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GENÉTICA

BACTERIANA
Genética Bacteriana

Pssst!! Oye chico quieres ser un Súperbicho?


Pega unos de estos en tu genoma…Ni la
penicilina podrá dañarte

Me
enfermas!!!
Mutación y mutantes
• Mutación cambio hereditario en la secuencia de bases del material genético

• El efecto de la mutación (cambio genotípico) sobre el fenotipo puede ser


observable o no
Nomenclatura
• Genotipo se designa convencionalmente con tres letras minúsculas seguidas de
una letra mayúscula. Por ejemplo, el gen hisC de E.coli. Las mutaciones en el gen
hisC se designan como hisC1, hisC2, y así sucesivamente.

• Fenotipo se designa por una letra mayúscula seguida de dos letras minúsculas, con
un signo más o menos como superíndice para indicar la presencia o ausencia de
tal carácter. Por ejemplo, una cepa His+ indica que la bacteria es capaz de
sintetizar su propia histidina, no asi una cepa His-
Aislamiento de mutantes
Descripción Naturaleza del cambio Detección del mutante
Inmóvil Pérdida de flagelos, flagelos no funcionales Colonias compactas en lugar
de planas y extendidas
No capsulado Pérdida o modificación de la cápsula Colonias pequeñas y rugosas
en lugar de lisas y brillantes
Colonia rugosa Pérdida o cambio lipopolisacárido de la capa Colonias granulosas e
externa irregulares en lugar de lisas y
brillantes
Resistencia a Pérdida de receptor de virus Crecimiento en presencia de
virus grandes cantidades de virus
Auxótrofo Pérdida de una enzima en una vía Incapacidad de crecer en
biosintética medio carente del nutriente
Fermentación Pérdida de una enzima en una vía Pérdida de cambio de color en
de azúcares degradativa medio conteniendo el azúcar y
un indicador de pH
Resistencia a Alteración de la permeabilidad al compuesto, Crecimiento en medio que
antibióticos modificación de su diana, bombas de contiene una concentración
exporte. inhibitoria del antibiótico
Mutantes nutricionales

Protótrofo Bacterias silvestres


capaces de crecer en medios mínimos
(iones, fuente de carbono y agua)
sintetizando autónomamente todas
las macromoléculas esenciales

Auxótrofo Bacterias generalmente


mutantes incapaces de fabricar alguna
molécula esencial y, por tanto,
incapaces de crecer en medio mínimo.
Vías de intercambio de genes entre bacterias
Descubrimiento de la conjugación

Descubrimiento de la conjugación
Joshua Lederberg
Edward Tatum
1946 E. coli
A B
met - bio- thr+ leu+ thi+ met+ bio+ thr – leu – thi -
Protótrofos consecuencia de intercambio
genético y recombinación frecuencia 1/107
Bernard Davis
Contacto físico esencial
para la transferencia génica
y recombinación

Sembrar en medio mínimo


No se recuperaron protótrofos
William Hayes
1953 E. coli
F + / macho
Factor de fertilidad (plásmido F)

F - / hembra

Interacción física fase inicial del proceso de conjugación


mediada por el pilus sexual o F
• Células F+ poseen un factor Cruza
de fertilidad y pueden células F+ X células F-
donar material genético
Todas Células F+

• Células F- células que Por tanto, el factor F es un


pueden recibir DNA y por elemento móvil
recombinación lo integran
en su genoma • Plásmido F codifica alrededor
de 100 genes, alrededor de 19
productos génicos están
implicados en la transferencia
de información génica
incluyendo aquellos para la
formación de los pilli
Conjugación
Plásmido F
La conjugación se inicia cuando la célula
F+ sintetiza el pilus y lo extiende hacia la
célula F-

Cromosoma bacteriano

Una vez adherido el pilus a la superficie


dela célula F- se retrae acercando a las dos
células
Una cadena del plásmido F es cortada.
Esa cadena se desplaza hacia la otra
célula

A medida que la cadena entra, se


produce la síntesis complementaria del
DNA en ambas cadenas

Al término de la conjugación ambas


bacterias tienen una copia íntegra del
plásmido F, por tanto ambas son F+

Exconjugantes
• La frecuencia de transferencia del factor F es
mayor que la frecuencia de recombinantes
para marcadores genéticos

• el plásmido F no es el responsable de los


fenotipos silvestres después de la conjugación
Células Hfr (high frecuency recombination)

El plásmido F es capaz de
integrarse al cromosoma
bacteriano

Episoma Elemento génico


que puede replicarse
independientemente del
cromosoma bacteriano o
F+ integrarse y replicarse como
parte del cromosoma

Hfr
La célula Hfr mantiene su
capacidad de conjugación por
lo que puede conjugar con una
célula F-

Comienza la transferencia de material génico de Hfr


hacia F- pero no hay transferencia
F- completa del
genoma ni de la secuencia de plásmido F

Se transfirió parte del DNA cromosomal, si hay


homología ocurrirá recombinación. Sin embargo la
célula F- permanece sin el plásmido F.
Recombinación
Integración del plásmido F al cromosoma
Cartografía cromosómica
Conjugación interrumpida
El mapa de tiempos permite conocer el orden de los genes en los cromosomas
pero no la distancia entre ellos.
El estado F´ y los merocigotos

