acuosas. ................................................... 29
5.2. Evaluación de la constante de velocidad de reacción química entre
flavonoles y O2(1g) en mezclas acuosas (kr). ................................................ 32
5.3. Efecto de la presencia de iones divalentes. Cambio en la reactividad de
los flavonoles con O2(1g). .............................................................................. 39
5.3.1. Estudio espectroscópico de la interacción de flavonoles con
iones divalente. ..................................................................................... 39
5.3.2. Estudio de la reactividad de oxígeno molecular singulete con
flavonoles en presencia de iones divalente. .......................................... 49
6. Conclusiones............................................................................................. 59
7. Bibliografía. ............................................................................................... 61
iii
Índice de Figuras
iv
Figura 15 Relación de la constante de velocidad de reacción química entre 1O2 y
flavonoles con el porcentaje de agua en metanol pH 5,1. ................. 36
Figura 22 Estabilidad del aducto Q-Mg en el tiempo para dos razones molares
en metanol. ....................................................................................... 43
v
Figura 29 Disminución de la absorción durante la foto-oxidación de Quer en
presencia de Cu(II). Sens: RB, solvente: mentanol, [Cu]/[Quer]=0,5. 50
Figura 32 Ajuste cinético de pseudo primer orden para la reacción de Quer con
1
O2 en presencia de Ca(II) a diferentes razones molares
[Ca]/[Quer]. ....................................................................................... 54
Figura 33 Ajuste cinético de pseudo primer orden para la reacción de 3-HF con
1
O2 en presencia de Mg(II) a diferentes razones molares
[Ca]/[3-HF]. ....................................................................................... 56
Figura 34 Ajuste cinético de pseudo primer orden para la reacción de 3-HF con
1
O2 en presencia de Ca(II) a distintas razones molares
[Ca]/[3-HF]. ....................................................................................... 57
vi
Índice de Tabla
vii
Abreviaciones
Flav: flavonoles.
3-HF: 3-hidroxiflavona.
Quer: Quercitina.
Miric: Miricetina.
Kaemp: Kaempferol.
Fise: Fisetina.
9,10-DMA: 9,10-Dimetilantraceno
viii
Resumen
Por otra parte, la reactividad de los flavonoles, Quer y 3-HF, con oxígeno
molecular singulete es modificada en presencia de cationes divalentes. El aducto
formado entre el flavonol y catión presenta una mayor reactividad que el
flavonol libre. El tipo de catión y su tamaño, influenciaría directamente en el tipo
ix
de complejo formado, evidenciándose en los cambios en los espectros de
absorción y posteriormente en los cambios de reactividad del flavonol frente al
oxígeno molecular singulete.
x
Summary
Our results show that the reactivity between the flavonol (3-
Hydroxyflavone, Kaempferol, Miricitin, Quercitin, Fisetin) and singlet molecular
oxygen is dependent on the substitution of the aromatic rings, particularly when
substitution on ring B is present. The reaction rate constant between the
flavonols, 3-HF or Quer, and singlet molecular oxygen was observed to be
strongly influenced by the pH of the medium. Deprotonation of hydroxyl
substituents in the molecule increases the reactivity. We also found that the
chemical reaction rate constant increases with increasing the water proportion in
the solvent. Additionally, the reactivity of flavonols (3-HF and Quer) with singlet
molecular oxygen is modified in the presence of divalent cations. The association
xi
compound formed between the flavonol and the cation shows a greater reactivity
than the free flavonol. Properties of the association complex depend directly on
the type of cation and its radius.
xii
1. Introducción
1
1.1. Oxígeno molecular singulete
Figura 1.- Curva de energía potencial de los estados electrónicos del oxígeno
molecular.
