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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

​FACULTAD DE CIENCIAS

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE BIOLOGÍA

CURSO: ​FISIOLOGÍA VEGETAL

INFORME DE LA PRÁCTICA N°3

TÍTULO: “FOTOSÍNTESIS”

INTEGRANTES:

❖ Carrera Peña, César Eduardo (20180361)


❖ Castillo Ponce, Lucas Daniel (20170115)
❖ Hurtado Ccanto, David (20161353)
❖ Ibañez Palomeque, Eduardo Antonio (20161038)
❖ Príncipe Jara, Nayelli Geraldine (20180386)
❖ Santa Cruz Gutierrez, Diana (20161373)

HORARIO: ​Lunes (11:00 AM - 1:00 PM)

GRUPO: ​B*

PROFESOR: ​Rodríguez Delfín, Alfredo Salomón

FECHA DEL EXPERIMENTO: ​23/09/19

FECHA DE ENTREGA: ​30/09/19

LA MOLINA-LIMA-PERÚ
1. INTRODUCCIÓN

Es el proceso metabólico primario de las plantas y de hecho se considera el primero en la


biósfera, dada su naturaleza bioquímica. Es así que permite utilizar la energía radiante del
sol para transformarla en energía química de ATP, la cual es necesaria para la biosíntesis
de carbohidratos y, de hecho, para el anabolismo en general. La capacidad para realizar
este proceso metabólico se presenta en las células parenquimáticas clorofilianas de la
planta, las cuales se hallan generalmente en las hojas y partes verdes de tallos, flores y
frutos verdes; mientras que las células que no son parenquimáticas clorofilianas realizan la
gluconeogénesis para sintetizar carbohidratos. (Grajales, 2005)

​ 1.1. OBJETIVOS

● Observar cualitativamente los efectos de la ausencia o presencia de la luz sobre el


proceso de fotosíntesis en las 5 muestras de hojas.

● Distinguir y reconocer según la estructura vista en las 8 muestras de las hojas del
microscopio si son plantas C3, C4 O CAM.

● Relacionar las fases de los ciclos de Calvin y Benson (C3) y de Hatch y Slack (C4)
en las hojas de las plantas C3, C4 y CAM.

2. MARCO TEÓRICO

​2.1. Pigmentos Vegetales

Los cloroplastos de las plantas superiores contienen siempre varios pigmentos como la
clorofila A, clorofila B, xantofilas y carotinas. Todos estos pigmentos son insolubles en
agua, pero se disuelven fácilmente en algunos solventes orgánicos como ciertos
alcoholes, acetona, benzol, cloroformo, éter, etc. Las xantofilas tienen un color
amarillento u ocre, las carotinas son principalmente anaranjadas, la clorofila A es verde
azulado y la clorofila B es verde amarillenta. (Rodés y Collazo, 2006)

Cuando los cloroplastos pierden parte de su contenido de clorofilas, predominan los


pigmentos amarillentos, lo que causa un cambio de coloración, tal como ocurre durante
la maduración de muchos frutos o con las hojas al envejecer y transformarse los
cloroplastos en cromoplastos. Lo mismo sucede cuando se coloca una planta verde
durante algún tiempo en la oscuridad, lo que comprueba que, con algunas excepciones,
la luz es esencial para la formación y el mantenimiento de las clorofilas en las plantas.
(Rodés y Collazo, 2006)

2.2. Fluorescencia

La fluorescencia es un tipo de luminiscencia que se produce cuando una sustancia es


excitada por radiación luminosa. La longitud de onda de la luz emitida es normalmente
más larga que la de la luz de excitación. (Sampedro et al., 1995)
Los carotenoides (carotinas y xantofilas) solamente absorben en la parte verde-azul y
violeta del espectro visible, mientras que las clorofilas tienen dos máximos de absorción,
uno en la parte roja y otro en la parte azul. Estas últimas muestras además fluorescencia
marcada ya que emiten la luz de color rojo intenso. La fluorescencia se debe a la
reemisión de luz, para lo cual se utiliza energía electromagnética de onda más corta, que
es transformada en luz de mayor longitud de onda, pero de menor energía. (Rodés y
Collazo, 2006)

