CORPORACIÓN UNIVERSITARIA REFORMADA
FACULTAD DE INGENIERÍA BIOMÉDICA
MICROSCOPIA I: ILUMINACIÓN DE KÖHLER Y DIVISIÓN CELULAR
Integrantes: Duvan Ochoa, Andrés Torres, Kelly Vega.
Docente: Steffany Sanjuán Murillo. Grupo CN-Mesa 2. 09-09-2019
Laboratorio de Biología, Corporación Universitaria Reformada, Barranquilla.
Resumen
La célula es la unidad estructural y funcional
de los seres vivos, por su tamaño se escapa al
poder observarla a simple vista. El
descubrimiento de las células fue posible a
partir de la invención del microscopio. Con la
iluminación adecuada del microscopio se
puede observar los tejidos que forman las
células. El manejo del microscopio del campo,
se hizo con el objetivo de conocer las partes
esenciales del mismo, y llevar a cabo la
iluminación de Köhler.
Palabras claves: Microscopio, célula,
iluminación.
Abstract
The cell is the structural and functional unit of
living beings, because of its size it escapes by
being able to observe it with the naked eye.
The discovery of the cells was possible from
the invention of the microscope. With the
proper illumination of the microscope you can
see the tissues that form the cells. The field
microscope was managed with the objective
of knowing the essential parts of it, and
carrying out the lighting of Köhler.
Key words: Microscope, cell, illumination.
1. INTRODUCCIÓN
El hombre en su búsqueda del conocimiento
del mundo que lo rodea, ha construido una
serie de instrumentos para ampliar su campo
de observación. Uno de esos instrumentos es
el microscopio, gracias a este fue posible el
descubrimiento de la célula, ya que son
demasiadas pequeñas para verse a simple
vista, por lo que la célula ha dependido del
estudio del microscopio.
Desde su invención, el microscopio ha sido
una herramienta de enorme importancia en
el desarrollo de diferentes disciplinas
científicas. En la actualidad, se han
desarrollado diversos tipos de microscopios,
así como también diferentes sistemas de
iluminación, que permiten observar las
células o tejidos vivos, siendo un instrumento
útil en la investigación. Se utilizan en la
actualidad varios tipos de microscopios
ópticos: de campo claro, de contraste de
fases, campo oscuro y florescencia.
Los cambios más importantes de la
microscopia surgieron a partir de los
comienzos del siglo XX, cuando el gran físico
alemán, el Dr. August Köhler. Desarrollo un
nuevo sistema de iluminación, que aún hoy en
día se maneja y lleva su nombre. Este sistema
de iluminación fue el que se llevó a cabo en
esta práctica de laboratorio.
2. OBJETIVO
Identificar las partes del microscopio de
campo claro, aprender a realizar la
iluminación de Köhler y observar diferentes
tipos de celulares.
3. MATERIAL Y EQUIPO
- Microscopio
- Papel seda
- Aceite de inmersión
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- Cebolla
- Elodea
- Bisturí
- Portaobjetos
- Cubre objetos
- 2 ml de azul de metileno