2
Los estados basal y excitado, tienen momento angular cero y presentan
simetría cilíndrica respecto al eje molecular. Al presentar distribuciones
electrónicas análogas, en la aproximación de orden cero la reactividad del
oxígeno en estos dos estados será de carácter dirradicálico y muy similar, en
procesos independientes de la naturaleza del espín y sin considerar el exceso
de energía de la especie excitada. Cuando el oxígeno se encuentra en el primer
estado singulete sus electrones se encuentran apareados, como se muestra en
la Figura 2, mostrando carácter diamagnético, por esta razón la reactividad del
oxígeno molecular singulete será muy diferente a la del oxígeno en estado basal.
Figura 2.- Representación del último nivel ocupado de los estados singuletes y triplete
del oxígeno molecular.
4
mecanismo tipo II, el oxígeno singulete es generado vía un proceso de
transferencia de energía durante la colisión del sensibilizador excitado singulete
o triplete con oxígeno triplete basal4.
5
molecular singulete, bajo ciertas condiciones, pueden ser mayor que la unidad
debido a que la generación puede ocurrir mediante los estados triplete y
singulete excitado del sensibilizador. La generación fotosensibilizada de O 2 (1g)
tiene relevancia en áreas de foto-oxidación, terapia fotodinámica (PDT) de
cáncer, tratamientos de purificación de agua y ciencia de los polímeros 3. En la
Figura 4, se presenta un esquema de la generación de los estados excitados del
sensibilizador y de las especies reactivas del oxígeno, la línea azul representa
absorción de un fotón, la línea roja corresponde a fluorescencia y las líneas
verdes involucran reacciones químicas.
6
molecular singulete son 0,76 en metanol y 0,75 en agua. Su estructura molecular
se muestra en la Figura 5.
7
del O2(1g) involucra la transferencia de energía electrónica a los niveles
vibracionales del solvente por medio de un mecanismo dipolo-dipolo6. La
mayor probabilidad de resonancia ocurre cuando mayor es la energía del
modo vibracional de más alta frecuencia del solvente, es decir, cuanto
más cercanos se encuentren estos modos vibracionales a la transición
vibrónica del O2(1g). De esta forma, mayor será la probabilidad de la
transición y menor será el tiempo de vida del O2(1g)7. Algunas
características del solvente que influyen en el tiempo de vida de O 2(1g)
son el número de enlaces C-H y O-H, como también la presencia de
átomos de halógeno y deuterio8.
c) Desactivación por interacciones con compuestos desactivantes presentes
en el medio.
Las reacciones de oxígeno molecular singulete son generalmente
procesos no controlados por difusión, y las reacciones en un sistema
biológico son determinadas tanto por la concentración estacionaria del
O2(1g) en el sitio de reacción como por el valor de la constante de
velocidad de reacción bimolecular9.
El oxígeno molecular singulete puede ser desactivado por moléculas
orgánicas e inorgánicas, y este proceso de desactivación puede ser físico
(constante de velocidad kq) o químico, que mediante rupturas o
generación de enlaces dan origen a nuevos productos (constante de
velocidad kr).
O2(1g) + M O2(3g)+ M kq ec.4
O2(1g) + M Productos kr ec.5
8
1.2. Flavonoides
9
Los flavonoles corresponden a un tipo de flavonoides, este grupo tiene
como compuesto base a la 3-hidroxiflavona (3-HF). La estructura química de los
flavonoles a estudiar en esta memoria se muestran en la Figura 6.
10
Tabla 1.- pKa de los diferentes sustituyentes hidroxilos para los flavonoles a estudiar.
pKa
Flavonol
R7 R5 R3´ R4´ R5´ OH
10,34
3-HF -- -- -- -- --
(8,19)
7,19 11,56 -- 9,36 -- --
Quer
(6,40) (7,79) (12,82) (9,88) -- (9,19)
-- -- -- -- -- --
Miric
(7,61) (9,76) (6,38) (14,71) (11,34) (8,97)
7,05 11,04 9,04 --
Kaemp -- --
(6,41) (10,03) (9,26) (7,89)
7,36 13,85 9,71 12,11
Fise -- --
(6,30) (12,82) (9,54) (8,01)
11
Figura 7.- Estructura química general de flavonoides indicando grupos cromóforos.
