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IMPUNIDAD”
FACULTAD CIENCIAS
Escuela Profesional Ciencias
Biológicas
TRABAJO DE INVESTIGACIÓN
DOCENTE : Ing.
CICLO ACADÉMICO : I
PIURA - PERÚ
2019
I. INTRODUCCIÓN
La levadura de cerveza es un organismo vivo capaz de crecer y reproducirse cuando
encuentra el ambiente propicio. Conocida técnicamente como Saccharomyces
Cerevisae, vegetal uni-celular o específicamente un hongo, es capaz de seguir dos rutas
metabólicas para obtener la energía necesaria para llevar a cabo sus procesos vitales: la
fermentación alcohólica y la respiración aerobia.
Objetivo general
Los factores bióticos, o sea las poblaciones que ocupan un mismo espacio en un tiempo
definido, deben tener características fisiológicas y un comportamiento especifico que les
permita sobrevivir y reproducirse dentro de un ambiente con otros factores bióticos. El
compartir un ambiente, da como resultad una competencia entre organismos que las
componen, por lo regular compiten, ya sea por alimento, por espacio, por luz, entre
otros factores abióticos.
De los factores abióticos que mencionamos anteriormente, los que inciden en las
poblaciones de levaduras por lo regular pueden alterar el crecimiento de una población,
como por ejemplo la presión atmosférica, la luz, el calor, o pequeños cambios en el pH
o en la temperatura aplicada en diversas muestras (Krebs, 195:326-330)
Las levaduras como todo organismo presenta una curva de crecimiento, donde etapas de
adaptación, crecimiento, estacional, y muerte influyen directamente en los productos
que generan mientras que cada etapa transcurra (Maestre, 2006).Al no encontrar un
ambiente optimo las levaduras tardan más en su etapa de adaptación (Verdugo, 2007),
esto se pudo notar en la velocidad con que generaron CO2 las levaduras.
A medida que las levaduras consumen azucares y los transforman en etanol y CO2 la
luminosidad aumenta gradualmente (Massera, 2010). Las levaduras han sido utilizadas
en los primeros procesos biotecnológicos que ha desarrollado la humanidad. Por ellas ha
sido posible la elaboración del pan y de bebidas alcohólicas. Las necesidades de
levadura son muy importantes en la sociedad actual. p.ej. en el mundo se producía la
década pasada 2.2-2.4 Tm de levadura seca al año y el consumo de levadura de
panadería en Europa era 1.2-1.8 Kg/habitante (Trivedi y coli, 1986).
La levadura es capaz de crecer en una solución con azúcar en una completa ausencia de
oxígeno y aire. En este caso, una pequeña cantidad de levadura es formada y una gran
cantidad de azúcar desaparece, 60 u 80 partes de azúcar por parte de levadura. Si el
experimento es hecho en presencia de aire, solo 4-10 partes de azúcar con transformadas
por cada parte de levadura obtenida” (traducción tomada de lagunas, 1986).
1.2 Fermentación:
La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, totalmente
anaeróbico, siendo el producto final un compuesto orgánico. Fue descubierta por
Pasteur, que la describió como (la vida sin el aire). La fermentación típica es llevada a
cabo por las levaduras. También algunos metazoos y protistas son capaces de realizarla.
El proceso de fermentación es anaeróbico ya que se produce en ausencia de oxígeno; en
los seres vivos (Brock & Madigan, 1982).
De acuerdo con esto, las fermentaciones se clasifican con base en los productos que se
obtienen por la transferencia del poder reductor a los compuestos orgánicos. Algunos
ejemplos de fermentaciones son las siguientes:
Fermentación acética.
Fermentación butírica.
Fermentación láctica.
Fermentación pútrida
1.2.1. Fermentación alcohólica: La fermentación alcohólica es el proceso
mediante el cual numerosos hongos (entre ellos los unicelulares como las levaduras)
bacterias y algunos protozoos consumen los azucares presentes en un
sustrato transformándolos en etanol y CO2.
III. JUSTIFICACIÓN:
Este experimento surgió gracias a la elaboración de trabajos encargados planteados en
la clase de Química General, en el que se planteó poner en contacto a Saccharomyces
cerevisiae con un sustrato como el azúcar con el objetivo de que se fermente este
disacárido, Como ya se mencionó en el marco teórico, en la fermentación alcohólica se
produce CO2 y etanol. Considerando esto, se planteó experimentar un sistema de
producción de CO2 moderadamente eficiente, fácil y rentable, teniendo en cuenta la
variabilidad en la temperatura y la variabilidad en la cantidad de sustrato y levadura.
