Universidad Nacional Autónoma de México.

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza.

Química Farmacéutico Biológica.

Microbiología General I.

Examen práctico de laboratorio

Alumno: Becerril Bonilla juan

Profesora: Georgina Bermejo flores

Grupo: 2652
Introduccion

La bacteria Escherichia coli fue inicialmente aislada y descrita por el pediatra

alemán Escherich, La denominó Bacterium coli commune, que puede traducirse
como “bacteria común del colon, Pertenece a la familia enterobacteriacae,
genero: Eschiria, Especie: E. coli,

E.coli se caracteriza por poseer bacilos Gram negativos, no esporulante, Además,

fermenta la glucosa y la lactosa con producción de gas. Como todas las bacteria
Gram -, la cubierta de E. coli consta de tres elementos: la membrana
citoplasmática, la membrana externa y, entre ambas, un espacio periplásmico
constituido por péptido-glucano. le permite resistir presiones osmóticas
ambientales relativamente elevadas; E. coli es una bacteria mesófila, su óptimo
de desarrollo se encuentra en el entorno de la temperatura corporal de los
animales de sangre caliente (35-43 ºC). La temperatura límite de crecimiento se
sitúa alrededor de 7 ºC, su crecimiento de ph optimo del E. coli es 7.2

CARACTERÍSTICAS NUTRICIONALES: No exigente. Fermenta glucosa y lactosa con

producción de gas, Es anaerobio facultativa.

CARACTERÍSTICAS COLONIALES:  Las colonias de E. Coli en agar E.M.B. (eosina y

azul de metileno) tienen 2 a 4 mm de diámetro, un centro grande de color oscuro
e incluso negro, y tienen brillo verde metálico cuando se observan con luz refleja.
 En agar MacConkey las colonias son rojas con halo turbio

ESPECIES PATOGENAS: 5 tipos que causan enfermedades en humanos:

Escherichia coli, E. coli enteropatógenas (EPEC) E.coli enterotoxígena (ECET) E. coli

enteroadherente (ECAD) E. coli enterohemorrágica (STEC) E.coli enteroinvasiva
(ECEI) E. Coli

Enfermedades causadas: Todas por lo general causan diarrea, dolor abdominal,

fiebre, pérdida de electrolitos.

Patogenicidad: Adhesión de la bacteria a la superficie de una célula intestinal.

Las superficies de las células epiteliales del intestino está cubierta por micro
vellosidades, extensiones de la célula que incrementan a la superficie destinada a
la absorción de nutrientes.Lo que hace la bacteria es engancharse a la superficie
de la célula epitelial del intestino por medio de los Pilis. Los Pilis están constituidos
por hebras de largas proteínas filamentosas que pueden adherirse al micro
vellosidades de la superficie de las células intestinales.
Tratamiento preventivo, lavar bien alimentos, lavarse las manos después de ir al
baño, evitar consumir alimentos crudos y leche sin pasteurizar

Tratamiento con algunos antibiotioticos: ciproxacino 500 mg/12 horas por 5 dias,
norfloxacino 400 mg/ 12 horas/ 5 dias, amoxicilina/ clavunalico 500 mg/ 8 horas/ 5
dias, cotrimoxol 160/800 mg/ 12horas/ 5 dias.
Resultados de sospecha para E. coli

Observado en microscopio en tinción para gram negativo

Imágenes observadas en laboratorio a x100 en inmersión bacilos gram(-)

cortos un poco aglomerados

Referencia E.coli

Imagen de E. coli a 100x inmersión sin tanta saturación.

1)Richard martin, E. coli gram stain images, Pinterest, consultado el

12/05/2019, pagina 1, disponible en
https://www.pinterest.com.mx/pin/569072102891171294/
Prueba de catalasa Catalasa (+) observado en
laboratorio

Siembras en agar chocolate, s.s. y mac conkey

Agares utilizados Observado en Imagen de ref para

laboratorio a las 48 hrs E.coli
Agar chocolate Crecio bolitas blancas

Referencia
Foto de agar bibliografíca 2 de E.
chocolate transcurrido Coli en agar sangre
48 horas
Agar s.s Crecio bolitas blancas referencia bibliografica
3 de agar s.s con E. coli.