1,2
3-HF
Quer
1,0
Fise
Miric
0,8 Kaemp
0,6
A (u.a.)
0,4
0,2
0,0
-0,2
250 300 350 400 450
Longitud de onda (nm)
12
1.2.1. Actividad antioxidante
14
estequiometría entre Quer y aluminio además de ser 1:1, puede ser; 1:2, 2:1 y
1:3. Esto demuestra que el grado de formación del complejo depende de la
razón de Aluminio-ligando y del solvente empleado; en general, en metanol se
favorece la formación de complejos 1:217h.
15
pro-oxidante de éstos. Es posible, que la actividad pro-oxidante mostrada por los
flavonoides pueda ser otra herramienta en sus funciones beneficiosas12b.
16
h
S
S* I ec.9
a
S * O2 S 1 O2 k
sens ec.10
1
O2 Fla FlaO k
r ec.11
1
O2 Fla O2 Fla k
q ec.12
1
O2 3 O2 k
d ec.13
Figura 9.- Mecanismo para la reacción entre flavonol y oxígeno molecular singulete. Los
flavonoles corresponden a 3-HF (R=H) y Q (R=OH).
17
Figura 10.- Mecanismo propuesto para la reacción entre 3-HF y oxígeno molecular singulete.
18
Debido a la complejidad de las interacciones soluto-solvente se han
utilizado las relaciones lineales de energía libre de solvatación, LSER, mediante
el uso de ecuaciones multiparamétricas, lo que permite relacionar datos cinéticos
con parámetros empíricos que describen las propiedades microscópicas del
solvente. Estas ecuaciones permiten reconocer la naturaleza de las
interacciones entre las especies involucradas en una reacción. El modelo más
utilizado de LSER y el empleado en este trabajo corresponde al propuesto por
Taft, Abraham, Abboud y Kamlet23, (ec.14).
19
bandas de absorción de diversas pruebas moleculares, las cuales son
particularmente sensibles a las propiedades específicas del solvente15, 25.
1.4. Objetivo
20
2. Materiales
21
3. Instrumentación
22
Figura 11.-Sistema de fotólisis de pulso para la detección de la emisión infrarroja del
oxígeno molecular singulete; E: espejo; FI Filtro de interferencia.
23
4. Metodología
[ Fla]0 1
ln kr [ O2 ]t kexpt ec. 15
[ Fla]
24
Cuando se utilizan actinómetros, como el 9,10-dimetilantraceno (9,10-
DMA), la determinación de la constante de velocidad de reacción química para
los flavonoles se obtiene del producto entre la constante de velocidad de
reacción química del 9,10-DMA y la razón de las constantes experimentales
entre el flavonol y 9,10-DMA, como se muestra en la ec. 16.
k Fla k Fla [1 O2 ]
exp
r ec. 16
k DMA k DMA [1 O2 ]
exp r
25
la absorbancia. Las reacciones involucradas tanto en la interacción flavonol-
catión como en la posterior foto-oxidación se muestran en la ecuaciones 17-24.
hv
S S* Ia ec. 17
F + M
k1
FM
K ec. 19
k1
FM + 1O2 P2 k 2R ec. 21
FM + 1O2 FM + O2 k Q2 ec. 23
O2 O2
1
k ec. 24
26
kD k d kDMA 9,10-DMA ec. 25
En la ec. 25 se muestra la ecuación tipo Stern-Volmer donde k9,10-DMA es
la constante de velocidad de desactivación total del oxígeno molecular singulete
por 9,10-DMA y kd la constante de desactivación de oxígeno molecular singulete
por el solvente.
27
Tabla 2.- Valores de los coeficientes de las ecuaciones de correlación, LSER, para las
diferentes mezclas acuosas metanol-agua.
