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EJERCICIO DE CUANTIFICACIÓN DE IMPUREZAS POR HPLC COMO

SUSTANCIAS RELACIONADAS.
Se realiza un ensayo de sustancias relacionadas por HPLC del API, IFC-1905.

LAS ESPECIFICACIONES SON LAS SIGUIENTES:

✓ Compuesto Relacionado A: no más de 0,2%.

✓ Compuesto Relacionado B: no más de 0,3%.
✓ Dímero: no más de 0,5%.
✓ Cualquier Impureza No Identificada: no más de 0,1% a/a.
✓ Total de Impurezas No Identificadas: no más de 0,5% a/a.

PREPARACIÓN DE SOLUCIONES:

Solución Standard: Pesar exactamente alrededor de 10 mg de Compuesto

Relacionado A RS, 15 mg de Compuesto Relacionado B RS y 25 mg de IFC-1905 RS
en un matraz aforado de 100 mL, disolver y llevar a volumen con solvente de
disolución.

Solución de Resolución: Pesar alrededor de 500 mg de IFC-1905 Standard de

Resolución (contiene el Dímero) en un matraz aforado de 10 mL, disolver y llevar a
volumen con solvente de disolución.

Solución Muestra: Pesar exactamente alrededor de 500 mg de IFC-1905 muestra en

un matraz aforado de 10 mL, disolver y llevar a volumen con solvente de disolución.

DATOS EXPERIMENTALES:

✓ Peso de Compuesto Relacionado A RS: 10,8 mg.

✓ Peso de Compuesto Relacionado B RS: 14,7 mg.
✓ Peso de IFC-1905 RS: 24,9 mg.
✓ Peso de IFC-1905 Standard de Resolución: 495,1 mg.
✓ Peso de IFC-1905 Muestra: 501,5 mg.
✓ Compuesto Relacionado A RS, Potencia: 98,8% sdtc.
✓ Compuesto Relacionado B RS, Potencia: 98,5% sdtc.
✓ IFC-1905 RS, Potencia: 99,8% sdtc.

DATOS DE LAS CORRIDAS (AREAS):

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Solución de Solución Solución

Resolución Standard Muestra
Impureza No Identificada 1 45 --- 150
Impureza No Identificada 2 355 --- 163
Compuesto Relacionado A 1412 901 855
Impureza No Identificada 3 777 --- 175
Compuesto Relacionado B 766 551 314
IFC-1905 178455 1051 179611
Dimero 985 --- 1985
Impureza No Identificada 4 50 --- 366
Impureza No Identificada 5 211 --- 281

CONSIDERACIONES:

✓ Los compuestos relacionados se cuantifican contra estándar externo.

✓ El Dímero se cuantifica contra el estándar del API (no hay RS del Dímero).
✓ Impurezas desconocidas se cuantifican por normalización interna (ver ejercicio
de comparación con otro tipo de cuantificación, al final, en rojo).
✓ La Solución de Resolución solo se inyecta para verificar el cumplimiento de R
que pediría la técnica analítica y para ubicar el pico del Dímero ya que no existe
el Dímero aislado como RS.

RESULTADOS:

Resultados Resultados
Veredicto
Obtenidos Informados
Compuesto Relacionado A 0,2019 % 0,2 % Cumple
Compuesto Relacionado B 0,1645 % 0,2 % Cumple
Dimero 0,9359 % 0,9 % No Cumple
Impureza No Identificada 1 0,0816 % a/a --- ---
Impureza No Identificada 2 0,0886 % a/a --- ---
Impureza No Identificada 3 0,0952 % a/a --- ---
Impureza No Identificada 4 0,1990 % a/a 0,2 % a/a No Cumple
Impureza No Identificada 5 0,1528 % a/a --- ---
Total de Impurezas No Identificadas 0,6172 % a/a 0,6 % a/a No cumple

CUANTIFICACIÓN ALTERNATIVA DE LAS IMPUREZAS DESCONOCIDAS:

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Si las Impurezas No Identificadas, en vez de haber sido cuantificadas por

normalización interna, se hubieran cuantificado contra el RS del API (Solución
Standard):

Resultados Obtenidos
Impureza No Identificada 1 0,0707 %
Impureza No Identificada 2 0,0768 %
Impureza No Identificada 3 0,0825 %
Impureza No Identificada 4 0,1726 %
Impureza No Identificada 5 0,1325 %
Total de Impurezas No Identificadas 0,5351 %

Comparando resultados se puede observar que en este último caso, los valores son
más bajos, ya que estos resultados no son afectados por la saturación de la señal del
API en la corrida de la muestra, como ocurre cuando se cuantifica por normalización
interna.

Glosario:

API: IFA (Ingrediente Farmacéutico Activo).

a/a: Área en Área.
RS: Reference Standard.
sdtc: Sobre Droga Tal Cual.