Las clorofilas son poco estables en vitro, especialmente bajo iluminación intensa. El
átomo central, el magnesio, es fácilmente reemplazado tanto por hidrógeno, dando lugar
a las feofitinas respectivas, pigmentos de color pardo-oliva, como también por cobre, lo
que imparte un color verde azulado muy estable. (Rodés y Collazo, 2006)

2.3. Luz

La luz es la energía que permite que el proceso de la fotosíntesis funcione, además esta
se encarga de romper las moléculas de agua en sus dos componentes: hidrógeno y
oxígeno. El dióxido de carbono y el hidrógeno del agua forman la glucosa, la cual es
base fundamental en la fabricación de otros glúcidos complejos como el almidón.
(Campos et al., 2002)

La intensidad fotosintética es directamente proporcional a la intensidad de la luz, hasta


un límite, relacionado con la cantidad de clorofila en los cloroplastos. Este control es
indirecto, ya que la función de la luz es activar el gen que codifica las enzimas
responsables de la síntesis de la clorofila. (Campos et al., 2002)

2.4. Plantas C4

Se les denomina así a las plantas que prolongan el ciclo de Calvin con un modo
alternativo de fijación de carbono que forma un compuesto de cuatro carbonos como
primer producto así como una estructura Kranz, los cual es muy característico de ellas.
La mayoría de monocotiledóneas con C4, algunos ejemplos son la caña de azúcar y el
maíz. (Campbell y Reece, 2007)

2.5. Plantas C3

Son aquellas plantas que poseen el ciclo fotosintético de Calvin y Benson y se les ha
dado este nombre porque los compuestos metabólicos intermedios formados son de tres
carbonos. Estas plantas presentan haces conductores ubicadas en la parénquima
lagunar o esponjoso con grandes espacios aéreos. En las dicotiledóneas se aprecian en
la parénquima empalizado. (Campbell y Reece, 2007)

2.6. Plantas CAM

Se denominan así por el Metabolismo del Ácido Crasuláceo. Estas plantas abren sus
estomas durante las noches y los abren durante el día, a comparación de otras plantas.
Por el día, el mantener sus estomas cerradas, ayuda a conservar agua y a prevenir la
entrada de CO​2 a las hojas. Por otro lado, el abrir las estomas por la noche ayuda a
tomar CO​2 e incorporarlos a una variedad de ácidos carboxílicos, fijando así el CO​2​. La
suculentas representan a este tipo de plantas. (Campbell y Reece, 2007)

3. RESULTADOS

3.1. Experimento 1

Parte superior A: ​Carotenos​ A: ​Clorofila A


Parte inferior A: ​Clorofila a

Parte superior B: ​Xantofilas ​ : ​Clorofila B


B
Parte inferior B: ​Clorofila b

3.2. Experimento 2

1. Hoja control
2. Hoja cubierta por el haz y envés
3. Hoja con recepción de luz solo en una pequeña área
4. Hoja cubierta por el haz
5. Hoja cubierta por el envés

3.3. Experimento 3

● C3

● C4

● CAM
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

4.1. EXPERIMENTO 1

Con este experimento se buscaba extraer los pigmentos fotosintéticos a través del
método de separación química.

● 10 g de hojas frescas fueron molidas hasta tener la consistencia de papilla, al cual


se le vierte 20 mL de acetona al 80% para luego obtener un extracto acetónico en el
cual se encuentran pigmentos fotosintéticos como la clorofila A y B, además de otras
sustancias como el caroteno y la xantofila.

● En un nuevo tubo de ensayos, se mezclan 10 mL del extracto acetónico y 10 mL de


éter de petróleo. Después de realizar la mezcla, se puede observar dos capas. La
capa superior tiene una coloración verde oscuro en donde se encuentran la clorofila
A y B, el éter de petróleo, la xantofila y el caroteno; y en la sustancia inferior están
disueltas los otros pigmentos. En este caso, se expulsa la capa inferior.