%H2O Xw H
0 0 0,595 1,000 0,690 210,8
10 0,2000 0,725 1,010 0,670 237,5
20 0,3595 0,821 0,994 0,682 265,7
30 0,5000 0,910 0,980 0,705 295,5
40 0,6000 0,970 0,980 0,695 326,6
50 0,7000 1,030 1,010 0,660 359,8
28
5. Resultados y discusión
29
220
200
180
160
kd/106(M-1s-1) 140
120
100
80
60
40
0 10 20 30 40 50
% H2O
30
8,4
log k
8,3
8,2
8,1
8,0
log k
7,9
7,8
7,7
7,6
7,5
0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85 0,90 0,95 1,00 1,05
31
5.2. Evaluación de la constante de velocidad de reacción
química entre flavonoles y O2(1g) en mezclas acuosas (kr)
32
1,2 0,7
(A) (B)
RB
0,6
1,0 Quer
0,5
0,8
0,4
ln(A0/A)
0 seg
A (u.a.)
0,6
0,3
0,4 0,2
4200 seg
0,2 0,1
0,0
0,0
-0,1
-0,2 0 1000 2000 3000 4000 5000
300 400 500 600 tiempo (seg)
Longitud de onda (nm)
33
mayor sustitución, tanto en el anillo A como en el anillo B. El aumento del valor
de krFla a medida que aumenta la sustitución se encuentra en un rango de 1,6 a
3,6 veces mayor que la 3-HF, el menor aumento corresponde al flavonol Kaemp
y los valores mayores a Quer y Miric, que presentan la misma constante de
velocidad de reacción.
El valor obtenido para krFise es 1,7 veces mayor que el valor obtenido para
krKaemp, esto implica que la mayor sustitución del anillo B por sobre el anillo A es
más importante para la reactividad frente a 1O2. Si se comparan estos dos
flavonoles con la 3-HF (flavonol base) el aumento en el valor de krFla para el
Kaemp y Fise corresponderían a 1,7 y 2,8 veces respectivamente. Además la
comparación entre los flavonoles Kaemp y Quer da cuenta del efecto de la
sustitución por un grupo hidroxilo en la posición meta, la sustitución en esta
posición favorecería la reactividad de la Quer con oxígeno molecular singulete, la
constante de velocidad de reacción química obtenida para la Quer es el doble
que la constante de velocidad de reacción química obtenida para Kaemp.
Por otra parte, los valores obtenidos para krFla de los flavonoles Quer y
Miric estarían indicando que la adición de otro grupo hidroxilo en la posición
meta del anillo B no influenciaría en la reactividad de los flavonoles con 1O2. La
capacidad para desactivar 1O2 de los distintos flavonoles por vía química se
puede ordenar de acuerdo a su reactividad como; M=Q>F>K>HF. La reactividad
frente al oxígeno molecular singulete es similar a la reactividad de los flavonoles
encontrada en literatura como atrapadores y reductores de radicales libres16, 28.
34
Tabla 5.- Valores de constante de reacción química entre O2(1g) y flavonol, krF, en
mezclas acuosas de metanol en tampón acetato pH=5,1.
kr/105 M-1seg-1
% H2O
3-HF Quer Miric Fise Kaemp
35
4,0x106
3-HF
Quer
Miric
3,5x106
Fise
Kaemp
3,0x106
2,5x106
kr/ M-1seg-1
2,0x106
1,5x106
1,0x106
5,0x105
0,0
0 10 20 30 40 50
% H2O
2,5x107
3-HF
Q
2,0x107
1,5x107
kr/ seg-1
1,0x107
5,0x106
0,0
0 10 20 30 40 50
% H2O
36
Tabla 6.- Valores de constante de reacción química entre O2(1g) y flavonoles (Quer y
3-HF), krFla, flavonoles en mezclas acuosas metanol-buffer Tris 7,8.