MATERIAL DE LABORATORIO:
2 Balones (250ml) y
1 Balón (500ml).
Cocina eléctrica.
Balanza digital.
Vaso precipitado (500ml).
Probeta (100ml).
Bagueta.
Gotero.
Microscopio.
Láminas y laminillas.
MÉTODO:
En un vaso precipitado se agregó 150 ml de agua, éste fue colocado en una cocina
eléctrica para llegar a una temperatura de 30-34ºC, se midió constantemente la
temperatura con un termómetro (IMAGEN 2).
Con ayuda de una probeta medimos 200ml de agua, lo vaciamos a un vaso precipitado
(500ml), en ella le agregamos 4g de azúcar y con una varilla disolvimos el azúcar en el
agua (IMAGEN 5).
MUESTRA 1:
La mezcla se mantuvo a una temperatura de 70-80°C aprox, durante 4 horas con el
globo puesto en la parte superior del balón, se midió constantemente la temperatura con
un termómetro, utilizando el baño maría, esto permitió que la temperatura se mantenga
constante e indirecta (IMAGEN 6).
MUESTRA 2:
La mezcla se mantuvo a una temperatura ambiente de 23ºC aprox, durante 4 horas con
el globo puesto en la parte superior del balón (IMAGEN 7).
MUESTRA 3:
Se sumergió el balón en un vaso precipitado con agua fría (utilizando cubos de hielo), a
una temperatura entre 10-15°C aprox, durante 4 horas con el globo puesto en la parte
superior del balón, midiendo constantemente la temperatura con un termómetro
(IMAGEN 8).
En el laboratorio, con ayuda de la balanza digital se pesó para cada muestra: (IMAGEN
11)
En un vaso precipitado se agregó 150 ml de agua, éste fue colocado en una cocina
eléctrica para llegar a una temperatura de 30-34ºC, se midió constantemente la
temperatura con un termómetro (IMAGEN 12).
En los 3 balones con “agua tibia”, le agregamos los diferentes gramos de levadura
proporcionados para cada muestra y agitamos levemente (IMAGEN 14).
Con ayuda de una probeta medimos 200ml de agua, lo vaciamos a un vaso precipitado
(500ml), en ella le agregamos los diferentes gramos de azúcar proporcionados para cada
muestra y con una varilla disolvimos el azúcar en el agua (IMAGEN 15).
PRODUCIÒN DE CO2
120
100
100 ml
80
60
40 50 ml
20
0
Caliente(70-80ºC) Ambiente(23ºC) 0
Fria(10-15ºC)
PRODUCCIÒN DE
450
400
400 ml
350
300
250
200
200 ml
150
150 ml
100
50
0
Balon 1 Balon 2 Balon 3
C02
VI. DISCUSIÓN:
En el primer ensayo se trabajó con cantidades iguales en los 3 balones (1g de
levadura y 4g de azúcar) para la obtención de CO2. Según “J. M. Mesas & M. T.
Alegre (1999), en condiciones de aerobiosis las levaduras se multiplican
abundantemente con un rendimiento en biomasa muy alto ya que se consigue 1 g
de levadura por cada 4 g de azúcares consumidos. En anaerobiosis las levaduras
realizan la F.A., es decir degradan los azúcares de forma incompleta generando
etanol, CO2 y energía. En estas condiciones el rendimiento en biomasa es de tan
sólo 1 g de levadura por cada 100 g de azúcares consumidos”.
En la tabla 1, se puede observar que la muestra 1, se trabajó con una temperatura
de 70-80°C obteniéndose 100 ml de gas contenida en el globo. Según ( Van
Uden,1989,Strehaiano,1993) “La temperatura durante el periodo de
fermentación de los mostos puede alcanzar eventualmente más de 35°C.Esto
depende de distintos factores como el calor generado por la fermentación,
subidas climatológicas de la temperatura, volumen de mosto a fermentar ,etc.
Aunque la mayoría de las cepas de S. cerevisiae pueden morir y producirse una
parada de la fermentación”. Por consiguiente el gas obtenido en esta muestra no
representa CO2.