● Se va añadiendo poco a poco agua y se nota una diferencia de coloración en la


sustancia. La capa superior se hace más oscura a comparación de la capa inferior
cuya coloración es totalmente clara. Después se añade 10 mL de metanol al 92% y
se logran distinguir dos capas: en la capa superior se encuentra una sustancia en la
que está disuelta la clorofila A, el caroteno y el éter de petróleo; en la capa inferior se
encuentra la sustancia en la que se encuentra disuelta la clorofila B, el xantofila y el
metanol. Estas sustancias son separadas en dos tubos de ensayos diferentes.
TUBO A​: Clorofila A, caroteno y el éter de petróleo; ​TUBO B: Clorofila B, xantofila y
metanol.

● Se agregan 10 mL de éter etílico al tubo B para luego añadir gotas de agua


destilada, lo cual ayudará en la formación de dos capas: en la capa superior se
encuentra la clorofila B y la xantofila; y en la capa inferior se tiene agua y metanol.
Luego, se agregan 5 mL de KOH al 30% a los tubos A y B y se deja reposar unos
minutos. Después de varios minutos se observa la separación de la sustancia en
capas. ​TUBO A: En la capa superior se encuentra disuelto éter de petróleo y el
caroteno, en la capa inferior se encuentra disuelto el metanol y la clorofila A; ​TUBO
B​: En la capa superior está el éter etílico y la xantofila y en la capa inferior está la
clorofila B y el metanol. Estos pigmentos son separados a tubos diferentes y al
momento de ser colocados en una cámara negra y con luz fluorescente se percibe
que la clorofila A tiene una coloración rojiza; mientras que la clorofila B tiene un
coloración rojiza más intensa ya que pierde mayor energía que la A.

4.2. EXPERIMENTO 2

● Tres días antes, se seleccionaron 5 hojas las cuales iban a ser sometidas a un
experimento.

Hoja N°1:​ Control

Hoja N°2:​ Cubierta por completo con cartulina negra para evitar el paso del sol.

Hoja N°3: Cubierta por completo con cartulina negra pero con un orificio (un
cuadrado) en la parte del haz.

Hoja N°4:​ Cubierta con una cartulina negra por la parte del haz.

Hoja N°5:​ Cubierta con una cartulina negra por la parte del envés.

Se cubrieron las hojas con la intención de evaluar la reacción de la hoja cuando se


evita el paso del rayo solar. Estas hojas son mantenidas en la planta hasta que se
logre evaluarlas.

● Después de retirar las hojas de la planta, se retiran las cartulinas colocadas


previamente. Las hojas son sumergidas en agua hirviendo por un par de minutos.
Luego, son llevadas a un vaso en donde hay alcohol al 70% y se deja hervir por
unos minutos para extraer los pigmentos de los cloroplastos. Para finalizar, se lava
las hojas con agua fría y son colocadas en placas petri para observar la coloración
que presentan.

Hoja N°1:​ Tiene una pigmentación verdosa.

Hoja N°2:​ La pigmentación es amarillenta ya que fue cubierta por completo

Hoja N°3: Presenta un cuadrado de pigmentación verdosa en el haz pero lo demás


de la hoja es de pigmentación amarillenta.

Hoja N°4: La pigmentación de envés es verdosa y la pigmentación en el haz es


amarillenta.

Hoja N°5: La pigmentación del haz es verdosa y la pigmentación del envés es


amarillenta.
4.3. EXPERIMENTO 3

Plantas C3:

Un corte transversal de una dicotiledónea con fotorrespiración presenta una


diferenciación dorsiventral, en la que se observa un parénquima en empalizada, con
células prismáticas formando una o más filas, apretadas entre sí, y un parénquima
esponjoso constituido por células redondeadas con espacios intercelulares. Esta
diferenciación indica también una especialización fisiológica, aspecto que no ha sido
estudiado experimentalmente y que es probable que muestre una compartimentación
de la fotosíntesis. (Raven et al., 1992)

Con lo visto en el laboratorio en diferentes grados de aumento en las muestras de


Acelga y tomate, podemos determinar que estas muestras pertenecen a plantas C3

Fig. 1.​ Corte transversal de una hoja de ​Phaseolus vulgaris​ (dicotiledónea C3).