kr/105M-1seg-1
%H2O
3-HF Quer
0 2,5±0,63 9,0±1,2
10 14,0± 1,1 57,0± 3,0
20 21,0±0,4 110,0± 0,4
30 24,0± 2,4 79,0± 5,1
40 35,0± 7,6 120,0± 22,0
50 67,0± 9,2 200,0± 27,06
2,5x107
3-HF pH 5,1
Quer pH 5,1
2,0x107 3-HF pH 7,8
Quer pH 7,8
1,5x107
kr/ M-1seg-1
1,0x107
5,0x106
0,0
0 10 20 30 40 50
% H2O
Figura 17.- Gráfico de la constante de velocidad de reacción química del 1O2 con
flavonol, 3-HF y Quer, versus porcentaje de agua a diferentes pH en metanol.
37
considerablemente mayor cuando se utiliza un tampón Tris pH 7,8 en la mezcla
de solvente, que cuando se utiliza tampón de acetato con pH 5,1.
38
5.3. Efecto de la presencia de iones divalentes. Cambio en la
reactividad de los flavonoles con O2(1g)
[Quer]=3,0x10-5M
1,0 [Cu]/[Quer]=0,4
[Cu]/[Quer]=0,9
[Cu]/[Quer]=1,3
0,8
[Cu]/[Quer]=1,8
[Cu]/[Quer]=2,2
0,6 [Cu]/[Quer]=3,1
A (u.a.)
0,4
0,2
0,0
39
0,65
0,60
0,55
0,50
A (u.a.)
0,45
0,40
0,35
0,30 XQuer=0,35
40
Cu(II) Cu
0 min 1,0 0 min
(A) (B) 5 min
5 min 0,9
0,8 tiempo 10 min 10 min
15 min 0,8 15 min
tiempo
20 min 0,7
20 min
0,6 25 min 25 min
30 min 0,6 30 min
35 min 0,5 35 min
A (u.a.)
A (u.a.)
40 min 40 min
0,4 0,4
45 min 45 min
50 min 0,3 50 min
55 min 55 min
0,2 0,2
Quer Quer
0,1
0,0 0,0
-0,1
300 400 500 250 300 350 400 450 500
Longitud de onda (nm) Longitud de onda (nm)
Cu
1,0
0 min
(C)
0,9 5 min
10 min
0,8
15 min
0,7 20 min
tiempo 25 min
0,6
30 min
0,5 35 min
A (u.a.)
0,4 40 min
45 min
0,3 50 min
0,2 55 min
Quer
0,1
0,0
-0,1
250 300 350 400 450 500
Longitud de onda (nm)
Figura 20.- Estabilidad del aducto Quer-Cu en metanol a diferentes razones molares.
(A) [Cu]/[Quer]=2,0. (B) [Cu]/[Quer]=1,0. (C)[Cu]/[Quer]=0,5.
41
sección1.2.3. El Cu(II) es reducido a Cu(I) cuando se encuentra enlazado a Quer
produciendo QuerS (producto de la oxidación) y peróxido de hidrógeno el cual es
un agente oxidante que reaccionaría con Quer libre, produciendo así una
disminución en la absorbancia tanto de Quer como del complejo Quer-Cu sin
necesidad de un agente externo al sistema.
1,0
[Q]=3,678x10-5M
[Mg]/[Q]=45
0,8 [Mg]/[Q] [Mg]/[Q]=33
[Mg]/[Q]=2
[Mg]/[Q]=1,5
0,6
[Mg]/[Q]=0,5
[Mg]/[Q]=0,26
A (u.a)
0,4
0,2
0,0
-0,2
250 300 350 400 450 500
Longitud de onda (nm)
42
1,0
[Mg]/[Q]=1 t=0min
[Mg]/[Q]=1 t=60min
0,8 [Mg]/[Q]=20 t=0min
[Mg]/[Q]=20 t=60min
0,6
A (u.a.)