4. FUNDAMENTO TEÓRICO
El estudio detallado de los componentes de
células y tejidos animales o vegetales, por el
tamaño que poseen, requiere el uso de
instrumentos que permitan ampliar muchas
veces más la imagen de las estructuras que los
constituyen. El instrumento que fue
empleado por los primeros biólogos para
estudiar la célula y los tejidos, es el
microscopio. El nombre deriva
etimológicamente de dos raíces griegas:
mikros, que significa pequeño y skopeoo, que
significa observar. Es decir, el microscopio es
un instrumento que sirve para observar
objetos o estructuras pequeñas (Arenas,
2010).
El microscopio óptico es un elemento
indispensable en el laboratorio, que, si bien
no ha de ser especialmente complejo,
requiere de unos elementos básicos
representador por objetivos (10x, 20x. 40x y
100x), algunos de ellos dotados de contraste
de fases, un micrómetro ocular y equipo de
microfotografía. En la descripción de un
microscopio, podemos encontrarnos con los
siguientes elementos:
Platina: Está situada sobre el estativo o
soporte y sobre ella se coloca el portaobjetos,
que, mediante un sistema de traslación
dotado de mandos, podrá hacerse desplazar
en las dos direcciones del plano.
Mandos de enfoque: Permiten el
desplazamiento en el plano vertical de la
platina, alejando o acercando la preparación
hacia los elementos ópticos.
Condensadores: Situados al pie del cuerpo
principal se encuentran el condensador de
campo y su diafragma, quienes tienen como
misión ampliar y colimar los rayos luminosos
proyectados por la fuente luminosa. Situados
en la parte inferior a la platina se encuentran
el condensador de apertura, con su diagrama
y elementos de centrado. Este condensador
tiene como misión hacer converger la luz
hacia la preparación. El centrado del
condensador se realiza cerrando el diafragma
de campo y llevando al centro el punto
luminoso con ayuda de los mecanismos de
centrado.
Objetivos: Son los componentes ópticos
responsables de la resolución de las
imágenes. Han de estar colocadas en un
orden lógico, de menor a mayor aumento,
10x, 40x y 100x.
Oculares: Están formados por dos lentes que
se sitúan sobre un soporte móvil que permite
que sean ajustadas a la distancia ocular del
observador. Estas lentes son las encargadas
de ampliar la imagen resuelta por los
objetivos, a la vez que la invierten. (Isac, 1997)
La iluminación de Köhler es una de las claves
de la buena microscopia y está incorporada al
diseño de casi todos los microscopios
modernos que se usan en laboratorios o para
la investigación. En la figura adjunta se
ilustran los dos trayectos de los rayos
luminosos y todos los controles de ajuste de
un microscopio moderno y esta deberá
emplearse como guía al seguir las
instrucciones que se dan a continuación para
obtener una iluminación adecuada en el
microscopio. (Michael & Ross, 2007)
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5. DESARROLLO EXPERIMENTAL

