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PROBLEMAS DE INHIBICIÓN

1. Calcule vi y el grado de inhibición causado por un inhibidor competitivo bajo las


siguientes condiciones:
a). [S]=2x10-3 M y [I]=2x10-3 M
b). [S]=4x10-4 M y [I]=2x10-3 M
c). [S]=7.5x10-3 M y [I]=1x10-5 M
Asume que KM=2x10-3 M, KI=1.5x10-4 M y Vmax=270 nM/min.

Solución:
En cada inciso calculamos la velocidad sin (v0) y con (vi) efectos de inhibición
a).
V [S ]
v0 = max =
( )
(270nM / min ) 2x10 6 nM = 135nM / min
K M + [S ] 2 x10 6 nM + 2 x10 6 nM

vi =
Vmax [S ]
=
(
(270nM / min ) 2 x10 6 nM ) = 17.61nM / min

K M 1 +
[I]
( 
 + [S ] 2x10 nM 1 +
6
)2x10 6 nM 
 + 2 x10 nM
6

 K i  5
 1.5x10 nM 
 v   17.61nM / min 
i% = 1 − i  ∗ 100 = 1 −  ∗ 100 = 86.96%
 v0   135nM / min 
b).
Vmax [S ] (270nM / min )(4x10 5 nM )
v0 = = = 45nM / min
K M + [S ] 2x10 6 nM + 4x10 5 nM

vi =
Vmax [S ]
=
( (
270nM / min ) 4x10 5 nM ) = 3.72nM / min

K M 1 +
[I]
( 
 + [S ] 2x10 nM 1 +
6
)
2 x10 6 nM 
 + 4x10 nM
5

 K i  5
 1.5x10 nM 
 v   3.72nM / min 
i% = 1 − i  ∗ 100 = 1 −  ∗ 100 = 91.74%
 v0   45nM / min 
c).
Vmax [S ] (270nM / min )(7.5x106 nM )
v0 = = = 213.16nM / min
K M + [S ] 2 x106 nM + 7.5x106 nM

vi =
Vmax [S ]
=
(
(270nM / min ) 7.5x10 6 nM ) = 210.21nM / min

K M 1 +
[I]
( 
)
 + [S ] 2x10 nM 1 +
6 1x10 4 nM 
 + 7.5x10 nM
6

 K i  5
 1.5x10 nM 
 v   210.21nM / min 
i% = 1 − i  ∗ 100 = 1 −  ∗ 100 = 1.38%
 v0   213.16nM / min 
2. (a) ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para producir 75% de
inhibición a una concentración de sustrato de 1.5x10-3 M si KM=2.9x10-4 M y KI=2x10-5
M? (b) ¿A qué concentración debe incrementarse el sustrato para re-establecer la
velocidad al valor original sin inhibición?

Solución:
a). La fórmula del grado de inhibición para inhibición competitiva es:
100[I ]
i% =

K i 1 +
[S ]  + [I ]
 K M 
Despejando [I]

i% K I 1 +
[S ]  (75)(2 x10 −5 M )1 + 1.5 x10 −3 M 
 K M   2.9 x10 − 4 M 
  = 3.7 x10 − 4 M
[I ] = =
100 − i% (100 − 75)
b)
v Sin inhibición Con inhibición
(Ec. Michaelis) (Inhibidor Competitivo)

v0 vi
v0 = vi

[S]0 [S]i [S]

De la gráfica observamos que v0 = vi , igualando las ecuaciones de velocidad tenemos:


Vmax [S ]0 Vmax [S ]i
=
K M + [S ]0  [I ]  + [S ]
K M 1 +  i
 KI 
Despejando [S]i tenemos

[S ]i = [S ]0 1 + [I ]  = 1.5x10 −3 M 1 + 3.7x10−5 M  = 2.93x10 −2 M


−4
 
( )
 KI   2x10 M 
3. Calcule KI para un inhibidor no-competitivo si una concentración de inhibidor
[I]=2x10-4 M produce 75% de inhibición de una reacción catalizada enzimáticamente.

Solución:
Para un inhibidor no-competitivo el grado de inhibición está dado por
100[I ]
i% =
K i + [I ]
despejando KI
 100 
K I = [I ] (
− 1 = 2 x10− 4 M  )
 100 
− 1 = 6.67 x10−5 M
 i%   75 

4. Calcule (a) la velocidad y (b) el grado de inhibición de una reacción catalizada


enzimáticamente en presencia de 6x10-4 M de sustrato (KM=1x10-3 M) y 2.5x10-4 M de un
inhibidor no-competitivo (KI=3x10-5 M). La Vmax=515 nM/min.

Solución:
Vmax [S ] (5.15x10-7 M / min )(6 x10−4 M )
v0 = = = 1.93x10-7 M / min
K M + [S ] 1x10 M + 6 x10 M
-3 −4

5.15x10−7 M
Vmax
 [I ] 
[S ]
 2.5x10 M  −4
( )
6 x10− 4 M
1 +  1 + −5

K 3x10 M
vi =  I 
=   = 2.07 x10−8 M / min
K M + [S ] 1x10− 3 M + 6 x10− 4 M
 v   2.07x10-8 M / min 
i% = 1 − i  ∗ 100 = 1 − -7
 ∗ 100 = 89.29%
 v0   1.93x10 M / min 

5. Considere una reacción enzimática, en presencia de un inhibidor competitivo. La


constante de Michaelis (KM) es 3.5 x 10-4 M, la constante de inhibición (Ki) es 1.7 x 10-5
M y la concentración del inhibidor [I] es 7.5 x 10-5 M. Calcule la concentración de
sustrato a la cual la velocidad observada en presencia del inhibidor es 3/4 de la
velocidad observada sin inhibición, es decir, una actividad relativa igual a 0.75

Solución:
Para un inhibidor competitivo la actividad relativa está dada por:
K M + [S ]
a= ; despejando [S]

K M 1 +
[I]
 + [S ]
 K i 

 [I ] 
a ⋅ K M 1 +  − K M
[S ] =  Ki  = 4.28x10−3 ⋅ M
(1 − a )