0,4
0,2
0,0
Figura 22.- Estabilidad del aducto Q-Mg en el tiempo para dos razones molares en
metanol.
43
[Ca]/[Quer]=0
2,0 1,50
[Ca]/[Quer]=0 (B) [Ca]/[Quer]=165
(A)
[Ca]/[Quer]=1,0 [Ca]/[Quer]=330
[Ca]/[Quer]=2,0 1,25 [Ca]/[Quer]=440
1,5 [Ca]/[Quer]=4,1 [Ca]/[Quer]=550
1,00
1,0
A (u.a.)
A (u.a)
0,75
0,5 0,50
0,25
0,0
0,00
250 300 350 400 450 500 250 300 350 400 450
longitud de onda (nm) Longitud de onda (nm)
0,6
A (u.a.)
0,4
0,2
0,0
Figura 24.- Estabilidad del aducto Quer-Ca en el tiempo para diferentes razones
[Ca]/[Quer] en metanol.
44
Existen diferencias considerables entre la formación de un complejo con
iones de metales de transición y cationes alcalinos térreos. Se ha encontrado en
la literatura que la reacción entre la Quer y Ca involucraría la formación de un
complejo iónico, esto debido a que el radio de los iones es mayor que el radio
de la cavidad entre el grupo carbonilo de la posición 4 y el hidroxilo de la
posición 329, en cambio la reacción entre Cu(II) y Quer es a través de la
formación de un quelato.
45
1,0
[3-HF]=4,5x10-5M
[Mg]/[3-HF]=1,1
0,8 [Mg]/[3-HF]=2,2
[Mg]/[3-HF]=3,3
[Mg]/[3-HF]=3,3
0,6 [Mg]/[3-HF]=253
A (u.a.) 0,4
0,2
0,0
300 400 500
Longitud de onda (nm)
0,8
A (u.a.)
0,6
0,4
0,2
0,0
250 275 300 325 350 375 400 425 450 475
Longitud de onda (nm)
Figura 26.- Estabilidad del aducto 3-HF-Mg en el tiempo para dos razones molares en
metanol.
46
este espectro de absorción es muy similar al espectro con Mg como catión
divalente, sin embargo, las concentraciones de catión en solución son mayores,
variando desde 90-1523 veces más Ca que 3-HF.
A (u.a.)
0,6 [Ca]/[3-HF]=15
[Ca]/[3-HF]=20 0,6
0,4
[Ca]/[3-HF]=25
0,4
0,2
0,2
0,0
0,0
250 300 350 400 450
300 400 500
Longitud de onda (nm)
longitud de onda (nm)
47
En la Figura 28 se muestra la estabilidad de la solución de 3-HF en
presencia de Mg(II), se observa que la solución es estable en el tiempo para las
diferentes razones molares [Mg(II)]/[3-HF].
[Ca]/[3-HF]=90 0hrs
1,2 [Ca]/[3-HF]=90 17hrs
[Ca]/[3-HF]=448 0hrs
1,0 [Ca]/[3-HF]=448 17hrs
[Ca]/[3-HF]=1523 0hrs
0,8 [Ca]/[3-HF]=1523 17hrs
A (u.a.)
0,6
0,4
0,2
0,0
-0,2
300 400 500
Longitud de onda (nm)
Figura 28.- Estabilidad del aducto 3-HF-Ca en el tiempo para diferentes razones
[Ca]/[3-HF] en metanol.
49
0 seg
1,6 60 seg
180 seg
1,4 240 seg
360 seg
1,2 480 seg
600 seg
1,0 720 seg
A (u.a.)
