INFORME DE LABORATORIO, IDENTIFICACIÓN DE CRECIMIENTO DE

PATÓGENOS EN SEMILLAS DE MAÍZ (Zea mays L.) EN UN MEDIO DE CULTIVO

PDA.

PRESENTADO (POR):

CARLOS RÍOS ORTEGA

ALFONSO HERNÁNDEZ MARTÍNEZ

SARA VASQUEZ LÓPEZ

MANUEL CASARRUBIA AVILEZ

GUILLERMO MENDOZA CASTRO

OSCAR DÍAZ PÉREZ

PRESENTADO (A):

IA., M.sC., Ph.D. FITOPATOLOGÍA, JUAN DE DIOS JARABA NAVAS.

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS AGRÍCOLAS
PROGRAMA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
CURSO DE MICROBIOLOGÍA
MONTERÍA, 2019.
 1. METODOLOGÍA.

La práctica fue realizada en el laboratorio de fitopatología de la Facultad de Ciencias Agrícolas de

la Universidad de Córdoba, donde se realizó un montaje con semillas de maíz (Zea mays L.) puestas
en un medio de cultivo PDA (papa destrozada, destroza, agar) para la identificación de hongos.
1.1 Fase 1. Montaje del ensayo.
Para el montaje del ensayo, se esterilizo previamente el lugar de trabajo con C2H5OH?. Formatted: Highlight
Posteriormente se desinfectaron las semillas de maíz sumergidas en NaClO al 5% por dos minutos
(Imagen 1), al pasar el tiempo estimado se lavaron con agua destilada y se secaron con una
servilleta absorbente (Imagen 2). Procedencia de las semillas
Para la siembra de las semillas en el medio de cultivo se esterilizaron las herramientas de trabajo
pasándolas por calor, de igual manera la persona encargada de realizar la siembra en el medio de
cultivo se esterilizo las manos con NaClO y se mantuvo el mechero de alcohol encendido durante la
siembra de las muestras (Imagen 3). Se trabajó a 10 cm de distancia del mechero y con la ayuda de
unas pinzas se tomaron las semillas y se colocaron en el medio de cultivo (Imagen 4); se colocaron
cuatro semillas por caja petri que contenían el medio de cultivo, utilizando cuatro repeticiones y un
tratamiento (Medio de cultivo PDA) y finalmente se sellaron las cajas con cinta adhesiva y se
rotularon (Imagen 5).
1.2 Fase 2. Toma de datos.
Para la toma de observaciones, se tomaron evidencias fotográficas a las 24 y 96 horas de la siembra
del cultivo con la finalidad de identificar si había presencia de algún hongo en las semillas de maíz.
1.3 Identificación del agente causal.
Al pasar las 96 horas de la siembra, se tomaron muestras del micelio presente en los medios de
cultivo con la ayuda de una cuchilla de bisturí, se colocó la muestra en una placa con azul de
metileno (Imagen 6). La muestra se observó en el microscopio para poder analizar los signos e
identificar el agente causal (Imagen 7).
Imagen 1. Semillas de maíz sumergidas en NaClO
al 5%. Imagen 2. Secado de las semillas de maíz en
una servilleta absorbente después de haber sido
sumergidas en y lavadas con agua destilada.

Imagen 3. Zona de trabajo con las Imagen 4. Semillas de maíz colocados en el

herramientas de trabajo y con el mechero medio de cultivo.
de alcohol encendido durante la siembra
para evitar la contaminación del medio
de cultivo.
Imagen 5. Caja de petri Imagen 6. Placa con azul de Imagen 7. Placa montada en
selladas y rotuladas. metileno, para ser observada el microscopio para ser
en el microscopio. observada y analizar los
signos e identificar el agente
causal.
 2. RESULTADOS.

Observaciones a las 24 horas.

R1 R2 R3 R4
Pedicelo de la semilla con
micelio de color blanco.

Imagen 8. Repeticiones de semillas de maíz en medio de cultivo PDA a las 24 horas después de siembra.

En las cuatros repeticiones se puede observar que a las 24 horas de la siembra de las semillas de maíz en el
medio, solo se observó micelio de color blanco en el pedicelo de una de las semillas de la R3.

Observaciones a las 96 horas.

Imagen 9. Repeticiones de semillas de maíz en medio de cultivo PDA a las 96 horas después de siembra.
 Pedicelo de la semilla
cubierto de micelio de Semilla de maíz rodeada por un
Las semillas de maíz se micelio de color verde en el
color blanco.
poblaron por una colonia de centro (a) y en el margen
micelio de color verde. exterior de color blanco (b).
a
b
b a

Imagen 10. Repetición 1 a las 96 horas Imagen 11. Repetición 2 a las 96 horas
después de siembra con crecimiento de después de siembra con crecimiento de
micelio en las semillas de maíz. micelio en las semillas de maíz.

Semilla de maíz rodeada por un

micelio de color verde en el
centro (a) y en el margen
exterior de color blanco (b).

Imagen 12. Repetición 3 a las 96 horas Imagen 13. Repetición 2 a las 96 horas
después de siembra con crecimiento de después de siembra con crecimiento de micelio
micelio en las semillas de maíz. en las semillas de maíz.
A las 96 horas después de siembra se pudo observar en las cuatro repeticiones crecimiento de micelio alrededor
de cada una de las semillas colocadas en el medio de cultivo. La semilla está rodeada por un micelio de color
verde y en la parte externa en la terminación del micelio de color verde un micelio de color blanco, esto se
presentó en todas las semillas de las cuatro repeticiones realizadas.
Identificación de los agentes causales.

a
a

b b
a
d

Imagen 14. Estructuras reproductivas asexuales de Aspergillus sp, presentan conidias hialinas agrupadas
contenidas en una sustancia mucilaginosa (a), unidas a un conidióforo alargado hialino (b), además de
presentar conidias libres (c)y agrupadas sin conidióforo (d).

a b

Imagen 15. Estructuras reproductivas asexuales de Penicillium sp, presentan un conidióforo alargado hialino
(a) con ramificaciones en la corona correspondientes a cadenas de conidias unicelulares hialina (b) además
presenta conidias unicelulares hialinas libres (c).
 3. CONCLUSIÓN.

De los resultados obtenidos anteriormente se puede concluir que se pudieron identificar estructuras reproductivas
de Penicillium sp y Aspergillus sp el cual este último se asocia al micelio de color verde presente en los medios
de cultivo característico de este hongo, siendo estos hongos de aparición frecuente e importantes por infectar
alimentos no perecederos como frutas o hortalizas.