Plantas C4:

En las plantas C4 existen dos tipos distintos de células fotosintéticas: células de la


vaina fascicular y células del mesófilo. Las células de la vaina fascicular están
organizadas en lámina fuertemente comprimidas alrededor de los fascículos
vasculares de la hoja entre la vaina fascicular y la superficie de la hoja es donde se
ubican las células del mesófilo. (Campbell, 2007)

Las muestras en el laboratorio a diferentes grados de aumento nos indicaron que


estábamos frente a plantas de tipo C4, estas era caña y maíz.
Fig. 2.​ Corte transversal de la hoja de una monocotiledónea C4 (​Trachypogon
plumosus)​

Fig. 3.​ Anatomía de una planta C4

Plantas CAM:

En las plantas CAM el resultado de las modificaciones evolutivas es que el CO​2 es


fijado en dos etapas separadas temporalmente, más que físicamente como ocurre en
las C4. Durante la noche la apertura de los estomas permite la difusión de CO​2 que
es fijado como HCO​3​- por la AC y es tomado por la PEPc que lo incorpora en ácidos
C4 que se acumulan en las vacuolas vía una bomba de membrana ATP
dependiente. Durante el día los estomas cierran y los ácidos C4 son llevados al
citoplasma, a través de un mecanismo aparentemente pasivo, en donde son
descarboxilados. (Campbell, 2007)

Con lo descrito en el laboratorio y se pudo observar en el microscopio óptico, se


pudo determinar que estas muestras pertenecen a plantas de tipo CAM.
Fig. 4.​ Cierre de estomas por el día y apertura de estomas por la noche en plantas
CAM..

5. CONCLUSIONES

● En la actividad para encontrar la importancia de la luz en la fotosíntesis, se


demuestra que, a través de la adición de lugol, hay presencia de almidón en todas
las hojas que no fueron cubiertas. En las hojas que han sido cubiertas por una
cartulina negra, indican que el almidón que han producido ha sido degradado por su
metabolismo y posteriormente no pudieron fabricar más almidón por la ausencia de
luz.

● El lugol es una solución que reacciona en presencia de almidón, por lo tanto, las
hojas que estuvieron en presencia de luz se tiñeron de un color azul oscuro. Las
otras muestras que no estuvieron en presencia de luz, presentaron un color
anaranjado oscuro en sus hojas por la ausencia del almidón.

● En las muestras de piña, opuntia, berro y crásula, se determina que pertenecen a la


familia de las plantas CAM. En la imagen, se presenta una gran parte de numerosas
células mesofílicas lagunares de forma homogénea y haces vasculares. Estas
células contienen cloroplasto que se encuentran agrupadas en los bordes de la
pared celular y presentan una gran vacuola. No se puede visualizar claramente los
estomas, dando la posibilidad que se encuentren cerrados por la presencia de luz.
Esta lista de características confirman que pertenecen a las plantas CAM debido a
las adaptaciones que poseen para sus respectivas funciones.

● En la muestra de tomate y acelga, se obtienen cortes de hojas provenientes de una


planta C3. Son dos plantas dicotiledóneas, esto se puede apreciar por la presencia
de parénquima empalizada aparte de parénquima lagunar.
● La muestra de caña de azúcar y maíz corresponden a plantas C4. Es claramente
distinguible por la presencia de la estructura de Kranz. Se aprecia numerosas células
del mesófilo rodeando a los haces vasculares formando un anillo. Estas células se
encuentran con un gran número de cloroplasto transmitiendo un color verde intenso
en las dos muestras.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● Barrow, G.M. 1967. Estructura de las moléculas. Barcelona, España. Reverté. 127 p.

● Campbell, N.A., Reece, J.B. 2007. Biología. 7 ed. Madrid, España. Médica
Panamericana. 196-197 p.