0,8
tiempo
0,6
0,4
0,2
0,0
250 300 350 400 450 500 550 600
Longitud de onda (nm)
50
-0,7
358 nm
-0,8 420nm
Linear Fit of ln(A)
-0,9 Linear Fit of ln(A)
-1,0
ln(A) -1,1
-1,2
-1,3
-1,4
Ln(A)= -0,72032-7,575x10-4t R=0,99737 (358nm)
-1,5
tiempo (seg)
Tabla 7.- Constante de velocidad de reacción química para Quer y Quer-Cu, a dos
longitudes de onda, en metanol y para una relación molar [Cu]/[Quer]=0,5.
kr /M-1s1
Quer 9,0x105
Quer-Cu (358nm) 6,3x106
Quer-Cu (420nm) 8,6x106
51
[Q]
0,8 [Mg]/[Q]=1
[Mg]/[Q]=2
0,6
ln(A0/A)
0,4
0,2
0,0
52
analítico apropiado para poder realizar la determinación de la concentración del
analito de interés en el tiempo y del tipo de cinética a la cual se ajusta.
[Mg]/[Quer] kr /M-1s-1
371nm
0 9,0x105
1 5,4x106
2 1,1x107
[Quer]
2,0 [Ca]/[Quer]=55
[Ca]/[Quer]=116
1,8
[Ca]/[Quer]=554
1,6 [Ca]/[Quer]=1711
1,4
1,2
1,0
ln(A0/A)
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
-0,2
0 100 200 300 400 500 600
tiempo (seg)
Figura 32.- Ajuste cinético de pseudo primer orden para la reacción de Quer con 1O2 en
presencia de Ca(II) a diferentes razones molares [Ca]/[Quer].
54
En la Figura 32 se muestra la cinética de la foto-oxidación de Quer en
presencia de diferentes concentraciones de Ca, se observa que las curvas
experimentales presentan una desviación negativa respecto a la linealidad
esperada para un ajuste de pseudo primer orden. Al igual que en el caso de la
foto-oxidación de la Quer en presencia de Mg, este comportamiento se puede
explicar considerando las tres posibilidades ya mencionadas.
[Mg]/[3-HF] kr /M-1s-1
~344nm
0 2,5x105
1 1,1x107
2 1,2x107
20 1,5x107
55
[Mg]/[3-HF]=1 343 nm
[Mg]/[3-HF]=2 343 nm
[Mg]/[3-HF]=20 343 nm
[3-HF]
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
56
química obtenidas para las diferentes concentraciones de Ca utilizadas se
encuentran en la Tabla 11.
kr / M-1s-1
[Ca2+]/ M [Ca2+]/[3-HF]
(344nm)
0 0 2,9X105
4,7x10-3 90 2,4X107
2,3x10-2 448 1,6X107
4,7x10-2 900 1,0X108
8,0x10-2 1523 1,1X108
[3-HF]
0,7 [Ca]/[3-HF]=90
(A) [Ca]/[3-HF]=448
[Ca]/[3-HF]=900
0,6
[Ca]/[3-HF]=1523
0,5
0,4
ln(A0/A)
0,3
0,2
0,1
0,0
57
En la Figura 34 se muestran los tratamientos cinéticos de pseudo primer
orden. Se observa que la desviación es notoriamente menor que para las
cinéticas estudiadas anteriormente.
58
6. Conclusiones
59
espectro de absorción es menor a medida que aumenta el radio del
catión.
La reactividad de los flavonoles (3-HF y Quer) frente a oxígeno molecular
singulete aumenta en presencia de cationes divalentes, esta variación en
la reactividad se debe probablemente a formación de un aducto entre el
flavonol y el catión que es más reactiva. Los dos flavonoles estudiados, 3-
HF y Quer, presentan diferentes cambios en la reactividad, la molécula
Quer posee más sitios que pueden interaccionar con los cationes los
cuales no influyen directamente en el centro de la reacción con oxígeno
molecular singulete. Por otra parte, la molécula 3-HF sólo presenta un
sitio de interacción con el catión, influenciando directamente el centro de
la reacción, esto produciría un mayor aumento en la reactividad para la 3-
HF que para la Quer frente a oxígeno molecular singulete.
60
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