Foto de agar s.s.

transcurrido 48 horas
Agar mac conkey Crecio bolitas rosadas

Imagen Referencia
bibliográfica 4 de E. coli
foto de lo observado en agar macconkey
en laboratorio
trascurrido 48 horas de
agar mac konkey

Morfologia

Medio de cultivo Morfologia microscopica

Agar sangre 2 mm, circular, ondulado, plana, opaca, mate,
blanca, cremosa, no genera beta hemolisis
Agar s.s 2 y 3 mm, circular, ondulado, plana, opaca,
mate, rojizas, cremosa
Agar mac conkey 2 mm, circular, ondulado, plana, opaca, mate,
rojizas rosadas, cremosa
Medios liquidos ocupados

Prueba Resultado Imagen de

observado en referencia de E. coli
laboratorio de del cual se tiene
bacteria sospecha que es la
desconocida bacteria
desconocida
Caldo rf/glucosa Amarillo(+) Amarillo(+)

referencia
bibliográfica 5 de rf/
imagen de lo glucosa
observado en
laboratorio de tubo
caldo rf/ glucosa
Caldo rf/manitol Amarillo(+)

imagen de lo
Amarillo(+)
observado en
laboratorio de tubo
Imagen de ref.
caldo rf/ sacarosa
bibliográfica 5
Caldo rf/manitol Amarillo(+) amarillo (+)
 Imagen de ref.

imagen de lo
observado en
laboratorio de tubo bibliografica 5
caldo rf/ manitol

Caldo nitrato Positivo(+) Positivo(+)

imagen de lo
observado en
laboratorio de tubo Imagen de ref. 6
con caldo de nitrato Observada de
caldo nitrato
Caldo rm/vp rojo Positivo(+) positivo
metilo (+)

imagen de lo
Imagen de ref. 7 rojo
observado en
de metilo (+) vogues
laboratorio de tubo
preskauer
de rmvp con rojo de
metilo
Caldo rm/vp vogues Negativo sin Negativo sin
reacción(-) reacción (-)

imagen de lo imagen de ref.

observado en Biliografica 7 de
 laboratorio de tubo vogues paskauer e.
en prueba de coli
vogues- proskauer

Medio mio Movilidad (+) Movilidad (+)

Indol(-) Indol (-)
Ornitina (+) Ornitina (+)

Imagen referencia 7
medio mio E. voli
imagen de lo
observado en
laboratorio de tubo
en medio mio
Medio sim Movilidad (+) Movilidad (+)
Indol ( -) Indol (-)

imagen de lo
observado en
laboratorio de tubo
de medio sim
Imagen ref. 7 medio Medios solidos
sim E. Coli
Prueba Resultado Resultado de
observado de imágenes de ref. De
bacteria bacteria e. Coli
desconocida en el
laboratorio
Agar lia Pico rojo purpura/ Pico rojo / fondo rojo
fondo rojo purpura purpura
 K/K K/K

imagen de lo
observado en
laboratorio de tubo Imagen de ref . 7 de
con lia E. coli.

Agar kia Pico acido amarillo Pico qmarillo/ fondo

Fondo amarillo amarillo
Fermenta glucosa y Fermenta glucosa y
lactosa lactosa
Produccion de gas Produce gas
No produce H2S No produce H2S
A/A +/-

imagen de lo Imagen de ref. 7 de

observado en kia para E. Coli
laboratorio de tubo
con kia
Agar urea Amarillo(-) Amarillo (-)

imagen de lo Imagen de ref. 7 de

observado en urea para E. coli
laboratorio de tubo
con urea
Agar fenilanalina Amarillo (-) Amarillo (-)

imagen de lo Imagen de ref. 7 de

observado en fenilalanina para E.
laboratorio de tubo Coli
con fenilanina
Agar citrato Azul (+) Azul(+)
simmons

Imagen de ref. 7 de
imagen de lo citrato siammos
observado en para e. Coli
laboratorio de tubo
con citrato simmons

Resultado final ; E coli.

Análisis de resultados.

Se sospecha que posiblemente pertenezca de acuerdo a lo observado en

la tincion de gram que fue gram negativo bacilos cortos, la prueba de
catalasa dio positiva, tambien se analizo que crecio en medio sangre en
el que crecen todo tipo de bacterias, se tuvo que escoger dos agares, se
escogió el agar salmonella y shigella, y medio mc konkey los cuales son
específicos para gram negativos, el primer medio s.s. ayudo a identificar las
bacterias que son fermentadotas de lactosa, al dar colonias rojizas
amarillentas, se pudo deducir que es una bacteria fermentadors de
lactosa, si hubiera digerido las sales biliares, tambien es un medio en el cual
hay citrato ferrico por si hay produccion de H2S pero en este caso solo
fermento lactosa.

La morfología colonial formada fue casi parecida en los 3 agares cambio

muy poco el tamaño, lo que ayudo también a determinar que era E. coli
fue las colonias rojizas en agar s.s y las colonias rosas, que las dos tienen
forma circular

En agar mckonkey tambien es un medio el cual inhibe el crecimiento de

gram positivas por las sales biliares contenidas, La lactosa es el punto clave para
que el medio sea un medio diferencial, pues los microorganismos que poseen la
capacidad para fermentar la lactosa desarrollaran colonias rosadas fuertes, como en este
caso el E. coli de acuerdo a lo observado se tuvo que escoger pruebas que nos indicaran
que fuera E. coli.