En la muestra 2 se trabajó con una temperatura de 23°C obteniéndose 50ml de
gas. Según (Amerine ,1980); (Benda, 1982) “Teniendo en cuenta las condiciones
óptimas de producción de dióxido de carbono, normalmente, la temperatura
optima de crecimiento para las cepas vínicas de S.cerevisiae está comprendida
entre 20C° y 25C°. Y según (Giudici y Zambonelli, 1992) “Aunque suelen
fermentar bien entre los 12C° y 36C°”. Por consiguiente el gas obtenido
representa CO2 por encontrarse en condiciones óptimas para la fermentación.
En la muestra 3 se trabajó con una temperatura de 10-15°C no obteniendo
ninguna cantidad (0ml de CO2). Según (Hiriano, 2000). “A baja temperatura
(0ºC) la levadura disminuye su actividad casi totalmente. A 1º-15º C la actividad
fermentativa es muy lenta. Por consiguiente no se registró cantidades de CO2.
Al sacar una pequeña porción de la muestra 1,se obtuvo una baja población de
levaduras .Según Alejandra Uribe Gutierrez,1964 “ A 40°C, 42°C y 45°C se
observó el efecto negativo que las altas temperaturas tienen sobre el desarrollo
de las levaduras ya que presentaron los crecimientos más bajos, donde los
valores máximos de absorbancia obtenidos fueron de 0.845 a 40°C para el
aislamiento CTSO22A,0.565 a 42°C para el aislamiento CTSO12B y 0.399 a
45°C para el aislamiento CTSO22A, valores relativamente menores comparados
con los obtenidos a 30°C”
Y según Swan et al, 1997 “Es probable que las levaduras que fueron expuestas a
altas temperaturas y lograron mantenerse viables, hayan incrementado el grado
de saturación en cuanto a la cantidad de lípidos en la membrana, ya que las
células con menos fluidez en su membrana son más tolerantes al calor”. Por
consiguiente hay poco crecimiento de levadura, está muerta, por productos de
las altas temperaturas.
En la muestra 2, se obtuvo una alta población de levaduras. Según Alejandra
Uribe Gutiérrez, 1964 “Al evaluar el crecimiento de las levaduras seleccionadas
a diferentes temperaturas (5°C, 10°C, 25°C, 30°C, 35°C, 37°C, 40°C, 42°C,
45°C). En la mayoría de ellas se observó que presento crecimiento, de acuerdo a
la magnitud de la absorbancia leída a405nm después de 4horas, obteniéndose el
crecimiento optimo en el rango de 25 a 37°C .Y según (Bu lock, 1991), citado
por Villamil “El valor optimo se sitúa hasta los 28°C”.Por consiguiente hay una
gran cantidad de levadura, estando en un ambiente óptimo para su crecimiento.
En la muestra 3, se obtuvo una baja población de levadura. Según Universidad
autónoma metropolitana, 2002 “Cuando los microorganismos se desarrollan a
bajas temperaturas como °5C, el crecimiento tiende a ser lento y a disminuir,
debido a que las células pueden experimentar periodos de latencia. A bajas
temperaturas, el metabolismo microbiano incluyendo el de las levaduras, se ve
afectado, ya que las reacciones químicas involucradas en el metabolismo celular
se detienen o se realizan lentamente. Por consiguiente a menor temperatura se
obtiene menos población de levaduras.
VII. CONCLUSIONES Y APLICACIÓN :
Con base en el análisis de los resultados llegamos a las siguientes conclusiones:
IMAGEN 13: Se agregó 50 ml de agua a IMAGEN 14: Agregamos los diferentes gramos
32.9ºc en cada balón. de levadura proporcionados para cada muestra.
http://esmateria.com/2014/05/31/10-cosas-que-hacer-con-el-co2-en-
vez-de-tirarlo-la-atmosfera/
http://javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis276.pdf
http://www.frd.utn.edu.ar/sites/default/files/CarrerasPos/Tesis%20
Conde%20Molina.pdf
https://bdigital.zamorano.edu/bitstream/11036/4636/1/AGI-2015-
025.pdf
https://biblioteca.ucm.es/tesis/19911996/X/3/X3034301.pdf
https://issuu.com/zilligus/docs/levaduras-tipos-y-usos
http://www.maquinasdepanaderia.com.ar/queeslalevadura-
maquinasdepanaderia.htm
https://cervezomicon.com/2017/12/07/la-dura-vida-de-las-levaduras/