● Campos Bedolla, P., Sanmartí Puig, N., Torres Lobejón, M.D., Mingo Zapatero, B.,
Fernández Esteban, M.A., Boixaderas Sáez, N., De la Rubia, M.E., Rodríguez
Bernabé, R., Pintó Casulleras, R. Guillón López-Puigcerver, M.J. 2002. Biología 2.
Ciudad de México, México. Limusa. 50-51 p.

● Grajales Muñiz, O. 2005. Apuntes de Bioquímica General. Ciudad de México,


México. Universidad Nacional Autónoma de México. 82 p.

● Raven, P., Evert, R.F., Eichhorn, S.E. 1992. Biología de las plantas. Barcelona,
España. Reverté 432-433 p.

● Rodés García, R., Collazo Ortega, M. 2006. Manual de prácticas de fotosíntesis.


Ciudad de México, México. Universidad Nacional Autónoma de México. 58 p.

● Sampedro, A., De los Toyos, J.R., Martínez-Nistal, A. 1995. Técnicas de


fluorescencia en Microscopía y Citometría. Oviedo, España. Universidad de Oviedo.
94 p.

7. CUESTIONARIO

7.1. Cuestionario

1) ¿Qué diferencia existe entre espectro de absorción y espectro de acción de la


fotosíntesis? Grafique.

El espectro de absorción es un conjunto de longitudes de onda que absorbe un


pigmento mientras que el espectro de acción es aquel que indica la eficiencia
relativa de la generación de una respuesta biológica en función a la longitud de
onda.

2) Dibuje el espectro de absorción de las clorofilas a y b, caroteno y xantofila.


(Desarrollado en una hoja aparte).
3) En qué consistió el experimento de Julius Sachs. Esquematizar es un gráfico
sencillo y claro.

Julius Von Sachs fue el fundador de la fisiología vegetal experimental, descubrió el


papel de la clorofila en la fotosíntesis y su localización en los cloroplastos​.

4) ¿Qué diferencia existe entre fluorescencia y fosforescencia?

La fluorescencia es un proceso mediante el cual una sustancia emite cierta


luminiscencia que se produce al ser excitada por radiación luminosa, siendo esta al
instante y deteniéndose cuando la radiación ya no está presente.(Sampedro et al.,
1995). En comparación, la fosforescencia es similar en el hecho de que las
sustancias absorben energía; sin embargo, estas sustancias las almacenan para
emitirla posteriormente en forma de luz o de otro tipo de radiación electromagnética.
Es un proceso más lento en comparación de la fluorescencia. (Barrow, 1967)

5) Represente los resultados del experimento de la importancia de la luz en la


fotosíntesis en esquemas y coméntalos.

Hoja control

Esta hoja tiene clorofila, por eso su color verde, que


recepciona la luz para poder realizar la fotosíntesis.
Es una hoja normal sin privación de luz u otros
factores que impidan este proceso.

Hoja cubierta por el haz y envés

Esta hoja no pudo desarrollar fotosíntesis ya que no


hubo presencia de luz que sus pigmentos, como la
clorofila, pudieran absorber. Esta hoja se tornó
amarillenta.
Hoja cubierta con un pequeño orificio descubierto

En esta hoja la importancia de la luz queda muy


explícita. Toda la hoja fue privada de luz pero el
orificio que no fue privado pudo realizar la
fotosíntesis, sus cloroplastos cumplieron su función y
a su vez hubo clorofila, esto le da el color verde
característica de las plantas.

Hoja cubierta por el haz

En esta hoja se puede apreciar que el haz no recibió


luz por lo cual no pudo realizar fotosíntesis, esto a su
vez indica que los cloroplastos no pudieron
desarrollar su función. Por esta razón, la hoja se tornó
amarilla ya que no hubo clorofila.

Hoja cubierta por el envés

En esta hoja podemos apreciar que solo el haz realizó


la fotosíntesis ya que no fue privada de la luz, como
en el caso del envés.

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