Se escogio el caldo rojo de fenol, con lactosa, sacarosa, glucosa, la bacteria que se
analizo es capaz de fermentar las 3 tipos de azucares, que indicaría la produccion de
acidos mixtos y E. coli es una bacteria con requerimientos no tan exigentes.

Tanto en la prueba de vogues praskauer para rojo de metilo dio positivo y vogues
negativo , ya que como se habia mencionado E. Coli es una bacteria que
produce fermentacion acido mixta y añadiendo rojo de metilo que es un
indicador para ph acido, detecta la formacion de acidos mixtos y debe dar
pisitva coml en esta ocasión, vogues paskauer dio negativa ya que el fin de esfa
prueba es determinar si hay produccion de acitoina que forma un compuesto
rojo con el alfa naftol con KOH, que se detecta cono negativas por que e. Coli
casi no usa esa via metabólica pars dar acido piruvico y daria negativa.

En la prueba de mio y sim se determino que la bacteria si se mueve, en ninguna

de las dos pruebas salio indol negativa posiblemente por que noo tiene la enzima
para degradar el triptofano, tampoco en sim hubo color negro qur indicaria la
presencia de h2S.
En la prueba de lia hubo descarboxinacion pero no hubo producion tampoco de
h2s, tambien con esta prueba se puede descartar de que sea alguna sallmonella,

En el tubo kia se puede determinar si una bacteria puede fermentar la glucosa y

la lactosa, e. Coli es una bacteria que puede utilizarla ya que no es de
requerimientos exigentes.

En el tuvo urea e. Coli no es capaz de hidrolizar la urea que sirve para identificar
el genero proteus o klepsellia y fenilalanina tambien salio negativa que tambien
es una prueba especifica para identificar proteus o providencia y e. coli da
negatiivo.

La prueba que no coincide es citrato siammons ya que salio positiva se pudo

haber contaminado o no inoculafo de la manera adecuada se decide
descartarse.

Tambien se puede agregar que falto un agar tsi para distinguir e. Coli de
citobacter, una prueba de gelatina para verificar el tipo de crecimiento, y haber
cambiado el agar s.s por emb, tanto una prueba de oxidasa para confirmar de
manera mas confiable que es e.clo

Conclusiones

Base a todas las pruebas obtenidas bacilo corto gram negstivo, tiene facilidad
para fermentar diferentes tipos de azucares, en los agares, y que digiere la
lactosa, ya descartando con pruebas de indol, h2s, fenilanalina y urea que es e.
Coli, tambien por su forma y tamano correspondiente.

Referencias bibliográficas.

1)Richard martin, E. coli gram stain images, Pinterest, consultado el

12/05/2019, pagina 1, disponible en
https://www.pinterest.com.mx/pin/569072102891171294/

4) Soza Tharwat Baban, E. coli colony morphology on MacConkey agar

figura 2, researchgates, consutaldo el 12/05/2019, pagina 1, disponible
en https://www.researchgate.net/figure/E-coli-colony-morphology-on-
MacConkey-agar-plate-Presumptive-identification-of-E-
coli_fig2_319130632
2) Camilo beleño, enterobacterias,slideshare, consultado el 12/05/2019,
pag 44, disponible en:
http://www.slideshare.net/CamiloBeleo/enterobacterias-
24817516?from_m_app=android
3) gran farmacia, medios de cultivo y pruebas bioquimicas, slideshare,
consultado el 12/05/2019 pagina 37, disponible en:
http://www.slideshare.net/roberchavez/medios-de-cultivo-y-pruebas-
bioquimica-presentation?from_m_app=android

5) gilberto, imágenes de caldo de rojo de fenol, microbitos blog,

consultado el 12/05/2019, disponible en :
http://microbitosblog.com/2011/09/27/imagenes-caldo-rojo-de-fenol/

6) amartharasu hernandez, identificacion de anaerobios, slideshare,

consultado el 12/05/2019 pagina 8, disponible en:
http://www.slideshare.net/Amartharasu1/presentacin1-
10314340?from_m_app=android

7) magy92, pruebas bioquímicas E. coli,, scribd, consultado el 12/05/2019

paginas 1-6, disponible en : https://es.scribd.com/doc/244506057/Pruebas-
bioquimicas-E-coli-docx

8) MacFaddin J. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias

de importancia clínica. 3ª ed. Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica
Panamericana: 2003.

9) Tortora G, Funke B, Case C. Microbiology an introduction. 8th ed. San

Francisco: Benjamin Cummings, 2004. 5. Norma Oficial Mexicana N