Hfr F´

En células Hfr el plásmido puede escindirse del cromosoma( con baja


frecuencia) y formar un plásmido circular nuevamente. Durante la escisión el
plásmido puede acarrear genes cromosómicos

Loas plásmidos F´ también son transferidos por conjugación creando


merocigotos o diploides parciales
Resumen conjugación
Transformación
Plásmidos
• Moléculas de DNA circulares extra
cromosomales que se replican
independientemente del
cromosoma bacteriano. Presentes
en bacterias y algunas células de
eucariotes

• Tienen un origen de replicación


reconocido por la maquinaria
replicativa de la bacteria

Bajo numero de copias 1-10


Alto número de copias 10-100

copia= número de moléculas de plásmido por célula


Autoregulación del número de copias
• Genes que regulan reparto y control
del número de ellos por célula

• Mediado por un represor RNA o


proteína que impide que se repliquen
“exceso” de copias del plásmido

• Plásmidos incompatibles
• Mecanismos capaces de excluir a un
plásmido relacionado cuando la
célula ya posee uno
Tipos de plásmidos
Tipo Organismos tipo
Plásmidos conjugativos E. coli plásmido F

Plásmidos de resistencia (R) Bacterias entéricas,


Antibióticos Staphylococcus
Resistencia a metales pesados(Hg, Cd,Ni,Co,Pb)
Pseudomonas

Producción de bacteriocinas y antibióticos Bacterias


entéricas,Clostridium,
Streptomyces

Metabólicos Bacterias entéricas


Metabolismo de carbohidratos (lactosa, sacarosa)
Degradación de hidrocarburos
Pseudomonas

Plásmidos de virulencia o interacción hospedero E.coli


Enterotoxinas y hemolisinas
Neurotoxina Clostridium tetani
Generalidades virus

• Tamaño: 24-300nm
• Material genético: RNA o DNA de cadena doble o sencilla cubierto por
envoltura proteica (cápside) puede tener lípidos
Generalidades virus
• Simetría: icosahédricos, helicoidal, complejos (cabeza y cola)
Parásitos intracelulares obligados

• Células animales

• Plantas

• Bacterias
Bacteriófagos
Bacteriófagos
Ciclo lítico del bacteriófago T4

1. Adsorción o fijación el fago se


une a receptores de la superficie
bacteriana

2. Inyección del material genético


viral

3. Replicación del genoma


Ciclo lítico del bacteriófago T4

4. Síntesis de envolturas proteicas

5. Empaquetamiento del DNA dentro


de la envoltura proteica y
ensamblaje

6. Lisis y liberación de partículas


virales
Análisis de calvas o placas de lisis
Ciclo lítico de un fago
Ciclo lisogénico Fagos temperados
1. Fago se adsorbe a la superficie de una célula e inyecta el DNA
2. El DNA del fago se circulariza
3. Transcripción de genes necesarios para la integración
4. Fago se integra en el cromosoma de la bacteria
5. La bacteria se reproduce normalmente transmitiendo el profago a
la descendencia
6. La bacteria (lisógeno)es inmune a la infección de otros fagos

• Profago El genoma de un fago que se ha insertado en el cromosoma bacteriano


• Lisógeno bacteria que tiene el genoma de un fago insertado dentro de su cromosoma
• Fagos temperados Fago capaz de llevar a cabo ciclos líticos o lisogénicos
Ciclo lisogénico vs ciclo lítico
Circularización del genoma λ e
integración
Transducción

• Mecanismo de transferencia de genes bacterianos mediado por fagos

1952
Joshua Lederberg
Norton Zinder S. typhimurium
Transducción generalizada
Transducción especializada
Elementos transponibles
Transposones y secuencias de inserción

• Elementos transponibles son segmentos de DNA que pueden


moverse de una posición a otra en el mismo cromosoma o a
diferentes cromosomas

• El movimiento de un elemento móvil puede producir


mutaciones o rearreglos cromosómicos y afectar de esa
manera la expresion de otros genes

• Descritos originalmente en maíz por Bárbara Mc Clinckton


• Se han encontrado en bacterias hasta humanos
La transposición es una recombinación no-homóloga, es decir
la inserción de un EM ocurre en ADN que no tiene homología
con el transposon.

a. En procariotes la transposición puede ocurrir en el


cromosoma del organismo , en un plásmido o en el
cromosoma de un fago.

b. En eucariotes la inserción puede ser en el mismo cromosoma


o en uno diferente.
Secuencias de inserción
Secuencias invertidas repetidas

10-30pb 10-30pb

Descubiertos por primera vez en E. coli en el operón gal y son los


transposones más simples
Tamaño 700-1500pb
Frecuentes en bacterias, plásmidos y fagos.
Transposones simples y compuestos
Mecanismos de transposición
Mecanismo de
transposición Tn5
Transposasa. Enzima que corta
al DNA blanco en sitios al azar
y une los extremos del
transposón

Las secuencias invertidas y


repetidas (IR) son el sitio de
reconocimiento de la
transposasa
Transposones en eucariotes

• Transposones de DNA

• Retrotransposones
Transposones de eucariotes

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