En esta práctica de laboratorio seguimos los

siguientes procesos:

a. Siguiendo las instrucciones del profesor

encargado pasamos a identificar, estudiar
las partes del microscopio óptico y sus
funciones.
b. Luego pasamos a seguir las instrucciones
para ajustar el sistema de iluminación
Köhler del microscopio.

Se siguieron esas instrucciones en cuanto al

Los ajustes necesarios para conseguir una microscopio, para realizar las muestras que
buena iluminación Köhler son pocos y íbamos a observar se realizó lo siguiente:
sencillos:
a. Cebolla:
- Se enfoca la muestra. Desprendimos un fragmento de
- Se cierra el diafragma de campo. epidermis de cebolla, la depositamos en
- Se enfoca el condensador moviéndolo un portaobjeto, le agregamos una gota de
hacia arriba o hacia abajo hasta que el agua, y luego le pusimos un cubre objeto.
contorno de su diafragma de campo Pasamos a ver la muestra de la cebolla en
aparezca bien nítido. el microscopio.
- Se centra el diafragma de campo con los
controles de centrado de la subplatina.
Luego se abre el diafragma de campo
hasta que el haz luminoso cubra todo el
campo observado.
- Se retira el ocular y se observa la pupila
de salida del objetivo. Así se verá un
campo circular iluminado cuyo radio será
directamente proporcional a la apertura b. Elodea:
numérica del objetivo. A medida que se En un portaobjetos depositamos cortes
cierre el diafragma del condensador su de elodea, le agregamos una gota de
contorno aparecerá dentro de este agua, la cubrimos con un portaobjeto.
campo circular. Para la mayor parte de los Pasamos a ver la muestra de elodea en el
preparados teñidos el diafragma del microscopio.
condensador deberá cerrarse hasta cubrir
aproximadamente dos tercios de la
apertura del objetivo. El resultado de este
ajuste es la avenencia máxima entre
resolución y contraste.
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c. Sangre:
Se pasó a esterilizar a la persona, con una
lanceta estéril se puyo a la persona, una
gota de sangre fue colocada en un
portaobjeto, se cubrió con un cubre
objetos y pasamos a observar en el
microscopio.
6. RESULTADOS
Una vez reconocidas las partes del
microscopio, realizamos el ajuste para la
iluminación Köhler observamos las células, la
célula animal y la célula vegetal. Observamos
cada una de las muestras, la muestra de
cebolla, la muestra de elodea y la muestra de
sangre. Se notaron resultados claros. Gracias
a la iluminación de Köhler es más sencillo
identificar las estructuras de las células.
7. CONCLUSIONES
En el transcurso de la experiencia pudimos
concluir que el microscopio es una
herramienta fundamental y útil en el estudio
de la célula, así como su uso correcto en los
preparativos que se deben hacer para tener
un buen enfoque e iluminación para facilitar
el trabajo a la hora de ver las muestras
observadas.
8. GUÍA DE ESTUDIO
Indique la importancia del microscopio de
campo claro en la investigación científica.
El microscopio óptico de campo claro o luz
transmitida es una valiosa herramienta para
el análisis y la observación de células,
secciones histológicas de órganos, tejidos
humanos, animales y vegetales, en el
diagnóstico de patologías y parasitología
animal y vegetal, de microorganismos.
También está configurado para observar
especímenes microscópicos vivos
transparentes o no coloreado. (Perez, 2005)
¿Qué importancia tiene realizar la
iluminación Köhler?
La iluminación Köhler es muy importante a la
hora de observar las muestras, ya que se
obtienen imágenes de alta calidad con el
ajuste adecuado del sistema de iluminación.
¿Qué cuidados hay que tener al utilizar el
aceite de inmersión?
Para usar el aceite de inmersión hay que tener
en cuenta ciertas condiciones:
Cuando se ha realizado una preparación
coloreada, hay que esperar que el frotis seque
completamente antes de colocar el aceite de
inmersión. De lo contrario, el aceite junto con
el agua formará micelas que no dejarán
visualizar la preparación. Por otra parte,
después de observar el lote de preparaciones,
es decir, al terminar la jornada de trabajo, se
debe limpiar cuidadosamente el objetivo de
100X, usando un papel para lentes con etanol.
Si se deja el lente sucio, el aceite se secará
sobre él y luego será muy difícil retirarlo,
dañando el campo de visualización. Así
mismo, hay que tener en cuenta que el aceite
es inflamable y debe tenerse alejado de
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fuentes de calor (mecheros). Es importante

evitar calentarlo por encima de 65°C.
Finalmente, el aceite es un producto tóxico.
Por tanto, debe evitarse el contacto directo
con piel y mucosas, donde puede producir
irritación leve. Para evitar accidentes, se
recomienda el uso de guantes y lentes de
seguridad para manipularlo. (Rita & Ninfa,
2015)

Diga las diferencias y semejanzas que hay

entre las células animales y vegetales.

La diferencia que hay entre las células

animales y vegetales es que la célula vegetal
realiza fotosíntesis, ya que tienen cloroplastos
que ayudan con este proceso. La semejanza
de ambas células es que son células
eucariotas por tener un núcleo definido.

¿Se logró el objetivo de la práctica?

El objetivo de la práctica si se logró, ya que

aprendimos a identificar las partes del
microscopio y realizar la iluminación de
Köhler con el fin de observar las muestras
claras y de alta calidad.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA

Arenas, C. E. (2010). Microscopia .

Isac, L. (1997). El microscopio optico .

Michael, H., & Ross, W. (2007). Histologia:

Texto y Atlas. Medica Panamericana.

Perez, G. R. (2005). El microcosmo se crecio .

Rita, S., & Ninfa, O. (2015). Historia del

microscopio y su repercusion en la
mircobiologia .